抗抑郁剂对大白鼠脑内激活剂刺激的5-HT_(1A)与[^(35)S]GTPγS结合的影响(英文)

电生理研究证明 ,焦虑与忧郁剂治疗的神经生物学机制取决于影响特异性的解剖区域对 5 -HT1A受体敏感的适应性。此外 ,临床上用相应的抗焦虑 /抗忧郁药剂重复处理 ,在前脑的作用表现为增进 5 -HT的神经传导 ,尤以海马最显著。药物处理 2～ 3周后 ,可减少抑制性体树突自动受体的敏感性 ,增加突触后的受体敏感性 ,或两者兼备。使用对氮 ,氮 -二丙基 -5 -氨基色胺刺激的鸟苷 -5 '-氧-( 3-硫代 )三磷酸盐 ( [35S]GTPγS)结合体进行放射自显影照相的方法评估 ,测定了该假设。将大白鼠用生理盐水或药剂处理 2 1d ,每天处理 1次 (mg/kg :fluoxetine ,1 0 ;imipramine ,1 0 ;clorgyline ,1 )或每天处理 2次 (ipsapirone,2 0mg/kg)。检测了 3个富含 5 -HT1A受体的脑区 :背中缝核 (DR ;体树突 ) ,背侧海马 (DH)和外侧隔区 (LS) (突触后 )。只有imipramine( +1 7% )和fluoxetine( +5 4 % )显著地增加了背侧海马上激活剂结合在背侧海马。除了imipramine ,所有药剂均减少在背侧中缝核的结合 ( -1 9到-4 1 % )。尽管总的说来结果支持增进海马 5 -HT的神经传导的概念 ,但受体敏感性变化的模式与电生理的研究结果仍稍有不同。然而 ,最一致和最显著的结果是四种药剂处理均在外侧隔区 (LS)降低 [35S]GTPγS结合 ( -1 4到

ZMS对老年大鼠脑M受体与G-蛋白偶联活性的影响

以非ＧＴＰａｓｅ水解性的［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ在激动剂Ｃａｒｂａｃｈｏｌ作用下和Ｇ－蛋白不可逆结合，检测大鼠脑Ｍ受体与Ｇ－蛋白偶联活性，同时观察不同剂量ＺＭＳ对其活性和学习记忆的影响。结果老年组Ｇ－蛋白活性低于青年组，中、大剂量组优于老年组，并能改善其学习记忆能力。Ｔａｃｒｉｎｅ无明显作用。提示老年大鼠Ｍ受体与Ｇ－蛋白偶联可能有障碍，ＺＭＳ对大鼠学习、记忆的促进作用可能与提高Ｍ受体与Ｇ－蛋白偶联活性有关。

大鼠Gs alpha亚基的原核表达和纯化

用 PCR的方法 ,在大鼠 Gs alpha亚基的 C端引入了 6个外源组氨酸 (即 6×His- Tag)并以此为纯化标记 .构成的表达载体 p QE60 /rat Gsα( L)在大肠杆菌 BL2 1 ( DE3)中获得了稳定的表达 .经 DEAE- Sephacel离子交换柱和 Ni- NTA Agarose亲和层析获得纯化的具有较高 [35S]- GTPγS结合活力的重组大鼠 Gs

Saponin对不同趋化因子受体的活化的影响研究

通过在稳定表达趋化因子受体的细胞系CHO/CXCR1、CHO/CXCR2、CHO/CXCR3、CHO/CXCR4和CHO/CCR5上进行[35S]GTPγS结合实验,研究了Saponin对不同趋化因子受体活化的影响。实验结果表明:(1)对于CHO/CXCR1和CHO/CXCR4,在反应体系中添加10μg/mlSaponin能提高受体G蛋白与[35S]GTPγS的特异性结合,使刺激比率(CPMAgonist/CPMBasal)分别从125%和184%扩大到481%和415%;(2)对于CHO/CCR5,10μg/mlSaponin对受体G蛋白与[35S]GTPγS的特异性结合无影响,刺激比率大小未变;(3)对于CHO/CXCR2和CHO/CXCR3,10μg/mlSaponin降低了受体G蛋白与[35S]GTPγS的特异性结合,使刺激比率分别从171%和168%减小到130%和114%。实验结果表明Saponin是与受体发生作用,对于不同的趋化因子受体,Saponin对受体的活化的影响不同。