DADS负调控uPAR/uPA信号抑制人结肠癌SW480细胞侵袭和EMT

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)抑制人结肠癌SW480细胞侵袭和上皮间质转化(EMT)的可能机制。方法免疫组化检测结肠癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)受体(uPAR)的表达。基因转染技术构建uPAR过表达细胞。实验分为SW480组、SW480+DADS组、uPAR组、uPAR+DADS组。迁移、侵袭实检测各组细胞迁移与侵袭能力。RT-PCR、Western blotting分别检测相关信号通路分子mRAN及其蛋白的表达。裸鼠实验验证DADS对uPAR过表达SW480细胞移植瘤的影响。结果结肠癌组织中uPAR表达显著高于癌旁正常黏膜组织(P<0.05)。成功构建稳定uPAR过表达SW480细胞。uPAR过表达上调uPA、uPAR表达,而DADS下调uPA、uPAR表达。uPAR过表达增强细胞迁移、侵袭能力,DADS抑制uPAR过表达细胞的迁移、侵袭能力。DADS通过下调Vimentin、基质金属蛋白酶(MMP-9)表达,上调E-cadherin、组织金属蛋白酶抑制物(TIMP)-3表达抑制SW480细胞EMT。裸鼠实验结果显示,DADS可体内抑制uPAR过表达SW480细胞EMT。结论DADS通过负调控uPAR/uPA信号体内外抑制人结肠癌SW480细胞侵袭和EMT。

靶向uPA-uPAR系统在肿瘤治疗中的研究进展

uPA-uPAR系统在多种肿瘤组织中表达增高,该系统不但可促进细胞外基质蛋白降解,而且可以与玻连蛋白、整合素等结合参与细胞内信号转导,从而介导肿瘤的发生与发展。近年来,一系列靶向uPA-uPAR系统的方案在肿瘤治疗中取得了显著效果,并且其中部分药物已经进入临床试验阶段,为肿瘤的靶向治疗提供了新思路。本文拟从靶向uPA-uPAR系统的基因治疗、药物治疗和免疫治疗等方面的研究进展进行综述。

帚状江蓠质体UPA和线粒体COⅠ基因的序列比较及其系统进化分析

为研究海南省帚状江蓠(Gracilaria edulis)野生群体的种质资源、遗传多样性状况及红藻门物种间亲缘关系,采集海南省文昌和莺歌海潮间带的野生帚状江蓠,采用PCR扩增获得帚状江蓠质体UPA基因片段(质体23S rRNA V区域)和线粒体COⅠ基因片段,分别对其进行序列比较及系统进化分析。结果表明,UPA基因片段T、C、A、G的含量分别为26.2%、16.2%、30.3%、27.3%;COⅠ基因片段T、C、A、G的含量分别为39.2%、15.1%、27.6%、18.1%;UPA和COⅠ基因片段的A+T的平均含量分别为56.5%和66.8%。UPA基因片段长度为370bp,共检测出1种单倍型,无多态性位点;COⅠ基因片段长度为664bp,共检测出2种单倍型,3个多态性位点,均为简约信息位点。与UPA基因相比,COⅠ基因具有更高的变异度,更适合用于帚状江蓠遗传多样性的分析。基于UPA和COⅠ基因片段对帚状江蓠进行系统进化分析,两者结果一致,结合形态学分析表明,帚状江蓠应是江蓠属内独立的分支。

胃癌组织中uPA和uPAR mRNA表达及临床意义

目的 :探讨uPA和uPARmRNA表达水平与胃癌细胞恶性程度、浸润转移的关系及其临床意义。方法 :运用cDNA mRNA斑点杂交技术定量、平行地检测了 2 3例胃癌及相应癌旁组织中uPA和uPARmRNA表达水平 ,并综合分析了uPA和uPARmRNA表达水平与胃癌临床生物学指征的相关意义。结果 :uPA和uPARmRNA表达水平在 2 3例胃癌组织中 ,分别有 18例uPA和 19例uPAR高于相应癌旁组织 ;14例uPA和uPAR协同高于癌旁组织 4倍以上 ;在伴有淋巴结转移和浸润到肌层、浆膜层的胃癌组织中均明显增高 ;Ⅲ、Ⅳ期胃癌组织也明显高于Ⅰ、Ⅱ期胃癌组织。结论 :在基因转录水平 ,胃癌组织中uPA和uPAR表达呈增高趋势 ;具有浸润转移的胃癌组织表达增强 ;uPA和uPAR基因的高表达是影响胃癌细胞恶性程度和浸润转移的重要因素之一。

uPA及其抗uPA抗体和其他因素对U937细胞uPAR的影响

目的 观察ｕＰＡ、抗体等因素对Ｕ９３７细胞表达ｕＰＡＲ的影响。方法 以受体放射配基结合分析法（ＲＢＡ）测定Ｕ９３７细胞的ｕＰＡＲ，并用ｕＰＡ、抗ｕＰＡ抗体、ＰＭＡ、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ和放线菌素Ｄ刺激培养细胞。结果 ＰＭＡ、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ都能使细胞表达ｕＰＡＲ增多，放线菌素Ｄ具有抑制作用。抗ｕＰＡ抗体使ＰＭＡ非刺激或刺激细胞的ｕＰＡＲ数减少，刺激细胞的粘附贴壁性能下降。

骨关节炎滑膜uPA,uPAR,tPA表达及意义

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)和组织型纤溶酶原激活物(tPA)在OA的发生发展中的意义。方法采用免疫组化方法检测滑膜组织中uPA,uPAR,tPA的表达。结果40例OA滑膜中阳性表达uPA31例(775%)、uPAR22例(55%)、tPA37例(925%)。10例对照滑膜中阳性表达uPA2例(20%)、uPAR1例(10%)、tPA8例(80%)。阳性表达主要分布在滑膜衬里层细胞。结论uPA系统可能参与介导软骨降解。促进OA的发生发展;而tPA可能与OA关系不密切。

uPA、uPAR、nm23-H1在大肠癌中的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)、尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(uPAR)和nm23H1基因蛋白在大肠癌中的表达及其与肿瘤侵袭和淋巴结转移的关系。方法应用免疫组化SABC法,对121例大肠癌手术根治标本进行uPA、uPAR和nm23H1基因蛋白测定。结果uPA、uPAR和nm23H1阳性表达率分别为62%、74%和48%。uPA和uPAR高表达与大肠癌侵袭和淋巴结转移关系密切(P<0.05)。nm23H1基因蛋白的低表达与大肠癌分化程度和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。大肠癌中uPA和nm23H1蛋白表达呈负相关(P<0.05)。结论uPA、uPAR和nm23H1基因蛋白表达与大肠癌侵袭和转移有显著相关性;同时检测uPA和nm23H1表达状况,可作为预测大肠癌淋巴结转移及预后的有用指标。

食管癌中uPA、uPAR蛋白表达及其临床意义

目的探讨食管癌中uPA、uPAR蛋白表达与临床病理因素间的关系及其对单纯放疗预后的影响。方法应用免疫组化SP法检测59例食管癌和41例食管癌旁组织中uPA、uPAR蛋白表达情况,分析蛋白表达与临床病理因素间的关系及其对食管癌放疗预后的影响。结果59例食管癌组织中uPA、uPAR蛋白阳性表达率分别为76.27%、77.97%,41例食管癌旁组织中阳性表达率分别为48.78%、43.90%,癌组织和癌旁组织中两种蛋白的阳性表达率比较差异均有统计学意义(P<0.01)。胸部CT扫描显示食管病变层面椎前三角形间隙消失者uPA蛋白强阳性表达率为70.37%,明显高于三角形间隙存在者的43.75%,两者比较差异有统计学意义(P=0.040)。发生远处转移者uPA蛋白阳性表达率比无远处转移者也显著升高,分别为100%和68.89%,两者比较差异有统计学意义(P=0.042)。进一步分析发现uPA、uPAR蛋白表达与食管癌预后未见明显相关性,而uPA、uPAR两种蛋白的表达呈显著性正相关。结论食管癌中uPA蛋白高表达可能与肿瘤局部浸润及远处转移的发生有关。

抗骨增生片对兔骨关节炎滑膜病理形态及uPA、uPAR表达的影响

目的探讨抗骨增生片治疗骨关节炎是否与改变滑膜组织形态以及下调尿激酶型纤溶蛋白酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)的表达有关。方法 30只健康雄性日本大耳白兔随机分成正常对照组、模型对照组,抗骨增生片组。用1.6%木瓜蛋白酶膝关节腔内注射,建立兔膝骨关节炎模型。灌胃4周后,观察滑膜组织病理形态学变化,免疫组织化学法测定uPA、uPAR的表达情况。结果抗骨增生片组滑膜组织病理总积分明显低于模型对照组;抗骨增生片组uPA、uPAR的表达低于模型对照组。结论抗骨增生片治疗膝骨关节炎可能与抑制uPA、uPAR的表达,抑制滑膜炎症的进一步发展,修复滑膜损害有关。

骨关节炎滑膜uPA、uPAR、PAI-1表达及意义

探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)和其抑制剂(PAI-1)在OA的发生发展中的意义。方法:采用免疫组化方法检测OA滑膜组织中uPA,uPAR,PAI-1的表达。结果显示:36例OA滑膜中阳性表达uPA 29例(80.56%)、uPAR 25例(69.44%)P、AI-1 27例(75.00%)。21例对照滑膜中阳性表达uPA 6例(28.57%)、uPAR 6例(28.57%)、PAI-1 3例(14.29%)。实验组与对照组间3种蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05);再将实验组按年龄及软骨破坏程度分组,按年龄分组3种蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05);按软骨破坏程度分组3种蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05)。阳性表达主要分布在滑膜衬里层细胞。结论:uPA系统可能参与介导软骨降解、促进OA的发生发展;而PAI-1则通过抑制uPA活性延缓OA的发生发展。

乳腺癌组织中uPA、uPAR及nm23-H1的表达

目的 观察乳腺癌组织中uPA、uPAR、nm2 3 H1的表达并探讨与腋窝淋巴结转移的关系。方法 用免疫组化EnVi sion两步法检测 6 9例乳腺癌组织中uPA、uPAR和nm2 3 H1表达的分布情况 ,观察其与肿瘤的分化程度以及与腋窝淋巴结转移的关系。结果 (1)uPA阳性表达定位于癌细胞胞质 ;uPAR和nm2 3 H1阳性表达定位于癌细胞胞膜及胞质 ,多数癌旁乳腺上皮细胞呈nm2 3 H1阳性表达 ;高分化乳腺癌 (Ⅰ级 )uPA和uPAR表达阳性率 (30 0 %和 2 5 0 %)低于中低分化乳腺癌 (Ⅱ、Ⅲ级 ) (分别为 6 8 1%、72 7%和 70 0 %、74 1%) (P <0 0 5 ) ;nm2 3 H1表达阳性率在乳腺癌组织不同分化程度间差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;(2 )腋窝淋巴结有转移者uPA和uPAR的表达阳性率 (73 2 %和 75 6 %)高于无淋巴结转移者 (35 7%和35 7%) (P <0 0 5 ) ;有腋窝淋巴结转移者nm2 3 H1的表达阳性率 (2 4 4 %)显著低于无淋巴结转移者 (5 0 0 %) (P <0 0 5 ) ;uPA、uPAR和nm2 3 H1的表达与淋巴结转移的个数均无关 ;(3)uPA阳性表达的癌组织其nm2 3 H1表达阳性率 (15 0 %)低于uPA阴性表达的癌组织 (6 2 1%) (P <0 0 5 )。结论 uPA和uPAR的高表达与乳腺癌腋窝淋巴结转移密切相关 ;uPA、uPAR和nm2 3 H1可以作为乳腺癌侵袭与淋巴结转移的?

皮肤创伤修复中uPA/uPAR的表达及作用的研究

目的 探讨皮肤创伤修复中uPA/uPAR的表达规律及意义。方法 应用免疫组化、WesternBlot、细胞培养、ELISA等方法检测小鼠皮肤伤缘和培养的单层角质形成细胞创伤模型的uPA/uPAR的表达。结果 创伤后uPA/uPAR的表达增高 ,伤后 1 2～ 2 4h为uPA/uPAR的表达高峰。结论 创伤促进了uPA/uPAR的表达 。

AP-1及其相关基因uPA、uPAR在肺癌中的表达及其意义

研究AP-1及其相关基因uPA、uPAR在人肺癌中的表达及其与肺癌临床病理特征的关系.通过免疫组织化学方法检测101例肺癌组织及7例正常肺组织中AP-1、uPA、uPAR的表达情况,利用CMIAS2000型多功能真彩病理图像分析系统测量计算各病例中c-jun、c-fos、uPA、uPAR蛋白阳性细胞的平均光密度(DAO)和积分光密度(DIO).c-jun、c-fos在肺癌组织中表达的阳性率及其共表达率均显著高于正常肺组织;二者在NSCLC的表达显著强于SCLC;不同组织学类型肺癌中二者表达具有显著性差异,腺癌中表达最强,小细胞肺癌中表达最弱;c-jun、c-fos与肺癌分级、合并分期、淋巴结转移均呈显著正相关.uPA、uPAR与肺癌淋巴结转移密切相关,与合并分期呈显著正相关;uPAR与肺癌分级呈显著正相关;各指标之间均存在显著正相关关系.研究结果表明uPA、uPAR参与了肺癌侵袭转移,AP-1信号传导通路在该过程中起了重要调节作用.

肝硬化患者血浆uPA、uPAR水平与肝纤维化和癌变的相关性

目的探讨肝硬化患者血浆尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)的表达与肝纤维化及肝癌变的关系。方法对正常对照组(A组)、肝硬化组(B组)及肝硬化并发肝癌组(C组)用ELISA方法测定uPA和uPAR值,同时测定透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(ⅣC)及层粘连蛋白(LN)。结果各组除LN外,uPA、uPAR、HA、ⅣC值由高到低:C组>B组>A组;uPA、uPAR与HA、ⅣC、LN的相关性:(1)B、C组uPA和uPAR呈正相关,r分别为0.594、0.651(P均<0.05)。(2)B组uPA与HA呈正相关r=0.514(P<0.05)。(3)C组uPA与HA、ⅣC呈正相关,r分别为0.715、0.698(P均<0.05)。结论B、C组患者血浆中uPA和uPAR的表达是互动的正向调节;由肝硬化到肝癌,纤维化不断进展;uPA及uPAR的表达与肝纤维化的进行性加剧和肝癌变密切相关。

uPA和uPAR在侵袭性垂体腺瘤中的表达及意义

目的研究尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)及其特异性受体uPAR在非侵袭性与侵袭性垂体腺瘤中的表达,探讨其与垂体腺瘤侵袭性的关系。方法 61例垂体腺瘤分为侵袭性和非侵袭性两组,采用免疫荧光检测uPA和uPAR的蛋白表达情况,应用RT-PCR检测uPA和uPARmRNA表达水平,并用t检验、2检验,spearman相关分析法分析比较两组肿瘤之间uPA和uPAR的表达差异性。结果在所检测的肿瘤中,31例为侵袭性垂体腺瘤,30例为非侵袭性垂体腺瘤,免疫荧光结果显示在侵袭性垂体腺瘤及非侵袭垂体腺瘤的uPA阳性表达率分别为67.74%和36.67%(P<0.05)、uPAR为58.06%和30.00%(P<0.05),PCR检测结果显示侵袭性垂体腺瘤组与非侵袭组中uPA的相对表达量为0.5468±0.0464和0.4462±0.0305(P<0.05)、uPAR为0.6463±0.0314和0.5464±0.0471(P<0.05)。检测结果显示侵袭性垂体腺瘤组中uPA和uPAR的mRNA及蛋白表达水平明显高于非侵袭组,并且两个指标间存在正相关性(r=0.525,P<0.05)。结论 uPA和uPAR在侵袭性垂体腺瘤中的表达明显上调,说明其可能与垂体腺瘤侵袭性有关。

uPA/uPAR在人胚胎毛囊隆突区中表达的研究

目的研究人胚胎毛囊干细胞所在部位隆突区形态及uPA/uPAR表达。方法通过HE染色,确定毛囊隆突区的部位及大小;采用免疫细胞化学和原位杂交技术研究毛囊干细胞的隆突区部位uPA/uPAR的表达。结果在球形毛钉期,毛囊隆突区最为明显;位于毛囊隆突区的干细胞有uPA/uPAR的表达。结论球形毛钉期是研究人毛囊干细胞的较佳期;uPA/uPAR的表达与毛囊干细胞的增殖、迁移和细胞间信号传递有关。

乳腺癌患者血浆uPA、uPAR检测的临床意义

目的探讨血浆uPA、uPAR水平在乳腺癌侵袭和转移评定的临床意义。方法采用ELISA方法,测定经组织病理学确诊的女性乳腺癌初治患者50例和健康女性体检者20例的血浆uPA、uPAR水平。结果乳腺癌患者血浆uPA、uPAR水平明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.001);血浆uPA、uPAR水平随原发肿瘤的增大、腋淋巴结的转移以及分期而增高(P<0.05)。结论乳腺癌患者血浆uPA和uPAR的水平增高,与分期、腋淋巴结转移及原发肿瘤的大小密切相关,是乳腺癌侵袭和转移判定的有意义的指标。

急性髓系白血病中uPA和uPAR的表达及意义

目的观察急性髓系白血病人骨髓单个核细胞uPAR(CD87)的表达及血浆uPA的水平,并探讨其临床意义。方法用ELISA法测定22例急性髓系白血病患者(观察组)及34例良性血液病患者(对照组)血浆中uPA表达水平,用流式细胞学技术测定骨髓单个核细胞uPAR水平,比较两组之间的表达差异。结果血浆中uPA水平和骨髓单个核细胞uPAR水平急性髓系白血病组均高于良性血液病组,差异具有显著性(P<0.05);pearson相关分析显示uPA表达水平及uPAR水平之间存在正相关性(观察组r1=0.614,对照组r2=0.921;P<0.05)。结论急性髓系白血病患者血浆uPA水平及骨髓单个核细胞uPAR表达均升高,二者具有协同表达关系,联合检测对于急性髓系白血病的病情监控和预后分析有临床指导意义。

胃癌组织中uPA系统及VEGF表达与侵袭转移的关系

目的:研究尿激酶型纤溶酶原激活系统uPA,uPAR, pAI-1蛋白及血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系. 方法:采用免疫组化S—P法检测67例胃癌及癌旁组织中uPA,uPAR,PAI-1及VEGF蛋白表达情况,同时结合临床生物学特征进行分析. 结果:癌和癌周比较uPA,uPAR,PAI-1及VEGF蛋白阳性表达率明显升高(P<0.01),阳性产物主要分布在癌细胞胞质中.侵及浆膜组阳性率明显高于未及浆膜组(P=0.000,0.014,0.016,0.000).uPA,uPAR 蛋白在淋巴结转移组中的阳性率明显高于无淋巴结转移组(P=0.002,0.008).PAI-1蛋白在低分化组中的阳性率明显低于中分化和高分化组(P<0.05).uPA,upAR 及VEGF蛋白阳性率在胃癌组织不同分化程度间差异无显著性.在胃癌组织中uPA,uPAR蛋白的表达呈显著正相关(r=0.653,P<0.001).在uPA,uPAR蛋白同时阳性的41例病例中,有28例发生淋巴结转移,与阴性组(4/15)相比,转移发生率明显增高(P<0.01).胃癌组织中uPA蛋白表达与VEGF表达显著正相关(r=0.300. P<0.05).PAI-1蛋白表达与VEGF表达具有极显著正相关性(r=0.413,P<0.01).应用COX回归模型进行多变量分析并采用向前逐步回归法,仅浸润深度、uPA表达和病理类型对淋巴结转移有影响. 结论:uPA、uPAR、PAI-1及VEGF蛋白在胃癌组织中表达增强,uPA,uPAR与胃癌浸润转移密切相关.