基于PLUS土地利用模拟的阿克苏河流域NEP时空格局研究

净生态系统生产力(NEP)是评估陆地生态系统碳吸收量的重要指标,而土地利用/覆盖变化(LUCC)是影响区域碳吸收量变化的主要因素之一,分析LUCC与NEP的变化趋势,对区域实现“双碳”目标具有重要意义。基于阿克苏河流域2000—2020年LUCC与MODIS遥感数据估算区域内各土地利用/覆盖类型的年均固碳速率,借助PLUS模型模拟未来40 a的LUCC,预测未来40 a流域NEP时空变化趋势。结果表明:(1)近20 a流域内总NEP呈上升趋势,上升速率为0.136 Mt C·(10a)-1,林地平均固碳速率最高;(2)未来40 a阿克苏河流域总碳吸收量在不断上升。林地面积的增加是阿克苏河流域碳吸收量上升的主要途径,生态保护工程的积极性对流域内碳吸收量起到关键作用。

2023年全国小学生英语能力测评(NEPTP)报名工作全面展开

全国小学生英语能力测评(NEPTP)自1998年起,每年举办一届,截至2022年已成功举办24届。2023年将继续举办第二十五届全国小学生英语能力测评(NEPTP),本届活动由国际英语外语教师协会中国英语外语教师协会主办,英语辅导报社和考试与评价杂志社联合承办。测评正式通知已于2023年1月下发至各级教育行政部门、教研部门,目前全国各级测评组委会正在积极组织测评报名工作,报名时间从即日起至2023年3月10日。

人类疾病研究的新焦点:中性肽链内切酶(NEP)——NEP生理功能及其潜在调控因子研究之进展(英文)

Neprilysin(NEP)是M13锌金属蛋白酶家族的一种Ⅱ型整合细胞膜糖蛋白.自从1974年首次被定义以来,NEP作为一种神经肽的降解酶,已经被发现广泛地存在于中枢神经系统以及外周各种组织中,并具有众多组织特异性功能.其中,NEP具有两大重要生理功能:一是NEP通过抑制细胞迁移增殖并诱导细胞程序性死亡具有抗肿瘤作用,这依赖它的酶学特性以及与涉及细胞信号转导通路的关键分子直接的蛋白-蛋白间相互作用;另外,NEP具有神经保护作用,这主要通过阻止神经毒物——淀粉样蛋白Aβ在大脑中的聚集来实现.通过研究各种人类疾病的进展,目前发现这些疾病经常伴随有NEP表达的削弱和活性下降.基于这些发现,调控NEP在病理细胞中的不同水平正在逐渐被认可为具有治疗应用前景的一种策略,从而达到恢复正常的细胞功能并缓解病症的目的.现阶段的研究重点,主要在于揭示涉及NEP的表达以及活性的一些调控机制,并且获得了大量鼓舞人心的研究成果.例如,男性荷尔蒙已知是前列腺中NEP的转录调节因子.除它之外,最新研究结果还发现,女性雌激素,柳栎的水合萃取物,绿茶的一些组分,各种神经肽比如韩蛙皮素和生长激素抑制素以及淀粉样前体蛋白的胞内区,也都对NEP的表达和活性有刺激作用.

NEP1-40基因克隆及蛋白的原核表达和纯化

目的通过基因工程手段从大鼠脊髓中获取Nogo-66、NEP1-40基因并实现其蛋白的体外表达。方法从幼年大鼠的脊髓组织中,通过RT-PCR技术获得Nogo-66、NEP1-40基因,将目的基因通过基因连接反应与T载体连接,重组质粒进行基因序列测序,构建PQE30-GST和目的基因的高表达质粒,异丙基-β-D-硫代半乳糖(isopropy-lthiogalactoside,IPTG)诱导表达,Ni柱纯化,Western-blot法检测纯化的目的蛋白。结果成功获得大鼠Nogo-66、NEP1-40基因,加上两端的酶切位点和保护性碱基,大小分别为215bp和137bp。序列测序显示基因突变率为0,表达质粒构建双酶切(BamH和Hind)可见目的基因的条带,经IPTG诱导表达,获得带GST标签的融合蛋白Nogo-66和NEP1-40,相对分子质量分别为33.2×103和30.3×103。蛋白纯化结果理想,经Western-blot分析证实抗原性正确。结论Nogo-66、NEP1-40蛋白可通过基因工程手段获得体外高效表达,这将对其功能的研究及脊髓损伤疫苗的研究提供基础。

NEP1-40对成年单眼剥夺弱视大鼠视皮层可塑性的再激活作用

目的:探讨NEP1-40对成年单眼剥夺弱视大鼠视皮层结构及功能可塑性的再激活作用及意义。方法:60只新生SD大鼠随机分为6组:正常对照组(Nor)、正常+PBS治疗组(Nor+PBS)、正常+NEP1-40治疗组(Nor+NEP)、模型对照组(MD)、模型+PBS治疗组(MD+PBS)及模型+NEP1-40治疗组(MD+NEP)。模型组大鼠于出生后21d缝合右侧眼睑建立单眼剥夺弱视模型,于45日龄时打开剥夺眼,对各组大鼠行闪光视觉诱发电位(F-VEP)检测,确定单眼剥夺模型建立成功后,对需给药的各组大鼠按组别给予NEP1-40或PBS侧脑室注药治疗7d。于52日龄时对各组大鼠再次行F-VEP检测后处死动物,取左侧视皮层进行透射电镜观察突触超微结构变化。结果:45日龄时F-VEP检测示,MD组、MD+PBS组及MD+NEP组与Nor组比较,P波潜伏期延长,波幅降低(P<0.05);52日龄时F-VEP检测示,MD+NEP组与MD组、MD+PBS组大鼠比较,右眼F-VEP的P波潜伏期及波幅差异有统计学意义(P<0.05),而与Nor组比较差异无统计学意义(P>0.05);MD+PBS组与MD组大鼠比较,右眼F-VEP的P波潜伏期及波幅差异无统计学意义(P>0.05),而与Nor组比较差异有统计学意义(P<0.05)。透射电镜观察视皮层神经元突触界面结构参数:与Nor组比较,MD组大鼠剥夺眼对侧视皮层神经元突触间隙增大,突触活性区长度缩短,突触界面曲率减小,突触后致密物厚度变薄(P<0.05)。MD+NEP组大鼠剥夺眼对侧视皮层神经元突触界面结构参数的各项指标均较MD组、MD+PBS组明显改善(P<0.05),与Nor组相比除突触间隙外(P<0.05),其余各项参数差异无统计学意义(P>0.05)。MD+PBS组与MD组大鼠比较剥夺眼对侧视皮层神经元突触界面结构参数的各项指标差异均无统计学意义(P>0.05),而与Nor组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:NEP1-40可使成年单眼剥夺弱视大鼠剥夺眼对侧视皮层神经元的突触界面结构参数得以恢复,F-VEP的P波潜伏期及波幅恢复至正常水平,重新"激活"被抑制的视皮层结构及功能可塑性,为成年弱视患者提供新的治疗途径奠定了理论基础。

NEP量表在西部农村的应用评估——以陕北农村为例

西部具有重要的生态地位,而该地区生态平衡却日益受到威胁,这使西部农村居民的环境关心尤其应该受到重视。基于陕北农村调查数据,对2000年修订版NEP量表在西部农村的适用性进行评估,发现照搬原量表使用存在很大问题,对其加以修正后,由6个项目构成的量表具有更高的信度和效度,可构成测量西部农村居民环境关心的有效工具。

苦参碱对人肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞趋化因子受体4表达的影响

目的探讨苦参碱对体外培养人肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞抑制增殖及诱导凋亡的作用。方法体外培养人肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞分对照组,0.5 mg/ml、1.0 mg/ml、1.5 mg/ml苦参碱干预组,应用四甲基偶氮蓝比色法、流式细胞术检测苦参碱对SK-NEP-1细胞抑制率、凋亡率的影响,逆转录聚合酶链反应检测SK-NEP-1细胞的趋化因子受体4(CXCR4)mRNA表达。结果不同浓度苦参碱干预组及对照组SK-NEP-1细胞的抑制率、凋亡率以及CXCR4 mRNA表达差异均有统计学意义(P<0.01);随苦参碱浓度增加,SK-NEP-1细胞的抑制率和凋亡率呈上升趋势,而CXCR4 mRNA表达呈下降趋势,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论苦参碱可以抑制SK-NEP-1细胞增殖并诱导凋亡,该作用可能与下调CXCR4的表达有关。

热释电探测器NEP参数测量不确定度分析与计算

阐述热释电探测器NEP参数的测量原理和方法,分析热释电探测器NEP测量不确定度的来源,计算NEP实际测量中的测量不确定度,计算结果表明,测量环境和测量过程中探测器光敏元与辐射源的准直度是影响热释电探测器NEP测量不确定度的主要因素,指出提高热释电探测器NEP参数测量质量的措施。

NEP1-40促进高苯丙氨酸损伤大鼠神经元Nogo A表达

目的了解神经元NgR受体拮抗剂NEP1-40对高苯丙氨酸（Phe）作用下大鼠大脑皮质层神经元Nogo A蛋白表达的影响。方法原代培养胎龄16~18 d的SD大鼠皮质神经元,体外模拟高Phe（0.9 mmol/L）环境,并用不同浓度NEP1-40干预;用免疫荧光方法检测神经元轴突生长和生长锥塌陷情况,实时荧光定量PCR和Western blot检测Nogo AmRNA和蛋白表达。结果 Nogo A可以在神经元胞体和突起表达;高Phe作用12、24和48 h神经元NogoAmRNA与α微管蛋白（α-Tub）的相对表达量明显减低（P〈0.05）;高Phe作用后神经元Nogo A蛋白明显降低（P〈0.05）;NEP1-40对正常神经元无促进作用,但对高phe作用下的神经元呈浓度依赖性地促进其Nogo A的表达。结论 NEP1-40可以促进高Phe损伤时神经元Nogo A的表达增高,从而促进神经元轴突的生长。

NEP1-40对缺氧缺血性脑病新生大鼠的Wnt信号通路胞增殖的调控作用

目的探讨Nogo-A受体拮抗剂NEP1-40对Wnt信号通路和神经细胞增殖的调控作用。方法 40只大鼠被均分为HIBD(缺氧缺血性脑损伤)组和HIBD+NEP1-40组,采用PCR定量、Western blot分析、细胞增殖的免疫组化试验、8-异前列腺素评估等检测分析缺氧缺血性脑病新生大鼠的修复过程中Wnt信号通路中NgR的转录因子调控与神经细胞增殖。结果NEP1-40处理后,c Jun和c-Myc的表达在蛋白水平上调,基因表达水平上调,Ki-67增加,8-异前列腺素无显著变化。结论通过抑制NgR后发现,c-Jun和c-Myc是Wnt通路的主要转录因子,同时脑室下区神经细胞的增殖增加。

TAT-NEP1-40融合蛋白的表达、纯化及蛋白转导功能的鉴定

为大量获得高纯度具有蛋白转导功能并可以穿过血脑屏障的融合蛋白TAT-NEP1-40,将构建好的表达载体pTAT-NEP1-40转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达后。将融合蛋白进行纯化和复性,鉴定蛋白转导功能。带有重组质粒pTAT-NEP40的大肠杆菌经IPTG诱导后,主要以包涵体形式表达,融合蛋白的分子量大小为14kD,其表达量占菌体总蛋白量的31.59%,纯化后目的蛋白纯度达95.6%,通过免疫组化染色显示融合蛋白可以穿过血脑屏障进入脑组织。上述结果表明利用pTAT-NEP1-40重组质粒,可以成功地表达TAT-NEP1-40;纯化后该蛋白具有穿过血脑屏障的功能,为NEP1-40功能的进一步研究提供了基础。

NEP1-40治疗增加大鼠脊髓损伤引起的降钙素基因相关肽CGRP的表达

目的探讨大鼠脊髓损伤(spinal cord impairment,SCI)后Nogo受体拮抗剂NEP1-40对降钙素基因相关肽(calcitoningene related peptide,CGRP)表达的影响。方法取雌性SD大鼠,随机分成对照组、生理盐水组和NEP1-40治疗组,每组60只。生理盐水组和NEP1-40治疗组的大鼠建立脊髓半切损伤模型,并在蛛网膜下腔留管,再分别注射生理盐水和NEP1-40;对照组的大鼠不损伤脊髓。SCI后1、3、7、14、21 d收集损伤部位的脊髓组织,再用免疫荧光、免疫印迹检测每组CGRP蛋白含量,并在术后7 d采用免疫荧光双标技术检测损伤部位的脊髓内生长相关蛋白-43(growth associated protein 43,GAP-43)、CGRP的表达量。结果生理盐水组CGRP阳性神经细胞减少,而NEP1-40组CGRP阳性神经细胞24 h内减少,然后开始增多,到术后7 d达到高峰,之后一直维持在高水平表达,而对照组发现CGRP阳性神经细胞在低水平表达。免疫印迹和免疫荧光的结果一致。术后7 d,NEP1-40组GAP-43阳性神经细胞数最多,生理盐水组次之,对照组未发现,而且发现GAP-43和CGRP有共表达。结论脊髓损伤后,NEP1-40可以降低神经细胞Nogo-A的表达而大量增加CGRP、GAP-43的表达,从而改善脊髓的内环境,促进神经突起的修复。

NEP1-40对视网膜缺血-再灌注损伤过程中视网膜细胞的保护作用

背景 视网膜缺血-再灌注损伤（RIRI）可导致细胞凋亡,凋亡是一个复杂的过程,与许多基因有关,探讨药物对RIRI后视细胞凋亡的保护作用具有重要意义. 目的 探讨Nogo-A在大鼠RIRI模型中的表达及其与细胞凋亡的关系,研究Nogo受体竞争性拮抗剂NEP1-40对视网膜细胞的保护作用. 方法 将78只SD大鼠按随机数字表法随机分为正常组、RIRI组和NEP1-40组,RIRI组及NEP1-40组大鼠分别用前房升高眼压的方法升高眼压至大鼠视网膜苍白,持续60 min,然后恢复眼压至视网膜色泽恢复,制作RIRI大鼠模型.术后6h、12 h及1、2、3、7d用过量的水合氯醛处死大鼠,制备视网膜标本.透射电子显微镜下观察各时间点各组大鼠视网膜的超微结构,采用TUNEL法检测视网膜细胞的凋亡情况,并计算细胞凋亡指数（AI）.采用免疫组织化学法检测视网膜组织中Nogo-A蛋白的表达,并采用逆转录PCR（RT-PCR）法半定量检测Nogo-A mRNA在视网膜中的表达. 结果 正常组大鼠视网膜各层结构正常；RIRI组大鼠视网膜再灌注12h后可见少量视网膜细胞器的线粒体嵴异常及空泡化,再灌注后1 ～2d可见凋亡小体；NEP1-40组视网膜的视细胞外节膜盘略疏松,部分线粒体嵴短小,空泡化,未见凋亡小体,视网膜细胞超微结构损害明显轻于RIRI组.TUNEL检测显示细胞凋亡出现于再灌注后6h,并逐渐递增,再灌注后1d凋亡细胞数目达高峰,2d后开始下降,但再灌注后3d仍可见TUNEL阳性细胞.NEP1-40组各时间点间凋亡细胞数目较RIRI组明显减少.正常组、RIRI组和NEP1-40组大鼠在不同时间点细胞AI的差异均有统计学意义（F分组=100.850,P=0.000;F时间=34.309,P=0.000）,其中RIRI组和NEP1-40组大鼠视网膜细胞AI明显高于正常组,而NEP1-40组AI明显低于RIRI组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.Nogo-A蛋白及其mRNA主要表达于RIRI后的视网膜,再灌注后6h大鼠视网膜中Nogo-A蛋白及其mRNA均开始增加,至再灌注id时表达达高峰,然后逐渐减弱,但再灌注后7d仍有表达.3个组大鼠不同时间点视网膜中Nogo-A蛋白的表达差异有统计学意义（F分组=164.139,P=0.000; F时间=21.772,P=0.000）,Nogo-A mRNA的表达差异有统计学意义（F分组=93.889,P=0.000;F时间=6.349,P=0.000）,NEP 1-40组和RIRI组大鼠视网膜中Nogo-A蛋白及其mRNA的表达均明显高于正常组,而NEP1-40组大鼠视网膜中Nogo-A蛋白及其mRNA在各时间点的表达均低于RIRI组,差异均有统计学意义（P＜0.05）. 结论 Nogo-A可促进RIRI后视网膜细胞的凋亡,NEP1-40能抑制Nogo-A的表达,从而减少视网膜细胞的凋亡,对RIRI后的视网膜细胞有保护作用.

慢病毒介导NEP1-40转染神经干细胞的研究

目的通过慢病毒载体将NEP1-40基因转入神经干细胞内表达,探讨NEP1-40基因体外转染大鼠神经干细胞的可行性。方法将大鼠胚胎室管膜区神经干细胞(NSC)采用已成功构建的NEP1-40慢病毒载体转染,同时设立空白慢病毒载体对照组及神经干细胞对照组。用荧光显微镜观察细胞内荧光表达情况,计算转染率,采用RT-PCR及Western blot法检测NEP1-40在细胞内表达情况。结果 NEP1-40基因慢病毒载体转染NSC其感染复数(MOI)为10时,最佳转染率可达96%;转染后NSC中GFP荧光表达24h开始出现,48h达最高分值,并且可以稳定表达。RT-q PCR提示NEP1-40mRNA表达在实验组明显增加,Western blot结果提示NEP1-40及GFP融合蛋白在细胞内稳定表达。结论经慢病毒携带NEP1-40基因成功转染入NSC内,并且可在NSC内稳定表达。

新生态范式(NEP)量表在我国城市学生群体中的修订及信度、效度检验

本文分别在江苏南通绿色学校四至六年级学生群体以及湖北武汉两所高校大学生群体中对学生版NEP量表进行了修订,并对所修订的量表进行了信度、效度检验。研究表明,修订后的学生版NEP量表具有良好的信度;因素分析表明,NEP量表在我国城市学生群体中既不呈现单一维度也不符合理论所设计的五维结构;进一步的内容分析主张该量表主要由"自然观""生态价值判断""生态价值认知"三个维度构成。虽然小学生和大学生群体在三个维度的具体项目组成方面存在一些差异,但其基本结构一致,这在一定程度上反映了当下学生群体在生态世界观方面的心态体系特征。

NEP1-40和甲基强的松龙联合治疗对脊髓修复的影响

目的:探讨甲基强的松龙(MP)和NEP1-40联合治疗对大鼠脊髓损伤后脊髓的功能恢复的影响。方法:选用SD大鼠60只,随机分为联合治疗组、MP治疗组、NEP1-40治疗组和对照组4组。建立大鼠中段胸部脊髓后半部横切模型。MP的给药方法为术后30 min内经鼠尾静脉给予MP 30 mg/kg,后给予剂量5.4 mg/(kg.h),持续23 h;NEP1-40的给药方法为术后3 d于硬膜下管给予NEP1-40 12.5μg/(20μl PBS.d),连续7 d。对照组给予等量生理盐水。不同时间点进行运动诱发电位(MEP)测定和行为学评价。结果:联合治疗组大鼠潜伏期延迟时间较MP、NEP1-40治疗组和对照组短,5 w时接近正常,其P1波的潜伏时间为5.42 ms,N1波的潜伏时间为5.55 ms(P<0.01),其BBB运动评分5 w时为17分(P<0.01);联合治疗组的空洞面积百分比不到对照组的一半(P<0.01);NF200阳性染色的神经元数目为20.19个/1000μm2。结论:MP和NEP1-40联合治疗可减少病变范围,减轻白质纤维脱髓鞘病变,增多NF200阳性神经元数目,促进神经再生,改善由于脊髓后半横切所引发的脊髓电生理的障碍,促进了脊髓功能恢复。在治疗脊髓损伤时,MP与NEP1-40有协同作用,促进脊髓功能恢复。

慢病毒载体介导的NEP1-40在人脐血间充质干细胞中的表达

背景:近年来研究证明间充质干细胞具有高度增殖和多向分化潜能,是一种理想的组织工程种子细胞,能高效转染表达外源性目的基因,在基因治疗领域具有广阔的应用前景。目的:将含有NEP1-40基因的慢病毒载体转染脐血间充质干细胞,评价基因转染后脐血间充质干细胞生物学功能变化,观察NEP1-40在脐血间充质干细胞中的表达。方法:体外分离和培养人脐血间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面标记,并对其生物学特性进行鉴定。同时将NEP1-40基因克隆入慢病毒载体,包装出病毒上清,以不同拷贝数转染脐血间充质干细胞。结果与结论:实验通过密度梯度离心法成功在体外分离和培养脐血间充质干细胞,诱导其向脂肪细胞分化,流式细胞仪检测结果显示脐血间充质干细胞中CD90、CD73及CD105蛋白阳性,不表达CD14、CD34、CD45、CD19、HLA-DR、Stro-1及CD106蛋白;real-timePCR检测发现其NEP1-40mRNA表达水平与转染拷贝数有关,转染拷贝数越高,NEP1-40的表达量越高,此外转染NEP1-40后的脐血间充质干细胞中可检测到NEP1-40蛋白,提示NEP1-40基因转染后脐血间充质干细胞原有的生物学功能无明显影响。

基于NEP量表的生态旅游动机研究

文章运用环境价值关心NEP量表,来测量我国旅游者出于对环境价值的关心而参与生态旅游活动的旅游动机。研究表明NEP量表可以应用于我国旅游市场,具有相当的预测效度,可以在一定程度上预测人们的环保态度,有利于旅游的可持续发展。

项目措辞方向与NEP量表在中国应用的再评估

项目措辞方向会对NEP量表在中国应用时的测量质量产生影响吗?利用问卷调查数据,本研究评估了NEP量表在中国大学生群体中的应用情况,并特别关注项目措辞方向差异对量表测量质量的影响。研究发现:(1)项目措辞方向的不一致确实干扰了NEP量表的内部一致性和维度结构,统一方向后,量表的内部一致性明显提升,理论维度也更加明确;(2)统一措辞方向后NEP量表的预测效度并不理想,但在拆解为5个子量表后,预测效度得到了明显改善;(3)统一措辞方向后的NEP量表是大学生环境关心的最佳测量工具。进一步,研究对项目措辞方向为何会影响量表测量质量做出了解释,并明确了未来使用NEP量表应当注意的事项。

教师生态价值观的现状分析及对区域可持续发展教育的启示——基于北京市通州区部分教师的NEP量表调查

教师生态价值观的状况在教学过程中对学生价值观的形成有潜移默化的影响。基于北京市通州区部分教师的NEP量表调查结果,分析和讨论了教师生态价值观的现状,提出:要在教师培训中支持亲生态价值观的塑造;在教师学科教学培训活动中帮助其理解、探索自然规律;支持教师探索自然界在满足人类需求和保持生态平衡方面的教育教学研究工作。