玉米醇溶蛋白γ-zein基因载体构建及亚细胞定位

用PCR方法从pROK.TG1LK扩增得到γ-zein基因的全长,克隆到中间载体pMD18-T,获得了重组质粒pMD18-γ-zein,分别用NcoⅠ和BglⅡ2种限制性内切酶酶切重组质粒和经过改良的pCAMBIAI1302载体,经回收、连接、转化、鉴定后,构建了由35S驱动的绿色荧光蛋白(GFP)融合的植物表达载体pCB-GFP-γ-zein,用基因枪法将GFP-γ-zein基因整合到洋葱表皮细胞中,通过共聚焦显微镜观察,该融合基因在洋葱表皮细胞的细胞壁、细胞核和细胞质中得到了表达。

农杆菌介导含硫氨基酸γ-zein转化菊苣的初步研究

含硫氨基酸具有动物营养与免疫相关的重要生理功能,为提高菊苣中含硫氨基酸含量,采用根癌农杆菌介导法将玉米种子贮藏蛋白含硫氨基酸基因γ-zein和绿色荧光蛋白GFP融合基因转入到菊苣无菌苗叶片中,经过共培养、潮霉素抗性筛选、分化、再生和炼苗,得到抗性植株。对抗性植株进行PCR、PCR-Southern、斑点杂交和RTPCR分析,结果表明,外源目的基因已经整合到菊苣基因组中并且得到了表达,为提高菊苣含硫氨基酸含量,改善其品质奠定了基础。

辐照处理对玉米醇溶蛋白流变性的影响

为了改善玉米醇溶蛋白在复合材料加工中的流变特性,研究了辐照剂量、温度、剪切速率对玉米醇溶蛋白流变性的影响。结果表明,玉米醇溶蛋白经辐照处理后具有假塑性流体特性,呈现"剪切变稀"现象。辐照剂量、剪切温度和剪切速率对玉米醇溶蛋白的流变性有显著影响。随着辐照剂量增加,溶液黏度呈现先增加后减小的趋势,当辐照剂量为10kGy时,黏度最高;随着剪切温度的增加,溶液黏度呈现先下降后增加的趋势,当温度为308K时,黏度最低;随剪切速率的增加,溶液的黏度降低,但当剪切速率接近100s-1时,黏度变化不明显。

玉米蛋白环(组氨酸-脯氨酸)二肽前体的制备及其鉴定（英文）

以玉米蛋白为原料,制备活性环（组氨酸-脯氨酸）二肽（cyclo（His-Pro））前体——His-Pro和Pro-His二肽。分别采用碱性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶对提取的玉米γ-醇溶蛋白进行单酶和双酶分步水解,筛选出最佳酶解工艺。采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解的水解产物中cyclo（His-Pro）前体的含量比其他水解产物要高。采用响应面和L16（4-5）正交试验对碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解γ-醇溶蛋白的工艺进行了优化,最佳水解条件为：底物质量浓度32 mg/m L,先加入12 100 U/g的碱性蛋白酶水解6.5 h,再加入17 000 U/g的风味蛋白酶于p H7.5、55℃条件下水解6 h。采用超高效液相色谱法和电喷雾质谱法对cyclo（His-Pro）前体进行定量和定性分析,结果表明水解产物中含有较高含量的脯氨酸-组氨酸二肽（6.88 mg/g）。