基因转染β肾上腺素能受体激酶抑制剂在小鼠肺内的表达

目的构建β肾上腺素能受体激酶抑制剂(βARKct)的表达质粒,并研究其在正常小鼠肺内的表达。方法(1)取正常小鼠脑组织作为模板,经RT PCR 取得目的基因,构建以质粒pcDNA3 1为载体的表达质粒。(2)通过脂质体的包裹后,以不同的质粒DNA剂量经尾静脉注射和气道滴入途径进行体内转染。用免疫蛋白印迹法检测蛋白质的表达。结果(1)经测序表达质粒的序列完全正确。(2)不同途径转染的目的基因在肺内都有表达,但表达的量不同。结论构建含有目的基因βARK1 的碳基末端的质粒在肺部有表达,表达的量与转染途径和质粒DNA的量相关。

基因转染Gβγ亚基抑制剂对哮喘小鼠β受体水平和环磷酸腺苷的影响

目的研究基因转染Gβγ亚基抑制剂对哮喘小鼠β受体水平和环磷酸腺苷(cAMP)的影响。方法建立哮喘小鼠动物模型,经尾静脉注射转染携有Gβγ亚基抑制剂基因(βARKct)的表达质粒。用Westernblot检测基因表达。放免法检测小鼠肺部的β受体和cAMP的水平。结果(1)哮喘小鼠β受体和cAMP水平均比正常对照组明显下降(P<0.05)。(2)βARKct在经基因转染7d后的小鼠肺部有表达。(3)βARKct转染后肺部β受体的数目和cAMP受体水平均比空载质粒转染组显著上调(P<0.05)。结论基因转染βARKct对哮喘小鼠β受体和cAMP的下降有抑制作用。