Analysis of α-amylase Inhibitor Content Change in Pu-erh Tea During Pile-fermentation Process

The study was to investigate the changes of α-amylase inhibitor content in Pu-erh tea during pile-fermentation process. Pu-erh tea samples from two regions of Shuangjiang County and Jinggu Dai and Yi Autonomous County of Yunnan Province at various fermentation stages were used as experimental materials to investigate the effect of different fermentation stages on the inhibitory effect to α-amylase; and the change law of the inhibitory effect of c-amylase inhibitor during processing was meanwhile studied by determining the contents of tea polyphenol and amino acid. The results showed that crude meterial of Pu-erh tea presented strong inhibitory effect to α-amylase; this inhibitory effect assumed a de： creasing trend to the minimum at the middle stage of fermentation, whereafter it increased to some extent. Made tea also showed a strong inhibitory effect to α-amylase. During whole processing period, contents of tea polyphenol and amino acid generally assumed a remarkably decreasing trend. Our results provided references for further isolating co-amylase inhibitor from Pu-erh tea and discussing the mechanism of its health care function.

Comparisons of phaseolin type and α-amylase inhibitor in common bean(Phaseolus vulgaris L.)in China

The objective of this study was to characterize the phaseolin type and a-amylase(αAI) level in common bean(Phaseolus vidgaris L.) accessions deposited in the Chinese National Genebank.The 40 accessions sampled were common varieties originating in Asia,North America,South America,Europe,and Africa.No Inca(I-) phaseolin was observed in the accessions.Only four accessions contained Tendergreen(T-) phaseolin and the remaining36 contained Sanilac(S-) phaseolin.aAI proteins extracted from nine accessions showed higher a-amylase inhibitory activity than the control(Phase 2,IC_(50) = 0.65 μg).These common bean accessions have potential use as nutraceutical ingredients.

Synthesis and Characterization of Zinc Oxide and Zinc Oxide Doped with Chlorine Nanoparticles as Novel <i>α</i>-Amylase Inhibitors

In this study we used a chemical solution method from oxalic acid (OX. acid) and zinc acetate (ZnAc) to prepare Zinc Oxide nanoparticles (ZnONPs) and Zinc Oxide nanoparticles doped with Chlorine (Cl:ZnONPs). The characterizations (FTIR, X-ray, SEM, TEM) of ZnONPs and Cl:ZnONPs were determined. Amylase inhibitors of ZnONPs and Cl:ZnONPs also were determined. SEM indicated that the ZnONPs and Cl:ZnONPs have an average particle size of 46.65 - 74.64 nm. TEM images of the ZnONPs and Cl:ZnONPs showed the round shaped. Compounds b, d and e exhibited significant inhibitory activity against amylase enzyme (from 69.21 ± 1.44 to 76.32 ± 0.78), respectively, and were comparable with that of acarbose (86.32 ± 0.63) at 1000 μg, thereby, projecting ZnONPs and Cl:ZnONPs as α-amylase inhibitors.

Introducing New Peptide Extracts from Saccharomyces cerevisiae and Achatina achatina Fluids with Strong Inhibitory Activities on Human α-Amylase

This study aimed at exploring for new natural peptides with strong inhibitory capabilities on α-amylase, the main metabolic enzyme that regulates mellitus diabetes, in order to contribute in controlling this global pandemic. It has consisted in heat shock (to 60&deg;C, 70&deg;C, 80&deg;C, 90&deg;C and 100&deg;C for 10, 20 and 30 minutes) of crude proteins extracted from biomass and extracellular parts of Saccharomyces cerevisiae under cultivation, and from the digestive fluid of the giant snail Achatina achatina, and in-vitro assays of the resulting solutions, as effectors, in human α-amylase catalyzing reactions. The results showed that whatever the temperature and time of treatment, an increase (from 2.65 to 3.98-fold) in proteins concentration was noticed. When blended up to 75 microliters in reaction mixtures, the three peptide extracts showed beyond 11% of inhibition of initial α-amylase activity. By reducing samples volume, only 5 microliters of the studied peptide extracts representing 4.70 μg of S. cerevisiae biomass peptides, 0.55 μg of S. cerevisiae extracellular peptides or 1.05 μg of peptides from the digestive fluid A. achatina were quite sufficient to induce complete (100%) inhibition of the human α-amylase activity. Compared to the inhibitory effect obtained from 2.50 μg of acarbose, a renowned antidiabetic, the studied peptide effectors showed more pronounced inhibitory activities. So, we can positively state that S. cerevisiae as well as A. achatina are both capable of synthesizing proteins made up of small inhibitory peptides which deserve purification and structural analysis for potential exploitation as healthy antidiabetic drugs.

LuxS/AI-2型群体感应系统调控细菌生物被膜形成研究进展

生物被膜是大多数细菌在自然状态下的一种生长方式,使菌体具有浮游态时不具有的优势。它的形成和发展受到群体感应系统的调控,该系统是细菌依赖于群体密度而调控其生理行为的一种机制。其中Lux S/2型自诱导物(autoinducer 2,AI-2)群体感应系统又称种间群体感应系统,广泛存在于G^(+)及G^-菌中。其信号分子AI-2被认为是种间通用的信号分子,参与调控多种细菌的生物被膜。此外,目前已发现多种Lux S/AI-2型群体感应系统抑制剂,它们可以影响许多细菌生物被膜的形成。目前研究人员已开始致力于揭示Lux S/AI-2型群体感应系统调控生物被膜形成的分子机制,这对于进一步理解Lux S/AI-2型群体感应系统与生物被膜的关系具有重要意义。

海洋源乳酸菌AI-2类群体感应抑制剂对单增李斯特菌抑制效果研究

单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)AI-2类群体感应系统调控的生物被膜与毒力因子是导致其高致病率与高死亡率的主要原因。以测定报告菌哈维氏弧菌BB170的发光值作为筛选指标,对16株海洋源乳酸菌代谢产物中筛选L. m AI-2信号分子的群体感应抑制剂(QSIs),并通过测检QSIs对L. m的MIC值、生长曲线、动力形成、生物被膜形成量,评价QSIs对L. m的控制效应。结果表明:从16株海洋源乳酸菌中筛选到6株乳酸菌的乙酸乙酯提取物对L. m AI-2信号分子活性有良好的抑制作用,占筛选菌株的37.5%,且抑制率均达75%以上,其中菌株Pediococcus pentosaceus zy-B-1乙酸乙酯提取物QSI-B-1抑制率最高(98.5%),并对L. m作用的MIC值为250μg/mL,随着QSI-B-1浓度的增加,对L. m菌落生长与动力形成的抑制作用逐渐加强,形成的生物被膜结构愈加疏松。本研究为利用从海洋环境中筛选乳酸菌源L. m QSIs提供依据。

PPi对17℃保存猪稀释精液质量及AI水平的影响

为了研究无机焦磷酸盐（PPi）对17℃保存的猪稀释精液质量和精子顶体酶抑制剂（AI）水平的影响,试验选择2周岁长白猪精液分为4组,对照组精液保存液中不添加PPi,试验1组、试验2组、试验3组分别在精液保存液中添加10,50,100μmol/L的PPi,在17℃保存第1,2,3,4天采用精子质量分析仪（CASA）、考马斯亮蓝、低渗肿胀（HOST）法检测精子活率、顶体膜及质膜完整性,采用SDSPAGE及Western-blot法分析精子的AI水平。结果表明：保存2～4 d,试验2组、试验3组精子活率、顶体膜和质膜完整性均显著高于对照组和试验1组（P〈0. 05）;保存3～4 d,试验1组、试验2组精子的AI水平显著高于对照组（P〈0. 05）。说明在精液保存液中添加PPi能显著改善17℃保存猪稀释精液的质量。

Two alkaloids as α-amylase inhibitors: enzyme kinetics and molecular modeling investigations

In the present study, we studied the inhibitory effects of chelidonine and rutaecarpin on porcine pancreatic a-amylase （PPA） catalyzed hydrolysis using 2-chloro-4-nitrophenyl-4-O-β-D-galactopyranosylmaltoside （Gal-G2-α-CNP）. We, for the first time, provided kinetic report and detailed inhibitory effects of both compounds on PPA. Lineweaver-Burk plot revealed that the inhibition was a mixed-noncompetitive type, and only one molecule of inhibitor bound to the enzyme or to the enzyme-substrate complex. Kinetic constants calculated from secondary plots were in millimole range. Dissociation constants of enzyme-inhibitor complex （KEI） were 0.9 mM and 3.5 mM, respectively. Moreover, dissociation constants of enzyme-inhibitor-substrate complex （KESI） were 0.04 mM and 0.31 mM, respectively. These data indicated that the inhibition was more inclined to competitive to Gal-G2-α-CNP hydrolysis. Further molecular docking study manifested that hydrogen bonding formed between acarbose and aspartic acid （Asp300）, histidine （His305） and glycine （Gly3-6）, while hydrogen bonding was observed between chelidonine and glutamic acid （Glu233）, lysine （Lys200） and His305. In addition, rutaecarpine had only one hydrogen bond with Lys200. Our data indicated that chelidonine and rutaecarpine were two promising drug candidates, and chelidonine possessed stronger inhibitory effect compared with rutaecarpine.

芳香化酶抑制剂诱导乳腺癌患者关节痛风险预测模型的建立

目的:芳香化酶抑制剂诱导的关节痛(aromatase inhibitor-induced arthralgia,AIA)是接受芳香化酶抑制剂(aromatase inhibitors,AIs)治疗的不良反应。本研究旨在高海拔地区乳腺癌患者AIA的预测模型建立。方法:回顾性分析2021年6月至2023年10月就诊于青海大学附属医院315例接受AI治疗的乳腺癌患者,随机以7∶3的比例分配到训练集(220例)或验证集(95例),使用最小绝对收缩和选择算子(least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)回归进行变量选择,并进行7倍交叉验证,对训练集进行多变量Logistic回归分析,以确定AIA的独立危险因素,从而建立基于这些危险因素的列线图。使用校准图、受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线和决策曲线分析(decision curve analysis,DCA)评估模型的性能。结果:多因素Logistic回归分析确定了高海拔地区AIA的几个重要独立预测因子包括既往使用紫杉烷类化疗(OR=10.174,95%CI:2.008~62.69,P=0.008)、末次月经(last menstrual period,LMP)(OR=0.175,95%CI:0.052~0.494,P=0.002)、药物诱导的绝经(OR=3.834,95%CI:1.109~14.13,P=0.036)、分期(OR=10.423,95%CI:4.114~32.15,P<0.001)和心理因素(OR=25.108,95%CI:8.430~87.95,P<0.001)。该队列中AIA的发生率为58.41%,ROC曲线下面积值为0.971。结论:本研究建立了高海拔地区乳腺癌患者AIA的预测模型,识别危险因素有助于对发生AIA风险较高的患者进行个体化识别和早期干预治疗。

小麦α-淀粉酶抑制剂降血糖作用的实验研究

目的:研究从小麦中提取的α-淀粉酶抑制剂对糖尿病小鼠的影响。方法:四氧嘧啶性糖尿病小鼠灌胃给予α-淀粉酶抑制剂45 mg·kg-1,测定其淀粉耐量和糖耐量;四氧嘧啶性糖尿病小鼠灌胃给予α-淀粉酶抑制剂(5,15,45mg·kg-1),连续21 d后,测定血糖值和小肠内二糖酶活性。血清葡萄糖测定采用葡萄糖氧化酶法。结果:α-淀粉酶抑制剂能够增加四氧嘧啶性糖尿病小鼠的淀粉耐量而对其葡萄糖耐量没有影响;糖尿病小鼠灌服α-淀粉酶抑制剂45和15 mg·kg-1后,血糖值均明显低于模型组。α-淀粉酶抑制剂能有效抑制小鼠小肠内各肠段的麦芽糖酶和蔗糖酶活性。结论:小麦α-淀粉酶抑制剂对糖尿病小鼠有降血糖作用,其机制可能与抑制小肠内各肠段的麦芽糖酶和蔗糖酶活性有关。

芳香化酶抑制剂对暗纹东方鲀CYP19A、DMRT1基因表达及性腺分化的影响

采用组织学和分子生物学方法,研究了投喂芳香化酶抑制剂来曲唑(LE)后暗纹东方鲀(Takifugu obscures)初孵仔鱼CYP19A、DMRT1基因表达以及性腺的组织学变化,以期进一步了解P450芳香化酶(P450arom)在鱼类早期性别分化过程中的作用。RT-PCR结果显示,对照组样品CYP19A和DMRT1表达显示性二态,雌性表达CYP19A基因,雄性表达DMRT1基因。LE处理组在性别分化期间,雄性样品单一表达DMRT1,雌性样品则同时表达CYP19A和DMRT1。qRT-PCR结果显示:LE处理组雌性仔鱼CYP19A基因表达被显著抑;虽然在仔鱼出膜后22d(dph)的表达水平高于9 dph,但仅为同日对照组的2.11%。LE处理组雌性样品22 dph时DMRT1基因表达量上调,至150 dph时达对照组雄性水平。55 dph的性腺组织学结果表明,LE处理可导致暗纹东方鲀稚鱼原始卵巢退化,并向功能性精巢发育。150 dph的LE处理组性腺均为精巢,并与对照组精巢发育同步。结论认为,暗纹东方鲀性腺分化期间P450arom是卵巢形成和维持发育所必须的,抑制P450arom活性可导致雌性暗纹东方鲀发生雄性化逆转。

具有α-淀粉酶抑制活性的白芸豆多肽的制备及其热稳定性研究

以白芸豆为原料,酶法制备多肽。以α-淀粉酶抑制率为指标,比较酸性、中性和碱性蛋白酶的酶解效果。结果表明：3.350酸性蛋白酶的酶解效果最好。通过加酶量、酶解p H值、酶解温度和酶解时间的单因素试验和正交试验,得到制备白芸豆多肽的最佳工艺条件为：加酶量3 200 U/g、酶解p H 2.2、酶解温度55℃、酶解时间60 min,此条件下白芸豆多肽α-淀粉酶抑制率为80.82%。热稳定性研究表明,白芸豆多肽的热稳定性高于α-淀粉酶抑制剂（α-amylase inhibitor,α-AI）粗提液,该多肽在85、90℃条件下的α-淀粉酶抑制活性能保持更长时间。凝胶电泳分析表明白芸豆多肽的分子质量为7.53~9.09 ku。

芳香化酶抑制剂治疗乳腺癌的研究进展及临床评价

目的:介绍芳香化酶抑制剂的研究进展,评价其在乳腺癌治疗中的应用及临床价值。方法:查阅近期国内、外相关 文献进行整理、分析、总结。结果与结论:芳香化酶抑制剂用于绝经后晚期乳腺癌和早期乳腺癌术后辅助治疗的地位已经确 立。新一代芳香化酶抑制剂与早期芳香化酶抑制剂相比,其疗效和抑制作用均有显著差异,这与其临床疗效较好有一致性。

贝那普利联合缬沙坦治疗对老年糖尿病肾病血糖、血脂及肾功能的影响

【目的】探讨贝那普利、缬沙坦联合治疗老年糖尿病肾病（DN）的疗效及对患者血糖、血脂、肾功能的影响。【方法】98例老年DN患者随机分为两组。对照组在常规治疗基础上加用贝那普利，观察组在常规治疗基础上加用贝那普利和缬沙坦。比较治疗前、连续治疗6个月后患者血糖、血脂、肾功能等指标变化情况及药物不良反应发生率。【结果】两组治疗前各观察指标比较差异均无显著性（P〉0.05）；治疗6个月后两组空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2hPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、甘酰三油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）、尿白蛋白排泄率（UAER）、24h尿蛋白定量（24h Upro）、血肌酐（SCr）、血尿素氮（BUN）较治疗前均显著下降，而HDL-C则显著上升（均P〈0.05）；且观察组血脂、肾功能指标改善效果优于对照组（P〈0.05）；二组不良反应发生情况比较差异无显著性（P〉0.05）。【结论】贝那普利、缬沙坦联合治疗老年DN患者能提高临床疗效，获得更为理想的血糖、血脂、肾功能改善效果。

烟酸对冠心病患者外周血单核细胞环一磷酸腺苷与三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达的影响

目的以冠心病患者的外周血单核细胞为研究对象,观察烟酸对体外培养的单核细胞中环一磷酸腺苷及ATP结合盒转运体A1表达的影响,分析烟酸调节ATP结合盒转运体A1的表达与环一磷酸腺苷—蛋白激酶A途径的相关性。方法运用逆转录聚合酶链反应和Westernblot蛋白印迹分别检测ATP结合盒转运体A1mRNA与ATP结合盒转运体A1蛋白的表达,采用低pH值EIA法测定细胞内环磷酸腺苷水平。结果(1)各组外周血单核细胞中ATP结合盒转运体A1的表达及环一磷酸腺苷的水平在3h和48h的变化无明显差异(P>0.05);(2)冠心病高血脂患者单核细胞中ATP结合盒转运体A1的表达较正常人明显降低(P<0.05),而正常血脂组单核细胞中ATP结合盒转运体A1的表达较正常人无明显差异(P>0.05);(3)烟酸单独作用能明显增加冠心病人单核细胞中ATP结合盒转运体A1的表达(P<0.05),同时使单核细胞中环一磷酸腺苷的含量增加(P<0.05);(4)蛋白激酶A抑制剂Ro31-8220单独作用能明显降低冠心病人单核细胞中ATP结合盒转运体A1的表达(P<0.05),同时使单核细胞中环—磷酸腺苷的含量降低(P<0.05);(5)先用Ro31-8220作用30min后,再加入烟酸,则烟酸使单核细胞中ATP结合盒转运体A1表达上调及环一磷酸腺苷的含量增加的作用被完全抑制(P<0.05)。结论烟酸对单核细胞中ATP结合盒转运体A1表达的影响,是通过环一磷酸腺苷-蛋白激酶A途径发挥作用的,烟酸上调外周血单核细胞中ATP结合盒转运体A1表达的作用,与环一磷酸腺苷—蛋白激酶A途径存在明确的相关性。

芳香化酶抑制剂于乳腺癌新辅助治疗最新进展

随着临床工作者对患者生活质量的关注,术前新辅助内分泌治疗被应用于晚期乳腺癌患者。大量临床试验证明在新辅助内分泌治疗中芳香化酶抑制剂(Aromatase inhibitors,AIs)应用于激素受体阳性乳腺癌患者可提高客观缓解率(Objective response,OR)和保乳手术率(Breast concerving rate,BCR),尤其在HER-2+和Ki-67+对TAM和化疗新辅助治疗可能存在抵抗时。AIs应用于新辅助治疗最佳治疗期限仍未确定,然而治疗延长至4个月以上时部分患者也取得良好疗效。最新研究表明AIs与COX-2抑制剂(COX-2 inhibitors,COX-2 I)或信号转导阻滞剂(Signal transduction inhibitors,STI)联合应用于新辅助内分泌治疗可以改善AIs耐药的情况。然而AIs应用于新辅助内分泌治疗仍需要临床工作者进一步的探索以取得其最佳的治疗效果。

鼠李糖乳杆菌MS1对副溶血弧菌群体感应淬灭作用的研究

从发酵食品中筛选并研究对副溶血弧菌群体感应和生物被膜形成具有抑制作用的乳酸菌菌株。采用哈维氏弧菌BB170生物发光法筛选出7株对副溶血弧菌群体感应淬灭活性较强的乳酸菌菌株,其中鼠李糖乳杆菌MS1菌株的乙酸乙酯提取物(MS1-QSI)的淬灭效果较好,抑制率达69.54%。在亚抑菌浓度下,MS1-QSI对副溶血弧菌群体感应信号分子AI-2活性、鞭毛运动(群集和泳动)、胞外多糖合成、生物被膜形成均有抑制作用,并表现出浓度依赖性。光学显微镜、场发射扫描电镜以及激光共聚焦显微镜的观察结果亦证实了MS1-QSI对生物被膜的抑制作用。该研究表明鼠李糖乳杆菌MS1对副溶血弧菌有良好的群体感应淬灭活性,为开发一种新型的乳酸菌生物制剂提供理论基础。

有氧运动联合抗阻训练对接受芳香化酶抑制剂治疗的绝经后乳腺癌患者生活质量的影响

目的评估有氧运动联合抗阻训练项目对接受芳香化酶抑制剂(AI)治疗的绝经后乳腺癌幸存者生活质量的影响。方法招募36例接受AI治疗的绝经后乳腺癌幸存者,随机分为试验组和对照组。试验组进行为期3个月的有氧运动和抗阻训练,对照组仅进行日常中等强度的身体活动。分别于干预前和预后1个月、2个月和3个月采用36项健康调查简表(SF-36)、欧洲癌症研究与治疗组织生命质量核心量表(EORTC QLQ-C30)和乳腺癌生存质量测定量表(EORTC QLQ-BR23)评价患者的生活质量。采用一般线性混合模型、双因素方差分析比较干预方式对试验组和对照组在干预1个月、2个月和3个月后的生活质量的影响。结果使用SF-36问卷测量的结果显示,具有组别×时间交互作用的条目有:一般健康感知、生理功能、身体健康、社会功能、躯体疼痛、活力(P<0.05或P<0.001)。试验组在几乎所有的变量方面都有显著改善(Cohen′s d>0.8)。EORTC QLQ-C30量表的功能领域,试验组的角色功能变量的组别×时间的交互作用显著(P=0.008),时间效应(P<0.001)和组别效应差异也有统计学意义(P=0.022)。除认知功能的效应量Cohen′d较低(<0.5)外,其他所有变量的效应量均较高(>0.8)。在EORTC QLQ-C30量表的症状领域,疼痛、疲劳和睡眠障碍方面存在显著的组别×时间交互作用(P<0.05或P<0.001)。试验组的效应量较高的是疼痛和疲劳(Cohen′d>0.8)。EORTC QLQ-BR23量表评估的结果中,试验组身体形象的组别×时间的交互作用有显著性差异(P=0.012),主要受时间(P=0.001)和组间差异的影响(P=0.007),且效应量得到显著的提高(Cohen′d>0.8)。结论联合抗阻和有氧运动的训练可使接受AI治疗的绝经后乳腺癌幸存者的身体、心理和社会功能方面的生活质量得到较好的改善。运动项目可作为减少乳腺癌患者AI治疗不良影响的策略之一。

谷物蛋白类α-淀粉酶抑制剂及其功能特性的研究进展

谷物是人类重要的食物,含有丰富的淀粉、蛋白质等营养物质,同时也是蛋白类α-淀粉酶抑制剂的良好来源。α-淀粉酶抑制剂(α-amylase inhibitor,α-AI)是一类具有抑制糖苷酶水解作用的物质,具有降血糖、降血脂、减肥及抗虫等作用,在医学与农业方面都有广泛的应用。该文对谷物中蛋白类α-AI的分离纯化、检测方法、功能特性等进行综述,并对其在食品及其它领域的应用前景进行展望。

血管生成抑制剂NM-3抑制胃癌生长机制研究

目的:研究血管生成抑制剂NM-3对胃癌生长的影响,探讨其抑制胃癌生长可能存在的分子机制。方法:建立人胃癌裸鼠皮下种植模型。将40只荷瘤裸鼠随机分成4组,种植后第2 d开始分别腹腔内注入生理盐水(2 ml/kg,对照组)、NM-3(剂量分别为10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg,治疗组),每周2次,共6周。第7周处死动物,测量皮下肿瘤体积、计算抑瘤率;取瘤组织行免疫组化染色测定微血管密度(MVD)、胃癌细胞凋亡指数(AI)。结果:NM-3剂量为10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg的皮下肿瘤体积分别为(915.46±39.66)mm3(、871.26±38.84)mm3(、812.27±32.59)mm3,明显低于生理盐水对照组(1 609.55±41.32)mm3(P<0.05),抑瘤率为43.20%、45.87%、49.53%;和生理盐水组比较,NM-3治疗后肿瘤的微血管密度明显减少,胃癌细胞的凋亡指数显著增加(P均<0.05),且与治疗剂量有关。结论:NM-3可通过抑制肿瘤微血管生成,诱导胃癌细胞凋亡,抑制体内人胃癌生长。