α2b-IFN诱导CD25表达和对PBMC内HCV RNA的阴转作用

目的探讨α2b-IFN对PBMC内CD25的诱导及对HCV-RNA、抗-HCV转阴效果。方法用BSA法检测慢性丙肝患者治疗前后CD25表达水平。以α2b-IFN（3MU／d）治疗3个月为一疗程，共2个疗程，于治疗前后分别检测患者PBMC内HCV-RNA和血清HCV-RNA、抗-HCV。结果慢性丙肝患者α2b-IFN治疗后静息期、诱导期CD25表达水平分别为（3．44±0．77）％、（33．62±3．95）％，PBMC、血清内HCV-RNA和抗-HCV转阴率分别为42．31％（11／26）、57．69％（15／26）和65．38％（17／26），与对照相比差异有显著性（P〈0．01～P〈0．05）。结论α2b—IFN可诱导CD25表达，对PBMC内HCV-RNA具有肯定的治疗作用，其疗效优于常规治疗。

基因工程人干扰素α2b和α2a亚型抗病毒效应的实验研究

本文采用鸡胚接种法和微量细胞病变抑制法研究了不同亚型α干扰素（α２ａＩＦＮ和α２ｂＩＦＮ）抗流感病毒、脊髓灰质炎病毒以及麻疹病毒的作用。结果表明：两种亚型α干扰素均显示明显的抗病毒效应，其中（１）α２ｂＩＦＮ抗流感病毒作用略强于α２ａＩＦＮ，（２）两亚型α干扰素抗脊髓灰质炎和麻疹病毒作用相似。

IFN-α2b对慢性乙肝患者抗病毒及免疫调节作用

目的探讨IFN-α2b对慢性乙肝患者抗病毒效果及对CD25的免疫调节作用。方法选择160例慢性乙肝患者(轻度93例,中度67例),随机分为IFN和常规治疗组,用生物素-链霉亲和素(BSA)法和Real-time PCR法分别动态检测PHA诱导前后CD25和CD25 mRNA的表达水平,PCR法动态检测患者治疗前后HBV-DNA水平。结果轻、中度组患者经干扰素治疗后,静息态和诱导态CD25表达水平逐渐升高,其CD25 mRNA含量亦升高。第3疗程后,轻、中度组中以干扰素治疗者CD25表达水平与同期常规治疗者相比,差异有显著性(P<0.05)。CD25 mRNA表达水平与CD25的表达具有平行性。IFN治疗者血清和PBMC内HBV-DNA阴转率均高于常规治疗者(P<0.05或P<0.01)。结论IFN-α2b对血清和PBMC内HBV-DNA均有较好阴转效果,阴转率明显高于常规治疗者。IFN-α2b可诱导T细胞活化,CD25表达水平增加,通过免疫调节发挥抗病毒作用。

干扰素-α2b对慢性髓系白血病抗血管生成作用的体外研究

本研究旨在应用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及K562细胞探讨干扰素-α2b在慢性髓系白血病(CML)中抗血管生成作用。用ELISA法检测K562细胞系培养上清液中VEGF和bFGF水平;应用real-time RT-PCR法检测103、102、10U/ml IFN-α2b作用K562细胞24、36、48小时VEGF、bFGF mRNA的表达;通过MTT法、Transwell室及体外微管形成实验研究K562细胞培养上清液及IFN-α2b对HUVEC增殖、迁移及体外分化的影响。结果表明:K562细胞系表达和分泌VEGF和bFGF,细胞培养上清液能明显促进HUVEC的增殖、迁移、体外微管形成,其作用随着细胞培养上清液浓度的增加而增强;IFN-α10U/ml作用K562细胞24、36、48小时,VEGF相对表达量为1.64±0.18、1.49±0.14、1.31±0.05,bFGF相对表达量分别为1.53±0.10、1.29±0.15、0.79±0.13(p=0.002),随着药物浓度增高,细胞VEGF、bFGF相对表达量无明显差异。结论:CML存在血管新生,K562细胞分泌和表达促血管新生因子VEGF和bFGF,促进HUVEC的增殖、迁移、体外微管形成,干扰素通过抑制HUVEC的增殖、迁移、微管形成,下调K562细胞VEGF和bFGF mRNA表达,具有一定程度的抗血管新生作用。

[H^+]对LAK细胞、rIL-2、IFN-α2b或联合ADM抗恶性肿瘤的影响

目的 调节细胞培养液pH值,观察不同pH值对LAK细胞的增值和rIL-2、IFN-α2b、LAK细胞杀伤恶性细胞的影响。方法 采用淋巴细胞分离液梯度离心法从正常人外周血分离单个核细胞并用rIL-2激活,于96孔细胞培养板或培养管中培养。应用细胞计数方法观察pH值分别为6.8、7.3、7.6的培养液,对rIL-2激活单个核细胞的影响。用7404细胞作为靶细胞、MTT法测定培养液pH值分别为6.8、7.3、7.6状态下rIL-2、IFN-α2b的杀伤作用,以及IFN--α2b对ADM(阿霉素)的增效作用和LAK细胞的细胞毒性作用。结果 pH值为7.3、7.6状态下,有利于LAK细胞增殖,pH值为7.6状态下rIL-2、IFN-α2b、LAK细胞杀伤效果最佳;pH值为6.8状态下几乎无杀伤作用。pH值为6.8、7.6都不利于7404细胞生长,pH值为7.6有利于LAK细胞生长。pH值为6.8、7.3、7.6时,IFN-α2b都能增加ADM抗肿瘤作用,但pH值为7.6时,IFN-α2b+ADM杀伤效果最佳。结论 在偏碱性环境下,有利于LAK细胞增殖,并且在此状态下LAK细胞和rIL-2、IFN-α2b、IFN-α2b+ADM对肿瘤细胞杀伤效果最佳。

聚乙二醇修饰干扰素α2b的分离纯化和制备

目的 建立聚乙二醇修饰干扰素 α2 b的分离纯化方法。方法 运用 Superdex75 Highload制备型凝胶色谱柱 ,以含 0 .1 5 mol/L Na Cl的 0 .0 1 mol/L磷酸盐缓冲液进行洗脱 ,流速为 1 .5 ml/min,检测波长为 2 1 5nm。结果 各洗脱组分经 SDS-PAGE检测呈单一条带。聚乙二醇修饰干扰素 α2 b的蛋白回收率为 3 6.5 % ,抗病毒活性回收率为 4 .3 % ,比活度为 4 .74× 1 0 7IU/mg,是原形干扰素 α2 b的 1 0 .4 %。结论 这种方法可以用于制备聚乙二醇修饰干扰素α2

干扰素-γ、干扰素-α2b联合应用诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡及机制

目的研究干扰素-γ、于扰素-α2b联合应用对MCF-7乳腺癌细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法流式细胞仪(FCM)检测处理后细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达情况。结果处理后凋亡细胞百分率及FasL的表达增加,随着处理时间的延长,表达有增加趋势,差异有统计学意义(P<0.05);Fas的表达无明显变化。结论干扰素-γ、干扰素-α2b联合应用可诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡,机制可能与上调FasL的表达,加强Fas/FasL之间的交联及使Fas/FasL通路敏感性增加有关。

绿色荧光蛋白α2b-干扰素融合蛋白的表达与活性研究

采用基因重组技术,构建原核表达质粒pET 32a(+)/GFP-α2b-IFN,转化大肠杆菌BL 21,以IPTG诱导融合蛋白的表达并用镍金属螯合层析柱进行纯化.SDS-PAGE及免疫印迹结果显示,46.0 kD的融合蛋白在大肠杆菌中得到了正确的表达,并具有α2b-IFN的抗原活性.受体结合实验表明,该融合蛋白能够与W ISH细胞上的干扰素受体特异性结合,并在激发光下呈亮绿色荧光.采用细胞病变法测定分离纯化的融合蛋白的抗病毒活性,比活力为1.0×107IU/m g.表达的GFP-α2b-IFN融合蛋白具有α2b-IFN的特性与荧光活性,为研究α2b-IFN受体功能以及IFN与细胞相互作用的机理奠定了基础.

IFN-α2b对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞内HBV-DNA阴转和对CD25的诱导作用

目的探讨IFNα2b对慢性乙型肝炎患者HBVDNA的治疗效果及对CD25的诱导作用。方法将患者分为A(66例)、B(44例)两组,分别采用IFNα2b和常规治疗,PCR法动态检测患者外周血单个核细胞(PBMC)内和血清中HBVDNA,生物素链霉亲和素(BSA)法检测CD25表达水平,实时(realtime)PCR法检测CD25mRNA含量,动态检测抗IFNIgG水平。结果IFNα2b治疗24、48周后,患者PBMC内、血清中HBVDNA和HBeAg阴转率分别为36.36%、39.39%、40.91%和42.42%、51.52%、53.03%,与常规组相比差异有显著性(P<0.05～P<0.01);干扰素治疗后,ALT、AST、ALT/AST水平分别为(33.4±12.6)U/ml、(34.3±10.7)U/ml、(0.9±0.2)U/ml,与常规组相比差异有显著性(P<0.01);慢性乙型肝炎患者静息态和诱导态CD25水平均降低,干扰素治疗后,静息态和诱导态CD25水平显著升高,其CD25mRNA含量亦同步升高,与常规组相比差异有显著性(P<0.01);IFNα2b治疗48周抗IFNIgG阳性率仅6.06%,与常规组相比差异无显著性(P>0.05)。结论IFNα2b对PBMC、血清HBVDNA和HBeAg均有较好阴转效果,阴转率明显高于常规疗法;IFNα2b可诱导慢性乙型肝炎患者表达CD25,促进T细胞活化发挥抗病毒作用;IFNα2b自身免疫原性较弱,治疗过程中诱导机体产生低水平的抗IFNIgG,对IFNα2b的抑制作用较弱。

突变和修饰IFN-α2b基因的5’和3’端对其在E.coli表达的调控作用

目的对人 IFN- α2 b基因进行突变和修饰 ,从翻译水平上调控 IFN- α2 b基因在大肠杆菌中的表达。方法采用PCR技术 ,人工合成寡核苷酸引物 ,对人 IFN- α2 b基因进行了改造 :在不改变氨基酸的前提下 ,将 5’端编码区的四个 G、C位点突变为 A、T;去除 3’端非编码区。将突变和修饰后的基因片段分别克隆入原核表达载体 p BV32 1,在大肠杆菌中进行表达。对表达产物进行活性效价测定。结果 3’端删除非编码区 ,表达水平比删除前提高 4倍 ;5’端四个位点突变 ,表达水平比突变前降低 2倍。结论 IFN-α2 b基因的 3’端非编码区抑制其在原核系统的表达 。

体内观察IFN-α2b对慢性乙肝患者CD25的免疫诱导作用

[目的]探讨在体内IFN-α2b(干扰素-α2b)对慢性乙肝患者CD25(白细胞分化抗原25)的免疫诱导作用及其抗病毒效果。[方法]采用临床试验将110例典型慢性乙肝患者根据病情分为轻度组(65例),中度组(45例),并给予IFN-α2b治疗3疗程(每疗程12周)。每疗程前后,应用生物素-链霉亲和素(BSA)法和RT-PCR法动态检测体外PHA诱导前后患者PBMC的CD25和CD25 mRNA的表达水平,PCR法动态检测患者外周血单个核细胞(PBMC)内和血清中HBV-DNA。[结果]轻度组和中度组患者经干扰素治疗后的静息态和诱导态CD25表达水平逐渐升高,其CD25 mRNA含量亦同步升高,但与正常对照组仍存在不同差异性(P﹤0.05或P﹤0.01)。IFN-α2b治疗36周后,患者PBMC内、血清中HBV-DNA和HBeAg阴转率两组分别为29(44.62%)、26(40.00%)、39(60.00%)和11(24.44%)、9(20.00%)、17(37.78%),差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]IFN-α2b可诱导慢性乙肝患者表达CD25,促进T细胞活化发挥抗病毒作用。此效果轻度组高于中度组,似与患者病情程度相关。

同位素法体内示踪HSA-IFN-α2b的方法学研究

采用氯胺-T法制备了^(125)I-HSA-IFN-α2b,标记率为82.7%,放化纯度>95%,放射性比活度为O.26 TBq/g。体外WISH/VSV系统抗病毒活性分析表明,^(125)I标记对HSA-IFN-β2b的生物学活性几乎无影响。^(125)I-HSA-IFN-α2b的血清和各组织的回收率分别为102.0%、104.0%(心脏)、100.4%(肺)、100.9% (肝)、104.1%(脾)、101.4%(肾)和103.0%(小肠),均符合方法学考核中回收率达90%～110%的要求。^(125)I-HSA-IFN-α2b的溶液干扰、血清样品干扰和组织样品干扰实验的结果表明,溶液、血清和组织样品对测定均无干扰,可以直接进行测定。根据实验结果可以初步推断,采用^(125)I-HSA-IFN-α2b同位素示踪法进行HSA-IFN-α2b的体内分布排泄研究是可行的。

干扰素对慢性乙肝患者CD25及mRNA表达影响

目的探讨干扰素(IFN-α2b)对慢性乙肝患者白细胞分化抗原(CD)25、CD25 mRNA表达水平的影响。方法选择典型慢性乙肝患者160例,其中慢性乙肝轻度93例,慢性乙肝中度67例,随机分为IFN和常规治疗亚组,以生物素-链霉亲和素(BSA)法和Real-time PCR法分别动态检测IFN-α2b治疗前后CD25和CD25 mRNA的表达水平。结果轻、中度组中以IFN治疗者的CD25表达水平逐渐升高,其CD25 mRNA含量亦同步升高。第3疗程后,以干扰素治疗者CD25表达水平与常规治疗者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CD25 mRNA表达水平与CD25的表达呈平行关系。结论慢性乙肝患者CD25、CD25 mRNA表达水平低,并与患者病情活跃程度有一定关系;IFN-α2b可诱导慢性乙肝患者表达CD25、CD25 mRNA,改善宿主免疫状况。

中国流行株HIV-1Gag与IFN-α2b重组质粒的构建与实验免疫研究

目的探讨中国流行株 ＨＩＶ－ １Ｇａｇ与 ＩＦＮ－ α２ｂ共表达重组核酸疫苗质粒的免疫效果。方法以 核酸疫苗质粒ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ为表达载体，构建重组核酸疫苗质粒ｐＩＲＥＳ１－Ｇａｇ、ｐＩＲＥＳ１－Ｇａｇ－ＩＦＮ，通过间接免疫荧光 试验、ＤｏｔＥＬＩＳＡ检测Ｃａｇ／ｈＩＬ－２／ｈＩＬ－６基因的表达产物。另将此重组核酸疫苗质粒免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，进行淋巴细 胞转化试验、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞数量测定、细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）特异性杀伤作用检测及血清抗体检测。 结果构建的重组质粒转染ＢＨＫ细胞后可表达目的基因，免疫小鼠后可有效地刺激淋巴细胞增殖，诱导特异性 ＣＴＬ反应，当和 ＩＦＮ－α２ｂ共表达时免疫效果更加显著。结论与 Ｇａｇ蛋白共表达的 ＩＦＮ－ａ２ｂ能够进一步提高细胞 免疫与体液免疫水平，构建的重组质粒为ＨＩＶ－１ＤＮＡ疫苗的研究奠定了一定实验基础。

丝裂霉素C加干扰素-α2b灌注预防膀胱癌术后复发

目的 寻求预防膀胱癌术后复发的有效方法。方法 对 62例膀胱癌行保留膀胱的手术治疗 ,术后应用丝裂霉素C加干扰素 -α2b进行膀胱灌注 ,并与同期作丝裂霉素C灌注者进行比较。结果 随访的 59例中复发 5例 ,复发率为 8.5% ,优于同期丝裂霉素C灌注的预防效果 ,而且并发症和副作用极少。结论 丝裂霉素C加干扰素 -α2b膀胱灌注预防膀胱癌术后复发疗效确实 ,毒副作用少 ,明显优于单用丝裂霉素C灌注。

重组人干扰素α2b雾化吸入治疗小儿手足口病的临床分析

目的分析探讨小儿手足口病采取重组人干扰素α2b雾化治疗的临床效果。方法选择2016年4月至2019年8月在泰兴市人民医院住院治疗的手足口病患儿共357例纳入研究,在获得患儿监护人同意的条件下,分为两组;对照组为2016年4月~2017年6月病例组,抗病毒方法为利巴韦林注射液静脉滴注,观察组为2017年7月~2019年8月病例组,抗病毒方法为重组人干扰素α2b雾化治疗。比较两组的临床疗效、退热时间及口腔疱疹消退时间。结果在退热、疱疹消失、溃疡愈合方面,观察组均明显比对照组快(P<0.05);在住院时间方面,观察组明显比对照组短(P<0.05)。在治疗总有效率方面,观察组与对照组分别为95.6%、73%;观察组治疗总有效率明显比对照组高,两组数据差异有统计学意义(x^2=12.349,P<0.05)。结论对于小儿手足口病患儿,采取重组人干扰素α2b雾化治疗效果显著,能够加快患儿退热、缩短疱疹消失以及口腔溃疡愈合时间,从而缩短患儿住院时间,值得在临床中采纳及应用。

重组人干扰素α-2b(假单胞菌)雾化吸入治疗儿童病毒性上呼吸道感染疗效观察

目的：观察α-2b型干扰素（假单胞菌）雾化吸入治疗病毒性上感儿童的临床疗效。方法：100例确诊为病毒性上呼吸道感染的患儿按就诊顺序分为观察组和对照组各50例。两组患儿均给予对症及支持治疗,观察组在此基础上给予注射用重组人干扰素α-2b（假单胞菌）15万IU·kg-1·d-1加0.9%氯化钠注射液2-4 ml雾化吸入给药,qd,每次5-10 min,对照组给予利巴韦林注射液10-15 mg·kg-1·d-1加5%葡萄糖注射液150 ml,ivd。两组均连续治疗5 d为1个疗程。比较治疗前后两组退热效果、感冒症状（包括咳嗽、卡他、全身症状）改善情况和临床有效率。结果：治疗后,观察组患儿退热疗效显著优于对照组（P〈0.05）;观察组患儿治疗后轻、中度咳嗽变化情况显著优于对照组（P〈0.01）;观察组热程、咳嗽消退时间、卡他症状消退时间和全身症状消退时间均显著优于对照组（P〈0.05）;观察组临床有效率达96.0%,显著高于对照组的84.0%（P〈0.05）。结论：在常规治疗基础上,雾化吸入α-2b干扰素治疗病毒性上呼吸道感染患儿效果显著,安全性高,值得在临床上推广使用。

保妇康栓联合干扰素α2b治疗子宫颈HPV感染患者的临床价值系统分析

目的:系统评价保妇康栓与干扰素α2b联合治疗和干扰素α2b治疗子宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染的临床效果,为子宫颈HPV感染患者提供临床治疗决策依据。方法:计算机检索The Cochrane Library、PubMed、Embase、Medline、中国知网(CNKI)、万方数据(WanFang Data)、维普(VIP)及中国生物医学(CBM)数据库(从建库至2021年12月),纳入以保妇康栓与干扰素α2b联合治疗和干扰素α2b单药治疗子宫颈HPV感染患者为研究对象的随机对照试验(RCT)及半随机对照试验(CCT),由2名研究者独立进行文献筛选、资料提取及文献偏倚风险评价后,再利用Cochrane手册对纳入的研究进行方法学质量的评价,用RevMan 5.4.1进行统计分析。结果:共纳入10个RCT,5个CCT,共1548例患者。经Meta分析后,保妇康栓与干扰素α2b联合治疗子宫颈HPV感染的总有效率优于干扰素α2b(OR=4.76,P<0.00001),保妇康栓与干扰素α2b联合治疗子宫颈HPV感染的总转阴率优于干扰素α2b(OR=2.08,P<0.00001)。结论:保妇康栓与干扰素α2b联合治疗子宫颈HPV感染有效率和HPV转阴率均优于干扰素α2b单药治疗,但由于纳入的研究文献质量不高,最终结果需要更多高质量的RCT的研究和验证。

重组人干扰素-α2b雾化吸入对小儿手足口病的疗效及其对炎症因子水平的影响

目的:评价重组人干扰素-α2b雾化吸入对小儿手足口病的疗效及其对炎症因子水平改善的影响。方法:选取2017年3月—2018年12月间收治的手足口病患儿160例资料,按治疗方法的不同将患儿分为观察组80例和对照组80例;对照组患儿给予利巴韦林治疗,观察组患儿则给予重组人干扰素-α2b雾化吸入治疗;比较两组患儿治疗后的总有效率差异,以及治疗前后炎症因子水平测得值的变化情况。结果:观察组患儿治疗后的总有效率(93.75%)高于对照组(82.50%)(P<0.05),临床症状(体温、皮疹)复常时间均早于对照组(P<0.05);治疗后IL-4、IL-6和WBC水平测得值明显低于对照组(P<0.05)。结论:采用重组人干扰素-α2b雾化吸入治疗小儿手足口病的疗效优于利巴韦林静脉滴注治疗,有效改善了炎症因子水平,促进了临床症状的复常。

慢性丙肝患者血清干扰素抗体检测及其临床意义

选择 94例慢性丙型病毒性肝炎 (慢性丙肝 )患者 ,采用 α2 b-干扰素 ( α2 b- IFN)治疗 ,动态检测其血清抗 - HCV、 HCV- RNA及α2 b- IFN- Ig G表达水平。结果显示α2 b- IFN治疗后抗 - HCV、 HCV- RNA阴转率分别为3 2 .98% ( 3 1/ 94)和 3 8.3 0 % ( 3 6/ 94) ,常规治疗组治疗后抗 - HCV、HCV- RNA阴转率分别为 10 .0 0 % ( 4/ 40 )和15 .0 0 % ( 6/ 40 ) ,两者相比差异有显著性 ( P<0 .0 1)。α2 b- IFN治疗后抗 - IFN- Ig G阳检率为 5 .3 2 % ( 5 / 94) ,与常规治疗组相比差异无显著性 ( P >0 .0 5 )。认为α2 b- IFN对抗 - HCV、 HCV- RNA阴转具有肯定疗效 ,且优于常规治疗 ,是治疗慢性丙肝的有效药物之一。α2 b- IFN虽有一定的免疫原性 ,但在治疗过程中仅诱导机体产生低水平的抗α2 b- IFN- Ig G,对 IFN-α2