猪水肿病毒素B亚单位的表面表达

用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从大肠杆菌PPSLT_ⅡeB中扩增出猪水肿病素 (SLT_Ⅱe)的B亚单位基因 (slt_ⅡeB)的 2 0 4bp的编码序列。将此PCR扩增产物按预定的阅读框架克隆进质粒表达载体PZSPAX ,并转化到大肠杆菌HB10 1中 ,筛选到含有slt_ⅡeB的重组质粒PZBSPAX。将重组质粒PZBSPAX进行序列分析 ,结果表明 :重组质粒PZBSPAX中的插入序列与发表的slt_ⅡeB是一致的 ,证明PZBSPAX就是含有slt_ⅡeB的重组表达质粒。含有重组质粒PZBSPAX的大肠杆菌HB10 1命名为重组大肠杆菌PZBSPAX。通过在不同温度条件下、不同培养时间情况下、不同IPTG诱导条件下 ,利用荧光抗体染色证明重组大肠PZBSPAX可表面表达预期的融合蛋白PP_SLT_ⅡeB_SPAX ;利用SDS_PAGE、Western_blot对重组大肠杆菌PZBSPAX的表达进行了分析 ,结果表明重组大肠杆菌PZBSPAX表达的融合蛋白PP_SLT_lleB_SPAX与预期大小一致 。