慢性肾衰竭患者FGF23、α-Klotho与中医证型相关性研究

慢性肾脏病(CKD)起病隐匿,因其发病率高、知晓率低、诊断率低、预后差和医疗费用高等特点,已成为危害人类健康的重要公共卫生问题。CKD最终会进展成终末期肾脏病,其常见并发症之一就是慢性肾脏病-矿物质和骨代谢异常(CKD-MBD),进入透析阶段时CKD-MBD的发病率高达100%,严重影响透析患者的生存质量,且其是导致透析患者死亡的独立危险因素^([1])。故CKD-MBD的预防与治疗至关重要。CKD的病理基础是肾纤维化,符合中医学对癥积的认识。

血清半乳糖凝聚素-3、α-klotho表达与代谢相关脂肪性肝病糖脂水平及预后的关系

目的 探讨半乳糖凝聚素-3(Gal-3)、α-klotho在代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)病人血清中的表达情况,并分析其与糖脂水平和预后的关系。方法 选取2020年12月至2021年12月来保定市人民医院就诊并确诊为MAFLD病人112例为研究对象,根据非酒精性脂肪性肝病肝纤维化评分(NAFLDFS)将病人分为肝纤维化危险组(n=46)、无肝纤维化组(n=66),同时选取50例健康者为对照组。收集研究对象一般资料,采用酶联免疫吸附法对血清中α-klotho、Gal-3表达水平进行检测,Pearson法分析α-klotho、Gal-3表达的相关性,及两者分别与糖脂代谢指标的相关性;受试者操作特征(ROC)曲线分析血清α-klotho、Gal-3水平对MAFLD病人预后的预测价值。结果 MAFLD病人血清中α-klotho表达水平低于对照组(268.15±82.13)ng/L,Gal-3表达水平高于对照组(1.48±0.47)μg/L,其中肝纤维化危险组病人血清中α-klotho表达水平低于无肝纤维化组[(140.49±45.16)ng/L比(215.51±70.33)ng/L],Gal-3表达水平高于无肝纤维化组[(2.26±0.50)μg/L比(1.96±0.33)μg/L](P<0.05);预后不良的MAFLD病人血清中α-klotho表达水平低于预后良好病人,Gal-3高于预后良好病人,均差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson法分析结果显示,MAFLD病人血清中α-klotho、Gal-3表达呈显著负相关(r=-0.49,P<0.05);MAFLD病人血清中α-klotho表达与空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗(HOMA-IR)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、谷氨酰转肽酶(GGT)表达呈负相关,与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、血小板(PLT)、血清白蛋白(Alb)表达呈正相关(P<0.05);Gal-3表达与FBG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-c、AST、ALT、GGT表达呈正相关,与HDL-c、PLT、Alb表达呈负相关(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清α-klotho、Gal-3水平评估预后不良病人的曲线下面积(AUC)分别为0.83、0.84,对应的灵敏度分别为86.84%、80.90%,特异度分别为66.22%、82.02%;二者联合评估的AUC为0.93,灵敏度为86.84%,特异度为89.19%。结论 MAFLD病人血清中α-klotho表达降低,Gal-3表达升高,二者表达与糖脂水平和病人预后密切相关。

老年白内障患者血清HO-1、α-Klotho水平与氧化应激指标的关系及其诊断价值

目的探讨老年白内障患者血清血红素氧合酶1(HO-1)、α-Klotho水平与氧化应激指标的关系及其诊断价值。方法选取2021年6月至2023年6月于如皋市人民医院就诊的老年白内障患者121例作为白内障组,并选取同期该院年龄、性别相匹配的体检健康者123例作为对照组。收集两组临床资料并采用酶联免疫吸附试验法检测两组血清HO-1、α-Klotho水平及血清氧化应激相关指标[超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(TAC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]。Pearson相关性分析血清HO-1、α-Klotho水平与氧化应激指标的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HO-1、α-Klotho水平对老年白内障的诊断价值,多因素Logistic回归分析影响老年白内障发生的因素。结果白内障组血清HO-1、α-Klotho水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。白内障组血清SOD、GSH-Px水平低于对照组,LPO、MDA、TAC水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清HO-1、α-Klotho与SOD、GSH-Px呈正相关(P<0.05),与LPO、MDA、TAC呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,HO-1、α-Klotho二者联合诊断老年白内障的曲线下面积为0.912(95%CI:0.869~0.944),其灵敏度为78.51%,特异度为90.24%,二者联合诊断优于HO-1、α-Klotho单独诊断(Z=4.358、4.075,P<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示,HO-1、α-Klotho是影响老年白内障发生的保护因素,糖尿病是影响老年白内障发生的危险因素(P<0.05)。结论老年白内障患者血清HO-1、α-Klotho水平降低,与氧化应激指标密切相关,且HO-1、α-Klotho对老年白内障有一定的诊断价值。

血清CERP、SF、α-Klotho、FGF-23水平在2型糖尿病患者白蛋白尿进展中的预测价值

目的分析血清铜蓝蛋白(ceruloplasmin,CERP)、血清铁蛋白(serum ferritin,SF)、α-Klotho、成纤维细胞生长因子-23(fibroblast growth factor,FGF-23)在2型糖尿病患者白蛋白尿进展中的预测价值。方法选择2020年6月至2022年5月沭阳医院内分泌科因控制血糖重复收住院的120例2型糖尿病患者进行回顾性队列研究,将首次住院和第二次住院的资料分别作为基线资料和随访资料。根据基线中患者白蛋白尿情况将其分为3组:无白蛋白尿组、微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组,比较3组患者中CERP、SF、α-Klotho、FGF-23水平的差异;根据随访资料评价白蛋白尿进展的情况,比较白蛋白尿进展的患者与未进展的患者的基线临床资料及其CERP、SF、α-Klotho、FGF-23水平的差异,采用logistic回归分析白蛋白尿进展的影响因素,采用ROC曲线分析白蛋白尿进展的预测指标。结果随着2型糖尿病患者尿白蛋白水平升高,血清CERP、SF、FGF-23水平升高,而α-Klotho水平降低(P<0.05);白蛋白尿进展的2型糖尿病患者的糖尿病病程长于未进展的2型糖尿病患者,其二甲双胍及SGLT2抑制剂(SGLT2i)使用比例、α-Klotho水平均低于未进展的2型糖尿病患者,其高血压比例、FBG、UA、CERP、SF、FGF-23水平均高于未进展的2型糖尿病患者,差异有统计学意义(P<0.05);logistic回归分析显示CERP、SF、FGF-23水平升高是白蛋白尿进展的危险因素,而使用二甲双胍及SGLT2i以及α-Klotho水平的升高均是白蛋白尿进展的保护因素;ROC曲线分析显示首次住院时血清CERP、SF、α-Klotho、FGF-23的水平对白蛋白尿进展具有预测价值,logistic回归方程的联合指标预测尿白蛋白的灵敏度和特异性均优于单一指标。结论血清CERP、SF、FGF-23水平的升高及α-Klotho水平的降低与2型糖尿病患者中白蛋白尿进展有关,检测4项血清指标对白蛋白尿进展具有预测价值。

慢性肾脏病3~5期患者病情程度与α-Klotho、FGF23及钙、磷相关性研究

目的探讨慢性肾脏病(CKD)3~5期患者α-Klotho、成纤维细胞生长因子23(FGF23)和钙磷水平的变化情况及CKD病情与α-Klotho、FGF23和钙磷代谢水平的相关性。方法选择2018年6—12月在湖北省中医院肾病科就诊的CKD 3~5期患者20例作为CKD组,另选择22名健康人作为正常组。检测两组血清中α-Klotho、FGF23、甲状旁腺激素(PTH)、估算肾小球滤过率(eGFR)和钙、磷水平变化。结果CKD组血清磷、PTH及FGF23水平高于正常组,钙及α-Klotho、eGFR水平低于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。与CKD3期比较,CKD4期及5期患者血清钙、α-Klotho、eGFR水平降低,而磷、FGF23、PTH升高,差异有统计学意义(P<0.05)。CKD3~5期患者病情程度与磷、PTH、FGF23与呈正相关(r=0.706、0.963、0.915,P<0.05),与钙、eGFR、α-klotho呈负相关(r=-0.821、-0.865、-0.718,P<0.05)。结论CKD 3~5期患者骨矿物质代谢紊乱逐渐加重,且病情程度与α-Klotho、FGF23、钙磷水平有密切相关性。

血液透析患者血清25-羟维生素D与α-Klotho及主动脉弓钙化的关系

目的 评价血液透析(hemodialysis,HD)患者血25羟维生素D[25-hydroxyvitamin D,25 (OH)D]和α-Klotho的相关性及二者在血管钙化中的角色.方法 选择北京友谊医院血液净化中心中心HD患者152例;周中透析日抽取透析前空腹血,采用全自动电化学发光免疫分析仪检测血清25 (OH)D及全段甲状旁腺激素(intact parathormone,iPTH)水平;夹心酶联免疫吸附法测定血清α-K]otho水平.后前位胸部X线摄片评估主动脉弓钙化程度.结果 患者血清25 (OH)D的平均水平为(19.97±8.30) ng/ml;维生素D缺乏的罹患率为69.7%(n=106).血清α-Klotho的平均浓度为(421.69±185.28)pg/ml.89例患者(58.6%)存在主动脉弓钙化.维生素D缺乏组患者女性更多、血清α-Klotho水平更低(x2/t值分别为9.660,-2.308;P值分别为0.006,0.022);主动脉弓钙化罹患率趋向于更高,但未达统计学差异(x2=3.127,P=0.077).多元逐步回归分析显示血清25 (OH)D与α-Klotho水平独立相关(P=-0.022).Logistic回归分析显示年龄和血清25 (OH)D是主动脉弓钙化的独立危险因素(95% CI值分别为1.069~1.163,0.901~0.998;0R值分别为1.115,0.948;P值分别为<0.001,0.041).结论 维生素D缺乏在HD患者中非常多见,是循环α-Klotho及主动脉弓钙化的独立危险因素.

高糖下调小鼠永生性MPC5肾小球足细胞α-Klotho水平

目的研究α-Klotho在小鼠永生性MPC5肾小球足细胞系中的表达及高糖刺激下α-Klotho的水平变化。方法采用30 mmol/L葡萄糖刺激MPC5足细胞,与空白组及高渗对照组比较,反转录PCR检测MPC5足细胞α-Klotho mRNA水平,Western blot法和免疫荧光细胞化学染色检测MPC5足细胞α-Klotho蛋白的水平和定位。结果免疫荧光细胞化学染色结果显示,空白组及高渗对照组细胞α-Klotho表达丰富,模型组α-Klotho表达极少。正常足细胞α-Klotho mRNA和蛋白高表达,高糖作用后24、48 h后,足细胞α-Klotho mRNA和蛋白水平较正常组显著降低,与24 h模型组相比,高糖作用48 h的足细胞α-Klotho mRNA和蛋白水平也显著降低。结论 MPC5足细胞中α-Kloth存在一定量的表达,葡萄糖可下调足细胞α-Klotho水平。

α-Klotho在肾性甲状旁腺功能亢进患者甲状旁腺组织中表达的研究

目的探讨甲状旁腺α-Klotho蛋白在肾性甲状旁腺功能亢进发生、发展中的作用。方法入选14例因尿毒症伴甲状旁腺功能亢进而在中日友好医院行甲状旁腺切除术的患者,并收集增生的甲状旁腺50枚;5例甲状腺癌患者因甲状腺手术而连带切除的甲状旁腺5枚作为对照组。用免疫组织化学染色法检测甲状旁腺α-Klotho蛋白的表达水平。结果与正常甲状旁腺相比,增生的甲状旁腺α-Klotho蛋白表达显著减少(30.3%VS 9.9%),且随着甲状旁腺病理程度的进展而进一步下降(弥漫性增生12.2%,结节性增生10.1%,腺瘤样增生8.2%)。结论尿毒症患者增生的甲状旁腺α-Klotho蛋白表达明显减少,可能在肾性继发性甲状旁腺功能亢进的发生、发展过程中起重要作用。

α-Klotho蛋白、FGF-23与糖尿病肾脏病进展相关性临床研究

目的:探讨α-Klotho蛋白、FGF-23与糖尿病肾脏病进展相关性。方法:收集2016年04月~2018年05月就诊于北京中医药大学东直门医院等多家肾病中心的糖尿病肾脏病患者,共计127例病例,收集一般临床资料,进行肾功能、血脂等相关检查。依据DKD诊断依据及Mogensen分期等标准,分为三组(早期、中期、晚期),并检测了各组的血清α-Klotho蛋白、FGF-23水平。结果:α-Klotho蛋白在早、中、晚期三组中依次降低,早期和晚期组间差异存在统计学意义(P=0.035);FGF-23在早、中、晚期三组中依次升高,且三组间差异存在统计学意义(P=0.000)。采用Spearman相关分析,eGFR与α-Klotho蛋白存在正相关(r=0.237,P=0.008),eGFR与FGF-23存在负相关(r=-0.605,P=0.000)。24 h尿蛋白定量与FGF-23存在正相关(r=0.552,P=0.000)。结论:Klotho和FGF-23与糖尿病肾脏病的进展相关,有可能成为糖尿病肾脏病疗效评价的生物学标志物之一。

促红细胞生成素通过上调α-Klotho减轻大鼠血管平滑肌细胞钙化

目的 观察促红细胞生成素(EPO)对钙化血管平滑肌细胞(VSMCs)中α-Klotho蛋白表达的影响,研究α-Klotho在EPO减轻血管钙化中的作用。方法 采用高磷刺激大鼠VSMCs钙化,实时聚合酶链反应检测钙化相关基因的表达变化,von Kossa染色和钙含量检测钙化情况,应用siRNA技术敲低VSMCs中α-Klotho的表达,Western blotting检测VSMCs中α-Klotho的蛋白表达。结果 与高磷刺激的钙化模型组相比,EPO下调了钙化VSMCs中骨钙素和Cbfα-1的mRNA水平(P <0.01),并减少了钙盐沉积和钙含量(P <0.01)。Western blotting结果发现,EPO可使钙化VSMCs中α-Klotho蛋白表达水平上调1.19倍(P <0.05)。敲低VSMCs中α-Klotho后,EPO抑制骨钙素和Cbfα-1 mRNA表达的作用下调。而且,α-Klotho敲低使EPO抑制钙盐沉积和钙含量的作用被阻断。结论 α-Klotho参与了EPO减轻VSMCs钙化的作用,该实验结果为防治血管钙化提示了可能的干预靶点。

成纤维细胞生长因子-23和α-Klotho蛋白在慢性肾脏病中的作用

成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF-23)是一种重要的调磷因子,可以减少钠-磷共转运体NPT2a和NPT2c表达,增加尿磷的排泄;抑制1-α羟化酶(Cyp27b1)活性,刺激24-羟化酶(Cyp24α1)活性,减少血液中1,25(OH)2D3;减少甲状旁腺素(parathyroid hornone,PTH)分泌。α-Klotho蛋白是一种与抗衰老相关的单跨膜蛋白,膜型α-Klotho蛋白作为辅助因子与FGF受体(FGFR)组成聚合体,增强FGF-23与FGFR亲和力。分泌型α-Klotho蛋白不依赖于FGF-23而发挥作用,在近端小管细胞顶端膜区域通过聚糖酶修饰作用,促进Ca2+回吸收,灭活NPT2a和NPT2c,抑制磷重吸收。慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者伴随FGF-23水平升高和α-Klotho蛋白缺乏,FGF-23和α-Klotho蛋白有可能作为CKD预测和早期诊断的生物标志物之一。

Cys C、α-klotho蛋白、sICAM-1与糖尿病肾病的相关性

目的探讨胱抑素C(Cys C)、α-klotho蛋白、血清可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)与糖尿病肾病(DN)的相关性。方法选取160例2型糖尿病(T2DM)患者,依据尿白蛋白/肌酐比值(ACR)将患者分为单纯T2DM组(40例,ACR<30 mg/g)、早期DN组(60例,ACR为30~300 mg/g)、临床DN组(60例,ACR>300 mg/g)。以60名体检健康者作为正常对照组。检测所有对象的血清Cys C、α-klotho蛋白、sICAM-1水平及肾功能指标[肌酐(Cr)、尿酸(UA)、尿素氮(BUN)]。采用Pearson相关分析评估Cys C、α-klotho蛋白、sICAM-1与ACR的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各项指标判断T2DM患者早期肾损伤的效能。结果T2DM患者血清Cys C、sICAM-1、Cr、UA、BUN水平均高于正常对照组(P<0.05),血清α-klotho蛋白水平低于正常对照组(P<0.05)。血清Cys C、sICAM-1水平随着DN患者肾脏损伤的加重而升高(P<0.05),血清α-klotho蛋白水平随DN患者肾脏损伤的加重而降低(P<0.05)。Cys C、sICAM-1与ACR呈正相关(r值分别为0.562、0.613,P<0.05),α-klotho蛋白与ACR呈负相关(r=-0.702,P<0.05)。以ACR>30 mg/g作为判断T2DM患者早期肾损伤的标准。ROC曲线分析结果显示,Cys C、sICAM-1和α-klotho蛋白判断T2DM患者早期肾损伤的曲线下面积(AUC)分别为0.796、0.801、0.795,最佳临界值分别为1.39 mg/L、352.61 ng/mL、531.95 pg/mL,敏感性分别为73.75%、82.50%、75.00%,特异性分别为80.00%、68.33%、76.67%。结论Cys C、sICAM-1和α-klotho蛋白在判断T2DM患者早期肾损伤中有一定价值。

α-Klotho保护移植肾功能的研究进展

α-Klotho主要表达于近端肾小管上皮细胞,具有调节钙磷和维生素D代谢、抗炎、抗氧化、抗凋亡等多种生物学作用,特别是在改善肾脏缺血再灌注损伤和纤维化方面扮演着重要角色。近年来,α-Klotho在肾移植领域越来越受到关注,其血液和组织水平均被认为与移植肾功能直接相关,核因子κB和Wnt/β-Catenin等信号通路可能均有参与,一些干预性措施也应运而生。本文将对α-Klotho在肾移植领域中的研究进展进行全面综述,以期为改善移植肾功能并最终改善移植肾受者的预后提供新思路。

血清泛素-核糖体融合蛋白52联合α-klotho蛋白对早期糖尿病肾病的诊断价值

目的探讨血清泛素一核糖体融合蛋白52（UbA52）联合α-klotho蛋白测定对早期糖尿病肾病（DN）诊断的意义。方法选取2015年10月～2016年9月于我院住院的2型糖尿病（T2DM）患者77例，根据估算的肾小球滤过率（eGFR）并结合肾脏损害程度的Mogensen分级标准，将其分为单纯2型糖尿病组（T2DM组）35例和2型糖尿病早期肾病组（DN组）42例，另选取同期我院门诊体检的健康人群30例为对照组（NC组），检测各组的血清UbA52、d—klotho蛋白、24h尿微量白蛋白（mAlb）水平，计算eGFR并进行比较分析。结果T2DN组患者血清UbA52和24h尿mAlb水平明显高于NC组和T2DM组，且α-klotho蛋白和eGFR水平明显低于NC组和T2DM组（P〈0．05）。T2DN组患者血清UbA52与24h尿mAlb呈正相关（r=0．478，P〈0．05），与eGFR呈负相关（r=-0．529，P〈0．05）；α-klotho蛋白与24h尿mAlb呈负相关（r=-0．593，P〈0．05），与eGFR呈正相关（r=0．511，P〈0．05）。结论血清UbA52和α-klotho蛋白可能作为DN早期诊断的新标记物，对早期DN的发现和治疗有重要意义。

束缚应激对小鼠血浆α-klotho蛋白及肾脏α-klotho mRNA表达的影响

目的检测不同束缚应激条件下小鼠血浆皮质酮、α-klotho蛋白质量浓度及肾脏α-klotho mRNA表达的变化,分析α-klotho与束缚应激之间的关系,并探讨其在病态窦房结中可能的作用方式。方法本实验采用经典的束缚应激实验方法,运用血皮质酮浓度评估实验模型。将48只5周龄C57BL6/J小鼠分成1、10、20h组,每组设应激亚组和对照亚组,每亚组8只。运用ELISA方法测定血浆α-klotho蛋白和皮质酮浓度,实时定量PCR检测肾脏α-klotho mRNA表达的变化情况。结果束缚应激实验模型符合要求。1、10、20h对照亚组α-klotho蛋白质量浓度分别为(757.71±333.93)、(687.38±342.79)、(912.90±337.8)pg/mL;束缚应激亚组分别为(726.40±342.79)、(1 261.54±442.71)、(1 696.18±404.11)pg/mL。对照亚组各组之间质量浓度无统计学意义,但20h组较其他两组稍高。1h束缚应激亚组与对照亚组间无统计学差异,而10h与20h束缚应激亚组与其各自对照亚组间有统计学差异(P<0.05)。10h与20h束缚应激亚组肾脏α-klotho mRNA表达较空白对照亚组分别减低2.02倍和2.46倍。结论抗衰老基因α-klotho所表达的蛋白为急性期蛋白,束缚应激导致血α-klotho蛋白质量浓度升高的同时却减低肾脏α-klotho mRNA的表达;机体可能在应激条件下通过改变窦房结局部α-klotho蛋白质量浓度的方式,影响窦房结的功能。

急性心肌梗死与慢性稳定型心绞痛患者血清α-Klotho蛋白浓度对比分析

目的比较急性心肌梗死（AMI）和慢性稳定型心绞痛（CSA）患者血清α-Klotho蛋白浓度的差异。方法选择拟诊冠心病（CAD）准备行冠状动脉造影（CAG）的患者为研究对象。入院24 h内采集病史、生化数据、血清α-Klotho蛋白浓度。应用单因素、多因素分析急性心肌梗死组（n=84）与慢性稳定型心绞痛组（n=90）血清α-Klotho蛋白浓度的差异。结果急性心肌梗死组血清α-Klotho浓度低于慢性稳定型心绞痛组（903.19±558.13ng/L比1075.10±535.29 ng/L）,组间差异有统计学意义（P〈0.05）。Logistic回归分析显示,校正性别、年龄、吸烟史、饮酒史、早发冠心病家族史、高血压病病史、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDLC）、肌酐清除率、2型糖尿病病史后,血清α-Klotho蛋白浓度与急性心肌梗死呈负相关（OR=0.995,95%CI为0.993~0.997,P〈0.05）。结论慢性稳定型心绞痛患者血清α-Klotho蛋白浓度高于急性心肌梗死患者。血清α-Klotho蛋白浓度与急性心肌梗死呈负相关。

2型糖尿病肾脏病患者血清长正五聚蛋白3和α-klotho蛋白水平的变化及意义

目的探讨2型糖尿病肾脏病患者血清长正五聚蛋白3(Ptx3)和α-klotho蛋白水平的变化及意义。方法选取2016年11月至2018年11月保定市第一中心医院内分泌科收治的2型糖尿病患者174例及同期于本院体检的55例健康人群(NC组)作为研究对象,依据WHO推荐的糖尿病肾脏病分期标准,按照尿白蛋白/肌酐比值(UACR)将2型糖尿病患者分为3个亚组:正常白蛋白尿组(DM组)60例;微量白蛋白尿组(DKD1组)61例;大量白蛋白尿组(DKD2组)53例。应用酶联免疫吸附法测定并比较各组研究对象Ptx3和α-klotho蛋白水平。采用Spearman相关分析影响Ptx3和α-klotho蛋白的相关因素,多元线性回归分析评估两者的独立影响因素,绘制受试者工作曲线(ROC曲线)评估两者对糖尿病肾脏病的诊断价值。结果各组研究对象血清Ptx3浓度比较结果显示,3组2型糖尿病患者的Ptx3水平均高于NC组,其中以DKD2组最高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。α-klotho蛋白浓度比较结果显示,DM组α-klotho蛋白水平低于NC组,DKD1和DKD2组α-klotho蛋白水平低于DM组,且以DKD2组最低,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,血清Ptx3水平与糖尿病病程、血肌酐(sCr)、尿素氮(BUN)、空腹静脉血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、尿白蛋白(UALB)、尿白蛋白排泄率(UAER)、UACR及24 h尿蛋白等呈正相关(r=0.152,0.287,0.312,0.543,0.609,0.492,0.549,0.588,0.619,0.422,P均<0.05),与肾小球滤过率(eGFR)、清蛋白(ALB)及α-klotho蛋白呈负相关(r=-0.402,-0.541,-0.933,P均<0.05)。血清α-klotho蛋白水平与eGFR、总蛋白(TP)及ALB呈正相关(r=0.352,0.201,0.532,P均<0.05),与糖尿病病程、sCr、BUN、FBG、HbA1c、HOMA-IR、UACR、24 h尿蛋白、Ptx3等呈负相关(r=-0.156,-0.359,-0.318,-0.533,-0.621,-0.528,-0.872,-0.632,-0.933,P均<0.05)。多元线性回归分析显示UACR、eGFR为Ptx3和α-klotho蛋白的独立影响因素。ROC分析显示血清Ptx3及α-klotho蛋白的曲线下面积值分别为0.84、0.95,两者均对糖尿病肾脏病诊断提供帮助,且α-klotho蛋白较Ptx3具有更高的敏感度(Ptx3及α-klotho蛋白敏感度分别为67.5%、95.6%)。结论 2型糖尿病肾脏病患者随着病情的进展,Ptx3水平依次升高,α-klotho蛋白依次下降,两者互为彼此独立影响因素,可能为糖尿病肾脏病尽早筛查及治疗提供新思路。

α-klotho蛋白拮抗瘦素损伤小鼠足细胞的实验研究

目的:探讨瘦素对小鼠足细胞的损伤效应及α-klotho蛋白拮抗这一效应的可能。方法:小鼠足细胞分为三组,分别为空白对照组,瘦素刺激组(瘦素15 ng/ml),α-klotho干预组(α-klotho 0.1μg/ml及瘦素15 ng/ml)。mRNA检测采用实时定量PCR方法,蛋白质检测采用免疫印迹法。结果:瘦素能显著抑制足细胞标志蛋白podocin,nephrin,podocalyxin,podoplanin表达,与对照组比较,蛋白质表达的抑制率分别为24%、25%、25%和23%;mRNA表达的抑制率分别为42%、27%、39%、24%,P均<0.05。α-klotho干预后,上述足细胞标志蛋白均被上调,与瘦素组比较,蛋白质表达分别上调1.36、1.25、1.29和1.22倍;mRNA表达分别上调1.77、1.48、1.66、1.26倍,P均<0.05。此外,瘦素能显著活化Wnt/β-catenin信号通路,与对照组比较,Wnt2b、Wnt5a、Wnt6、Wnt7a的mRNA表达分别上调2.06、1.72、2.14、1.59倍,P<0.05;β-catenin的蛋白磷酸化水平抑制率为26%,P<0.05。α-klotho干预后,上述信号通路分子均被抑制,与瘦素组比较,Wnt2b、Wnt5a、Wnt6、Wnt7a的mRNA表达抑制率分别为42%、28%、43%、30%,P均<0.05,磷酸化的β-catenin上调1.27倍,P<0.05。结论:瘦素可能通过Wnt/β-catenin信号通路损伤足细胞,而α-klotho可逆转足细胞损伤,其机制可能与抑制瘦素的作用有关。

“益气养阴通络法”通过调控α-klotho延缓DKD进展的研究

目的:观察"益气养阴通络法"在糖尿病肾脏病(DKD)中作用并探讨其可能机制。方法:回顾性筛选整理DKDⅢ或Ⅳ期,病程半年以上患者56例,其中接受基础治疗29例,基础治疗联合"益气养阴通络法"治疗7例;同时选择肾活检诊断为肾脏轻微病变的患者21例作为非DKD对照组,检测患者血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量以及血清α-klotho,尿液KIM-1、NGAL水平;冻干粉干预糖基化终末产物刺激的原代肾小管上皮细胞,观察上述疗效学指标。结果:"益气养阴通络法"联合基础治疗可有效降低24 h蛋白尿水平(P <0. 05)。而且与基础治疗组相比,"益气养阴通络法"联合基础治疗组血肌酐、尿素氮水平亦有下降趋势。基础治疗组α-klotho蛋白水平明显低于对照组(P <0. 01),益气养阴通络组α-klotho水平相比DKD组明显上调(P <0. 05)。体外实验也发现,"益气养阴通络法"处方含药血清可改糖尿病肾病致病因素所致肾小管上皮细胞损伤。结论:"益气养阴通络法"可延缓DKD进展,很可能与其调控α-klotho有密切关系。