rIL-12和rIFN-γ可抑制气道肥大细胞的聚集与哮喘发作

目的 观察细胞因子IL 12和IFN γ对抗原诱发的过敏性哮喘及气道肥大细胞浸润的抑制作用。方法 将DunkinHartley豚鼠随机分为哮喘组 (A组 )、rIL 12干预组 (B组 )、rIFN γ干预组 (C组 )和正常对照组 (D组 ) ,并用 10 0g/L卵蛋白分别致敏各组豚鼠。于致敏后第 5周行抗原特异性支气管激发试验。A、B、C 3组在卵蛋白支气管激发试验前 2 4、12、和 2h分别用生理盐水、rIL 12和rIFN γ进行气道雾化吸入干预。激发试验后 1h取各组豚鼠支气管 肺组织标本 ,并用抗人类胰蛋白酶 (Tryptase)单克隆抗体 (AA1)进行免疫组织化学染色 ,计数阳性染色细胞。结果 支气管激发试验阳性率A组为 10 0 % ,B、C和D组均为 0 %。A组豚鼠支气管 肺组织中Tryptase阳性肥大细胞计数几乎高于B、C和D组的 3倍。结论 rIL 12和rIFN

补体C_3的自然转换特征及rIFN-γ和SPG对C_3的调节

用免疫印迹方法观察了补体C_3从pro-C_3自然转换到C_(3c)的过程以及重组干扰素-γ(rIFN-γ)和抗肿瘤多糖Sizofiran(SPG)对C_3的调节。在4℃时,血清中Pro-C_3完全降解为C_(3C)约需18天,C_3与C_(3b)的水平在pro-C_3降解过程的第8天为最高。rIFN-γ和SPG 均能诱导pro-C_3的合成,两者合并使用效果更显著。上述结果提示C_3在体内是以pro-C_3的形式存在的,大部分的物质对补体成分C_3的影响亦是改变pro-C_3的合成。由于C_3随着血清贮存的时间不断变化,因而对补体C_3分析获得的结果都拟被视作是“瞬时结果”。

重组干扰素-γ对哮喘患者外周血单个核细胞IL-8和IL-10的作用研究

目的研究重组干扰素 -γ对哮喘患者体外单个核细胞 IL - 8和 IL - 10释放的影响以及与血清 ECP水平的关系。方法取哮喘患者 8例、正常人 5例的外周静脉血 ,分离单个核细胞培养 ,6 6 h后将哮喘患者的 PBMC上清液分为重组干扰素 - γ干预组、氟美松干预组、未加干预物组 ,72 h收集上清液测定 IL- 8和 IL- 10的浓度。同时留取血清测 ECP。结果哮喘者血清 ECP值与 PBMC培养细胞上清液中 IL- 8值呈显著正相关 (r=0 .70 1) ,与 IL- 10值呈显著负相关 (r=0 .6 38)。哮喘患者血清中 ECP和 PBMC上清液 IL- 8和 IL- 10浓度与正常相比有显著性差异 (P<0 .0 5 )。 r IFN- γ干预后 PBMC上清中 IL- 8较未干预组显著下降 (P<0 .0 5 ) ,而 IL - 10显著增高 (P<0 .0 5 ) ;氟美松干预组则无明显差异性。结论 r IFN-γ通过降低 IL - 8水平 ,发挥抗炎作用。 IL - 10有广泛抑制作用 ,可抑制抗原刺激引起的炎性细胞增殖、活化和有促炎作用的细胞因子及某些介质合成 ,抑制 B细胞分泌 Ig E,r IFN-γ促进 IL - 10合成分泌 。

重组r－干扰素气雾剂治疗RSV毛细支气管炎

重组ｒ－干扰素气雾剂治疗ＲＳＶ毛细支气管炎烟台市毓璜顶医院儿科（２６４０００）王晓明上海市第一人民医院儿科沈时霖，王乃礼，洪建国呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）毛细支气管炎患儿存在低干扰素（ＩＦＮ）反应，因此国内外不少学者用外源性ＩＦＮ进行治疗，已获得了肯定...

山羊IFN-γ免疫血清制备及抗体ELISA检测方法的建立

摘要：为制备山羊干扰素-γ（IFN-γ）免疫血清并建立山羊IFN-γ抗体ELISA检测方法，以原核表达的山羊γIFN重组蛋白（rIFN-γ）为材料，免疫小鼠制备免疫血清；通过对测定不同的抗原包被浓度及包被时间，酶标抗体稀释度，免疫血清的孵育时间等条件的优化建立检测抗体效价的ELISA检测方法，并采用建立的方法测定免疫血清的抗体效价。结果显示，rIFN-γ抗原包被浓度为10μg／mL，4℃包被12h；酶标抗体稀释度为1：5000；免疫血清孵育时间为60min，可以得到最佳ELISA的检测结果。重复试验显示该方法变异系数（CV）在1．5％～5％之间。采用建立的方法测得免疫小鼠免疫血清效价为10^7。该ELISA检测方法灵敏高，稳定性好，为山羊IFN-γ抗体检测提供了技术支持。

γ-基因工程干扰素治疗骨髓增生异常综合征的临床研究

26例MDS患者，每日皮下注射IFN－γ5×105～3×106u，其中21例患者可评价疗效。按欧洲疗效标准判定总有效率为429％。3例患者获得PR，6例获MR，9例稳定，2例恶化．按FAB分型，RA有效率为45．5％（5／11），RAS有效率为50％（1／2），RAEB有效率为50％（3／6）。RAEB－T和CMMDL（各1例）均无效。发生最多及持续时间最长的副作用是发热和疲乏，然而用布洛芬后能明显减轻。当IFN－γ剂量＞2×106u／日时，部分患者可出现Hb、WBC、PIt减少，其它副作用一般为轻度及可逆的。

rIFN－γ及Sizofiran对正常和肿瘤鼠TNF的调节

用免疫印迹电泳方法，观察了重组鼠γ－干扰素（ｒＩＦＮ－γ）及抗肿瘤多糖Ｓｉｚｏｆｉｒａｎ（ＳＰＧ）对正常和肿瘤鼠ＴＮＦ－α的调节。ｒＩＮＦ－γ和ＳＰＧ均能诱导ＴＮＦ的水平增加，但在正常与肿瘤鼠中表现了两个不同的特征。①ＴＮＰ被调节的时程不同：肿瘤鼠ＴＮＦ的增加发生在用药后早期，并迅速降至对照水平；正常鼠的ＴＮＦ增加迟于肿瘤鼠，但能维持较长时间。②ＴＮＦ被调节的水平不同：肿瘤鼠眼用ｒＩＦＮ－γ和ＳＰＧ后，ＴＮＦ的增加分别最高为４８％和４３％；正常鼠则分别可达８８％和９０％。如将ｒＩＦＮ－γ和ＳＰＧ合并使用。对ＴＮＦ的调节能力要优于两者的单独使用。上述结果提示正常与肿溜状态有自身的抗肿瘤免疫特征，ＴＮＦ的调节在很大程度上亦依赖于给药的方式。

人丙型基因工程干扰素（rINF－γ）治疗异位性皮炎27例报告

我们采用ｒＩＮＦ－γ皮下注射治疗了２７例ＡＤ患者，经过３周及４～６周治疗后病情严重度积分较治疗前明显下降（Ｐ值均＜０．００１），而对照组１３例患者皮下注射白蛋白后病情严重度积分无明显下降（Ｐ均＞０．０５）；３周后治疗组总有效率（４８％）高于对照组（１５％），但无统计学意义，４～６周后治疗组总有效率（７５％）明显高于对照组（２２％）（Ｐ＜０．０５）。ｒＩＮＦ－γ的主要副作用为：发热、乏力、肌痛或／和关节痛。

天然DNA和细胞因子对SLE患者淋巴细胞体外分泌抗双链DNA抗体的影响

我们检测了6例活动期、6例缓解期SLE患者和10例正常人血清和外周血单个核细胞(PBMC)自发及经天然DNA(nDNA)、rIL—2、rIL—6和rIFN—γ诱导后分泌IgG类抗双链DNA(dsDNA)特异性抗体水平,观察到活动期患者血清和自发分泌量显著高于缓解期,后者又显著高于正常人,且体外细胞分泌平与血清中的含量密切相关(r=0.9882)。nDNA能特异地激发SLE患者的FBMC分泌抗dsDNA抗体,但对正常人无作用。rIL—2和rIFN—γ皆能增强SLE患者PBMC产生抗dsDNA抗体,表明即使缓解期病人,血中仍有表达IL—2受体的激活的B细胞存在。nDNA和rIL—2联合应用时,对活动期患者PBMC分泌抗dsDNA抗体有协同作用。本文未见外源性rIL—6对抗dsDNA抗体分泌的影响。

基因重组干扰素γ对类风湿关节炎患者体内免疫调节

用基因重组干扰素γ（ｒＩＦＮ－γ）１．０×１０￣６Ｕ治疗类风湿关节炎（ＲＡ）患者并检测多项免疫学指标。结果表明，患者的总Ｔ淋巴细胞、Ｌ／Ｔ＿８比值无明显改变，淋巴细胞表达Ｔａｃ抗原和ＭＨＣⅡ类抗原的水平亦与治疗前相近；但淋巴细胞转化率由治疗前的异常升高降至正常范围，单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达由６８％提高至７９％，ＨＬＡ－ＤＰ、－ＤＱ的表达则增加了一倍以上。上述结果提示ｒＩＦＮ－γ对ＲＡ具有较强的体内免疫调节作用。

重组干扰素-γ对哮喘患者外周血单核细胞IL-4和IL-10 mRNA表达的调节作用

目的 :研究重组干扰素 -γ对哮喘患者外周血单核细胞 (PBMC)IL - 4和IL - 10mRNA表达的调节作用。方法 :哮喘患者9例、正常人 5例的外周静脉血 ,ficoll-hypaue密度梯度离心分离PBMC ,分为 2组进行培养 ,A组加入rIFN -γ ,0 .2U·μl-1;B组为不加rIFN -γ的对照组。在 3 7℃ ,5 %CO2 培养箱中培养 48h后 ,用RT -PCR方法检测PBMCIL - 4和IL - 10mRNA表达。结果 :哮喘患者PBMCIL - 4mRNA的表达显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,IL - 10mRNA的表达低于正常对照组 (P <0 .0 5 )。rIFN -γ作用于PBMC 48h后 ,哮喘患者PBMCIL - 4mRNA的表达显著降低 (P <0 .0 5 ) ,IL - 10mRNA的表达明显上升 (P <0 .0 5 ) ,而健康者PBMCIL - 4和IL - 10mRNA的表达均无显著改变 (P >0 .0 5 )。结论 :rIFN -γ可能通过下调哮喘患者PBMCIL- 4mRNA的表达、上调IL -

重组人干扰素α-2a口含片剂的豚鼠毒性试验

目的评价重组人干扰素α-2a（rIFNα-2a）口含片剂对豚鼠口腔黏膜及内脏器官的毒性作用。方法设试验组、赋形剂组及空白对照组,每组用6只豚鼠,试验组口含rIFNα-2a片剂（300 IU/片）,1片/d,含5～7min,连续含服6 d。赋形剂组口含乳糖颗粒片剂（0.15 g/片）,方法同上。空白对照组未含任何物质。临床观察6 d后全部活杀。剖检口腔黏膜、咽部黏膜及内脏等器官,10%甲醇液固定,常规病理制片,HE染色,光镜观察。结果试验组与赋形剂组和空白对照组之间的组织病理学所见相似,均未见明显毒性病理损伤。结论rIFNα-2a口含片剂对豚鼠口腔黏膜及内脏器官均未见明显毒性作用,证实rIFNα-2a口含片剂安全可靠。

α2b—基因工程干扰素发酵培养基的优化

以LB和M9培养基为基本成分，运用均匀设计方法对α2b—基因工程干扰素发酵培养基的组成和配比进行了优化。所得适宜工程菌PBV321／BMH—71—18生长和rIFN—α2b表达的发酵培养基，经摇床培养，rIFN－α2b表达水平为5．0×105IU／ml培养液，分别是LB和LB＋M9培养基表达量的6倍和3倍。

重组人γ-型干扰素单克隆抗体的鉴定

5株小鼠杂交瘤细胞ID5、1C10、1C11、3H9和6F8，所分泌抗重组人γ－型干扰素（rIFN－γ）单克隆抗体经双扩散试验证明其中4种为小鼠IgG1型，另一种为IgG2b型。用ELISA间接法测定小鼠腹水抗体效价为1：8000～1：128000。经免疫印迹试验证实5种单抗均能特异地识别rIFN－γ，其中1D5、3H9和1C11单抗对rIFN－γ具有中和活性，中和效价＞1：8000，用2种单抗建立的ELISA夹心法检测rIFN－γ，最低可测值为10．0ng／ml，且与白细胞介素－2，重组人α和β干扰素无交叉反应。

rIL—2和rIFN—γ在抗体生成中的协同作用

本文研究了基因工程重组的IL-2和IFN-γ对人-人B细胞杂交瘤的作用。结果发现1000u/ml rIL-2短期作用于人-人杂交瘤细胞,即可以提高抗体分泌量2倍,如果和rIFN-γ合并使用即可以提高3倍。当杂交瘤细胞培养于低血清培养基时,500u/ml的rIL-2可以提高抗体分泌量4倍,应用间接免疫荧光抗体技术表明,约7％～8％的B细胞杂交瘤表面呈现抗Tac抗体染色阳性。