Integrin α_5β_1及CD_(44V6)在卵巢上皮性肿瘤的表达及临床意义

目的:通过研究integrinα5β1及CD44V6在卵巢上皮性肿瘤中的表达,探讨各指标与卵巢癌淋巴结转移的关系。方法:用免疫组化ElivisionTM法检测80例卵巢上皮性肿瘤中integrinα5β1及CD44V6的表达。结果:integrinα5β1的表达按良性、交界性及恶性的顺序呈递减趋势,组间均有显著性差异(P<0.01);CD44V6的表达则呈递增趋势,组间有显著性差异(P<0.05);integrinα5β1淋巴结转移组与未转移组间表达有显著性差异(P<0.05);integrinα5β1与CD44V6的表达呈负相关。结论:integrinα5β1表达下降或缺失,CD44V6表达升高,提示肿瘤进展,恶性度高,预后不良;计算机图像分析系统对卵巢上皮性肿瘤的自动化诊断、淋巴结转移及预后评估有重要意义。

Integrinα_5β_1在卵巢上皮性肿瘤的表达及临床意义

目的通过研究integrinα5β1(整合素α5β1)在卵巢上皮性肿瘤中的表达,探讨其与卵巢癌淋巴结转移的关系。方法用免疫组化ElivisionTM法检测80例卵巢上皮性肿瘤中integrinα5β1的表达;运用图像分析系统进行定量检测。结果①定性及半定量结果integrinα5β1的表达按良性、交界性及恶性的顺序呈递减趋势,组间均有显著差异(P<0.01);integrinα5β1淋巴结转移组与未转移组间表达有显著差异(P<0.01)。②定量检测结果integrinα5β1表达的阳性细胞面积按良性、交界性、恶性的顺序呈递减趋势,灰度呈递增趋势。结论integrinα5β1的表达与肿瘤的侵袭、转移有关;integrinα5β1表达下降或缺失,提示肿瘤进展,恶性度高,预后不良;计算机图像分析系统为卵巢上皮性肿瘤的自动化诊断、淋巴结转移及预后评估有重要意义。

整合素α_5β_1和E-选择素蛋白在结直肠腺癌中的表达及意义

目的探讨整合素α5β1(integrinα5β1)和E-选择素(E-selectin)蛋白在结直肠腺癌中的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组织化学PV方法检测Integrinα5β1和E-selectin蛋白在80例结直肠腺癌组织、15例结直肠腺瘤、10例癌旁正常肠组织中的表达情况。结果 80例结直肠腺癌组织中Inte-grinα5β1和E-selectin蛋白表达阳性率分别为67.50%和58.75%,其表达均高于相应的结直肠腺瘤及癌旁组织(P<0.05)。低分化腺癌组织中Integrinα5β1与E-selectin蛋白表达均高于高、中分化腺癌组织(P<0.05),且两者表达均与癌组织浸润深度、Dukes分期及淋巴结转移有关(P<0.05)。Integrinα5β1与E-selectin蛋白表达之间存在明显相关性(rs=0.264,P<0.05)。结论 Integrinα5β1与E-se-lectin蛋白在结直肠腺癌中高表达,两者可能共同参与了结直肠腺癌的浸润转移过程。

整合素α_5β_1及黏着斑激酶在肝纤维化中的作用

目的探讨整合素α5β1及黏着斑激酶(FAK)在慢性乙型肝炎肝纤维化形成中的作用。方法纳入慢性乙肝患者100例,其中S0期20例,S1期21例,S2期22例,S3期19例,S4期18例。均行肝组织穿刺,采用S-P免疫组化染色观察肝组织整合素α5β1、FAK的表达分布,并采用HPIAS-1000型多媒体真彩色病理图文分析系统进行半定量测定。其含量以表达阳性区域占全视野面积的百分比(面密度)平均数表示。结果肝组织整合素α5β1、FAK染色阳性物质呈棕黄色,其含量随着纤维化程度(S0～S4)的加重而逐渐增加(F值分别为58.87、59.14,P<0.05);整合素α5β1与FAK表达呈明显正相关(r=0.711,P<0.01)。结论整合素α5β1及FAK在慢性乙型肝炎肝纤维化形成中起着重要作用。

α_5β_1整合素在大肠癌中的表达与大肠癌细胞生物行为学的关系

目的研究整合素α5β1在大肠癌及癌旁组织中的表达与肿瘤细胞分化、转移等生物学行为的关系。方法用免疫组化EV二步法检测81例大肠癌及相应癌旁组织石蜡标本整合素α5β1的表达情况。结果在81例大肠癌组织中整合素α5β1表达量与相应的癌旁组织相比差异有显著性(P<0.05),癌旁组织中整合素α5β1的表达量明显降低。低分化大肠癌组织中整合素α5β1的表达量高于高分化大肠癌,有显著性差异(P<0.05)。整合素α5β1在大肠癌的表达与是否有淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论整合素α5β1的表达与大肠癌癌变及癌细胞的分化关系较密切,与癌组织发生淋巴结转移的关系不明显。整合素α5β1的表达量可作为大肠癌发生、发展过程中的一种较有价值的病理学指标。

整合素α_5β_1在卵巢上皮性癌中的定性及定量研究

目的:检测整合素α5β1在卵巢上皮性肿瘤中的蛋白表达,探讨其与卵巢癌淋巴结侵袭、转移的关系。方法:应用免疫组化法,检测100例卵巢上皮性肿瘤(其中上皮性癌54例、交界性肿瘤26例、良性肿瘤20例)。石蜡包埋标本中整合素α5β1的蛋白表达,运用计算机图像自动分析系统进行定量分析。结果:①定性表达:整合素α5β1在淋巴结转移组和未转移组中的阳性表达率为25.00%和61.11%(P<0.05);在不同病理分级中的阳性表达率依次为53.85%、58.82%和12.50%,1、2级和3级间比较,差异具有显著性;在良性、交界性及恶性肿瘤标本中的阳性表达率分别为80.00%,75.00%和37.04%,前2者与后者间比较,具有显著性统计学差异。②定量结果:整合素α5β1表达的阳性细胞面积,按良性、交界性和恶性肿瘤的顺序呈递减趋势,其中,良性与恶性肿瘤3级的阳性细胞面积为11 576.479 5和1 960.917 83,(P<0.05);良性与恶性肿瘤3级的灰度值比较有显著性差异。结论:整合素α5β1在卵巢上皮性癌的侵袭和转移过程中起重要作用,其低表达和失表达提示肿瘤恶性程度高,预后不良。

整合蛋白α_5β_1的表达与胃癌生物学行为及微血管密度的关系

目的 探讨整合蛋白α5β1和微血管密度在胃癌组织中表达的临床意义及其相互关系。方法 采用免疫组化SP法检测了 3 5例胃癌组织及其中 10例胃癌淋巴结转移灶和 8例慢性浅表性胃炎组织中整合蛋白α5β1的表达及微血管密度 (MVD)。结果 胃癌组织中整合蛋白α5β1表达水平及MVD均显著高于慢性胃炎 (t=3 .3 2 ,P<0 .0 1;t =2 .3 0 ,P<0 .0 5 ) ;胃癌原发灶中整合蛋白α5β1的表达仅与胃癌浸润深度相关 (t =2 .2 9,P<0 .0 5 ) ,而MVD则与胃癌浸润深度、淋巴结有无转移及TNM分期之间密切相关 (t =3 .0 7,P<0 .0 1;t =2 .48,P<0 .0 5 ;t=2 .94,P<0 .0 1) ;胃癌淋巴结转移灶中整合蛋白α5β1表达水平较相应的原发灶显著增高 (t =2 .45 ,P<0 .0 5 ) ;整合蛋白α5β1的表达及MVD均与胃癌组织学分级无关(t=0 .15 ,P >0 .0 5 ;t=0 .41,P >0 .0 5 ) ;胃癌组织中整合蛋白α5β1不同表达水平间MVD的差异无显著性意义 (F =1.43 ,P >0 .0 5 ) ,相关性分析显示两者无显著相关性 (r =0 .15 6,P =0 .3 7)。结论 整合蛋白α5β1在胃癌组织中的表达显著上调并与胃癌的进展有关 ,有可能成为判断胃癌侵袭和转移能力的指标及基因治疗的靶标 。

血小板源性生长因子和转化生长因子-β_1对大鼠肺成纤维细胞整合素α_5β_1表达的影响

目的观察血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）和转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）对大鼠肺成纤维细胞整合素（ｉｎｔｅｇｒｉｎ）α５β１及其配体纤维连接蛋白（ＦＮ）合成的影响。方法采用细胞培养、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交、免疫细胞化学方法。结果经ＰＤＧＦ－ＢＢ、ＴＧＦ－β１作用２ｈ，α５、β１、ＦＮｍＲＮＡ的表达即强于对照组，以后继续增强，其间仅于１８或１２ｈ短暂回落，但仍明显强于对照组。免疫细胞化学显示肺成纤维细胞α５β１和ＦＮ蛋白的表达也明显增强。结论ＰＤＧＦ、ＴＧＦ－β１可以促进ｉｎｔｅｇｒｉｎα５β１及其配体ＦＮ的合成增加，其调控机制之一可能是在转录水平上增强ｉｎｔｅｇｒｉｎα５β１及其配体ＦＮｍＲＮＡ的表达。

FAK和整合素α_5β_1在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的比较粘着斑激酶(FAK)和整合素(integrin)α5β1在大肠癌及癌旁正常组织中的表达与肿瘤细胞分化、浸润、转移等生物学行为的关系。方法用免疫组织化学SP法检测60例大肠癌及癌旁组织中FAK和整合素α5β1蛋白的表达水平。结果大肠癌组织FAK和整合素α5β1的表达均明显高于癌旁组织(P<0.01);低分化癌组织FAK和整合素α5β1的表达均高于高、中分化癌组织(P<0.05);FAK表达与癌组织浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.01);而整合素α5β1表达与癌组织浸润深度及淋巴结转移无关(P>0.05)。结论FAK较整合素α5β1可以更有效地衡量大肠癌的发生与发展,FAK的表达水平可作为大肠癌发生、发展过程中1种较有价值的指标。

整合素α_5β_1及CD44v6与卵巢癌生物学行为关系研究

目的 :研究黏附分子整合素α5β1及CD4 4v6在卵巢癌中的表达情况及与临床病理因素的关系。方法 :用免疫组化检测6 5例卵巢癌及 2 0例卵巢良性肿瘤的整合素α5β1及CD4 4v6的表达情况 ,分析其与卵巢癌的组织类型、临床分期、细胞分化程度、手术减瘤情况、淋巴结转移情况、CA12 5、无瘤生存期、3年生存率之间的关系。结果 :整合素α5β1及CD4 4v6在恶性和良性上皮性肿瘤中的阳性表达率差异均有显著性 (P <0 .0 1)。整合素α5β1及CD4 4v6的表达情况均与组织学类型无关 (P >0 .0 5 ) ;整合素α5β1的表达与临床分期无关 (P >0 .0 5 ) ,而与细胞分化程度有关 ,细胞分化愈差 ,整合素α5β1表达愈低 (P <0 .0 0 5 ) ;CD4 4v6的表达情况与临床分期、细胞分化程度有关 ,分期愈晚 ,细胞分化愈差 ,CD4 4v6表达愈高 (P <0 .0 5和P <0 .0 0 5 )。整合素α5β1表达与血CA12 5呈负相关 ,CD4 4v6表达与CA12 5呈正相关 (P <0 .0 0 5 )。整合素α5β1阴性表达者淋巴结转移率高 ,CD4 4v6阳性表达者淋巴结转移率高 (P <0 .0 5 )。整合素α5β1表达情况与减瘤满意程度及无瘤生存期均无明显关系 (P >0 .0 5 ) ,但与 3年生存率有关 (P <0 .0 5 )。CD4 4v6表达情况与减瘤满意程度、无瘤生存期及 3年生存率均有关 (P <0 .0

青年缺血性脑卒中病人血清miR-218-5p、LASP1水平及其应用价值

目的探究青年缺血性脑卒中(IS)病人血清微RNA-218-5p(miR-218-5p)、LIM和SH3蛋白1(LASP1)水平及其应用价值。方法选取2020年6月至2022年6月山东中医药大学附属医院收治的青年IS病人96例为IS组,对所有IS病人进行为期3个月的随访,按照改良Rankin量表(mRS)评分进行分组,预后良好组68例(mRS评分≤2分)和预后不良组28例(mRS评分>2分)。选择同期在该院进行体检的健康志愿者96例为对照组。血清miR-218-5p、LASP1 mRNA水平检测采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR);Pearson相关性分析血清miR-218-5p与LASP1 mRNA表达水平的关系。采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清中miR-218-5p、LASP1 mRNA表达水平对IS预后评估的价值。结果与对照组相比,IS组白细胞计数、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平显著升高,高密度脂蛋白胆固醇水平显著降低(P<0.05);与对照组(1.03±0.11、1.01±0.11)相比,IS组血清中miR-218-5p水平0.88±0.09显著降低,LASP1 mRNA(1.12±0.12)水平显著升高(P<0.05)。IS病人血清miR-218-5p与LASP1 mRNA呈负相关(r=−0.73,P<0.001)。与预后良好组(0.94±0.10、1.05±0.11)相比,预后不良组血清中miR-218-5p(0.74±0.08)水平显著降低,LASP1 mRNA(1.28±0.13)水平显著升高(P<0.05)。ROC曲线显示,二者联合评估IS预后不良的AUC高于miR-218-5p、LASP1 mRNA单独预测的AUC值(Z=12.35,P<0.001;Z=6.60,P=0.010)。结论青年IS病人血清miR-218-5p较低,LASP1 mRNA较高,可用于评估青年IS病人的预后。

整合素α_5β_1在成骨细胞与生物衍生材料黏附过程中的表达

背景:整合素在细胞与材料的黏附过程中发挥重要作用。目的:了解整合素α5β1在成骨细胞构建组织工程骨和组织工程骨膜过程中的表达,探讨在成骨细胞与生物衍生材料黏附过程中整合素α5β1发挥的作用。方法:选用人胚骨膜来源成骨细胞为种子细胞,接种生物衍生骨及羊膜支架材料上,制备组织工程骨及骨膜,分别培养2,4,6,8,10d。单纯培养的成骨细胞作为对照组。结果与结论:实时定量PCR测定结果,培养早期整合素α5表达呈阴性,整合素β1组织工程骨中的表达略高于组织工程骨膜,培养2,6d组比较差异有显著性意义。单纯细胞培养的对照组中,整合素β1稳定,各时间段比较差异无显著性意义。提示生物衍生材料有利于成骨细胞黏附,但在黏附过程的初期,成骨细胞可能是通过纤维连接蛋白以外的其他蛋白质完成该过程的。

非小细胞肺癌组织中整合素α_5β_1和VEGF的表达研究

目的研究整合素α_5β_1和血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌(N SCLC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法用免疫组化法检测53例N SCLC患者病灶组织及12例正常肺组织中α_5β_1及VEGF的表达情况。结果α_5β_1、VEGF在N SCLC组织中的表达(58.49%、75.47%)均明显高于正常肺组织(16.67%、25.00%),差异均有统计学意义(P<0.05)。α_5β_1β表达与病理分级呈负相关,与淋巴结转移、临床分期呈正相关;VEGF表达与临床分期、淋巴结转移呈正相关。结论整合素α_5β_1和VEGF高表达促进了N SCLC的侵袭、转移,两者在N SCLC的发生、发展中可能起相互促进作用。

整合素α_5β_1与CD44s在非小细胞肺癌中表达的意义

目的:研究整合素α5β1与CD44s在NSCLC中表达的意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测53例非小细胞肺癌标本中整合素α5β1和CD44s的表达情况,用卡方检验对各指标表达情况与临床病理参数的关系进行分析,用Spearman分析探讨NSCLC组织中整合素α5β1和CD44s表达强度的相关性。结果:有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的NSCLC中整合素α5β1的表达阳性率分别为67.50%和30.77%,差异有显著性(P<0.05);CD44s在鳞癌组织中的表达强度明显高于腺癌,表达率分别为46.87%和14.29%,P<0.05;有淋巴结转移组与无淋巴结转移组的NSCLC组织中CD44s的表达率分别为54.55%和23.00%,两者有显著性差异(P<0.05)。NSCLC组织中整合素α5β1与CD44s表达程度呈正相关(rs=0.502,P<0.001)。结论:整合素α5β1和CD44s在NSCLC的表达呈正相关,是预测NSCLC病人预后的有意义的指标。

纤维连接蛋白对大鼠肺成纤维细胞纤维连接蛋白和整合素α_5β_1表达的影响

目的 研究纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)及其受体整合素α5β1在肺纤维化中的作用。方法 应用Northern印迹杂交和免疫细胞化学技术。结果 经FN作用 2h ,肺成纤维细胞α5β1和FNmRNA的杂交信号均增强 ,6h达最高值 ;FN作用 6、1 2、2 4h ,免疫细胞化学染色显示整合素α5β1、FN蛋白的表达增强 ;经α5单克隆抗体预作用 ,FN作用组的肺成纤维细胞整合素α5β1和FN蛋白表达减弱 ,其抑制作用依次分别在 6h(α5β1)、1 2h(FN)最明显。结论 FN能直接刺激肺成纤维细胞合成FN或通过上调整合素α5β1的表达来促进自身合成FN。

补肾生血法对慢性再障患者表达α_5β_1/CD49e水平影响的研究

目的:探讨补肾生血法对慢性再生障碍性贫血(简称慢性再障,CAA)患者α5β1/CD49e表达水平的影响。方法:将60例慢性再障患者随机分为实验组和对照组,分别给予补髓生血颗粒和康力龙,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测α5β1/CD49e的mRNA表达,流式细胞术(FCM)检测骨髓造血干/祖细胞α5β1/CD49e的表达水平。结果:CAA骨髓单个核细胞整合素α5β1/CD49e mRNA及骨髓造血干/祖细胞α5β1/CD49e呈低表达状态,补肾中药补髓生血颗粒能促进其表达,与有效药物康力龙比较无显著差异(P(0.05)。结论:CAA可能存在骨髓微环境功能缺陷,调节骨髓造血干/祖细胞粘附分子的表达,改善骨髓造血干/祖细胞与骨髓基质细胞/细胞外基质间的粘附功能,从而促进骨髓造血功能恢复可能是补髓生血颗粒治疗CAA的作用理之一。

整合素α_5β_1和纤维连接蛋白在大肠癌中的表达及其意义

目的 研究纤维连接蛋白、整合素α5β1 在大肠癌及癌旁组织中的表达与肿瘤细胞分化、转移等生物学行为的关系。方法 用免疫组化EV二步法检测 81例大肠癌及相应癌旁组织石蜡标本纤维连接蛋白和整合素α5β1 的表达情况。结果 在 81例大肠癌组织中纤维连接蛋白及整合素α5β1 表达量与相应的癌旁组织相比差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,大肠癌细胞中纤维连接蛋白及整合素α5β1 的表达量明显升高。低分化大肠癌组织中整合素α5β1 的表达量高于高分化大肠癌 ,其差异有显著性 (P <0 0 5 )。整合素α5β1 在大肠癌的表达与淋巴结转移无相关性 (P >0 0 5 )。纤维连接蛋白在大肠癌癌细胞中的表达与大肠癌癌细胞的分化程度及淋巴结转移无相关性 (P >0 0 5 )。结论 整合素α5β1 的表达与大肠癌癌变及癌细胞的分化关系较密切 ,与癌组织发生淋巴结转移的关系不明显。纤维连接蛋白的表达与大肠癌癌变关系较密切 ,而与癌细胞分化及是否发生淋巴结转移的关系不明显。提示纤维连接蛋白与其受体整合素α5β1 在大肠癌癌变中的作用值得进一步的研究。

过表达溶质载体家族1成员5和敲低慢病毒载体构建及稳定转染RAW264.7细胞株

背景:溶质载体家族1成员5(solute carrier family 1 member 5,SLC1A5)在多种疾病中发挥了潜在作用,但确切作用机制尚不清楚。构建稳定的SLC1A5过表达和敲低细胞模型可为深入研究SLC1A5在疾病中的确切作用机制以及发现潜在治疗靶点提供有力的实验工具。目的:构建小鼠SLC1A5过表达和敲低的慢病毒载体,以建立稳定转染的RAW264.7细胞株,为深入探讨SLC1A5在炎症中的作用提供实验基础。方法:根据SLC1A5基因序列设计合成引物并使用聚合酶链反应扩增该基因片段。将目的基因定向接入经Age I/Nhe I酶切的载体质粒GV492中构建重组慢病毒质粒,对阳性克隆进一步筛选后测序比对结果;pHelper1.0质粒载体、pHelper2.0质粒载体、目的质粒载体与293T细胞共同培养并转染,获得慢病毒原液进行包装和滴度测定;在此基础上,通过体外培养RAW264.7细胞,确定嘌呤霉素工作质量浓度;不同滴度的慢病毒分别与RAW264.7细胞共同培养,根据荧光强度确定转染效率;用嘌呤霉素挑选出稳定转染细胞,实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹方法检测稳定转染细胞株的SLC1A5基因和蛋白表达水平。结果与结论:(1)测序序列与目的序列一致提示重组慢病毒载体构建成功;(2)过表达SLC1A5慢病毒的滴度为1×10~9 TU/mL,敲低SLC1A5慢病毒的滴度为3×10~9 TU/mL;(3)确定RAW264.7细胞嘌呤霉素工作质量浓度为3μg/mL;(4)过表达/敲低SLC1A5慢病毒转染RAW264.7细胞的最佳条件皆为HiTransG P转染增强液且感染复数值等于50;(5)过表达SLC1A5稳转细胞株中SLC1A5基因和蛋白的表达量明显上调,而敲低SLC1A5稳转细胞株中SLC1A5基因和蛋白的表达量显著下调。结果表明,成功构建了小鼠SLC1A5过表达和敲低的慢病毒载体并获得稳定转染的RAW264.7细胞株。

整合素α_5β_1蛋白及mRNA在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨子宫颈鳞状细胞癌(cervix squamous cell carcinoma,CSCC)中整合素α5β1蛋白和mRNA的表达,并分析其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法、RT-PCR技术检测60例CSCC及40例子宫颈正常组织中整合素α5β1蛋白及mRNA的表达。结果 CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA表达均高于子宫颈正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);整合素α5β1蛋白及mRNA的表达均与CSCC分化程度、pTNM分期、淋巴结转移、浸润深度有相关性(P<0.05),与患者年龄无相关性(P>0.05)。结论 CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA的表达与其生长、侵袭与转移密切相关。采用免疫组化SP法与RT-PCR技术联合检测CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA,有望成为评估CSCC恶性程度、侵袭、转移和临床预后的指标。