Pectolinarin inhibited LPS-stimulated inflammation in microglial BV_(2) cells via NF-κB signaling pathway

Background:Neuro-inflammation is regarded as one of the critical pathogenesis in neurodegenerative diseases,which is characterized by the activated microglial cells.Pectolinarin(Pec),a natural flavonoid that exists in many Chinese herbal medicines,has been reported to have various biological activities.However,the effects and mechanisms on neuro-inflammation are not clear.Methods:In this study,the inhibitory effects and mechanisms of Pec on neuro-inflammation were investigated in the LPS-stimulated microglial BV_(2) cells.BV_(2) microglial cells were treated with Pec or vehicle,followed by LPS.Enzyme-linked immunosorbent assay,real-time quantitative PCR,nitric oxide and reactive oxygen species assay,and western blot were performed to examine the effects of Pec on neuro-inflammatory responses.Results:We showed that Pec significantly inhibited the expression of tumor necrosis factorαand interleukin 6 in mRNA and protein levels induced by LPS.Moreover,the production of nitric oxide,iNOS,reactive oxygen species,and COX-2 were suppressed by Pec in LPS-stimulated microglial BV_(2) cells.In addition,Pec inhibited LPS-induced inflammation via nuclear factor kappa B signaling pathway,as evidenced by the reduction of the phosphorylation of inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase,the degradation of IκBα,and the nuclear translocation of p65.Conclusion:Taken together,Pec exhibited anti-inflammatory effects in LPS-stimulated microglial BV_(2) cells via nuclear factor kappa B signaling pathway,which might provide therapeutic potential for neuro-inflammation and neurodegenerative diseases.

HPLC法同时测定中药柳穿鱼中柳穿鱼苷和橙皮苷的含量

目的建立同时测定柳穿鱼中柳穿鱼苷和橙皮苷含量的方法，为柳穿鱼药材质量标准的制定及进一步开发利用奠定基础。方法采用HPLC法。色谱柱：Diamonsil ODS C18柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相：乙腈-甲醇-水（体积比15：20：65）；流速：0．8mL·min^-1；检测波长：280nm；柱温：室温。结果柳穿鱼苷和橙皮苷能够达到基线分离；柳穿鱼苷质量浓度在51．12～306．8mg·L^-1内（r=0．9998）、橙皮苷质量浓度在50．25～502．5mg·L^-1内（r=0．9997）与峰面积呈良好的线性关系；柳穿鱼苷和橙皮苷平均回收率分别为99．1％、100．7％，RSD分别为2．8％、2．1％。结论所建立的方法可用于柳穿鱼的质量控制。

柳穿鱼叶苷和柳穿鱼黄素的大鼠肠外翻吸收研究

目的:研究生大蓟、大蓟炭主要活性成分柳穿鱼叶苷、柳穿鱼黄素在大鼠肠道内的吸收情况。方法:以吸收率和吸收速率常数为指标,通过大鼠外翻肠囊法对柳穿鱼叶苷和柳穿鱼黄素在大鼠小肠各肠段的吸收情况进行对比研究。结果:柳穿鱼叶苷在十二指肠、空肠、回肠、结肠段的吸收速度常数分别为0.505 1±0.192 7、0.936 0±0.187 2、0.732 0±0.133 5、0.251 3±0.027 6(μg·h-1·cm-2);柳穿鱼黄素在十二指肠、空肠、回肠、结肠段的吸收速度常数分别为0.059 1±0.008 3、0.093 3±0.029 2、0.112 3±0.035 6、0.029 4±0.009 1(μg·h-1·cm-2)。柳穿鱼叶苷在整个小肠段累积吸收率明显大于柳穿鱼黄素。结论:二药的吸收均随时间延长而增多,且在空肠与回肠段吸收情况均好于其它肠段。柳穿鱼叶苷在整个小肠段的吸收情况明显优于柳穿鱼黄素。

大蓟根饮片质量标准初步研究

目的对大蓟根饮片质量标准进行研究。方法采用显微、TLC法对大蓟根进行定性鉴别;采用HPLC法测定大蓟根中蒙花苷和柳穿鱼叶苷含量,色谱柱Waters Sunfire C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸(22∶78),检测波长330 nm,柱温30℃,流速1.0 mL·min^(-1)。结果大蓟根显微特征清晰,大蓟根的TLC鉴别斑点清晰,分离度好;HPLC法中蒙花苷在4.93~24.66μg·mL^(-1),柳穿鱼叶苷在5.16~25.81μg·mL^(-1)与峰面积线性关系良好;蒙花苷平均回收率为96.4%,RSD为1.2%,柳穿鱼叶苷平均回收率为97.9%,RSD为0.64%;水分符合中国药典附录药材及饮片检定通则要求;浸出物均大于25%。结论建立方法简单、可行,重复性好,便于控制大蓟根饮片质量。

UPLC指纹图谱结合化学计量学对不同产地大蓟的质量评价研究

目的 建立大蓟的UPLC指纹图谱结合化学计量学评价不同产地大蓟的质量。方法 采用UPLC法建立15批大蓟药材的指纹图谱,以共有峰峰面积为依据,采用熵权法计算权重,灰色关联度法计算相对关联度,优劣解距离法计算相对贴近程度,得到大蓟药材产地排名和各色谱峰权重。结果 共确定7个共有峰,指认了6个成分,分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、蒙花苷、柳穿鱼叶苷和柳穿鱼黄素。产自安徽、浙江的大蓟药材排名普遍靠前,浙江丽水产的大蓟样品质量排名较优,而江苏产大蓟药材排名普遍较后,且安徽、江苏省内药材排名波动大。结论 本法可对不同产地的大蓟药材进行区分,为大蓟质量评价提供参考。

百蕊草化学成分分离

目的：研究百蕊草的化学成分。方法：对百蕊草95%乙醇提取物采用各种柱色谱方法分离纯化,通过理化常数测定和光谱分析鉴定化合物结构。结果：从百蕊草中分离纯化了10个化合物,分别鉴定为木犀草素-7-O-葡萄糖苷（1）,芹菜素-7-O-葡萄糖苷（2）,芦丁（3）,芹菜素-8-C-α-L-阿拉伯糖苷（4）,高车前苷（5）,大蓟苷（6）,蒙花苷（7）,芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷（8）,柯伊利素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷（9）,金圣草黄素（10）。结论：化合物10为首次从百蕊草属植物中分离得到,化合物4-9为首次从檀香科植物中分离得到。

大蓟-魁蓟-覆瓦蓟的蒙花苷和大蓟苷含量比较

目的:通过对大蓟与主要类似品魁蓟、覆瓦蓟的性状与蒙花苷、大蓟苷含量比较,为研究药材大蓟的质量控制方法奠定基础。方法:实地采样并购买对口药材,将样本分为根、茎、叶、花与花序4部分,用HPLC测定蒙花苷、大蓟苷含量;色谱柱Waters XBridgeTMC18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-水(45∶55);检测波长326 nm;流速0.8 mL.min-1;柱温30℃。结果:蒙花苷的标准曲线方程为Y=74 064X-47 748,R2=0.991,大蓟苷的标准曲线方程为Y=171 164X-180 707,R2=0.999,线性关系良好。大蓟叶蒙花苷质量分数为1.987 3%、魁蓟叶为1.412 2%、覆瓦蓟叶为0.149 2%,大蓟与魁蓟的根、茎中蒙花苷质量分数均较低,覆瓦蓟根未检出蒙花苷。大蓟苷在大蓟与魁蓟各部位均未检出,覆瓦蓟各部位中以叶的质量分数最高为0.069 0%。结论:大蓟,魁蓟,覆瓦蓟均为菊科蓟属植物,药材性状十分相似,覆瓦蓟在四川做大蓟用可能与叶缘、叶面有针刺并能检测出大蓟苷(柳穿鱼叶苷)有关。魁蓟在陕西,四川、河南部分地区做大蓟用,可能与叶色、被毛、叶缘针刺以及粉末特征与大蓟药材记述相似有关。

灯盏花乙素半合成柳穿鱼叶苷研究

柳穿鱼黄素及柳穿鱼叶苷作为中药大蓟中黄酮及黄酮苷类的代表性化合物,具有非常重要的生物活性.以商业易得的灯盏花乙素为原料,经羧基酯化、酚羟基选择性甲基化及糖苷键水解3步反应,以69.5%的总收率制备得到柳穿鱼黄素.随后,以得到的柳穿鱼黄素为糖基受体、全苯甲酰基保护的溴代芸香糖为糖基供体完成了柳穿鱼叶苷的化学合成.

HPLC法测定肾炎灵胶囊中柳穿鱼叶苷、地榆皂苷-Ⅰ、女贞苷、特女贞苷、去甲蟛蜞菊内酯和蟛蜞菊内酯

目的建立HPLC波长切换法同时测定肾炎灵胶囊中柳穿鱼叶苷、地榆皂苷-Ⅰ、女贞苷、特女贞苷、去甲蟛蜞菊内酯和蟛蜞菊内酯。方法采用高效液相色谱法,Agilent Extend-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–乙腈(1∶1)与0.5%冰醋酸溶液,梯度洗脱;检测波长:330 nm(0~14 min检测远柳穿鱼叶苷)、203 nm(14~20 min检测地榆皂苷-Ⅰ)、224 nm(20~29 min检测女贞苷和特女贞苷)、351 nm(29~45 min检测去甲蟛蜞菊内酯和蟛蜞菊内酯);体积流量:0.8 m L/min;柱温:30℃;进样量为10μL。结果柳穿鱼叶苷、地榆皂苷-Ⅰ、女贞苷、特女贞苷、去甲蟛蜞菊内酯和蟛蜞菊内酯分别在2.97~59.40、19.59~391.80、1.78~35.60、4.96~99.20、1.13~22.60、3.29~65.80μg/m L线性关系良好;平均回收率分别为97.97%、99.78%、96.98%、98.52%、98.10%、99.10%,RSD值分别为0.76%、1.01%、0.66%、1.22%、0.95%、1.56%。结论该方法简便,分析速度快,为完善肾炎灵胶囊的质量标准提供参考。

HPLC法测定大蓟配方颗粒中蒙花苷和柳穿鱼叶苷的含量

目的:建立大蓟配方颗粒中蒙花苷和柳穿鱼叶苷的含量测定方法。方法:采用HPLC法,Hypersil ODS2 C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);乙腈-0.1%磷酸(23∶77)为流动相;体积流量1mL/min;检测波长330nm;柱温30℃。结果:蒙花苷对照品在0.044～0.44μg进样量与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997),平均加样回收率为100.26%,RSD为1.25%(n=6);柳穿鱼叶苷对照品在0.141～2.115μg进样量与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为100.37%,RSD为1.18%(n=6)。结论:该方法操作简便,结果准确,重现性好,可用于大蓟配方颗粒的质量控制。

大蓟药用部位成分分析

目的:为大蓟合理入药及质量评价提供科学依据。方法:采用反相高效液相色谱法测定根、茎、叶不同药用部位的蒙花苷和柳穿鱼叶苷含量。结果:大蓟药材中叶和茎中柳穿鱼叶苷和蒙花苷的含量相近,根中的含量最少,柳穿鱼叶苷和蒙花苷在地上部分中的含量显著高于地下部分。结论:大蓟的地上部分和根的柳穿鱼叶苷和蒙花苷成分含量差异较大,根据测定结果地上部分入药具有合理性。