钙通道阻滞剂对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用

目的 :观察钙通道阻滞剂对缺氧 /复氧 (A/R)心肌细胞的保护作用。方法 :原代培养大鼠心肌细胞分为A/R、A/R +硝苯地平 (Nif)、A/R +钌红 (Ru) +肝素 (Hep)和对照 4组。检测各组心肌细胞内钙浓度 ([Ca2 + ]i)、细胞活力、ATP含量及孵育液中乳酸脱氢酶 (LDH)含量、[3H]-亮氨酸 ([3H]-Leu)掺入量、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)和蛋白激酶C(PKC)活性。结果 :A/R +Nif和A/R +Ru +Hep组心肌细胞 [Ca2 + ]i、孵育液中LDH均显著低于A/R组 (P <0 0 1) ;细胞活力、ATP含量、PKC和MAPK活性、[3H]-Leu掺入量显著高于A/R组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 :阻断心肌细胞外Ca2 + 内流及内贮Ca2 + 的释放 ,可通过减轻A/R介导的细胞Ca2 +

辣椒素引起脑干内心血管活动相关核团中c-fos的表达

在 16只切断两侧缓冲神经的大鼠 ,观察颈总动脉注射辣椒素对脑干内心血管活动相关核团c fos原癌基因表达的影响。在溶剂对照组大鼠脑干 ,仅见少数Fos蛋白样免疫反应 (FLI)神经元。与对照组相比 ,颈总动脉注射辣椒素 ( 10 μmol,0 1ml)时 ,脑干内巨细胞旁外侧核 (PGL)、蓝斑 (LC)、最后区 (AP)和孤束核 (NTS)等部位的FLI神经元显著增加 ,而中脑中央灰质 (PAG)和中缝核群 (RN)的FLI神经元则无明显改变。应用辣椒素受体阻断剂钌红 (RR ;2 0 0mmol,0 1ml) ,可明显抑制辣椒素的上述效应。以上结果提示 ,辣椒素可通过激活辣椒素受体 (VR) ,引起脑干内多个心血管活动相关核团的神经元兴奋 。

博莱霉素对肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖及功能的影响

目的 观察博莱霉素 (BL M)肺损伤早期肺泡 型上皮细胞 (AT )的超微结构和肺表面活性物质 (PS)中磷脂(PL)及其组分的变化 ,探讨与 AT 增殖活性及修复功能的关系 .方法 BL M气管内滴注 (4 mg· m L- 1 ,5 mg· kg- 1 )制作 2 8只大鼠肺损伤模型分为 3,7,14,2 8d组 ,分别行肺组织标本电镜组织化学染色和支气管肺泡灌洗液 (BAL F)的 PS中 PL 及其组分测定并把二者作对照分析 ,观察 PS形态组成成分的质与量的改变与 AT 结构的变化间的关系 .结果 1注药后各组均可见 PS层丧失连续、均匀绒状结构 ,脱落入肺泡腔或聚集成块现象或散落于肺泡腔内 .其中以 3d组较为明显 .钌红阳性表面层的厚度与对照组比较 ,3d组较厚 ,且染色深 ,7,14d组无明显差别 ,2 8d组较淡薄 .BAL F的PS中 PL含量趋于增加 .其中磷脂酰甘油 (PG)含量 3d组升高 ,7,14,2 8d组降低 .磷脂酰肌醇 (PI)含量变化则与此相反 .2 3,7d组可见 AT 变性坏死 ,甚至崩解 ,以 3d组较明显 .AT 增生各组均可见 ,以 7d组较明显 .板层小体 3d组数量减少 ,并呈空泡状 .7d组开始增多 ,以 14,2 8d组较为明显 .33,7d组基底膜水肿、裸露 ,甚至断裂 ,炎性细胞和间隔中的成纤维细胞等渗出到肺泡腔 .14d组可见有 AT 转化为 AT ,并逐渐伸展、粘附于裸露基底膜 ,14,2 8d?

钌红对内毒素多种生物活性的拮抗作用

钌红对内毒素的鲎试剂凝集反应、局部Shwartzman反应、降低外周血白细胞计数和血清锌的含量等效应均有拮抗作用。电镜下可见经钌红处理过的内毒素呈无规律絮状凝聚,正常网状结构被破坏。用三硝基苯磺酸法证实钌红与内毒素结合,使其氨基含量大增。以上结果提示:钌红的多阳离子氨基可能是对内毒素多种生物活性起拮抗作用的有效结构。

钌红减轻严重烧伤早期心肌细胞和线粒体损害

目的 :探讨钌红对严重烧伤早期心肌细胞和线粒体损害的治疗作用。方法 :健康成年Wistar大鼠 2 4只 ,随机分为正常对照组、烧伤组和钌红治疗组 (n =8)。烧伤组、钌红治疗组大鼠造成 30 %TBSAⅢ°烧伤 ,伤后30min经腹腔补液。钌红治疗组同时于颈外静脉推注钌红 (剂量 2mg/kg) ,3h后再推注 1次。烧伤组和钌红治疗组动物于伤后 6h抽血并活杀。测定线粒体呼吸功能、Ca2 + 浓度 ([Ca2 + ]m)及血清LDH、CK。结果 :钌红治疗组较烧伤组 [Ca2 + ]m显著降低 ,线粒体呼吸控制率 (RCR)、Ⅲ态呼吸速率 (ST3)明显升高 ,Ⅳ态呼吸速率(ST4 )降低 ,钌红治疗组血清CK、LDH显著低于烧伤组 ,分别是烧伤组的 65 .0 %和 45 .5 %。结论

辣椒素对大鼠延髓腹外侧头端区神经元电活动的影响

在35只切断两侧缓冲神经的麻醉大鼠,应用细胞外记录的电生理学方法,观察颈总动脉注射辣椒素(capsaicin)对延髓腹外侧头端区(RVLM)巨细胞旁外侧核(PGL)自发电活动的影响。所得结果如下:(1)颈动脉注射辣椒素(10μmol,01ml),MAP由1074±013升至1256±021kPa(P<0001);HR由374±4增至395±5bpm(P<0001);30个PGL神经元自发放电单位的放电频率由126±07增至209±11spikes/s(P<0001)。(2)在10个放电单位,应用辣椒素受体阻断剂钌红(rutheniumred;200mmol,01ml)后,明显抑制辣椒素的上述效应。以上结果提示,辣椒素可能通过激活RVLM神经元上的辣椒素受体。

颈动脉注射辣椒素对脑干心血管相关核团一氧化氮合酶和Fos表达的影响(英文)

实验采用NADPH d组化技术和Fos蛋白免疫组化技术相结合的方法 ,观察了颈动脉注射辣椒素时 ,大鼠脑干心血管相关核团内NOS和Fos蛋白的分布以及两者的共存关系。结果显示 :(1)颈动脉注射辣椒素可诱发脑干中最后区 (AP)、孤束核 (NTS)、巨细胞旁外侧核 (PGL)和蓝斑 (LC)等多个部位Fos样免疫反应 (FLI)神经元显著增加 ,而中脑中央灰质 (PAG)和中缝核群 (RN)的FLI神经元无明显改变。 (2 )PGL和NTS内NO合成神经元以及PGL内双标神经元数量也明显增加 ,而PAG和RN中NO合成神经元无明显变化 ,在LC和AP仅偶见或未见NO合成神经元。 (3)预先应用辣椒素受体阻断剂钌红或NMDA受体阻断剂MK 80 1,则明显减弱辣椒素的上述效应。以上结果表明 ,颈动脉注射辣椒素可兴奋脑干心血管活动相关核团神经元 ,NO在脑干核团对辣椒素的反应中发挥间接的调制作用 ,辣椒素的效应由香草酸受体 (辣椒素受体 )

肾动脉内注射辣椒素兴奋肾神经传入纤维的自发活动(英文)

应用记录肾传入神经多单位和单位放电的方法,观察肾动脉内注射辣椒素对麻醉家兔肾神经传入纤维自发放电活动的影响。结果表明:(1)肾动脉内注射辣椒素20、40和60 nmol/kg可呈剂量依赖性地兴奋肾传入纤维的活动,而动脉血压不变;(2)静脉内预先应用辣椒素受体阻断剂钌红(40 mmol/kg),可完全阻断辣椒素对肾传入纤维的兴奋作用。(3)静脉内预先注射一氧化氮合酶抑制剂L-NAME(0.1mmol/kg),能延长并增强肾传入神经对辣椒素的反应。以上结果提示:肾动脉内应用辣椒素可兴奋肾传入纤维的自发放电活动。一氧化氮作为抑制因素参与辣椒素诱导的肾传入神经兴奋。

西伯利亚立克次体中国分离株超微结构的研究

对西伯利亚立克次体中国分离株W—88(人株),JH—74(草原革蜱株),TO—88(草原革蜱蜱卵株),BJ—90(中华革蜱株)及国际标准株(西伯利亚立克次体246株)进行扫描电镜和超薄切片免疫电镜观察。结果显示中国株与国际株具有相似的外部形态和内部超微结构。可见到立克次体细胞外表的粘液层和微荚膜;细胞包膜的细胞壁和胞浆膜;胞内结构的DNA丝和核糖体。在固定液中加入相应的免疫血清用钌红细胞化学染色,在立克次体表面可见有肥厚的纤维状物(亚晶格状表面层)围绕的粘液层,经乙醚提取的立克次体标本粘液层消失,而用泛影(?)胺密度梯度离心纯化的立克次体标本仍有粘液层存在,此为进一步研究其化学成分和功能提供了必要条件。

最后区微量注射辣椒素对大鼠血压、心率和肾交感神经放电的影响

在 36只麻醉Sprague Dawley大鼠 ,观察了最后区内微量注射辣椒素 (10 μmol/L ,5 0nl)对平均动脉压(MAP)、心率 (HR)和肾交感神经放电 (RSNA)的影响。实验结果如下 :(1)最后区内注射辣椒素可引起MAP、HR和RSNA明显增加 ,分别由 12 34± 0 5 3kPa、32 8 5 2± 7 5 4bpm和 10 0± 0 %增至 15 17± 0 2 5kPa (P <0 0 0 1)、35 4 81± 8 5 4bpm (P <0 0 0 1)和 15 6 95± 7 5 7% (P <0 0 0 1) ;(2 )静脉注射辣椒素受体阻断剂钌红 (10 0mmol/L ,0 2ml)后 ,辣椒素的上述效应可被明显抑制 ;(3)预先应用NMDA受体阻断剂MK 80 1(5 0 0 μg/kg,0 2ml,iv)也明显抑制辣椒素的兴奋效应。以上结果提示 ,最后区微量注射辣椒素对血压、心率和肾交感神经放电有兴奋作用 。

颈动脉注射辣椒素激活脑干心血管相关核团的儿茶酚胺神经元(英文)

在外周压力感受器去神经支配的大鼠上 ,用Fos蛋白和酪氨酸羟化酶 (TH)的双重免疫组化方法 ,研究辣椒素的效应是否通过激活脑干核团内儿茶酚胺能神经元而诱发。结果显示 ,颈动脉注射辣椒素诱发脑干中最后区 (AP)、孤束核 (NTS)、巨细胞旁外侧核 (PGL)和蓝斑 (LC)等多个部位出现大量Fos样免疫反应(FLI)神经元和双标神经元 ,辣椒素受体阻断剂钌红 (RR)或NMDA受体阻断剂MK 80 1可明显减弱此效应。以上结果表明 ,辣椒素的兴奋效应通过激活儿茶酚胺能神经元而诱发 ,辣椒素受体和 / (或 )

Effects of the mitochondrial calcium uniporter on cerebral edema in a rat model of cerebral ischemia reperfusion injury

The present study investigated the effects of the mitochondrial calcium uniporter inhibitor ruthenium red and the agonist spermine on cerebral edema in rats with cerebral ischemia reperfusion injury. Left middle cerebral artery occlusion （MCAO） was induced in rats using the suture method. Following 24 hours of ischemic reperfusion, neurological function scores of rats with MCAO, and rats pretreated with ruthenium red and spermine were significantly lower, however, water content of brain tissue, aquaporin 4 expression and immunoglobulin G （IgG） exudation were significantly higher than those of sham-operated rats. Compared with MCAO rats and spermine-treated rats, neurological function scores were considerably higher, and brain tissue water content, aquaporin 4 expression and IgG exudation decreased in ruthenium red-treated rats. These findings suggest that preventive application of the mitochondrial calcium uniporter inhibitor ruthenium red can significantly decrease aquaporin 4 and IgG expression, influence the permeability of the blood brain barrier, and thereby decrease the extent of cerebral edema.

钌红染色对研究肺泡Ⅱ型上皮细胞的价值

目的 观察钌红染色方法对博莱霉素 (BL M)肺损伤早期肺表面活性物质 (PS)的超微结构的效果 .方法 BL M气管内滴注制作大鼠肺损伤模型 ,分为 3,7,14和 2 8d组 ,用钌红行肺组织标本染色 ,观察 PS的改变与肺泡 型上皮细胞 (AT- )结构变化间的关系 .结果 注药后各组均可见 PS层丧失连续、均匀绒状结构 ,脱落入肺泡腔或聚集成块或散落于肺泡腔内 ,以 3d组较为明显 .钌红阳性表面层的厚度与对照组比较 ,3d组较厚 (P<0 .0 1) ,且染色深 ,7及 14d组无明显差别 ,2 8d组较淡薄 (P <0 .0 1) .相应的 3及 7d组可见AT- 变性坏死 ,甚至崩解 ,以 3d组较明显 .各组均可见AT- 增生 ,以 7d组较明显 .板层小体 3d组数量减少 ,并呈空泡状 .7d组开始增多 ,以 14及 2 8d组较为明显 .14d组可见有 AT- 转化为 AT- ,并逐渐伸展、粘附于裸露基底膜 .结论 钌红染色法可敏感显示 BL M损伤 AT- 后 PS的形态特征而直接反映 AT-

蛋白多糖在实验性动脉粥样硬化病变中的分布、超微形态定性和定量分析

用钌红染色透射电镜观察的方法,在超微结构水平上对正常和不同时间高脂饲食免主动脉内膜蛋白多糖作定性和定量分析。结果表明:在正常和病变的主动脉内膜细胞间质均能清楚地看到两型钌红颗粒。大颗粒直径约20～100nm,有细丝状的突起相互联结成网,并和平滑肌细胞质膜、胶原及弹性纤维相联系。小颗粒直径小于20nm,表面光洁无突起。主要分布在内皮细胞、平滑肌细胞基底膜周围。含脂区颗粒较大,且与脂质相联系。定量发现在动脉粥样硬化病变早期,动脉内膜蛋白多糖含量增加,后期减少。本文探讨了蛋白多糖含量变化与脂质聚集的关系,认为动脉内膜蛋白多糖代谢紊乱是动脉粥样硬化发病的重要原因之一。

辣椒素对颈动脉窦压力感受性反射的易化作用(英文)

在30只隔离灌流颈动脉窦区的麻醉大鼠,观察了辣椒素(capsaicin,CAP)对颈动脉窦压力感受性反射的影响。结果显示(1)以CAP(1 μmol/L)隔离灌流大鼠左侧颈动脉窦区时,颈动脉窦压力感受性机能曲线向左下方移位,曲线最大斜率(peak slope,PS)由0.34±0.01增至0.42±0.01(P<0.01),反射性血压下降幅度(reflex decrease,RD)由36.51±1.26增至45.01±0.71 mmHg(尸<0.01)。阈压、平衡压和饱和压分别从70.43±2.09、95.5±1.71和177.60±1.37 mmHg下降至52.86±2.80、87.00±1.58、163.55±2.12 mmHg(P<0.01)。其中Ps和RD的变化呈明显的剂量依赖性。(2)用香草酸受体亚型(vanilloid receptor subtype 1,VR1)阻断剂钌红(ruthenium red,100 μmol/L)预处理后,CAP的上述反射效应即被阻断。(3)先给予KATP通道阻断剂格列苯脲(glibenclamide,20μmol/L)也取消了CAP对压力感受性反射的影响。结果表明,CAP对大鼠颈动脉窦压力感受性反射有易化作用,此作用似与VR.介导的KATP通道开放有关。

钌红、维拉帕米对去甲肾上腺素诱导的心肌c-fos、c-myc表达的影响

目的 了解经典的钙通道阻断剂维拉帕米和肌浆网Ca2 +释放抑制剂钌红对去甲肾上腺素 (NE)诱导的心肌c fos、c myc基因表达的影响。方法 通过离体心脏灌流 ,采用逆转录—多聚酶链反应 (RT PCR)方法 ,测定左心室c fos、c myc表达水平。 结果 钌红明显降低NE诱导的c fos、c myc表达 ,维拉帕米部分阻断NE诱导的c fos表达 ,但对c myc基因表达无明显影响。结论 NE诱导的心肌c fos、c myc基因表达有赖于细胞内钙 ( [Ca2 ++]i)的增高。

钌红电镜组织化学技术应用

目的 采用钌红电镜组织化学技术对涎腺多形性腺瘤、肌上皮瘤、腺样囊性癌和基底细胞瘤进行研究以示踪肿瘤中蛋白多糖的形成和分布。方法 新鲜标本分切后固定于 2 .5 %戊二醛中 2 4小时 ,其中含 0 .2 %的钌红 ;0 .1M二甲胂酸钠缓冲液冲洗过夜 ;1%OsO4 后固定 1小时 ;丙酮逐级脱水 ;Epon812包埋。在半薄切片上定位 ,超薄切片用Opton10 9型电镜观察。结果 在多形性腺瘤和肌上皮瘤中 ,粘液样区域内充满了蛋白多糖 ,这种蛋白多糖是由NMCs分泌产生的。腺样囊性癌的NMCs也分泌产生蛋白多糖 ,该瘤中筛状结构形成是由于NMCs分泌蛋白多糖所致 ,这种分泌功能的出现是肌上皮细胞向肿瘤性细胞转变的一个标志。结论 钌红电镜组织化学技术方法可检涎腺肿瘤中蛋白多糖形成和分布 ,是一种简便。

不同动脉压力感受器对钌红反应的敏感性差异

目的研究钌红对压力感受器不同纤维的作用是否存在差异以及这些差异与感受器纤维类型的关系。方法制备家兔离体颈动脉窦-窦神经标本,采用颈动脉窦窦内外双重灌流,钳制窦内压同时记录窦神经细束(含少量纤维)放电,然后应用Spike2软件分析,获得单纤维放电的信息。结果在20μmol/L钌红作用下,根据对钌红的反应,可将窦神经压力感受纤维分为钌红敏感纤维和钌红不敏感纤维2类。进一步分析发现这2类纤维的电生理特点分别与C类和A类压力感受器相对应。结论窦神经中存在对钌红反应不同的2类纤维,可能分属A类纤维和C类纤维,提示这2类压力感受器的机-电换能机制可能存在某些差异。

钌红在脂多糖致大鼠发热过程中对体温的影响

目的探讨钌红在脂多糖(LPS)致大鼠发热过程中对体温的影响及可能的机制。方法用LPS复制大鼠发热模型,观察不同浓度钌红对LPS发热曲线的影响及发热时下丘脑组织中TRPV4表达的变化。结果(1)与单独给予LPS组相比,随着给予钌红浓度的增大,LPS致发热幅度均有不同程度的降低;(2)单独给予钌红与给予生理盐水的对照组比较,体温有所降低;(3)钌红组及钌红+LPS组TRPV4表达明显低于对照组。结论(1)钌红对LPS致热性有抑制作用;(2)钌红能调节TRPV4通道的表达;(3)TRPV4通道可能参与正常体温的维持。

钌红对豚鼠离体心室肌细胞钙激活电流的影响

钌红(ruthenium red,RR)是电镜研究中常用的一种组织染料。近来发现RR具有抑制线粒体钙摄取和肌质网钙释放等作用。但RR对心肌细胞内Ca^(2+)浓度的影响目前尚未见报道。本文通过观察RR对豚鼠离体心室肌细胞钙激活电流的影响,对这一问题作一探讨。