Livin蛋白和β-eatenin在胃癌组织中的表达及临床意义

胃癌发生是一个多步骤、多因素进行性发展的过程.在正常情况下,胃粘膜上皮细胞的增值和凋亡之间保持动态平衡.这种平衡的维持有赖于癌基因、抑癌基因及一些生长因子的共同调控.本文就Livin蛋白及β-eatenin蛋白在胃癌发生中的作用综述如下.

Wnt/β-catenin信号通路参与高渗条件下气道上皮细胞黏液高分泌

目的研究高渗刺激对人气道上皮细胞(16HBE)黏蛋白(MUC)5AC分泌的影响,以及Wnt/β-catenin信号通路可能的介导作用。方法使用浓氯化钠配置高渗培养液,用高渗培养液刺激16HBE细胞,细胞分为常规培养(阴性对照组)以及高渗培养液刺激3、6、9、12 h组。ELISA法检测MUC5AC分泌量,Western blotting法检测人气道Wnt家族蛋白Wnt1、Wnt2、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt7a、Wnt10a、Wnt10b的表达情况。将Wnt4小片段siRNA转染16HBE细胞,再给予高渗培养液刺激。采用ELISA法检测培养上清的MUC5AC分泌量,采用Western blotting法检测细胞内经典Wnt/β-catenin通路相关信号分子的表达量,细胞免疫荧光法检测核因子(NF)-κB p65核转位情况。结果高渗培养的16HBE细胞上清及胞质中检测到的MUC5AC分泌量显著高于阴性对照组,且MUC5AC分泌量在一定范围内呈时间依赖性(均P<0.05)。高渗刺激组Wnt1、Wnt2、Wnt3a、Wnt5a、Wnt7a、Wnt10a和Wnt10b表达量较阴性对照组无明显变化(均P>0.05),而Wnt4表达量显著升高(P<0.05)。高渗刺激组细胞内β-catenin和Cyclin D1的相对表达量显著高于阴性对照组,细胞免疫荧光法提示NF-κB p65核转位(均P<0.05);而经转染Wnt4 siRNA后,高渗培养组上清及胞质内MUC5AC分泌量显著低于未转染的高渗培养组(P<0.05),细胞内β-catenin、CyclinD1水平及NF-κB p65的核转位现象也受到显著抑制(均P<0.05)。结论高渗盐水可诱导16HBE细胞MUC5AC高分泌,Wnt/β-catenin信号通路在该效应中有重要的参与作用。

Claudin-7、β-catenin和MT1-mmp在乳腺癌中的表达及意义

目的:探讨Claudin-7、β-catenin和MT1-mmp在乳腺癌中的表达及其相关性。方法:应用免疫组织化学方法检测55例乳腺癌组织和20例乳腺良性病变组织中Claudin-7、β-catenin和MT1-mmp的表达情况,并分析3者表达之间的相关性,以及与乳腺癌临床病理参数的关系。结果:Claudin-7在乳腺癌组织的表达明显下调(P<0.01),阳性表达率为18.6%,与肿瘤临床分期和淋巴结转移相关(P<0.05,P<0.01);β-catenin在乳腺癌组织的表达明显上调(P<0.01),阳性表达率为79.1%,与肿瘤分级、临床分期及淋巴结转移显著相关(P<0.01);MT1-mmp在乳腺良恶性病变中表达差异无统计学意义(P>0.05)。Claudin-7和β-catenin表达呈显著负相关(rs=-0.813,P(0.001),Claudin-7或β-catenin与MT1-mmp表达之间无相关性。结论:Claudin-7可能是潜在的肿瘤抑制剂,与β-catenin表达呈显著负相关。β-catenin可能间接调控Claudin-7的表达。推测Claudin-7和β-catenin联合检测对乳腺癌的治疗和预后判断有指导作用。

Raptor通过Wnt3a/β-catenin信号通路对乳腺癌侵袭与转移的作用

目的探讨Raptor是否可以通过Wnt3a/β-catenin信号通路促进乳腺癌细胞的侵袭与转移。方法采用免疫印迹法(Western blotting)检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231(MDA231)中Raptor蛋白的表达情况;采用小RNA(RNAi)干扰技术将质粒转染MDA231,将过表达质粒转染MCF-7;趋化运动实验检测乳腺癌细胞的运动能力;Transwell侵袭实验检测乳腺癌细胞的侵袭能力;Western blotting检测上皮细胞-间充质转化(EMT)标志物的表达情况;核质分离实验检测β-联蛋白(β-catenin)的转核情况。结果 Western blotting法检测结果显示,Raptor在低转移细胞系MCF-7中低表达,而在高转移细胞系MDA231中高表达。转染后,SiRaptor/MDA231细胞组中Raptor蛋白的表达明显下降,MCF-7/Raptor细胞组中Raptor蛋白的表达明显升高,表明转染成功。用Wnt3a刺激处理后,趋化运动和Transwell侵袭实验结果显示,SiRaptor/MDA231细胞组运动和侵袭能力明显降低,MCF-7/Raptor细胞组运动和侵袭能力明显增强。Western blotting法检测结果显示,用Wnt3a和抑制剂Dkk1不同处理后,SiRaptor/MDA231细胞组中上皮-钙黏蛋白(E-cadherin)上调,波形蛋白(vimentin)下调,细胞核中β-catenin的表达降低,而MCF-7/Raptor细胞组中E-cadherin蛋白下调,vimentin蛋白上调,β-catenin蛋白的表达升高。结论 Raptor能通过Wnt3a/β-catenin信号通路促进EMT的发生,进而促进乳腺癌细胞的侵袭与转移。

胰腺实性-假乳头状肿瘤βcatenin及相关基因表达

目的研究βcatenin及相关基因在胰腺实性-假乳头状肿瘤(solidpseudopapillaryneoplasmofpancreas,SPN)中的表达,探讨它们在SPN发生中的作用。方法回顾性复习7例SPN的临床和病理资料,并检测βcatenin、cyclinD1、p53等基因的蛋白表达。结果7例SPN都有βcatenin的异常染色(>50%的肿瘤细胞有细胞质和细胞核着色)、上皮钙黏蛋白细胞膜表达降低和p53低表达(<10%),p53表达在1例伴肝转移的SPC表达最高(>5%)。3例SPNcyclinD1过度表达(>10%),4例低表达(<5%);5例SPNMIB1+细胞<1/HPF,2例SPNER或PR+。结论βcatenin及相关基因的表达异常在SPN发生中起重要作用。

韧带样型纤维瘤病Wnt通路中APC/β-catenin基因异常

背景与目的:APC和β-caten in基因作为W nt通路上重要的成员,其异常在肿瘤的发生、发展过程中起着重要作用。本研究分析了韧带样型纤维瘤病中APC和-βcaten in基因突变,探讨W nt通路中APC/β-caten in基因异常在肿瘤发生中的作用。方法:采用PCR-DHPLC-Sequence的方法分析韧带样型纤维瘤病中APC和-βcaten in基因的突变,免疫组织化学EnV ision+两步法检测β-caten in、cyc linD1和c-myc蛋白的表达。结果:APC基因发生碱基置换突变,均为体系突变,突变率为26.1%(18/69),突变不产生截短APC蛋白。β-caten in基因发生碱基转换,突变率为18.8%(13/69),导致第3外显子的codon41处苏氨酸磷酸化位点转变为丙氨酸。-βcaten in蛋白异常表达阳性率为47.8%(33/69),在APC、β-caten in基因突变阳性和阴性病例间,其异常表达阳性率没有显著差异。β-caten in异常表达阳性病例的c-myc蛋白阳性率(69.7%,23/33)显著高于阴性病例的c-myc阳性率(22.2%,8/36),两者之间有正相关关系(Pearson's r=0.477),而cyc linD1的表达没有显示出这种相关性和差异。结论:韧带样型纤维瘤病中APC、β-caten in基因存在体系突变,β-caten in蛋白存在异常表达,可能引起c-myc表达增加。韧带样型纤维瘤病中W nt通路存在异常,可能在肿瘤发生中起重要作用。

β-连环素基因在乳腺增生及癌组织中表达和突变的研究

目的检测β-连环素基因在乳腺增生及癌组织中的表达和突变情况,探讨其在乳腺癌发生中的作用。方法应用免疫组织化学染色法和PCR-SSCP检测42例乳腺癌组织、15例乳腺单纯性增生组织及15例乳腺非典型增生组织中β-连环素基因的表达及突变情况。结果乳腺单纯性增生组织中β-连环素表达正常,异常表达率为0。乳腺非典型增生组织和乳腺癌组织中β-连环素表达出现异质性,异常表达率分别为26.7%(4/15)和59.5%(25/42),明显高于单纯性增生组织(P<0.05),且前两者间差异亦有统计学意义(P<0.05)。乳腺单纯性增生、非典型增生和癌组织中均未发现β-连环素基因外显子3的突变。结论β-连环素异常表达在人乳腺癌发生过程中起到重要作用,但β-连环素基因突变并不是该蛋白异常表达的原因,需要进一步研究该蛋白异常表达的机理。

APC和β-catenin在大肠癌中的表达及其意义

目的探讨APC和β-catenin在大肠癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组织化学方法检测30例正常大肠黏膜、30例大肠腺瘤、10例大肠腺瘤恶变及50例大肠癌组织中APC和β-catenin蛋白的表达情况。结果大肠癌和大肠腺瘤恶变APC阳性率分别为44.0%、40.0%,显著低于大肠腺瘤的86.7%和正常大肠黏膜的100%,差异有统计学意义(P<0.01)。大肠癌、大肠腺瘤恶变和大肠腺瘤β-catenin胞浆/胞核异位表达率分别为62.0%、50.0%、30.0%,显著高于正常大肠黏膜的0%,差异有统计学意义(P<0.01),大肠癌β-catenin异位表达率显著高于大肠腺瘤,差异有统计学意义(P<0.01)。大肠癌中β-catenin膜表达缺失率为46.0%,显著高于大肠腺瘤(10.0%)和正常大肠黏膜的0%,差异有统计学意义(P<0.01),且与大肠癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期有关。APC蛋白表达与大肠癌组织分化程度有关。大肠癌中β-catenin异位表达与APC阳性表达呈负相关关系(r=-0.39,P<0.05)。结论APC失表达和/或β-catenin异位表达与大肠癌的发生密切相关,可能是大肠癌发生的早期事件;β-catenin膜表达缺失与大肠癌的侵袭、转移有关。

SOX2 OCT4 β-连环蛋白p120ctn在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的通过观察SOX2、OCT4、β-连环蛋白和p120ctn蛋白在甲状腺滤泡型腺瘤和甲状腺腺癌组织中的表达、分布,分析4种蛋白与甲状腺癌的临床病理特征之间的关系,探讨其在甲状腺癌发生、发展和预后中的价值。方法收集10例正常甲状腺组织,20例甲状腺滤泡型腺瘤和78例甲状腺腺癌蜡块,应用免疫组织化学二步法,对其组织中的SOX2、OCT4、β-连环蛋白及p120ctn的表达情况进行检测,采用SPSS14.0软件进行统计学分析,分析4种蛋白的表达与患者的肿物大小、年龄、临床分期和淋巴结转移的关系。并分析SOX2、OCT4、β-连环蛋白和p120ctn的表达相关性。结果①20例甲状腺滤泡型腺瘤组织中,有3例SOX2表达阳性,有2例OCT4表达阳性,β-连环蛋白和p120ctn有2例和1例异常表达。②78例甲状腺癌组织中,SOX2和OCT4的阳性表达率是64%和87%,SOX2表达与淋巴结转移有明显相关关系(P<0.05),OCT4的表达和淋巴结转移及肿瘤大小明显相关(P<0.05)。β-连环蛋白和p120ctn的异常表达率分别为79%和72%,二者的异常表达都和淋巴结转移相关(P<0.05)。③SOX2、OCT4、β-连环蛋白和p120ctn在甲状腺癌中的表达明显高于甲状腺滤泡腺瘤组织,其差异有统计学意义。(P<0.05)。④甲状腺癌的SOX2的异常表达强度随着OCT4表达强度的增强而升高,呈正相关(r=0.543)。β-连环蛋白异常表达与p120ctn异常表达呈正相关(r=0.319)。结论①SOX2和OCT4蛋白在甲状腺癌中阳性表达率升高,β-连环蛋白和p120ctn在甲状腺癌中出现明显的表达异常,反映出其表达情况在甲状腺癌发生发展中起重要作用。②SOX2、OCT4、β-连环蛋白和p120ctn的表达和甲状腺癌病理特征关系紧密,这4种蛋白的表达情况可以用来监测甲状腺癌恶性程度。③SOX2与OCT4阳性表达,β-连环蛋白异常表达与p120ctn异常表达可能在甲状腺癌的发生发展中起协同作用,这4种蛋白可以对甲状腺癌的生物学行为进行准确预测,在制定个体化治疗方案中,也具有一定的临床价值。

活血膏对膝骨性关节炎大鼠关节软骨Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:观察活血膏对骨性关节炎模型大鼠运动能力的干预效应,同时评估其对关节软骨超微结构以及Wnt/β-catenin信号通路标志性蛋白表达的影响。方法:将30只SD大鼠随机分为空白组、模型组以及活血膏组,每组10只。其中模型组及活血膏组大鼠接受4%木瓜蛋白酶关节腔注射以复制骨性关节炎模型,随后活血膏组大鼠接受活血膏外用涂抹,连续干预14 d,比较3组大鼠关节腔软骨下骨组织形态学、软骨形态以及软骨组织Wnt-2、β-catenin含量的变化。结果:1)接受造模的大鼠膝关节活动度明显低于空白组,其中活血膏组大鼠膝关节活动度大于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2)模型组大鼠骨小梁出现明显硬化现象,局部存在断裂,骨小梁排列顺序紊乱,可见骨赘形成,活血膏组大鼠骨小梁排列明显较模型组整齐,断裂现象明显减少。接受造模大鼠BS/BV较空白组升高,Tb.Th及Tb.N均较空白组下降,其中活血膏组较模型组改善,差异均有统计学意义(P<0.05);3)HE染色显示空白组大鼠软骨面形态正常,基质着色均匀正常,潮线清晰可见;模型组大鼠软骨出现不同程度的纤维化,软骨细胞数量减少,潮线模糊不清;活血膏组软骨细胞较模型组增多,可见部分潮线。4)Western Blot检测法提示模型组软骨组织Wnt-2、β-catenin含量较空白组明显升高,活血膏组虽较空白组上调但较模型组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:活血膏对骨性关节炎大鼠的软骨及软骨下骨有保护效应,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路表达有关。

β-catenin在四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化过程中的定位、表达及意义

目的探讨肝纤维化发生过程中β-连环蛋白(β-catenin)定位、表达及意义。方法健康雄性昆明小鼠(n=45)随机分为对照组(n=15)与实验组(n=30)。实验组小鼠皮下注射50%四氯化碳(CCl4)-粟米油混合液(6ml/kg),2次∕周,对照组皮下注射同等剂量的粟米油。各组分别于造模1周、4周和8周后取小鼠肝脏,常规制作石蜡切片,Masson染色及Desmin免疫组织化学法观察比较不同组别小鼠肝纤维化病理变化,RT-PCR及免疫组织化学方法检测不同时间点各组小鼠肝组织内β-catenin的表达及定位。结果 Masson染色结果显示,对照组肝汇管区结缔组织内及血管壁有少量细小纤维,实验组小鼠肝脏汇管区和中央静脉及其周围胶原纤维增多;随损伤时间延长纤维增生愈加明显。Desmin免疫组织化学结果显示,各组别均有阳性表达,但损伤组各时间点desmin阳性表达细胞数明显高于对照组(P<0.05或P<0.001)。RT-PCR结果显示,CCl4损伤1周后肝内β-cateninmRNA水平与对照组相比无明显差别(P>0.05),损伤4周及8周β-catenin mRNA水平则明显下降,与对照组相比差异均有显著性(P<0.01)。免疫组织化学结果显示,对照组β-catenin弱表达于肝细胞膜及胆管上皮细胞膜和胞质,而损伤组β-catenin阳性反应主要定位于肝内增生的细胞团及新生胆管上皮细胞质,各组间积分吸光度值差别有显著性(P<0.01)。结论 CCl4诱导的肝纤维化过程中β-catenin mRNA表达与蛋白表达不同步,阳性表达细胞主要为新生的细胞团及胆管上皮细胞。

shRNA抑制SGK1基因表达对人乳腺癌细胞系生物学特性的影响

目的建立稳定抑制血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)表达的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,观察SGK1基因沉默对人乳腺癌细胞生物学特性的影响。方法构建针对SGK1的shRNA干扰质粒pGen-3-siSGK1和阴性对照质粒pGen-3-control。转染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,经G418筛选得到稳定抑制SGK1表达的乳腺癌细胞模型;实时定量PCR、免疫荧光以及Western blotting检测shRNA干扰组、阴性对照组及未转染组细胞中SGK1的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞体外生长能力;体外浸润实验、细胞迁移实验检测各组癌细胞的侵袭和转移。结果成功构建针对SGK1基因的shRNA干扰质粒,建立了稳定抑制SGK1表达的乳腺癌细胞模型;与阴性对照组和未转染组相比,肿瘤细胞中SGK1的表达水平显著降低(P<0.01);SGK1基因沉默后,人乳腺癌细胞的生长能力、浸润和迁移能力均明显降低(P<0.05)。实验中还发现抑制SGK1基因表达之后,β-catenin的含量也出现明显下降。结论抑制SGK1基因的表达可以显著抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长,并降低其侵袭转移的能力,其中β-catenin参与了SGK1基因的抑制功能。

胰腺外实性假乳头状肿瘤临床病理观察

目的探讨胰腺外实性假乳头状肿瘤(ESPT)的临床病理特征及预后。方法报道1例罕见的腹膜后ESPT,结合文献对其临床表现、组织学形态、免疫组化特点及治疗和预后进行分析。结果患儿女性,5岁。查体发现盆腔包块天。镜下肿瘤见纤维性包膜,由形态相对一致的中等大小细胞构成,瘤细胞排列成实性巢片状、假乳头状,伴微囊性变,并可见灶性出血、坏死及钙化。免疫组化:β-catenin、CD99、Syn、vimentin、PR及AACT均不同程度(+),CK、CAM5.2、EMA、CD117、CD34、S-100、CR、CD10和WT-1均(-)。随访半年未见复发和转移。结论 ESPT多发生于卵巢、肾上腺及腹膜后,组织学具有特征性的实性、假乳头状结构。免疫组化检测对其组织起源具有提示意义。手术切除是首选治疗方法,总体预后良好。

SOX7与造血系统发育及血液系统恶性肿瘤的关系

SOX7基因是含高迁移率族蛋白(HMG)结构域的SOX家族重要成员,位于人类染色体8p23.1。Wnt/β-catenin信号通路在细胞自我更新、分化、增殖、凋亡中起到重要作用,与肿瘤的发生发展密切相关。SOX7基因为Wnt/β-catenin信号通路的抑制剂。在MDS等血液系统恶性肿瘤的研究中发现,SOX7基因极有可能是一个抑癌基因,该基因启动子区域的甲基化会导致表达沉默,从而促进肿瘤的发生发展。另外造血干细胞增殖与分化为一个随机过程,但是SOX7可以促进造血干细胞向各个血细胞系分化。本文就SOX7基因改变与造血系统发育及血液系统恶性肿瘤的发生、发展相关性研究的新进展进行综述。

直肠癌组织中β-catenin的表达意义

目的探讨直肠癌组织中β-catenin的表达意义。方法应用免疫组织化学S-P法检测60例直肠组织和20例癌旁正常粘膜组织中β-catenin的表达。结果在20例正常组织中β-catenin均呈正常表达。直肠癌中β-catenin的异常表达率为66.7%,β-catenin的异常表达与性别、年龄、直肠癌的分化程度无关(P(0.05),与淋巴结转移密切相关(P(0.05)。结论β-catenin的异常表达在直肠癌的发生发展中可能起到重要的作用。

鼠尾草酸对人结肠癌细胞增殖抑制作用及增强其对5-氟脲嘧啶敏感性的研究

目的研究鼠尾草酸(carnosic acid,CA)抑制人结肠癌细胞SW480增殖和增强化疗药物5-氟脲嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)敏感性的作用及机制。方法结晶紫染色法检测CA对SW480增殖的抑制作用,流式细胞技术分析和MTT法检测CA和5-FU联合使用对人结肠癌细胞SW480凋亡和细胞活力的影响。采用β-catenin荧光素酶报告基因(TOP-Flash)检测CA作用后SW480细胞内β-catenin活性改变。不同浓度CA处理SW480后,Western blot检测β-catenin蛋白质表达水平变化,RT-PCR法检测其下游基因Cyclin D1和P-gp(P-glycoprotein)的mRNA表达水平变化。结果 CA对人结肠癌SW480细胞增殖有抑制作用,且CA能够增强5-FU对结肠癌细胞凋亡和细胞活力的影响。CA处理后细胞内β-catenin转录活性明显降低,Western blot法和RT-PCR法结果显示CA下调了β-catenin的蛋白水平及下游基因Cyclin D1和P-gp mRNA表达。结论CA能够抑制人结肠癌SW480细胞增殖和增强5-FU的抗肿瘤效果,其机制可能与抑制β-catenin活性并下调其下游基因Cyclin D1和P-gp表达有关。

β-catenin在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨肝细胞癌肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)β-catenin的表达与HCC临床病理特征的关系。方法应用Envsion法检测333例HCC,168例癌旁肝组织及89例正常肝组织的β-catenin表达;RT-PCR检测37例HCC及癌旁组织,肝癌细胞株HepG2和正常肝细胞株LO2的β-catenin mRNA表达。结果β-catenin在HCC胞质、胞核的阳性表达率为79%/37%;在癌旁和正常肝组织中的表达率为72%/0%、70%/0%。差异均有统计学意义(P均<0.05)。且分化好的癌细胞表达低,分化差的细胞表达高。同时,HCC和HepG2的β-catenin mRNA表达高于癌旁组织及LO2的表达。结论肝细胞癌的β-catenin过表达提示其在癌的发生过程中可能起着促癌的作用。

结直肠肿瘤组织中β-catenin和c-myc的表达及其意义

目的探讨β-catenin和c-myc在结直肠肿瘤中的意义。方法用免疫组织化学技术检测非肿瘤结直肠组织、结直肠腺瘤组织和结直肠腺癌组织中β-catenin及c-myc。结果β-catenin在非肿瘤结直肠组织、结直肠腺瘤组织和结直肠腺癌组织中异位异常表达率分别为8.0%、73.9%、96.2%,3组之间差异有统计学意义(P<0.05)。非肿瘤结直肠组织、结直肠腺瘤组织和结直肠腺癌组织中c-myc表达的阳性率分别为4.0%、43.5%和76.9%,3组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论β-catenin异常表达及c-myc过度表达与结直肠肿瘤的发生有关,β-catenin异常表达可能与腺瘤的恶性转化易感性和结直肠腺癌的恶性行为有关,c-myc过度表达可能与结直肠肿瘤恶性化有关。

β-catenin 和 GSK-3β在红藻氨酸点燃动物模型颞叶癫痫形成中的变化

目的：探讨经典的 Wnt／β-catenin 信号分子β-catenin、GSK-3βmRNA 在红藻氨酸（KA）致痫大鼠颞叶癫痫形成中的时间变化过程及丙戊酸钠（VPA）对其表达的影响。方法利用生后30天的雄性 SD 大鼠，经皮下注射 KA 制成颞叶癫痫动物模型后，应用 Real-time PCR 技术检测 KA 后不同时期大鼠海马组织中 Wnt 信号通路分子β-catenin 和 GSK-3βmRNA 的表达，并观察抗癫痫药物丙戊酸钠对其表达的影响。结果 KA 致痫后在颞叶癫痫形成过程中，KA 组急性期β-catenin mRNA 的表达（0.76±0.06）较对照组（1.00±0.00）显著下降，差异有统计学意义；癫痫形成初期的表达（1.00±0.07）与对照组，差异无统计学意义；慢性期的表达（1.33±0.25）与对照组比较显著增高，差异有统计学意义。KA 组动物海马组织急性期 GSK-3βmRNA 的表达（0.72±0.12）较对照组（1.00±0.00）显著下降，癫痫形成初期（0.41±0.12）较对照组也降低，差异均有统计学意义；慢性期（0.82±0.10）与对照组比较，差异无统计学意义。红藻氨酸＋丙戊酸钠组大鼠海马组织 GSK-3β和β-catenin mRNA 的表达，在颞叶癫痫形成的不同阶段与对照组比较，与 KA 组有相同的变化趋势，但两组间比较，差异均无统计学意义。结论 Wnt5a 可能通过经典的 Wnt 信号通路调控 KA 点燃颞叶癫痫大鼠海马神经发生参与颞叶癫痫的产生。丙戊酸钠的抗痫作用机制与大鼠海马β-catenin、GSK-3β信号分子无关。

体外培养毛乳头细胞的versican基因表达变化

目的探讨versican基因及蛋白在体外培养的毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPC)中的表达变化,并研究其对DPC凝集性生长特性的影响。方法利用酶消化法分离培养DPC,并进行体外培养传代,观察不同代次DPC凝集性生长特性的变化。应用Western blot、RT-PCR检测DPC的β-catenin、versican的表达情况,对比研究其与DPC凝集性生长的关系。结果随着DPC由低代向高代分化,其凝集性生长特性逐渐减弱,versican表达水平逐渐降低。Wnt途径上调versican基因的表达,能够使高代DPC表达β-catenin、versican增强。结论versican基因和蛋白水平的表达与DPC凝集性生长呈正相关;versican基因是调控DPC凝集性生长的重要基因,versican的表达对毛囊(hair follicle,HF)的形成起着十分重要的作用,并在维护HF周期中扮演重要角色。