阿托伐他汀对兔动脉粥样硬化的作用及其机制

目的：观察阿托伐他汀对动脉粥样硬化（AS）早期病变的作用。方法：雄性新西兰白兔随机分为正常对照组（正常饮食）、动脉粥样硬化组（高脂饮食）和阿托伐他汀组,10周后测定血清中血脂、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）及白介素-10（IL-10）水平,H-E染色测定胸主动脉内膜及中膜厚度,免疫组织化学法测定胸主动脉环氧化酶2（COX-2）、氧化低密度脂蛋白受体1（LOX-1）及α肌动蛋白（α-actin）的表达。结果：高脂饮食后兔血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）,低密度脂蛋白胆固醇（ox-LDL）浓度升高,胸主动脉形成典型脂质条纹。与动脉粥样硬化组相比,阿托伐他汀组血清血脂、ox-LDL、 TNF-α、 CRP水平降低,IL-10水平则增高。胸主动脉内膜厚度和内膜/中膜厚度比下降,主动脉COX-2、 LOX-1、 α-actin的表达降低。结论：阿托伐他汀通过抑制血管炎症反应及平滑肌细胞增殖、降脂等多环节抑制动脉粥样硬化斑块的早期形成。

1,25-二羟维生素D_3抑制慢性哮喘模型小鼠肺组织 α-平滑肌肌动蛋白的表达及气道重塑

目的:探讨1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对慢性哮喘模型小鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达及气道重塑的影响。方法:卵白蛋白致敏激发建立慢性哮喘小鼠模型,将小鼠随机分为对照组、哮喘组及VD组。HE染色及天狼星红染色观察各组气道结构及上皮下纤维化,并用计算机图像分析系统评价各组气道重塑;Western blot法及实时荧光定量PCR法检测各组的α-SMA表达。结果:(1)哮喘组出现炎性细胞浸润增多、上皮细胞脱落、上皮下纤维化及平滑肌细胞层增厚等气道重塑的结构改变,而1,25-(OH)2D3的干预可有效减轻上述病理改变;(2)VD组肺组织α-SMA的mRNA及蛋白表达水平均显著低于哮喘组,但仍高于对照组(P<0.05)。结论:1,25-(OH)2D3能降低哮喘小鼠肺组织α-SMA的表达并有效抑制哮喘气道重塑。

人类α-actin启动子真核表达载体的构建

目的利用PCR技术克隆了人类-αactin基因的启动子(约450 bp)。方法将PCR产物连接到pMD-18T载体上,酶切鉴定后测序,并进行软件分析。结果与结论序列分析表明,扩增片段虽然与GenBank里登陆的序列同源性仅为72%,但包含有完整的启动子元件和转录专一调节因子相应的识别序列。用去掉启动子的pEGFP-N1作为框架结构,尝试构建真核表达载体,并获得了含人类心肌-αactin启动子的真核表达载体pEGFP-N1--αactin-P。

益肾保真方对慢性肾衰竭大鼠肾纤维化干预作用的实验研究

目的探讨益肾保真方对慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾纤维化的干预作用及其机制。方法采用两步分肾切除法复制5/6肾切除大鼠慢性肾衰竭模型,随机分为假手术组、模型组、益肾保真方高剂量组、益肾保真方低剂量组及尿毒清组。各组均干预6周,观察大鼠的血肌酐、尿素氮、尿蛋白定量及肾组织病理变化情况,检测肾小球硬化指数、肾组织Ⅳ型胶原含量及结缔组织生长因子(CTGF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果与模型组比较,益肾保真方组尿蛋白、血肌酐、尿素氮、肾组织IV型胶原含量均显著降低,与尿毒清组比较差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,益肾保真方组大鼠肾小球硬化指数降低,肾组织CTGF、α-SMA表达下调,与尿毒清组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论益肾保真方能延缓肾衰竭进展,干预肾纤维化进程,其机制可能与下调肾组织CTGF、α-SMA的表达,抑制肾脏固有细胞的转分化,从而减少细胞外基质成分的合成和积聚有关。

肝纤维化大鼠肝脏血管紧张素Ⅱ受体1型的表达及其与α-平滑肌肌动蛋白表达相关性研究

目的了解血管紧张素Ⅱ受体1型(angiotensinⅡtype 1receptor,AT1R)在肝纤维化大鼠肝脏的表达及其与胶原纤维含量和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的关系。方法将30只SD大鼠随机分成正常组(n=10)和肝纤维化组(n=20)。正常组正常饲养,肝纤维化组给予40%四氯化碳(CCL4)橄榄油0.4mL/100g体质量背部皮下注射,每3d注射1次,第5w末处死两组大鼠,肝组织制备成石蜡切片后进行Masson三色染色、AT1R和α-SMA免疫组织化学染色,采集图片后用image pro plus 6.0软件对阳性表达进行累计光密度测定。对所得数据进行相关和回归分析。结果 AT1R在正常组大鼠肝脏不表达或血管周围弱表达,在肝纤维化组肝脏汇管区周围和纤维间隔周围大量表达,其主要在肝细胞浆和(或)膜表达,肝星状细胞未见表达;半定量测定及相关分析结果显示,α-SMA与胶原纤维、AT1R与胶原纤维、AT1R与α-SMA的相关系数分别为0.958、0.971、0.990(P<0.01)。结论 AT1R在肝纤维化大鼠肝细胞大量表达,在肝星状细胞不表达,AT1R的含量与胶原纤维含量、α-SMA表达量存在正相关性。

细胞增殖与凋亡在单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化发病中的意义

目的 了解细胞增殖与凋亡在肾小管间质纤维化中的意义。方法动态观察单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型中梗阻侧肾脏及假手术组肾脏肾小管细胞及间质细胞的增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达及细胞凋亡情况，以及间质α平滑肌肌动蛋白（α-ＳMＡ）表达水平。结果ＵU０大鼠梗阻肾从第３天至第１１天 ，均可见较大量的细胞凋亡，以肾小管上皮细胞居多，其中亦有间质细胞。无论紧小管或间质细胞，ＰＣＮＡ的表达在第３天已达高峰，随后下降。尽管肾小管、间质细胞的增殖与凋亡水平有一过性升高，但肾小管上皮细胞增殖／凋指数最终降至低于正常，而间质细胞的该指数则一直高于正常。这与间质。α－ＳＭＡ的大量表达和肾间质容量不断增加的病理改变一致．结论 细胞的增殖与凋亡参与ＵＵＯ大鼠模型肾间质纤维化过程，是这一过程的两个重要参数。

两种植物雌激素对5／6肾切除鼠残余肾组织α-平滑肌肌动蛋白沉积的影响及机制探讨

目的探讨金雀异黄素、大豆黄素2种主要的植物雌激素对5／6肾切除鼠残余肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α—smooth muscle aetin，α—SMA）沉积的影响及其机制。方法32只鼠作5／6肾切除，将术后2周存活的27只鼠分为金雀异黄素组（9只）、大豆黄素组（10只）和对照组（8只），另有8只为假手术组。检测各组术前、术后第4、8周生化指标，观察第8周。肾组织的病理改变情况，应用免疫组化法检测肾组织中α—SMA的沉积情况，采用RT—PCR法和Western Blot法检测肾组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA转录以及蛋白质表达情况。结果与对照组相比，金雀异黄素组和大豆黄素组尿蛋白排泄量明显减少，血肌酐、尿素氮水平下降（P〈0．01），肾小球硬化程度明显减轻，肾小球内α-SMA沉积显著减少，TGF-β1 mRNA及其蛋白质表达明显减弱（P〈0．05）。结论金雀异黄素和大豆黄素可以降低5／6肾切除鼠残肾组织α—SMA的沉积，原因可能与抑制TGF-β1的表达有关。