高效毛细管电泳法同时测定维拉帕米和去甲维拉帕米对映体的血浆浓度

用高效毛细管电泳中最常用的毛细管区带电泳模式，以三甲基β环糊精（ＴＭβＣＤ）为手性选择剂，同时测定维拉帕米和去甲维拉帕米对映体的血浆浓度。手性测定条件：手性拆分缓冲液为含６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＴＭβＣＤ（ｐＨ２５），浓度６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１的磷酸盐缓冲液；毛细管柱为３０ｃｍ×７５μｍ（ＩＤ）的聚丙烯酰胺涂渍柱；选择电迁移方式进样，电压１２ｋＶ，时间７ｓ；运行电压１４ｋＶ；紫外检测波长２００ｎｍ；设柱温为２０℃；１２ｍｉｎ内完成检测。各对映体检测的线性范围为２５０ｎｇ·ｍｌ－１～３０００ｎｇ·ｍｌ－１，准确度和精密度达到生物样品分析的要求。用本法测定健康志愿者口服和静滴ＶＰＭ后各对映体的血浆浓度，结果良好。

高效液相色谱法同时测定盐酸维拉帕米及其主要代谢产物

建立了反相高效液相色谱法同时测定人血浆中维拉帕米及其主要代谢产物去甲维拉帕米血药浓度．以甲醇—水—三乙胺（６７∶３３∶０．４，ｐＨ６．７）为流动相，乙吗噻嗪（ｅｔｈｍｏｓｉｎｅ）为内标，样品用正己烷—正丁醇混合液提取浓缩后进样，紫外检测器检测（２７９ｎｍ）。此法操作简便，精密度好，日内、日间误差：维拉帕米＜８．６％，去甲维拉帕米＜７．６％；方法回收率高，维拉帕米、去甲维拉帕米回收率均＞９２％。两者血药浓度在２５～１０００ｎｇ·ｍｌ－１范围内呈线性关系，最小检测浓度维拉帕米：２．５ｎｇ·ｍｌ－１，去甲维拉帕米：５．０ｎｇ·ｍｌ－１。应用该法测定了６名志愿者口服盐酸维拉帕米片剂后的血药浓度。

RP-HPLC荧光检测法同时测定血浆中的盐酸维拉帕米和活性代谢物去甲维拉帕米的浓度

目的 研究建立同时测定盐酸维拉帕米 (Ver)和活性代谢物去甲维拉帕米 (Nor)血药浓度的方法。方法 应用反相高效液相 荧光检测色谱法 ,采用加洛帕米 (Gal)作内标 ,流动相组成为醋酸钠缓冲液 (pH =3.0 ,0 .0 1mol·L-1) 乙腈 三乙胺 (70∶35∶0 .4) ,荧光检测波长λex2 75nm ,λem310nm ,血浆样品提取方法采用碱化后有机相间液 液萃取 ,再酸化后反提。结果 Ver,Nor及Gal的色谱峰分离效果好 ,无内源性杂峰及Ver其它代谢产物干扰。结论 本研究建立了一种快速、准确。

维拉帕米对映体在人体的药代动力学

目的：考察维拉帕米（ＶＰＭ）和去甲维拉帕米（ＮＶＰＭ）对映体的药代动力学特性。方法：８名汉族男性健康志愿者分别ｐｏ外消旋ＶＰＭ８０ｍｇ和静滴５ｍｇ，以三甲基β环糊精为手性选择剂，毛细管电泳法同时测定ＶＰＭ和ＮＶＰＭ对映体的血浆浓度，用二房室开放模型拟合药时曲线。结果：ｐｏＶＰＭ的Ｒ／Ｓ（ＡＵＣ），Ｒ／Ｓ（ＣＬ）和Ｒ／Ｓ（Ｃｍａｘ）比率分别为３６６±１８６，０３±００５３和４８２±０５８；ＮＶＰＭ的Ｒ／Ｓ（Ｃｍａｘ）和Ｒ／Ｓ（ＡＵＣ）比率为２５８和２３６。ｉｖＶＰＭ的Ｒ／Ｓ（ＡＵＣ），Ｒ／Ｓ（ＣＬ）和Ｒ／Ｓ（Ｃｍａｘ）比率分别为１０４±０２９，１０１±０３和１３６±０１２。Ｒ（＋）ＶＰＭ和Ｓ（－）ＶＰＭ的绝对生物利用度为３０３±１９和９８±５９。结论：ＶＰＭ有较大的对映体特异性首过代谢，选择优对映体Ｓ（－）ＶＰＭ为监测对象有利于临床合理使用外消旋ＶＰＭ。

维拉帕米及其主要代谢物在健康人体内的药物动力学

研究了口服单剂量维拉帕米后,维拉帕米及其主要代谢物在正常中国人体内的处置动力学。采用药物及其代谢物的药动学结合模型描述两者在正常人体内的经时过程。口服给药后,维拉帕来迅速代谢,约3h其代谢物去甲维拉帕米达到血浓度峰值,去甲维拉帕米的C_(max)为123.1±62.6 ng/ml。维拉帕来和去甲维拉帕米的平均消除半衰期分别为3.70±0.63和6.26±1.69 h,混合参数K_(1m) V_1/V_m 为0.11±0.06h^(-1)。

毛细管区带电泳同时分离维拉帕米和去甲维拉帕米对映体

目的：建立同时分离维拉帕米（ＶＰＭ）和去甲维拉帕米（ＮＶＰＭ）对映体的高效毛细管电泳方法。方法：采用目前应用最广泛的毛细管区带电泳模式，以三甲基β环糊精（ＴＭβＣＤ）为手性选择剂，考察了毛细管柱、进样方式、运行电压、缓冲液ｐＨ值、溶剂等因素对峰迁移、分辨率、灵敏度的影响，选择优化的电泳条件用于标准溶液的分离和测定。结果：用ｐＨ为２．５，含６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＴＭβＣＤ的６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１磷酸盐缓冲液为手性拆分剂，在７５μｍ（ＩＤ）×３０ｃｍ的聚内酰胺涂渍柱（柱温２０℃）上，采用１２ｋＶ（７ｓ）电迁移进样，运行电压为１４ｋＶ，紫外检测波长２００ｎｍ，能在１１ｍｉｎ内将内标（Ｇａｌｏｐａｍｉｌ）、ＲＶＰＭ、ＳＶＰＭ、ＲＮＶＰＭ和ＳＮＶＰＭ完全分离，并用各对映体与内标的峰面积比为定量指标进行水标溶液的浓度测定，定量检测限为２５ｎｇ·ｍｌ－１，日间变异小于１０％，线性关系良好。结论：毛细管区带电泳方法能快速、高效地分离ＶＰＭ和ＮＶＰＭ对映体，为ＶＰＭ和ＮＶＰＭ对映体的测定及质量控制提供新的方法，为生物体液中ＶＰＭ及其代谢物ＮＶＰＭ对映体的测定，为开展ＶＰＭ对映体特异性的药动学和药效学研究打下基?

齐墩果酸对大鼠体内细胞色素P450酶活性的影响

目的:研究齐墩果酸对大鼠体内细胞色素P450酶CYP3A4的影响。方法:用Cocktail探针药物法,将SD大鼠按体重随机分组,分别给予0.5%CMC-Na、齐墩果酸高剂组、中剂组和低剂组灌胃9天,第10天给药1 h后,灌胃给药维拉帕米,不同时间点采集血样,用LC-MS/MS法测定血浆中探针药物维拉帕米及其代谢产物去甲维拉帕米的浓度,用PKSolution软件估算其药代动力学参数。结果:连续灌胃给药齐墩果酸10天,维拉帕米和去甲维拉帕米药动学参数Cmax、AUC显著减小(P<0.01)。结论:连续灌胃给药齐墩果酸10天,对CYP3A4酶活性有显著诱导作用。

毛细管区带电泳同时分离维拉帕米和去甲维拉帕米对映体

目的 :建立同时分离维拉帕米 ( VPM )和去甲维拉帕米 ( NVPM )对映体的高效毛细管电泳方法。 方法 :采用毛细管区带电泳模式 ,以三甲基 -﹀-环糊精 ( TM-﹀- CD )为手性选择剂 ,考察了毛细管柱、进样方式、运行电压、缓冲液 p H值、溶剂等因素对峰迁移、分辨率、灵敏度的影响 ,选择优化的电泳条件用于标准溶液的分离和测定。 结果 :用 p H为 2 .5,含 60 mmol/ LTM-﹀- CD的 60 mmol/ L磷酸盐缓冲液为手性拆分剂 ,在 30 cm× 75︼m ( id)的聚内酰胺涂渍柱(柱温 2 0℃ )上 ,采用 12 k V( 7s)电迁移进样 ,运行电压为 14k V,紫外检测波长 2 0 0 nm,能在 11min内将内标 ( Gallopamil)、R- VPM、S- VPM、R- NVPM和 S- NVPM完全分离 ,并用各对映体与内标的峰面积比为定量指标进行水标溶液的浓度测定 ,定量检测限为 2 5ng/ ml,日间变异小于10 % ,线性关系良好。 结论 :毛细管区带电泳方法能快速、高效地分离 VPM和 NVPM对映体 ,为 VPM和 NVPM对映体的测定及质量控制提供新的方法 ,为生物体液中 VPM及其代谢物NVPM对映体的测定、为开展

维拉帕米及去甲基维拉帕米临床血药浓度的HPLC-FLU检测

目的 :建立一种简便的维拉帕米 ( Ver)及去甲基维拉帕米 ( Norv)血药浓度 HPL C- FL U的测定方法。方法 :色谱柱为Alltima C1 8柱 ( 15 0 mm× 4.6 m m,5 ︼m) ;流动相为甲醇 -水 -三乙胺 ( 5 2∶ 47.6∶ 0 .4) ,用冰醋酸调节 p H至 5 .41,流速 1ml/min。荧光检测激发波长 Ex=2 84nm,发射波长 Em=313nm。Ver和去 Norv的保留时间分别为 7.14min和 5 .17min,血样预处理采用乙腈直接沉淀法。结果 :Ver及 Norv血药浓度在 2 5～ 40 0 ng/ ml范围内线性关系良好 ( r≥ 0 .9997) ,最低检测限分别为 2 0 0 pg和 10 0 pg( r S/N≥ 3) ,最低检测浓度均为 2 0 ng/ ml。批内、批间精密度小于 5 %。结论 :本方法简便可靠 。

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中维拉帕米与其代谢产物去甲维拉帕米的浓度及其药动学研究

目的:建立测定大鼠血浆中维拉帕米(Ver)及其代谢产物去甲维拉帕米(Nor)浓度的方法,并研究其药动学。方法:取大鼠6只灌胃Ver10mg/kg,采用液相色谱-串联质谱法,以他莫昔芬为内标,检测给药前和给药后24h内Ver和Nor的血药浓度,并用3p97软件计算药动学参数。液相色谱条件:色谱柱为AlltimaC18,流动相为甲醇-0.05%甲酸水(梯度洗脱),柱温为40℃;质谱条件:电喷雾电离源,Ver、Nor和他莫昔芬的选择检测离子质荷比(m/z)分别为455.3/165.0、441.0/165.0和372.2/129.1。结果:Ver、Nor检测质量浓度的线性范围均为2～1000ng/m(lrVer=0.9994,rNor=0.9992),最低检测限均为0.5ng/ml;药动学参数:cmax分别为(669.91±80.99)、(681.86±79.79)ng/ml,t1/2分别为(2.26±0.31)、(2.44±0.29)h,AUC0-∞分别为(1331.33±165.20)、(2341.66±201.20)ng·h/ml。结论:本方法专属性强、灵敏度高、准确性好,可用于Ver和Nor的血药浓度测定,且二者在大鼠体内的药动学符合二室模型。

LC-MS/MS法同时测定人血浆中维拉帕米和代谢产物去甲维拉帕米

建立一种简便、灵敏的同时测定人血浆中维拉帕米和去甲维拉帕米浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)的分析方法,并用于健康人体的药代动力学研究。血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,使用Agilent Zorbax Eclipse C18色谱柱(50 mm×4.6 mm,5μm)分离,以0.1%甲酸-5%乙腈-10 mmol·L-1甲酸铵水溶液作为水相,甲醇-乙腈(50∶50,v/v)溶液作为有机相,0.5 m L·min-1的流速进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI),多反应(MRM)正离子监测模式对维拉帕米、去甲维拉帕米及内标维拉帕米-d6进行定量检测,监测离子对分别为m/z 445.0→165.2、m/z 441.0→165.2和m/z 461.1→165.2。本文建立的同时测定人血浆中维拉帕米及去甲维拉帕米浓度的LC-MS/MS方法的定量下限(LLOQ)为0.1 ng·m L-1,且在0.1~50 ng·m L-1浓度内线性关系良好(r2>0.997)。维拉帕米及去甲维拉帕米的基质效应分别在99.2%~100%和101%~102%之间,该方法前处理简便快速,灵敏度高,能准确同时测定人血浆中维拉帕米及去甲维拉帕米浓度,方法验证后并经伦理委员会批准后应用于健康人体的药动学研究。