IFNα-2b治疗323例HBeAg阳性慢性乙型肝炎的效果

目的 探讨IFNα-2b抗病毒治疗乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者的效果。方法回顾性分析2010年1月至2014年1月就诊于南昌大学第二附属医院并接受IFNα-2b治疗的323例HBeAg阳性CHB患者的临床资料,按丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平将其分为3组:ALT<2×ULN(A1组,n=111)、2×ULN≤ALT≤5×ULN(A2组,n=111)以及ALT>5×ULN(A3组,n=101)。观察临床疗效及不良反应,并比较3组间的抗病毒效果。结果 在停药时及停药后第12、24、48、72、96、144、192、240周,323例患者的HBV-DNA阴转率分别为39.9%、40.2%、39.0%、36.2%、34.1%、33.4%、31.3%、30.7%、30.7%;HBsAg阴转率分别为6.2%、6.2%、6.2%、5.9%、5.9%、5.9%、5.6%、5.6%、5.6%;HBeAg血清学转换率分别为28.2%、31.0%、32.8%、34.4%、33.7%、33.1%、32.8%、32.5%、31.6%。在各随访时间点,3组患者的HBV-DNA阴转率和HBeAg血清学转换率比较,A3组显著高于A2组,A2组显著高于A1组(P<0.05);3组患者的HBsAg阴转率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。323例患者均出现发热及类流感样症状,238例(73.7%)出现白细胞及中性粒细胞降低,35例(10.8%)甲状腺功能异常,5例(1.5%)斑秃,1例(0.3%)睡眠障碍,经过密切观察和对症处理后,患者均顺利完成疗程,各指标均基本正常。结论 IFNα-2b治疗HBeAg阳性CHB患者在停药时及停药后随访期间均表现出较好的效果,大多数患者可耐受IFNα-2b的不良反应。IFNα-2b的抗病毒效果可能与ALT水平有关。

PEG-IFNα-2b联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎的疗效及对HBeAg转阴率、免疫功能的影响

目的:分析聚乙二醇干扰素α-2b(PEG-IFNα-2b)联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎的效果及对HBeAg转阴率、免疫功能的影响。方法:选取某院2019年3月—2022年3月收治的慢性乙型肝炎患者88例作为研究对象,依据随机抽签法分成研究组与对照组,每组44例。对照组接受替诺福韦治疗,研究组接受PEG-IFNα-2b联合替诺福韦治疗,比较2组HBeAg转阴率、HBsAg转阴率、治疗前后肝功能指标[谷氨酰转肽酶(GGT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)]、免疫功能指标(CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、C3、C4)及血清炎性因子[视黄酸受体相关孤核受体(RORγt)、白细胞介素-17(IL-17)、IL-4]水平。结果:研究组HBeAg转阴率、HBsAg转阴率分别为45.45%、13.64%,高于对照组的11.36%、0,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,研究组GGT、AST、ALT、IL-4、IL-17、RORγt分别为(30.42±5.39)U/L、(31.08±6.64)U/L、(29.37±4.68)U/L、(1.32±0.42)pg/mL、(0.64±0.19)pg/mL、(0.80±0.30),均低于对照组的(56.93±8.75)U/L、(38.72±5.83)U/L、(49.61±6.42)U/L、(3.91±1.14)pg/ml、(3.01±0.87)pg/ml、(1.61±0.36),差异有统计学意义(P<0.05)。研究组CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、C3、C4分别为(66.81±8.55)%、(1.53±0.16)、(1.22±0.01)g/L、(0.42±0.07)g/L,均高于对照组的(61.03±8.49)%、(1.26±0.2)、(0.73±0.09)g/L、(0.22±0.06)g/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PEG-IFNα-2b联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎效果明显,可提高HBeAg、HBsAg转阴率,改善肝功能,增强免疫功能,抑制炎性反应。

PEG-IFN α-2b治疗后慢性乙肝患者体内PBMC中的p11 mRNA GRα mRNA水平与抑郁症的相关性

目的 研究经聚乙二醇干扰素α-2b治疗后,慢性乙肝患者外周血单个核细胞中p11 mRNA、糖皮质激素受体α(GRα) mRNA水平与抑郁症的相关性。方法 对60例慢性乙型肝炎患者进行编号,采用随机数字表法,随机分为观察组和对照组各30例,均常规给予护肝和抗病毒治疗,观察组在此基础上给予聚乙二醇干扰素α-2b治疗,疗程均为24周。采用汉密顿抑郁量表评估两组患者治疗前后的抑郁水平,检测外周血中的炎症因子、神经递质、p11 mRNA和GRα mRNA水平,并对两组患者p11 mRNA、GRα mRNA水平与抑郁症评分进行相关性分析。结果 两组患者治疗24周后,乙型肝炎病毒DNA应答率均较治疗前升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。两组患者治疗24周后,汉密顿抑郁量表评分、血清γ干扰素和肿瘤坏死因子α水平均较治疗前升高(P<0.05或0.01),白细胞介素-4、血浆甲肾上腺素和5-羟色胺水平较治疗前降低(P<0.05或0.01),而观察组汉密顿抑郁量表评分和抑郁症发生率均明显高于对照组(P<0.05)。两组患者治疗24周后,观察组外周血单个核细胞中p11 mRNA水平高于对照组(P<0.05),GRα mRNA水平则低于对照组(P<0.05),且观察组外周血单个核细胞中p11 mRNA与γ干扰素、TNF-α和汉密顿抑郁量表评分呈正相关性(P<0.01),GRα mRNA与血浆甲肾上腺素、5-羟色胺水平和汉密顿抑郁量表评分也呈正相关性(P<0.01)。结论 聚乙二醇干扰素α-2b治疗后慢性乙肝患者外周血单个核细胞中p11 mRNA表达明显升高,GRα mRNA表达明显降低,且与外周血炎症因子和神经递质表达密切相关,可能是导致抑郁症发生的重要原因。

IFN-α2b体外对人眼葡萄膜黑色素瘤细胞端粒酶活性的影响

目的:研究端粒酶抑制剂IFN-α2b对人葡萄膜黑色素瘤细胞端粒酶活性的抑制作用。方法:采用原代培养的人葡萄膜黑色素瘤细胞,用特定时间下不同浓度以及特定浓度下不同时间的端粒酶抑制剂IFN-α2b作用于体外培养的黑色素瘤细胞,并设立空白对照组。采用PCR-ELISA法及PCR-PAGE法测定细胞中端粒酶活性的变化,采用单因素方差进行统计分析。结果:随着IFN-α2b浓度的增加及作用时间的延长,端粒酶的活性出现逐步的下降,在药物浓度达到50kU/L以及作用时间达到24h后,出现明显的抑制作用,并在500kU/L及48h达到抑制高峰。结论:IFN-α2b可有效降低体外培养的人葡萄膜黑色素瘤细胞的端粒酶活性,并呈浓度和时间依赖性。

HIV-lenv,gag与IFNα-2b融合蛋白的细胞免疫

目的 将编码艾滋病病毒 (HIV -1)外膜蛋白env、核心蛋白gag与编码干扰素 (IFNα -2b)基因分别插入pSFJ16与pSFJ3 8真核表达载体 ,观察表达产物诱导机体产生细胞免疫的变化规律。方法 利用分子克隆技术构建重组质粒 ,经脂质体转染与野生型痘病毒在Cos -7细胞内同源重组 ,筛选、纯化、获得重组痘苗病毒vJ16env/IFNα -2b和vJ3 8gag/IFNα -2b。免疫小鼠后 ,检测小鼠外周血与脾淋巴细胞对ConA及Lps的反应性 ,用流式细胞仪测定小鼠脾细胞CD4+ ,CD8+ 细胞计数。结果 外周血与脾淋巴细胞对ConA ,Lps的反应性 ,实验组与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。CD4+ 及T淋巴细胞与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。CD8+ T淋巴细胞与对照组比较差异无显著性 ,但呈增高趋势。结论 重组痘苗病毒能诱导小鼠产生较强的细胞免疫。重组痘苗病毒能在体外与HIV -1env和HIV -1gag阳性血清发生特异性反应 ,具有免疫原性和免疫反应性。

HIV-1gag/IFNα-2b表达产物免疫小鼠的实验研究

为了将艾滋病病毒核心蛋白(gag)与干扰素(IFNα-2b)融合基因表达的融合蛋白作为免疫原免疫小鼠,观察小鼠的体液免疫和细胞免疫应答。将IFNα-2b基因片段插入到gag基因的nt531位点,经脂质体转染与血凝素阴性蚀斑筛选出重组痘苗病毒。经SDS-PAGE和Westexn blot鉴定表达产物。用重组病毒vJ38gag/IFNα-2b免疫小鼠,用ELISA方法检测血清IgG抗体含量,用流式细胞仪测定小鼠脾CD4^+、CD8^+T淋巴细胞计数。结果表明,血清IgG抗体含量逐渐增高,实验组与对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。CD4^+、T淋巴细胞计数与对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。结论:重组痘苗病毒vJ38gag/IFNct-2b能增强小鼠的体液免疫和诱导细胞免疫。

人乳头瘤病毒11型E6基因与人IFN-α2b融合基因原核表达质粒的构建与鉴定

目的构建HPV11E6与人IFNα2b融合基因表达载体,为进一步原核表达奠定基础。方法在IFNα2b的起始密码子之前加入ccatggct,同时以编码(GGSGS)3的45个碱基序列取代其终止密码子,将改造后的人IFNα2b基因人工合成,然后将其装入质粒pET32a的NcoⅠ和BamHⅠ酶切位点之间;PCR扩增HPV11E6基因片段。将含有IFNα2b基因片段的质粒pET32a和含有BamHⅠ,EcoRⅠ酶切位点的HPV11E6同时用BamHⅠ,EcoRⅠ酶切,将酶切产物纯化回收后做连接反应,连接产物常规转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,随机挑选阳性克隆并提取质粒酶切鉴定,同时将挑选的阳性克隆菌液送公司测序。结果测序结果表明成功的将HPV11E6和人IFNα2b通过连接肽(GGSGS)3连接并装入pET32a的NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点之间,且基因序列与设计完全一致。结论HPV11E6与人IFNα2b融合基因表达载体的成功构建,为进一步原核表达奠定了基础。

重组人IFNα-2b融合表达及纯化工艺研究

为了利用多分子伴侣表达载体在大肠埃希氏菌中融合表达人干扰素（IFNα）-2b，并进行IFNα-2b纯化工艺研究，试验采用人工设计并合成Smt3-IFN（x-2b克隆至自行构建的P32-TrxA载体中，将重组表达质粒P32-TrxA—Smt3-IFNα-2b转化至大肠埃希氏菌（E．coil）BL21（DE3），经IPTG诱导表达、SDS—PAGE分析，在此基础上利用金属螯合层析、SUMO蛋白酶酶切、阴离子交换层析以及凝胶层析建立了IFNot-2b的纯化工艺。结果表明：重组质粒经酶切鉴定及测序证明构建正确；融合蛋白分子质量约为40ku，主要以可溶形式表达，表达量占菌体总蛋白的30％以上；纯化的IFNα-2b分子质量约为17ku，蛋白纯度达到95％以上，利用细胞病变抑制法测得干扰素的效价为1．0×10^8IU／mg。说明成功在大肠埃希氏菌中表达并经过简易工艺纯化了重组蛋白IFNα-2b。

重组人干扰素α-2b-卡介苗(hIFN-α-2b-BCG)药物敏感性分析

通过BACTEC MGITTM 960全自动分枝杆菌培养鉴定/药敏仪对重组人干扰素α-2b-卡介苗(hIFN-α-2b-BCG)菌株进行利福平等10种抗菌药物的敏感性试验,以野生BCG作对照观察药物对重组BCG菌株活性的潜在影响.结果发现:重组人干扰素α-2b-卡介苗在系统感染上对喹酮类的氧氟沙星、环丙沙星敏感,对氨基糖苷类药物的庆大霉素和卡那霉素耐药.在抗结核类药物中,除对吡嗪酰胺耐药外,对利福平等其他几种抗生素均敏感.因尿液回收率高,几乎所有的抗菌药物都对膀胱中的菌株有影响.

改造IFNα-2b基因3′端提高其在大肠杆菌中表达水平

目的 :对人IFNα_2b基因的 5′端进行改造 ,从翻译水平上调控IFNα_2b基因在大肠杆菌中的表达。方法 :采用PCR方法 ,人工合成寡核苷酸引物 ,对人IFNα_2b基因进行了改造 :去除3′端非编码区 ,并增加原核系统强终止密码子。将改造后的基因片段分别克隆入原核表达载体pBV32 1,在大肠杆菌中进行表达。对表达产物进行活性效价测定。结果 :3′端删除非编码区 ,表达水平比删除前提高 4倍。结论 :IFNα_2b基因的 3′端非编码区对其在原核系统的表达具有抑制作用 ,删除该区可提高表达水平。

人干扰素IFNα-2b在果蝇细胞中的稳定表达

以人干扰素IFNα-2b全长基因的质粒为模板,PCR扩增,PCR产物克隆到表达载体获得重组质粒,经转染和筛选,得到稳定表达的果蝇S2细胞株.经CuSO4诱导表达并对表达产物进行检测,结果显示,在果蝇S2细胞中成功地进行了人干扰素IFNα-2b的蛋白表达,表达产物的大小约为26kD.并且,通过体外的抗病毒活性测定,证明所表达蛋白具有抗病毒活性.该研究为进一步利用该系统表达真核细胞蛋白,研究其结构和功能提供了重要的基础.

静脉联合应用低剂量IL-2和中等剂量IFN_(α-2b)治疗肾透明细胞癌的初步探讨

目的:探讨经静脉应用低剂量IL-2联合中等剂量的IFNα-2b在肾透明细胞癌中的应用价值及安全性。方法:IFNα-2b小剂量递增至1000万U/m2·d～2000万U/m2·d,静脉滴注7～10d,随后IFNα-2b300万U～600万U/m2,皮下注射,每周2次;静滴IFNα-2b期间IL-260～100万U/d,分次静脉推注或滴注,连续5天;以上每1月为一疗程。结果:3例肿瘤完全切除术后应用者生存4月、53月和65月迄今无复发转移;余7例带瘤生存2年以上1例,3年以上5例,5年以上1例,其中完全缓解2例,死亡1例(生存26月);副作用主要有发热、肌肉关节酸痛、食欲减退、轻度WBC下降等。结论:静脉联合应用低剂量IL-2和中等剂量IFNα-2b治疗肾透明细胞癌有效、安全,值得临床进一步研究。

Effect of Trastuzumab in Combination with IFN α-2b on HER2 and MRP1 of ACHN

To study the effect of Trastuzumab in combination with IFN α-2b on HER2 and MRP1 of ACHN in vitro, ACHN cell line of RCC was cultured by employing cell culture. The tetrazolium-based colorimetric assay was used to evaluate the growth-inhibiting effect of Trastuzumab with IFN α-2b. SP method was utilized to determine the expression of HER2 and MRP1 of the cells. Our results showed that Trastuzumab had inhibitory effect on the growth of renal tumor cells and reversing effect on the multi-drug-resistance (MDR) in RCC in a time- and dose-dependent manner. Treated with Trastuzumab with or without IFN α-2b, the expression of HER2 and MRP1 genes of RCC was decreased significantly (P<0.05). It was concluded that Trastuzumab with IFN α-2b could inhibit the proliferation of RCC and the expression of HER2 and MRP1 of ACHN and to some extent, reverse the MDR of the tumor cells.

人干扰素α-2b基因在德氏乳杆菌的表达与鉴定

目的 :试图用乳酸杆菌在局部分泌干扰素 ,以达到预防和治疗病毒感染。方法 :以 pBLUE/IFNα 2b为模板 ,采用PCR技术将IFNα 2b基因扩增然后插入乳酸菌表达载体 pSC111AE ,将重组质粒电转德氏乳杆菌DM 890 9,获得重组菌株。在含乳糖的MRS培养基培养并诱导表达 ,表达产物分泌到菌液上清。结果 :分别用PCR和ELISA鉴定目的基因和表达产物 ,利用WISH VSV系统采用细胞病变抑制法 ,测定表达产物IFNα 2b的抗病毒活性 ,平均效价为 1 4 1× 10 5IU/ml。结论 :本研究为以乳酸杆菌为载体在局部产生治疗性药物奠定了基础。

斑蝥素联合a-2b干扰素治疗尖锐湿疣疗效观察

目的:观察斑蝥素联合a-2b干扰素治疗尖锐湿疣的疗效、安全性及复发情况。方法:将41例尖锐湿疣患者随机分为两组,其中对照组20例,治疗组21例。对照组应用斑蝥素软膏每日1次外用,治疗组在斑蝥素软膏治疗基础上辅以a-2b干扰素肌注100万U,隔日1次肌内注射,同时外用干扰素α-2b凝胶,每日4次外用。疗程3个月,治疗结束后随访8个月,观察复发情况。两组的治疗情况、安全性及复发情况均由专人记录。结果:(1)治疗组治愈率为90.48%,高于对照组(P<0.05);(2)治疗组复发率为29.41%,低于对照组(P<0.05);(3)对两组疣体完全脱落时间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用斑蝥素联合a-2b干扰素治疗尖锐湿疣,能够获得满意疗效,可在临床推广应用。

INFα-2b联合恩替卡韦对慢性乙型肝炎患者病毒载量、外周血中Th1/Th2型细胞因子与肝功能的改善效果

目的研究干扰素(INF)α-2b联合恩替卡韦对慢性乙型肝炎(CHB)患者乙型肝炎病毒(HBV)病毒载量、外周血中Th1/Th2型细胞因子与肝功能的改善效果。方法选取CHB患者96例,随机分为对照组和观察组各48例。对照组给予恩替卡韦口服治疗,观察组在对照组的基础上联合INFα-2b肌肉注射治疗,疗程均为48 w。比较两组治疗后HBV载量、Th1/Th2型细胞因子、肝功能指标、治疗效果及不良反应发生率的差异。结果治疗后,观察组HBV载量明显低于对照组及同组治疗前(P<0. 05)。两组INF-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α指标均明显低于治疗前,白细胞介素(IL)-4、IL-6、IL-10均明显高于治疗前(均P<0. 05)。观察组治疗后INF-γ水平明显低于对照组(P<0. 01),IL-6水平明显高于对照组(P<0. 05)。观察组总胆红素(TBiL)复常率、HBV-DNA转阴率、治疗总有效率均明显高于对照组,差异有统计学意义(均P<0. 05)。观察组不良反应发生率与对照组比较差异无统计学意义(P>0. 05)。结论 INFα-2b联合恩替卡韦治疗CHB的临床疗效显著,可有效降低患者外周血Th1型细胞因子水平,升高Th2型细胞因子水平,改善肝功能,且未增加患者不良反应。