E2F-3,pRb蛋白在前列腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨细胞周期调控因子E2F-3和pRb蛋白在前列腺癌发病机制中的作用及其临床意义。方法应用免疫组化E liV isionTMp lus二步法检测49例前列腺癌(prostate cancer,PCa)标本,20例良性前列腺增生(ben ign prostatichyperp lasia,BPH)及10例正常前列腺组织(norm al prostate,NP)中E2F-3与pRb蛋白的表达。结果E2F-3在PCa、BPH与NP中的阳性表达率为63.27%(31/49),20%(4/20)和10%(1/10),PCa中E2F-3的水平明显高于BPH(P<0.05)及NP(P<0.05),且与PCa病理分级临床分期呈正相关(rs分别为0.487、0.517,P<0.05)。pRb中在PCa,BPH与NP中的阳性表达率为44.90%(22/49),80%(16/20),90%(9/10),PCa中pRb的水平明显低于BPH及NP(P<0.05),且与PCa病理分级、临床分期呈负相关(rs分别为-0.401、-0.468,P<0.05)。E2F-3表达与pRb表达呈负相关(rs=-0.617,P<0.01)。结论E2F-3对PCa的发生发展发挥有重要的作用,且其表达与pRb蛋白的异常表达密切相关。

p16,pRb和Ki-67在宫颈鳞癌中的表达及其意义

[目的]观察p16,pRb和Ki-67在宫颈鳞癌中的表达,并探讨其临床意义.[方法]采用免疫组织化学EnVision法检测p16,pRb及Ki-67在35例宫颈鳞癌、36例宫颈上皮内瘤变(10例CINⅠ,26例CINⅡ/Ⅲ)及35例正常宫颈鳞状上皮黏膜组织中的表达水平.[结果]p16及Ki-67蛋白阳性表达率在宫颈鳞癌组织中分别为74.3%(26/35),37.1%(13/35);在CINⅠ中为60.0%(6/10),40.0%(4/10),在CINⅡ/Ⅲ中为61.5%(16/26),42.3%(11/26);在正常宫颈鳞状上皮中为5.0%(1/20),10.0%(2/20).p16及Ki-67蛋白在CIN和宫颈鳞癌中的阳性表达率和表达分数明显高于正常宫颈黏膜组织.pRb蛋白在正常宫颈、CIN、宫颈鳞癌黏膜组织中的表达间差异无统计学意义.[结论]p16,Ki-67是宫颈癌和癌前病变的特异性标志物,p16,Ki-67的检测对宫颈癌早期病变的诊断具有重要意义.

皮肤鳞状细胞癌中p16、CyclinD1、pRb蛋白表达与临床病理特征的关系

目的:分析皮肤鳞状细胞癌中p16、Cyclin D1、pRb蛋白表达与临床病理特征的关系为临床诊断提供依据。方法:采集45例皮肤鳞状细胞癌标本及10例正常皮肤标本,采用免疫组化法测定其中的p16、Cyclin D1、pRb蛋白表达情况。结果:皮肤鳞状细胞癌的p16蛋白阳性表达率明显低于正常皮肤,Cyclin D1、pRb蛋白明显高于正常皮肤,差异有统计学意义(P<0.05)。Broders分级为Ⅲ~Ⅳ级、有淋巴结转移者p16蛋白阳性表达率明显低于Ⅰ~Ⅱ级者(P<0.05),Cyclin D1、pRb蛋白阳性表达明显高于Ⅰ~Ⅱ级、无淋巴结转移者(P<0.05)。直线相关分析显示,p16蛋白阳性表达与Cyclin D1、pRb蛋白呈负相关;cyclin D1蛋白阳性表达与pRb蛋白呈正相关。结论:皮肤鳞状细胞癌的发生和进展可能是p16蛋白、Cyclin D1、pRb蛋白异常表达的结果。故认为可通过对三种指标进行检测来评估皮肤鳞状细胞癌的恶性程度及预后。

胃癌中BRG1蛋白的表达及意义

目的 探讨BRG1基因蛋白在胃癌组织中的表达及与 pRb、p5 3基因的相互关系。方法 应用S P免疫组化法检测30例胃癌组织中BRG1及pRb和 p5 3的表达情况 ,分析其相关性 ,并且结合临床病理因素 ,初步探讨其和胃癌发生、发展及预后的关系。结果 BRG1与 pRb的表达有相关性 ,而和 p5 3无关。BRG1在胃癌中的表达率为 76 6 7% (2 3/ 30 ) ,与正常组织相比呈高表达。BRG1和pRb的表达与胃癌的浸润、淋巴结转移、分级和分期有关。结论 BRG1蛋白在胃癌中高表达 ,对胃癌的发生、发展可能起重要作用。BRG1及 pRb的表达可作为判断胃癌恶性程度及预后的重要指标。

丙型肝炎病毒核心蛋白对HepG2细胞生长周期的影响

目的:构建丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-core-1b)真核重组质粒,获得稳定表达HCV-core-1b的HepG2细胞株,观察HCV-core-1b对HepG2细胞株生长周期及cyclin D1和pRb/p130表达的影响,探讨丙型肝炎病毒慢性感染的可能机制。方法:将HCV-core-1b亚克隆入pBabe-Flag-puro载体,获得重组质粒pBabe-Flag-HCV-core-1b;将重组质粒转染病毒包装细胞Pheonix 293T,筛选获得分泌HCV-core-1b的病毒包装细胞株。利用包装细胞产生的病毒上清感染靶细胞,筛选后获得稳定表达HCV-core-1b的HepG2细胞株,流式细胞仪检测靶细胞生长周期的变化,Western blotting检测cyclin D1和pRb/p130蛋白的表达。结果:基因测序确认HCV-core-1b亚型基因编码区完整无移位,与标签蛋白Flag形成融合蛋白。HepG2-HCV-core细胞株成功表达Flag-HCV-core-1b蛋白,并导致细胞cyclin D1和pRb/p130的水平下调,显著改变了HepG2细胞生长周期,使细胞阻滞在G0/G1期。结论:成功构建了pBabe-Flag-HCV-core-1b真核表达质粒,获得稳定表达Flag-HCV-core-1b融合蛋白的HepG2细胞。由于HCV-core-1b蛋白的表达,下调了HepG2细胞cyclin D1和pRb/p130的表达,显著抑制HepG2细胞生长周期。

HPV E7基因在细胞周期中的作用

人乳头瘤病毒(HPV)E7基因是目前公认的癌基因之一,其作用机制包括参与免疫逃逸、降低基因稳定性、DNA损伤、抑制凋亡和干扰细胞周期等,其中干扰细胞周期是E7重要的致细胞增殖机制。E7可以与视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)家族和袋状蛋白(E2F)家族、细胞周期相关蛋白等多种细胞周期调控因子相互作用,从而引起细胞周期的失控,导致上皮细胞的过度增殖,甚至恶变。

脑胶质瘤中pRb表达与CDK_4、MTS基因异常的相关性研究

目的 探讨脑胶质瘤中CDK4 、MTS基因异常及pRb表达改变与脑胶质瘤发生发展的相关性。方法 应用PCR SSCP、分子杂交及免疫组化技术检测 6 8例不同病理分级脑胶质瘤。结果 p16基因表达阴性或pRb无表达或CDK4 扩增多为单独发生 ,其中III IV级肿瘤中pRb、p16蛋白失表达或p15基因缺失或CDK4 基因扩增的综合发生率为 89% (4 2 / 47)。结论 脑胶质瘤中细胞生长周期“关卡”蛋白p16、pRb、或CDK4 单因素的异常比交错并发的改变更为常见 ,p16、pRb失活或CDK4 扩增的任一改变 ,即可能破坏细胞增殖的正常调控 。

人乳头瘤病毒E7蛋白对细胞周期G1/S检查点的影响

高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染与宫颈癌的发生关系已经明确,HPV编码的早期蛋白E7是HPV致宫颈癌的主要相关蛋白之一。G1/S检查点是细胞周期中不可逆的关键点,决定了细胞进入细胞周期与否,与肿瘤的发生发展关系密切。pRb蛋白是调控细胞周期G1/S检查点中的限速底物,是起调控作用的主要因子之一。E7通过影响pRb蛋白、E2F家族、Cyclin/CDK2复合物、p27蛋白、Dyrk1B等细胞周期相关蛋白来影响G1/S检查点的正常工作,形成失控的细胞增殖。高危型HPV E7蛋白对细胞周期检查点的影响,既是HPV致癌机制的重要组成部分,也可能成为攻克此类癌症的突破口。本文综述了高危型HPV E7蛋白对细胞周期G1/S检查点的影响。