膜联蛋白A3在脓毒症中的表达变化及功能分析

目的采用生物信息学方法探讨膜联蛋白A3(annexin A3,ANXA3)在脓毒症中的表达变化及其生物学功能。方法从基因表达综合数据库中获取ANXA3 mRNA在脓毒症患者中的表达数据,分析ANXA3在脓毒症患者中的表达变化。同时,对ANXA3在脓毒症的作用功能进行分析。结果本研究共纳入3个研究数据集(GSE28750、GSE70311和GSE12624),分析结果发现ANXA3 mRNA在脓毒症患者中显著高于非脓毒症患者(P<0.05)。将ANXA3用于脓毒症的早期预警时曲线下面积为0.766(0.650~0.859)。同时,分析结果发现在脓毒症患者中ANXA3与细胞因子(IL-10、IL1R1)、趋化因子(CCL19、CXCL13)、表面分子(CD163、CD55、CD58)等多种免疫基因表达相关。在ANXA3高表达组与低表达组脓毒症患者间共有416个差异表达基因,基因本体论和京都基因与基因组数据库富集分析均提示差异表达基因参与多条免疫调节通路,ANXA3在脓毒症中可能通过影响这些免疫调节通路发挥作用。结论ANXA3在脓毒症中表达上调,参与脓毒症的免疫调节通路,可作为脓毒症早期预警的分子标志物及干预潜在靶标。

ANXA3 mRNA和Livin mRNA在胆囊癌和胆囊息肉中的表达及意义

目的:探讨膜联蛋白A3(ANXA3)mRNA和Livin mRNA在胆囊癌和胆囊息肉组织中的表达及意义。方法:收集35例胆囊癌患者(胆囊癌组)和34例胆囊息肉患者(息肉组)的临床资料,采用RT-PCR技术检测组织ANXA3和Livin的表达,观察两标志物的变化与胆囊癌和胆囊息肉疾病之间的关系。结果:胆囊癌组ANXA3mRNA和Livin mRNA表达与息肉组比较显著增高(P<0.01)。胆囊癌组ANXA3mRNA和Livin mRNA表达呈正相关(r=0.617,P<0.01)。胆囊癌组中ANXA3mRNA和Livin mRNA的表达量分别和血清CEA、CA19-9及CA50具有相关性[(r=0.627,0.593,0.607,P<0.01),(r=0.643,0.610,0.623,P<0.01)]。结论:检测组织ANXA3和Livin的表达有助于胆囊癌和胆囊息肉疾病的早期鉴别诊断,

黄芪多糖通过ANXA3诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡

目的探讨黄芪多糖(RSP)对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响,并初步观察其作用机制。方法采用不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0 mg/mL)RSP、HY-N0168(2.0μg/mL)和MPT0B392(0.5μg/mL)处理HT-29细胞;CCK-8法检测RSP对HT-29细胞活力影响;流式细胞术分析HT-29细胞凋亡情况;Western blot方法分析RSP对HT-29细胞中total-PARP、Cle-PARP、Cle-caspase 3、ANXA3表达及p38和JNK磷酸化水平的影响。结果RSP呈浓度依赖性的抑制HT-29细胞活力、细胞周期进展及增殖;RSP还诱导HT-29细胞中Caspase-3/-9活性上调及细胞凋亡;RSP抑制HT-29细胞中ANXA3/p38和JNK信号通路活化;然而,p38激动剂HY-N0168和JNK激动剂MPT0B392能部分逆转RSP对HT-29细胞的毒性作用;RSP通过ANXA3降低p38和JNK信号通路活化及RSP细胞的毒性作用。结论RSP可通过降低ANXA3/p38和JNK信号通路转导抑制人结肠癌细胞增殖。

一组家族遗传性疾病全基因组测序的分析报告

目的 :临床上发现一组特殊病例,一个家族4代人中均发现有同一种神经肌肉性疾病的患者,症状具体表现为上肢肘关节有不同程度的伸直受限,下肢踝关节似马蹄样畸形,足部高弓畸形、无明显内翻内收现象。本研究拟通过全基因组测序,探讨其发病的致病基因及分子机制。方法:利用高通量测序技术,分别对患儿、具有相似症状的患儿父亲及健康母亲的血液样本进行全基因组测序。利用生物信息学分析筛选疾病相关基因突变,并进一步收集该家族中的其他患病及健康成员的血液样本,利用PCR技术进行验证。结果:生物信息学分析发现一系列突变基因,包括ANXA3基因突变[chr4,c.C820T(p.R274*)]、ATP6V1E2基因突变[chr2,c.G136A(p.V46M)]和HIST1H3A基因突变[chr6,c.C205T(p.Q69*)]等。基于家族更多成员血液样本的PCR实验结果进一步证实,ANXA3为该疾病潜在的致病基因,突变可导致其蛋白质高级结构的改变,可能与该疾病发生有关。结论:本研究为从分子水平上了解该家族遗传性疾病的发生提供了一定的理论参考。

干扰ANXA3基因表达对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

[目的]探究干扰膜联蛋白A3(ANXA3)基因表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响以及可能作用机制。[方法]以乳腺癌MCF-7细胞为研究对象,RNA干扰技术沉默ANXA3基因表达,荧光定量RT-PCR和Western Blot检测转染后细胞中ANXA3 m RNA及蛋白表达;四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞的增殖能力变化,膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞的凋亡率,蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)蛋白的水平。[结果]空白对照组、阴性对照组和ANXA3干扰组细胞中ANXA3 m RNA的表达量分别为0.078±0.006、0.072±0.007和0.008±0.001;ANXA3蛋白表达量分别为0.792±0.085、0.764±0.078和0.353±0.039;细胞的凋亡率分别为(3.425±0.643)%、(3.537±0.740)%、(23.455±3.686)%;Bcl-2蛋白水平分别为1.256±0.247、1.239±0.265、0.624±0.065;Bax蛋白水平分别为0.856±0.086、0.842±0.079、1.526±0.344;Cleaved Caspase-3蛋白水平分别为0.522±0.057、0.535±0.062、1.230±0.367。与空白对照组相比,ANXA3干扰组细胞中ANXA3 mRNA和蛋白水平显著性降低(P<0.05),细胞的增殖能力显著性降低(P<0.05),其凋亡率显著性增加(P<0.05);细胞中Bcl-2蛋白水平显著性下调(P<0.05),Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达量显著性上调(P<0.05)。[结论]干扰ANXA3表达抑制乳腺癌细胞增殖,诱导其凋亡,其作用与Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白水平变化引起的细胞凋亡通路的变化有关。

膜联蛋白A3与肿瘤性疾病最新研究进展

膜联蛋白A3（ANXA3）是膜联蛋白超家族的一员,已有研究结果表明,ANXA3与肿瘤的发生、发展、侵袭、转移及治疗预后有密切关系.ANXA3在前列腺及肾癌中表达下调,但在乳腺癌、肝癌等多种肿瘤中表达上调,且与肿瘤大小、分期、淋巴转移及预后、耐药具有相关性.沉默ANXA3的表达可抑制结、直肠癌及肝癌细胞的增殖和侵袭,抑制乳腺癌细胞的迁移.ANXA3还可能通过HIF1a/Notch及JNK信号通路参与调节和维持肝细胞癌干细胞.现有研究表明ANXA3可作为潜在的肿瘤诊断、预测化疗敏感性及预后的生物学标记物,并提供肿瘤治疗的新靶点.

下调Annexin A3基因对结肠癌HCT116/L-OHP细胞生物学特性影响

目的肿瘤患者体内人膜联蛋白A3(annexinA3,ANXA3)水平升高可能为结直肠癌(colorectal cancer,CRC)潜在筛查的标志物。本研究探讨ANXA3在CRC耐药细胞株HCT116/LOHP中表达,及其对细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法设计合成慢病毒载体GV493,感染HCT116/L-OHP耐药细胞株,实验分为对照组、空载体组、LV-ANXA3-RNAi-1实验组和LV-ANXA3-RNAi-2实验组4组。利用qRT-PCR和蛋白质印迹法分别检测ANXA3mRNA和蛋白表达水平;CCK-8法测定细胞体外增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Transwell双室法检测细胞侵袭能力。结果成功构建下调ANAX3稳定感染细胞株,与对照组(4.889±0.652 7)和空载体组(1.000±0.062 3)相比,实验组LV-ANXA3-RNAi-1(0.532 7±0.039 8)与LV-ANXA3-RNAi-2(0.466 9±0.014 8)的ANXA3mRNA表达量下降,F=125.5,P<0.001;实验组LV-ANXA3-RNAi-1、LV-ANXA3-RNAi-2的ANXA3蛋白表达为0.147 5±0.015 5、0.149 1±0.010 7与对照组(0.937 4±0.025 8)和空载体组(0.678 5±0.063 7)相比,ANXA3蛋白表达量下降,F=123.2,P<0.001;实验组细胞增殖速度减慢,P<0.001;LV-ANXA3-RNAi-1和LV-ANXA3-RNAi-2实验组细胞凋亡率分别为(26.2±0.519 6)%、(36.47±0.545 7)%,高于对照组(7.2±0.404 1)%和空载体组(3.3±0.230 9)%,F=1 259,P<0.001;LV-ANXA3-RNAi-1和LV-ANXA3-RNAi-2实验组穿透滤膜的细胞数量分别为63.67±6.119、50.00±5.132,少于对照组(112.3±1.453)和空载体组(100.0±4.359)穿透滤膜的细胞数量,细胞侵袭能力下降,F=40.89,P<0.001。结论下调ANXA3基因可抑制人结肠癌细胞HCT116/L-OHP的增殖,促进细胞凋亡,降低细胞的侵袭能力。