熵权逼近理想排序法结合谱效分析辨识菊花抗氧化功能的物质基础

目的评价不同产地菊花的抗氧化功能并辨识其药效物质基础。方法建立不同产地菊花水提物高效液相色谱(HPLC)指纹图谱;测定其2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)、羟基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、超氧阴离子自由基清除能力和铁离子还原能力(FRAP);采用熵权逼近理想排序法(TOPSIS)计算单指标的权重系数,从而计算不同产地菊花的抗氧化总药效;采用灰色关联度和偏最小二乘法进行谱效分析,辨识菊花抗氧化功能的物质基础。结果10批不同产地菊花指纹图谱共鉴定16个共有峰,指认其中13个成分;不同产地菊花均具较好的抗氧化能力,熵权TOPSIS分析结果显示10批菊花抗氧化总药效排序为:S1>S8>S3>S5>S4>S10>S7>S2>S9>S6;谱效分析结果发现峰1~5、9、10、12、14与抗氧化活性呈正相关,变量投影(VIP)值均>1,且这9个峰与总药效的关联系数均>0.7。结论熵权TOPSIS结合谱效分析可用于筛选菊花抗氧化功能的物质基础,研究结果为建立基于质量标志物的菊花质量评价体系从而提升其质量控制水平提供依据。

中药药效组分的指纹图谱分析思路与方法

指纹图谱是中药质量控制的有效、可行的方法。采用各种分离技术及其联用技术获取尽可能多的检测信息,构筑提取分离与分析检测的技术平台,在此平台上运行大量样本,建立“原始指纹库”,结合化学计量学的方法,提取“特征指纹库”,即寻找显著性差异;对获得的众多“特征指纹”进行系统的分析,获取多个可独立识别样本间差异性的“识别指纹”,建立“识别指纹库”,以代替“原始指纹图谱”,从而提供多种简单的分析方法,以代替多模式多柱分离多元检测。最终获取能够简单地表达中药内涵的标准、规范的识别指纹,形成规范统一的质量控制体系,建立对中药材和制剂具有普遍意义的方法学。

白酒气相色谱指纹图谱实验方法学的研究

对建立白酒的气相色谱指纹图谱的方法与条件进行了探索,结果表明,最佳条件为:载气(氮气)流速为1.3mL/min,分流比为:50∶1。同时对所建立的实验方法进行了考察,其仪器精密度试验中各色谱峰相对保留时间的相对标准偏差RSD<0.03%,相对峰面积的相对标准偏差RSD<5.0%。样品稳定性试验中各色谱峰相对保留时间的相对标准偏差RSD<0.04%,相对峰面积的相对标准偏差RSD<5.0%,说明仪器精密度、实验方法可靠、样品稳定,满足指纹图谱的技术要求。

HPLC法测定中药复方小半夏加茯苓汤中的8种药效成分

目的:通过对小半夏加茯苓汤高效液相色谱(HPLC)条件的考察,建立复方止呕效用成分,即鸟苷、盐酸麻黄碱、芦丁、6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚、去氢茯苓酸及茯苓酸8种成分的特征图谱方法学。方法:分别考察复方50%醇提液HPLC分离的流动相、色谱柱、洗脱梯度及检测波长四方面因素。以RP-HPLC法梯度洗脱,Phenomenex Gemini C18色谱柱(5μ,250mm×4.6mm);乙腈-0.1%磷酸水溶液洗脱流动相;检测波长236nm;柱温40℃;流速1mL/min。结果:在一定范围内,鸟苷、盐酸麻黄碱、芦丁、6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚、去氢茯苓酸及茯苓酸峰面积积分值Y与进样量X线性关系良好,加样回收率分别为98.33%、97.26%、97.81%、96.60%、98.01%、97.09%、96.46%和95.90%。结论:该方法操作简便、准确、重复性好,为复方质量标准评价提供了依据。

气相色谱-质谱联用建立中药特征指纹图谱的色谱条件探讨

目的探讨GC-MS建立中药特征指纹图谱色谱条件的参数设置。方法在石菖蒲、广藿香等实例研究的基础上,对溶剂的种类和数量,以及升温程序、电离电压、柱前压与流速、离子源温度、进样口温度等仪器参数进行比较。结果升温程序、电离电压、柱前压与流速等对特征指纹图谱的影响较大,而离子源温度、进样口温度的影响较小。结论GCMS建立中药特征指纹图谱方法先进、可靠。建议采用特征指标成分群开展方法学(精密度、稳定性、重现性)的考察,且将相对含量的RSD值定为不得大于5%比较符合实际情况。

中药“指纹药剂学”中关键性技术研究

探讨中药“指纹 药剂学”中关键性技术 ,商榷其科学性、先进性、实用性及其可行性。总结有关研究工作和文献资料 。

特香型年份白酒挥发性成分气相指纹图谱实验方法学的研究

建立特香型四特年份白酒的气相色谱检测方法,并对气相指纹图谱的实验方法学进行考察。经过预试验得出气相色谱最佳检测条件为:载气(氮气)流速1.5 mL/min,分流比30∶1。方法学考察结果表明,在精密度、重现性以及稳定性试验中,各色谱峰相对保留时间的相对标准偏差(RSD)均<0.03%,各相对峰面积的RSD均<3.0%。该检测方法精密度较高、重现性好、稳定可行,能满足气相色谱指纹图谱分析的技术要求。

HPLC指纹图谱对不同产地远志散的质量评价研究

建立不同产地远志散的HPLC指纹图谱,并进行比较研究,以期为远志散药材品质评价与质量控制提供参考。采用DurashellC_(18)(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.02mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1mL·min^(-1),检测波长为246nm,柱温40℃,进样量为10μL。建立了不同产地远志散的HPLC指纹图谱共有模式,确定18个共有峰,利用对照品指认了3,6’-二芥子酰基蔗糖、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱4个成分,10批远志散样品指纹图谱与对照图谱的相似度均>0.950。建立了远志散HPLC指纹图谱分析方法,该分析方法简单,重现性好,为远志散的质量评价提供参考依据。

气味指纹分析技术在食品质控和风味研究的应用

着重以食用油、橙汁和奶制品为例,阐述了SensoryArrayFingerprinAtnalyzerMethod(气味指纹分析法)对食品所建立的新型质量控制和风味研究方法。经针对7种储存时间不同的食用油、脂(大豆油、菜籽油、猪油、牛脂、禽类脂、白色油脂、棕榈油)的过氧化值和酸价的分析模型的建立,展示了应用气味指纹分析技术(电子鼻)对食用油品质控制及抗氧化能力比较的新方法,对不同品质的橙汁(半年和一年半的鲜榨汁,和浓缩还原汁)、不同种类的鲜奶(灭菌全脂奶、灭菌半脱脂奶、半脱脂生奶和乳粉还原奶)和真伪某品牌奶粉的区分,表明该技术对复杂介质样品的品质变化具有独特的识别能力。分析结果表明,该分析技术具有以下优点:满意的分析灵敏度和重复性:传感器检测平均重复性为1.32%RSD(n=10),对同一样品测量的重复性为1.4%RSD(n=10),对所有油样的过氧化值和酸价测定具有良好的线性关系,平均相关系数为0.9984。不同品质样品之间区分指数DI的特异性明显(>90)。所有的数据通过化学计量学方法处理,并且该分析方法无需样品前处理。

塔拉粉酶解废液HPLC指纹图谱及2个主成分含量测定方法研究

建立了一种同时分析塔拉粉酶解废液中奎宁酸(QA)与没食子酸(GA)的HPLC方法,并进行方法学验证,进一步绘制其HPLC指纹图谱,结合相似度、聚类分析等手段对不同批次塔拉粉酶解废液进行评价。研究结果表明:该方法选择215 nm、流动相乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液、乙腈梯度5%~20%、流速1.0 mL/min、柱温30℃作为奎宁酸与没食子酸的色谱分析条件;奎宁酸标准曲线线性范围为1.25~20 g/L、其检测限为0.5 g/L,没食子酸标准曲线线性范围为0.0625~1 g/L、其检测限为5 mg/L;该方法精密度、重复性、稳定性、加样回收试验的RSD均小于5%;奎宁酸与没食子酸平均加样回收率分别为100.87%、99.65%;12批次废液试样指纹图谱分析相似度均大于0.95;可通过聚类分析分为两类,10号和11号样品聚为一类,其余样品聚为一类;计算得到奎宁酸质量浓度为482.3 g/L,没食子酸质量浓度为35.7 g/L。

砂仁的化学成分及质量控制方法的研究进展

对砂仁的化学成分、主流国家和地区的药典标准以及质量控制方法研究进展进行系统分析,为进一步完善砂仁的质量评价体系提供参考。

药检分析实验室面临草药的挑战

介绍澳大利亚医疗用品管理局 (TGA)对草药的管理以及政府化验室在草药分析中面临的挑战及对策。重点介绍了该化验所利用色谱指纹图谱在检验草药制剂的应用情况和经验。并举例说明建立色谱指纹图谱的基本原则和方法学问题。

独活寄生汤高效液相色谱指纹图谱的建立和7种有效成分含量的测定

目的:建立高效液相色谱(HPLC)指纹图谱法分析独活寄生汤中7种有效成分的方法,为临床独活寄生汤中药处方的质量控制提供参考依据。方法:分析独活寄生汤中药处方现代药理研究文献,筛选HPLC检测主要有效成分,建立HPLC检测上述有效成分的色谱条件,考察精密度、重复性、加样回收率,检测5批次独活寄生汤煎液中独参汤中蛇床子素、二氢欧山芹醇-β-D葡萄糖苷、二氢欧山芹醇、芍药苷、松脂醇二葡萄糖苷、β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0含量。HPLC检测独活寄生汤中主要有效成分的色谱条件为:ODSC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分析柱;1 mL/min;柱温为30℃,进样量10μL,检测方法:设置监测波长0~40 min采用330 nm检测,41~80 min采用230 nm检测;流动相:乙腈-0.08%甲酸(A),水-2.5%异丙醇-0.08%甲酸(B)洗脱程序:0~25 min,10%~26%流动相A,26~30 min,27%~44%流动相A,31~35 min,45%~46%流动相A,41~45 min,47%~48%流动相A;46~65 min,49%~92%流动相A;66~80 min,93%~100%流动相A。结果:蛇床子素、二氢欧山芹醇-β-D葡萄糖苷、二氢欧山芹醇、芍药苷、松脂醇二葡萄糖苷、β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0具有较好的线性关系,精密度(日内和日间)RSD值均低于2.5%,7种成分检测重复性RSD值均低于3.5%,7种成分的加样回收率均≥95.0%。5批次独活寄生汤中7种成分含量比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:独活寄生汤主要有效成分可通过HPLC进行定量分析,但不同种含量差异较大,可能与煎药人不同、中药材批次不同有关。

油斑烟污染源物质的HS-GC-MS指纹图谱研究

建立油斑烟污染源物质的色谱指纹图谱分析方法,为进一步鉴别油斑烟支的污染物来源提供依据。以9种污染源物质样品为研究对象,采用静态顶空-气质联用法(HS-GC-MS)对每种污染源物质不同批次的样品进行分析,分别确定每种污染源物质的共有特征指纹峰,初步建立了油斑烟污染源物质的HS-GC-MS指纹图谱,并对所建立的图谱进行方法学考查和相似度评价。结果表明,每种污染源物质不同批次样品的相似度均在0.9以上,该方法具有良好的精密度、稳定性和重现性,可作为油斑烟污染物鉴别的参考依据。

山慈菇活性成分微波提取工艺优化、指纹图谱与抗植物病菌活性分析

本文综合运用单因素和Box-Behnken响应面试验,以山慈菇提取率和其中3种主要化学成分:双[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯-2-葡萄糖苷(dactylorhin A)、双[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(militarine)和秋水仙碱的含量为综合权重指标,对其微波提取工艺进行考察。同时,利用高效液相色谱技术建立13批不同产地山慈菇的指纹图谱,明确其主要成分含量分布情况。最后,运用滤纸片扩散法,对制备的山慈菇提取物进行抗菌活性评价。结果表明:山慈菇的最佳微波提取工艺条件:乙醇浓度55%、料液比1:30 g/mL、提取时间17 min。在此条件下,山慈菇的提取率为12.83%。指纹图谱结果表明,山慈菇中3种化学成分的含量分布趋势一致,其中militarine为13批山慈菇中的共有化学成分,而dactylorhin A和秋水仙碱分别在1个产地样品中未检出,表明不同产地山慈菇中主要化学成分分布具有差异性。抗菌实验结果显示,山慈菇提取物对胶孢炭疽菌、辣椒疫霉菌、灰葡萄孢菌、茄链格孢菌、荧光假单胞菌、水稻白叶枯菌和禾谷镰孢菌均没有显示抗菌活性(抑菌圈小于6 mm),对雷尔氏菌具有较好的抑制活性(抑菌圈8.5 mm),表现出一定的抗菌选择性。本研究确定了微波提取山慈菇的最佳工艺,建立的山慈菇中3种成分同步含量分析方法稳定可行,研究结果可为山慈菇药材的质量标准建立和综合开发利用提供参考。

白芷醇溶蛋白质提取工艺优化及其指纹图谱研究

目的:基于响应面设计优化白芷醇溶蛋白质提取工艺,并研究其指纹图谱特征。方法:首先考察液料比、提取时间、乙醇浓度、提取温度四个单因素对白芷醇溶蛋白质提取率的影响,再通过Box-Behnken方法对影响提取率的工艺因素进行响应面优化,最后对白芷及易混淆药材的醇溶蛋白质指纹图谱进行对比分析。结果:最佳提取工艺条件为:液料比13∶1(mL/g),提取时间8.75 h,乙醇浓度42%,提取温度45℃,在此条件下提取率为0.294%。SDS-PAGE分析表明白芷醇溶蛋白质样品分子量范围介于15~95 kDa,91.4 kDa与65.6 kDa分子为高丰度蛋白质。此外,白芷与天花粉、粉葛、山药的醇溶蛋白质指纹图谱有显著差异。结论:利用响应面法优化了白芷醇溶蛋白质的提取工艺,并建立其专属性SDS-PAGE指纹图谱,为其分子鉴定及资源开发提供实验依据。

团羽铁线蕨HPLC-DAD指纹图谱的建立与多种特征成分含量测定

通过建立团羽铁线蕨指纹图谱和多种共有成分含量测定方法,以在不同产地团羽铁线蕨质量控制中应用。采用SHISEIDO CAPCELL PAK C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长280 nm,检测温度35℃,甲醇-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱方法建立铁线蕨指纹图谱与特征成分含量测定的HPLC-DAD分析方法,对多批次药材以相似度软件与化学计量学分析相结合的方式进行质量评价。结果表明:本方法提取铁线蕨有13个共有峰,指认出共有峰2个,分别为槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸和山奈酚-3-O-芸香糖苷,相似度为0.558~0.901。结合聚类分析和主成分分析,使用化学计量学正交偏最小二乘判别分析法对13个共有峰进行评价,样本中槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸和山奈酚-3-O-芸香糖苷含量范围分别为0.11~4.35 mg/g、0.15~10.35 mg/g,结果显示不同产地团羽铁线蕨数据差异大。建立的指纹图谱及多特征成分含量测定的HPLC-DAD分析方法,能更全面而准确地体现团羽铁线蕨药化学成分整体轮廓与各类特征成分含量贡献,为提升不同产地团羽铁线蕨药材的质量控制方法奠定了基础。

基于QbD的二冬汤颗粒制备工艺及质量控制

目的基于质量源于设计(quality by design,QbD)理念对二冬汤颗粒制备工艺进行研究,并对其质量进行控制。方法设计L9(34)正交试验法,以出膏率、指标成分转移率、总多糖为评价指标,AHP-CRITIC混合加权法优选二冬汤最佳提取工艺;以成型率、溶化率、休止角、吸湿率为考察指标,采用星点设计-效应面法结合熵权法优化二冬汤颗粒成型工艺;以相对均齐指数、松密度、振实密度、水分、吸湿率、休止角、豪丝纳比为指标,建立物理指纹图谱,评价颗粒质量一致性。结果二冬汤的最佳提取工艺为加水量12倍,不浸泡,提取3次,每次30 min。3批重复验证试验综合评分均数为54.24,RSD为1.09%。二冬汤颗粒的最佳成型工艺:干膏粉与辅料比为1∶0.6,润湿剂体积分数87%,润湿剂用量16%,在80℃下干燥30 min。5批颗粒物理指纹图谱相似度均>0.99。结论该法稳定可行,可为二冬汤颗粒工业化生产以及该制剂的进一步研究提供方向。

DNA指纹技术方法学的建立及在结核分支杆菌菌株鉴定中的应用

目的探讨结核分支杆菌ＤＮＡ指纹技术的方法学及其在结核分支杆菌菌株鉴定中的应用。方法以结核分支杆菌染色体ＤＮＡ插入序列ＩＳ６１１０为基础，根据不同来源的结核分支杆菌菌株ＤＮＡ相异的ＩＳ６１１０拷贝数和相对分子质量，应用增强化学发光标记技术对结核分支杆菌ＤＮＡ酶切产物进行杂交和检测。结果不同来源的５０例结核患者临床分离株具有相异的ＤＮＡ指纹图谱。同一患者痰和膝关节脓培养阳性的结核分支杆菌菌株ＤＮＡ指纹图谱有较大的差异。人工诱导的结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ氧氟沙星耐药株和敏感株有一致的ＤＮＡ指纹图谱。

基于化学成分变化优化麦冬硫熏工艺

目的基于麦冬经不同程度硫熏后,相关检测指标的变化情况,优化麦冬硫熏的适宜工艺。方法运用苯酚-硫酸法测定麦冬多糖的量;运用HPLC-ELSD法测定麦冬皂苷D和D′的量,流动相为乙腈-水(50∶50),漂移管温度40℃,氮气体积流量2.0 L/min;运用HPLC-UV法进行麦冬正丁醇部位指纹图谱研究,流动相为乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱,检测波长297 nm,同法测定甲基麦冬二氢高异黄酮A和B的量。以硫熏麦冬的总多糖、麦冬皂苷D和D′、甲基麦冬二氢高异黄酮A和B的质量分数及指纹图谱得分为综合考察指标,以硫磺用量和硫熏时间为考察因素,运用星点设计-效应面法优化麦冬硫熏工艺。结果在实验设计范围内,随着硫磺用量和硫熏时间的增加,多糖的量先增加后降低,麦冬皂苷D和D′的量轻微增加后降低,甲基麦冬二氢高异黄酮A和B的量逐步降低。最终确定麦冬硫熏工艺为硫磺用量120~200 g/m^3,硫熏时间0.6~1.5 h,多元2项式方程为Y=0.574+0.054 3 X_1-0.008 13 X_2-0.518 X_(12)+0.131 X_(22)+0.153 X_1X_2,R-Sq=0.971。工艺验证结果表明偏差绝对值小于3%。结论本研究明确麦冬硫熏后相关化学成分变化情况,建立适宜麦冬的硫熏工艺。