HMGB1基因敲除通过抑制TLR4/NF-κB通路减轻脓毒症小鼠急性肺损伤

目的 研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因敲除减轻脓毒症小鼠急性肺损伤及抑制Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路的作用。方法 野生型(WT)小鼠分为WT-Sham组和WT-模型组,HMGB1基因敲除(KO)小鼠分为KO-Sham组和KO-模型组。WT-模型组和KO-模型组采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症ALI模型,WT-Sham组和KO-Sham组进行假手术操作。造模后24 h,检测动脉血氧分压(PaO_(2)),计算氧合指数(OI),检测肺组织病理改变,计算肺损伤评分,检测血清及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的浓度,肺组织中HMGB1、TLR4、核NF-κB的表达。结果 WT-模型组的PaO_(2)、OI、血清及肺组织SOD的浓度低于WT-Sham组,肺损伤评分、血清及肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、ROS、MDA的浓度、肺组织中HMGB1、TLR4、核NF-κB的表达水平高于WT-Sham组(P<0.05);KO-模型组肺组织中不表达HMGB1,PaO_(2)、OI、血清及肺组织SOD的浓度高于WT-模型组,肺损伤评分、血清及肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、ROS、MDA的浓度、肺组织中TLR4、核NF-κB的表达水平低于WT-模型组(P<0.05)。结论敲除HMGB1减轻脓毒症小鼠ALI,相关的分子机制可能是抑制TLR4/NF-κB通路介导的炎症反应和氧化应激反应。

血清转化生长因子β1、白细胞介素-6、Toll样受体-4、核转录因子κB联合评估非小细胞肺癌放射性肺炎病情严重程度的价值

目的探讨血清转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)、Toll样受体-4(TLR-4)和核转录因子κB(NF-κB)联合评估非小细胞肺癌(NSCLC)放射性肺炎(RP)病情严重程度的价值。方法选取104例NSCLC放疗后继发RP患者作为研究组,另选取52例NSCLC放疗后未继发RP患者作为对照组。比较2组患者放疗前后血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平。比较研究组不同程度RP患者放疗前后血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平,分析各血清指标单独及联合评估NSCLC放疗后RP病情程度的价值。结果放疗结束后,研究组患者血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);放疗结束后,随着RP病情程度的增加,研究组患者血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平呈升高趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,放疗结束后血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平评估1级RP的曲线下面积(AUC)分别为0.787、0.718、0.783、0.801,评估≥2级RP的AUC分别为0.729、0.740、0.793、0.825;血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB阳性表达患者发生≥2级RP的风险分别是阴性表达患者的2.473、2.275、2.610、5.267倍(P<0.05);血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB联合评估≥2级RP的AUC为0.939,敏感度为76.00%,特异度为97.47%。结论NSCLC患者放疗结束后血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平均与RP病情严重程度呈正相关,四者联合评估≥2级RP的价值显著,可为临床控制RP病情提供参考依据。

INRA717-1B4杂交杨TAC基因CRISPR/Cas9敲除载体的构建及编辑效率检测

TAC(tiller angle control)基因作为IGT [G?L(A/T)IGT]保守家族的一员,与植物体内各类激素相互作用,共同参与分枝角度的调控。为探究TAC基因的分子结构功能及其调节功能,利用CRISPR/Cas9基因编辑系统,以INRA717-1B4杂交杨为试验材料构建pDE-CAS9-NPTⅡ表达载体,通过农杆菌介导法侵染叶片进行遗传转化获得阳性植株,并通过测序检测基因编辑效率。最终获得基因编辑转基因株系12株,其中实现基因突变的2株,编辑效率为16.7%。本试验为CRISPR/Cas9系统在杨树TAC基因功能的验证提供了借鉴,为进一步在木本植物中的应用研究提供了技术支持。

血必净注射液联合乌司他丁注射液治疗脓毒症并发急性肺损伤的效果及对HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨血必净注射液联合乌司他丁注射液治疗脓毒症合并急性肺损伤的临床效果及对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 采用随机数字表法将2022年1—12月接受治疗的140例脓毒症并发急性肺损伤患者分为研究组70例和对照组70例。2组均按指南给予基础治疗,在此基础上研究组给予血必净注射液联合乌司他丁注射液治疗,对照组给予血必净注射液治疗,2组疗程均为2周。比较2组临床疗效,治疗前后血清HMGB1、TLR4及NF-κB水平,血清炎性因子水平,并记录2组不良反应。结果 治疗后研究组总有效率为91.43%(64/70)优于对照组的75.71%(53/70)(P<0.05)。治疗后2组血清HMGB1、TLR4、NF-κB、超敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、降钙素原水平均降低,且研究组低于对照组(P<0.05,P<0.01)。2组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 血必净注射液联合乌司他丁注射液治疗脓毒症并发急性肺损伤患者临床效果较好,可有效降低血清HMGB1、TLR4、NF-κB和炎性因子水平,且安全性较高。

LEASO患者血清miR-21、miR-126水平与HMGB1/TLR4信号通路活性和术后复发的关系

目的 探讨股腘型下肢动脉硬化闭塞症(LEASO)患者血清微小核糖核酸(miR)-21、miR-126水平与高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路活性和术后复发的关系。方法 选取行介入手术的股腘型LEASO患者120例,根据术后是否复发将股腘型LEASO患者分为复发组和未复发组。RF-qPCR剂检测血清miR-21、miR-126表达和外周血单个核细胞HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA表达。采用Pearson相关性分析法分析股腘型LEASO患者血清miR-21、miR-126与外周血单个核细胞HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA表达的相关性。多因素Logistic回归分析股腘型LEASO患者介入术后复发的影响因素。结果 120例股腘型LEASO患者随访2年,术后复发率为34.17%。与未复发组比较,复发组血清miR-21和外周血单个核细胞HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA表达升高,血清miR-126表达降低(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,股腘型LEASO患者血清miR-21与外周血单个核细胞HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA表达呈正相关(r分别为0.660、0.649,P均<0.05),miR-126与外周血单个核细胞HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA表达呈负相关(r分别为-0.632、-0.641,P均<0.05),外周血单个核细胞HMGB1mRNA与TLR4 mRNA表达呈正相关(r=0.742,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,高血压、糖尿病和miR-21、HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA升高为股腘型LEASO患者介入术后复发的独立危险因素,miR-126升高为独立保护因素(P均<0.05)。结论 股腘型LEASO患者血清miR-21高表达和miR-126低表达与HMGB1/TLR4信号通路激活有关,是股腘型LEASO患者术后复发的独立影响因素。

吴茱萸碱调节HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路对脑梗死大鼠神经炎症的影响

目的:探讨吴茱萸碱调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对脑梗死大鼠神经炎症的影响。方法:采用大脑中动脉栓塞法构建脑梗死大鼠模型,随机分为模型组、吴茱萸碱低剂量组、吴茱萸碱高剂量组、吴茱萸碱高剂量+空载质粒组、吴茱萸碱高剂量+HMGB1过表达组,每组15只,另选取15只健康大鼠设为假手术组,以吴茱萸碱和质粒分组处理后,采用改良神经功能缺损评分(mNSS)评估大鼠神经损伤;三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测大鼠脑梗死面积;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色检测大鼠海马神经元凋亡率;透射电镜观察大鼠海马神经元超微结构;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清及脑组织促炎因子环氧化酶-2(COX-2)、白细胞介素-18(IL-18)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平;蛋白免疫印迹法检测大鼠脑组织HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠海马神经元超微结构发生损伤,mNSS评分、脑梗死面积、海马神经元凋亡率、血清与脑组织COX-2、IL-18、iNOS水平、脑组织HMGB1、TLR4蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65明显升高(P<0.05);与模型组比较,吴茱萸碱低剂量组、吴茱萸碱高剂量组、吴茱萸碱高剂量+空载质粒组大鼠海马神经元超微结构损伤均减轻,mNSS评分、脑梗死面积、海马神经元凋亡率、血清与脑组织COX-2、IL-18、iNOS水平、脑组织HMGB1、TLR4蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低(P<0.05);吴茱萸碱高剂量组大鼠海马神经元超微结构损伤较吴茱萸碱低剂量组进一步减轻,mNSS评分、脑梗死面积、海马神经元凋亡率、血清与脑组织COX-2、IL-18、iNOS水平、脑组织HMGB1、TLR4蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65进一步降低(P<0.05)。与吴茱萸碱高剂量组比较,吴茱萸碱高剂量+HMGB1过表达组大鼠海马神经元超微结构损伤加重,mNSS评分、脑梗死面积、海马神经元凋亡率、血清与脑组织COX-2、IL-18、iNOS水平、脑组织HMGB1、TLR4蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05)。结论:吴茱萸碱可通过阻止HMGB1/TLR4/NF-κB信号激活而降低促炎因子表达,从而抑制神经炎症,减轻脑梗死大鼠神经功能损伤。

HMGB1、AQP4、8-OHdG、APN水平与癫痫患儿疾病进展及认知功能的关系

目的探讨血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、水通道蛋白4(AQP4)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、脂联素(APN)水平与癫痫患儿疾病进展及认知功能的关系。方法选取聊城市第二人民医院2021年1月至2023年12月收治的癫痫患儿142例为研究组,其中男74例,女68例,年龄(9.08±0.80)岁。根据癫痫类型分为全身强直阵挛发作组55例和局灶性发作组87例,并根据认知功能分为认知功能障碍组51例和认知功能正常组91例。另外选取同期接受健康体检的正常儿童145名为对照组。收集所选儿童的临床资料,均行血清HMGB1、AQP4、8-OHdG、APN水平检测,采用独立样本t检验比较研究组和对照组、不同癫痫类型及不同认知功能情况患儿血清HMGB1、AQP4、8-OHdG、APN水平,利用Pearson相关性分析癫痫患儿血清HMGB1、AQP4、8-OHdG、APN水平与认知功能的相关性,并绘制受试者操作特征曲线(ROC),获取曲线下面积(AUC),分析血清HMGB1、AQP4、8-OHdG、APN单独及联合检测对癫痫患儿认知功能障碍的预测价值。结果研究组血清HMGB1[(5.01±1.22)μg/L]、8-OHdG[(0.43±0.10)μg/L]水平高于对照组[(2.91±0.86)μg/L、(0.29±0.08)μg/L](均P<0.05),血清AQP4[(56.79±15.02)μg/L]、APN[(6.77±1.45)mg/L]水平低于对照组[(163.58±31.27)μg/L、(10.13±2.24)mg/L](均P<0.05)。全身强直阵挛发作组血清HMGB1[(6.14±1.98)μg/L]、8-OHdG[(0.53±0.15)μg/L]水平高于局灶性发作组[(3.95±1.10)μg/L、(0.36±0.09)μg/L](均P<0.05),血清AQP4[(41.43±12.07)μg/L]、APN[(4.64±1.40)mg/L]水平低于局灶性发作组[(70.89±21.44)μg/L、(7.98±2.32)mg/L](均P<0.05)。认知功能障碍组血清HMGB1[(6.18±2.04)μg/L]、8-OHdG[(0.57±0.19)μg/L]水平高于认知功能正常组[(3.98±1.25)μg/L、(0.38±0.12)μg/L](均P<0.05),血清AQP4[(46.94±15.15)μg/L]、APN[(4.97±1.55)mg/L]水平低于认知功能正常组[(71.43±23.59)μg/L、(8.01±2.53)mg/L](均P<0.05)。癫痫患儿血清HMGB1、8-OHdG水平与认知功能呈负相关(r=-0.499、-0.504,均P<0.05);血清AQP4、APN水平与认知功能呈正相关(r=0.531、0.527,均P<0.05)。血清HMGB1、AQP4、8-OHdG、APN联合预测癫痫患儿认知功能障碍的AUC为0.920,高于各指标单一检测(0.751、0.833、0.817、0.848)。结论血清HMGB1、8-OHdG在癫痫患儿中呈高表达,而血清AQP4、APN呈低表达,四者均参与疾病进展过程,并与认知功能障碍密切相关,且四者联合检测对癫痫患儿认知功能障碍的预测价值更高。

吴茱萸碱调节HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路对百草枯中毒大鼠肝损伤的影响

目的:探讨吴茱萸碱(EVO)对百草枯(PQ)中毒大鼠肝损伤及高迁移率族蛋白1/Toll样受体4/核因子-κB(HMGB1/TLR4/NF-κB)信号通路的影响。方法:将大鼠分为对照组(Control组)、百草枯染毒组(PQ组)、吴茱萸碱低、高剂量处理组(EVO-L、EVO-H组)、吴茱萸碱高剂量处理+HMGB1重组蛋白组(EVO-H+r-HMGB1组);ELISA检测血清中肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)水平和炎症因子肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、白介素-1β(IL-1β)及氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平;HE染色观察各组大鼠肝组织病理变化并进行肝组织学评分;Western blot检测HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达。结果:PQ组较Control组肝小叶中央静脉淤血增多,肝细胞水肿坏死及肝细胞浆空泡化明显,核固缩且伴有明显的炎症浸润,病理学评分、ALT、AST、TBil、TNF-α、IL-1β、MDA水平及HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达升高,SOD水平降低(P<0.05);EVO-L、EVO-H组较PQ组肝小叶中央静脉淤血减少,肝细胞浆空泡化减轻,水肿减轻,炎症浸润减少,病理学评分、ALT、AST、TBil、TNF-α、IL-1β、MDA水平及HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达降低,SOD水平升高(P<0.05);EVO-H+r-HMGB1组较EVO-H组肝组织病理损伤加重,病理学评分、ALT、AST、TBil、TNF-α、IL-1β、MDA水平及HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达升高,SOD水平降低(P<0.05)。结论:吴茱萸碱可改善百草枯中毒大鼠肝损伤,其作用机制与抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路有关。

基于HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路研究枇杷叶提取物对急性肺损伤模型大鼠炎症因子的影响

目的 基于高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路研究枇杷叶提取物对急性肺损伤(ALI)大鼠炎症因子的影响及潜在机制。方法 60只SPF级Wistar大鼠按照随机数字表法分为空白组(NC组)、模型组(ALI组)、阳性对照组(Dex组)、枇杷叶提取物低剂量组(EJLE-L组)、枇杷叶提取物中剂量组(EJLE-M组)和枇杷叶提取物高剂量组(EJLE-H组),每组10只。ALI组、Dex组、EJLE-L组、EJLE-M组、EJLE-H组气管内均滴注2 mg/kg脂多糖建立大鼠ALI模型。建模后,Dex组腹腔注射5 mg/kg地塞米松,EJLE-L组、EJLE-M组、EJLE-H组分别腹腔注射50、100、150 mg/kg枇杷叶提取物,NC组和ALI组腹腔注射5 mg/kg生理盐水。观察各组大鼠肺组织病理组织学及细胞超微结构变化,比较各组大鼠肺组织湿重/干重值,外周循环、肺组织炎症因子白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平及肺组织HMGB1、TLR4、NF-κB累积光密度值(IOD)及蛋白、mRNA表达量。结果 与ALI组比较,Dex组、EJLE-L组、EJLE-M组、EJLE-H组肺组织湿重/干重值[(6.12±0.14)、(5.76±0.11)、(5.09±0.12)、(4.67±0.10)比(6.89±0.17),P<0.05],肺组织病理评分[(7.79±0.65)分、(5.45±0.43)分、(3.23±0.29)分、(1.02±0.20)分比(13.23±1.00)分,P<0.05],外周循环炎症因子IL-1β[(102.32±11.23)ng/L、(87.86±9.09)ng/L、(64.54±6.74)ng/L、(43.11±5.63)ng/L比(147.87±15.64)ng/L,P<0.05]、IL-6 [(114.43±15.34)ng/L、(99.07±11.23)ng/L、(78.43±9.02)ng/L、(55.46±6.12)ng/L比(156.65±19.98)ng/L,P<0.05]、TNF-α[(156.64±19.09)ng/L、(107.64±12.32)ng/L、(69.09±9.09)ng/L、(49.98±5.46)ng/L比(201.98±24.43)ng/L,P<0.05]水平,肺组织炎症因子IL-1β[(172.21±17.68)ng/L、(123.32±14.35)ng/L、(95.54±10.76)ng/L、(70.94±8.75)ng/L比(223.42±28.76)ng/L,P<0.05]、IL-6[(154.43±17.65)ng/L、(100.23±11.43)ng/L、(76.42±8.93)ng/L、(66.75±6.55)ng/L比(198.90±22.34)ng/L,P<0.05]、TNF-α[(164.58±18.97)ng/L、(110.23±14.53)ng/L、(90.23±10.98)ng/L、(61.65±6.57)ng/L比(223.42±34.52)ng/L,P<0.05]水平,肺组织HMGB1[IOD值:(232.32±34.42)、(197.87±29.09)、(123.23±15.46)、(69.98±8.98)比(398.89±45.53),蛋白:(2.32±0.29)、(2.00±0.17)、(1.78±0.10)、(1.35±0.20)比(2.76±0.21),mRNA:(2.10±0.17)、(1.85±0.19)、(1.53±0.14)、(1.29±0.20)比(2.90±0.21),P <0.05]、TLR4 [IOD值:(214.34±22.35)、(168.98±18.90)、(100.34±11.23)、(77.85±8.45)比(453.34±52.32),蛋白:(2.54±0.23)、(2.04±0.22)、(1.61±0.18)、(1.46±0.14)比(2.98±0.34),mRNA:(2.03±0.25)、(1.76±0.21)、(1.54±0.14)、(1.25±0.10)比(2.76±0.22),P<0.05]、NF-κB [IOD值:(200.97±28.87)、(159.09±16.57)、(102.32±14.35)、(67.84±7.98)比(323.43±39.98),蛋白:(1.87±0.20)、(1.34±0.19)、(1.00±0.15)、(0.88±0.09)比(2.00±0.16),mRNA:(2.67±0.20)、(2.21±0.19)、(1.97±0.17)、(1.54±0.12)比(3.02±0.22),P<0.05]均明显降低;与Dex组、EJLE-L组、EJLE-M组比较,EJLE-H组上述指标改善更明显(P<0.05)。结论枇杷叶提取物可明显抑制ALI大鼠外周循环及肺部炎症,其可能通过HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路逆转肺损伤。

格隆溴铵福莫特罗吸入气雾剂对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者血清TIMP-1、LTB4及动脉血气分析指标的影响

目的 探究格隆溴铵福莫特罗吸入气雾剂对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者血清基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、白三烯B4(LTB4)及动脉血气分析指标的影响。方法 按简单随机化分组法将2021年3月至2023年9月建德市第一人民医院就诊的COPD稳定期患者分为观察组和对照组,各45例,观察组采用格隆溴铵福莫特罗吸入气雾剂治疗,对照组采用布地奈德福莫特罗吸入粉雾剂(Ⅱ),两组均持续治疗3个月。比较两组患者的临床疗效、治疗期间的不良反应发生情况和急性发作次数。比较两组患者治疗前和治疗3个月后的肺功能指标、血清TIMP-1、LTB4和动脉血气分析指标。结果 治疗3个月后,观察组的总有效率(93.33%)高于对照组(77.78%)(P<0.05)。两组的不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05);观察组急性发作次数[(0.98±0.12)次]低于对照组[(1.11±0.19)次](P<0.05)。治疗3个月后,两组的第1秒用力呼气容积(FEV_1)、用力肺活量(FVC)、最大呼气流量(PEF)和动脉血氧分压(Pa O_(2))均较治疗前提高,观察组FEV_1、FVC、PEF、Pa O_(2)[分别为(2.88±0.41) L、(3.21±0.33) L、(60.13±5.23) L·min^(-1)、(77.17±2.34) mm Hg(1 mm Hg≈0.133 k Pa)]高于对照组[分别为(2.62±0.43) L、(2.94±0.40) L、(57.27±5.27) L·min^(-1)、(75.51±2.20) mm Hg](P<0.05)。治疗3个月后,两组的血清TIMP-1、LTB4和动脉血二氧化碳分压(Pa CO_(2))均较治疗前降低,观察组TIMP-1、LTB4、Pa CO_(2)[分别为(58.32±4.10)μg·L^(-1)、(106.56±6.79) ng·L^(-1)、(46.58±2.42) mm Hg]低于对照组[分别为(60.97±4.36)μg·L^(-1)、(110.23±7.57) ng·L^(-1)、(48.43±2.46) mm Hg](P<0.05)。结论 格隆溴铵福莫特罗吸入气雾剂治疗COPD稳定期患者具有较好的疗效和安全性,有助于改善患者肺功能指标、血清TIMP-1、LTB4和动脉血气分析指标。

急性呼吸窘迫综合征患者血清HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平对临床预后的预测价值

目的探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素-34(IL-34)、血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)水平对临床预后的预测价值。方法选取2021年6月至2023年6月该院97例急性呼吸窘迫综合征患者作为观察组,另选取同期该院的体检健康者97例作为对照组。比较两组HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平。对比分析不同预后患者临床资料及血清HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平,并分析预后影响因素。分析预后影响因素对预后的预测价值,并评价血清HMGB1、IL-34、ANGPTL4联合检测对预后的预测价值。结果观察组血清HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。死亡组患者氧合指数(PaO2/FiO2)低于存活组,急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、Murray肺损伤评分(MLIS)及HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平均高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。PaO2/FiO2、APACHEⅡ评分、MLIS及HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平均为ARDS患者预后影响因素(P<0.05)。PaO2/FiO2、APACHEⅡ评分、MLIS及HMGB1、IL-34、ANGPTL4预测预后的曲线下面积(AUC)分别为0.779、0.799、0.808、0.844、0.772、0.822,各预后影响因素的AUC比较,差异无统计学意义(P>0.05);受试者工作特征曲线分析显示,血清HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平联合预测ARDS患者预后的AUC为0.915(95%CI:0.841~0.962),明显高于各指标单独预测AUC。结论ARDS患者血清HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平联合检测对其预后具有一定预测价值。

2-(4-甲氧基-苯巯基)-5,8-二甲氧基萘-1,4-二酮诱导Hep3B人肝癌细胞凋亡的机制

近年来,紫草萘醌类衍生物因其临床应用受到副作用的限制。为寻找副作用小疗效高的新型抗肿瘤药物,合成了2-(4-甲氧基-苯巯基)-5,8-二甲氧基萘-1,4-二酮,并对其化学结构进行了鉴定。同时研究了2-(4-甲氧基-苯巯基)-5,8-二甲氧基萘-1,4-二酮对人肝癌细胞活力、凋亡的影响及其潜在机制。研究结果表明,通过MTT检测其细胞活力,发现2-(4-甲氧基-苯巯基)-5,8-二甲氧基萘-1,4-二酮显著降低了人肝癌细胞系的细胞活力。蛋白免疫印迹结果表明,该化合物可通过上调Cle-caspase3、Bad和Bax凋亡相关蛋白表达水平来诱导肝癌细胞Hep3B凋亡。为进一步检测2-(4-甲氧基-苯巯基)-5,8-二甲氧基萘-1,4-二酮诱导Hep3B细胞发生凋亡的原因,使用荧光探针JC-1检测了2-(4-甲氧基-苯巯基)-5,8-二甲氧基萘-1,4-二酮处理后Hep3B细胞内线粒体膜电位的变化。结果发现,与对照组相比,药物处理组线粒体膜电位显著下降,绿色荧光增强,红色荧光减弱,说明2-(4-甲氧基-苯巯基)-5,8-二甲氧基萘-1,4-二酮能通过线粒体损伤来诱导Hep3B细胞凋亡。由于2-(4-甲氧基-苯巯基)-5,8-二甲氧基萘-1,4-二酮显著诱导Hep3B细胞凋亡。因此,2-(4-甲氧基-苯巯基)-5,8-二甲氧基萘-1,4-二酮具有良好的抗肿瘤活性。

1-苯基2-硫脲对Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼肿瘤多重耐药相关基因表达的影响

目的探讨去色素药物1-苯基2-硫脲(PTU)对Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼肿瘤多重耐药相关基因abcb4及其标记基因egfp表达的影响及可能机制。方法选取受精后24 h(24 hpf)Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼胚胎做药物暴露实验,分为Control、PTU以及PTU+RES 3个组;持续用药96 h,通过荧光显微镜拍照检测各组斑马鱼胃肠道荧光强度;RT-qPCR检测abcb4、egfp及pxr基因mRNA,Western Blot检测abcb4、egfp蛋白(Abcb4、eGFP)的表达,罗丹明B积累实验检测不同组Abcb4功能。结果与Control组相比,PTU组Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼荧光表达增强(P<0.01),PTU+RES组荧光变化不明显(P>0.05);PTU组abcb4、egfp及pxr基因mRNA表达均增加(P<0.005),PTU+RES组pxr基因mRNA表达增加(P<0.005),abcb4、egfp基因mRNA表达无明显变化(P>0.05);PTU组abcb4、egfp蛋白表达均增加(P<0.005),PTU+RES组无明显变化(P>0.05);PTU组Abcb4功能增强(P<0.01),PTU+RES组无明显变化(P>0.05)。结论PTU可诱导Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼abcb4和egfp表达增加,核因子pxr可能参与PTU对abcb4和egfp的诱导调节过程,在应用PTU去色素处理的Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼进行药物筛选时需注意PTU对abcb4和egfp表达的影响。

联合心脑宁胶囊对脑梗死恢复期患者HMGB1/TLR4/NF-κB通路及脑中动脉血流的影响

目的分析联合心脑宁胶囊对脑梗死恢复期患者高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路及脑中动脉血流的影响。方法选取2019年1月至2023年10月收治的脑梗死恢复期患者82例,采用抽签法分组,将采用依达拉奉治疗患者设为依达拉奉组,采用依达拉奉联合心脑宁胶囊治疗患者设为联合心脑宁组,每组41例,均治疗2周。统计2组治疗2周后的临床疗效及治疗期间不良反应发生情况,比较2组治疗前和治疗2周后血清HMGB1/TLR4/NF-κB通路指标水平、神经损伤指标水平、脑中动脉血流参数及神经功能、认知功能、生活能力。结果治疗2周后,联合心脑宁组总有效率为92.68%高于依达拉奉组的73.17%(P<0.05)。治疗2周后2组血清HMGB1、TLR4、NF-κB水平降低,且联合心脑宁组低于依达拉奉组(P<0.05,P<001)。治疗2周后2组血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、中枢神经特异性蛋白(S100β)、神经营养因子-3(NT-3)水平降低,脑源性神经营养因子(BDNF)水平升高,且联合心脑宁组血清NSE、S100β、NT-3降低及BDNF升高程度均大于依达拉奉组(P<0.05,P<001)。治疗2周后2组脑中动脉平均流速(Vm)升高,脑中动脉阻力指数(RI)、搏动指数(PI)降低,且联合心脑宁组脑中动脉Vm升高及RI、PI降低程度均大于依达拉奉组(P<0.05,P<001)。治疗2周后2组美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分降低,蒙特利尔认知评估量表(MoCA)、改良Barthel指数(MBI)评分升高,且联合心脑宁组NIHSS评分降低及MoCA、MBI评分升高程度均大于依达拉奉组(P<0.05,P<001)。治疗期间,2组总不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论心脑宁胶囊联合依达拉奉治疗可有效调节脑梗死恢复期患者HMGB1/TLR4/NF-κB通路因子表达水平,缓解患者神经损伤,改善脑中动脉血流情况,提高患者神经功能、认知功能、生活能力,具有较好的临床疗效,且安全性良好。

托吡酯联合拉莫三嗪对癫痫患者HMGB1、TLR4及IL-1β水平的影响

目的观察托吡酯联合拉莫三嗪对癫痫患者高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)、白介素-1β(IL-1β)水平的影响。方法选取2022年1月—2023年8月南京医科大学康达学院附属涟水县人民医院收治的癫痫患者66例,以随机数字表法分为联用组33例和单药组33例。联用组采取托吡酯联合拉莫三嗪治疗,单药组采取拉莫三嗪治疗,2组均连续治疗3个月。比较2组疗效,治疗前后血清学指标(HMGB1、TLR4及IL-1β)、癫痫发作状态及不良反应。结果联用组总有效率为93.94%,高于单药组的75.76%(χ^(2)=4.243,P=0.039)。治疗3个月后,2组HMGB1、TLR4及IL-1β水平低于治疗前,且联用组低于单药组(P<0.01);2组癫痫发作持续时间短于治疗前,发作次数少于治疗前,且联用组变化程度大于单药组(P<0.01)。联用组与单药组不良反应总发生率比较差异不显著(9.09%vs.12.12%,P=1.000)。结论较单独拉莫三嗪治疗,托吡酯联合拉莫三嗪治疗癫痫更能提高疗效,可显著改善患者HMGB1、TLR4及IL-1β水平,稳定癫痫状态,减少发作次数与时间,且不良反应无明显增加。

血清TLR4、HMGB1、NF-κB与全麻妇科腹腔镜术后肺部感染的关系

目的:探讨血清Toll样受体4(TLR4)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)、核转录因子-κB(NF-κB)与全麻妇科腹腔镜术后肺部感染的关系。方法:回顾性分析我院2022年1月—2023年1月接受全麻妇科腹腔镜手术的120例患者的临床资料,根据住院期间是否发生肺部感染分为感染组18例、未感染组102例。比较两组基础资料及血清TLR4、HMGB1、NF-κB水平,分析全麻妇科腹腔镜术后肺部感染的危险因素,以及血清TLR4、HMGB1、NF-κB对全麻妇科腹腔镜术后肺部感染的预测价值。结果:两组年龄、肿瘤类型、糖尿病、手术时间、术后卧床时间、血红蛋白比较,差异均有统计学意义(P<0.05);感染组血清TLR4、HMGB1、NF-κB均明显高于未感染组,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,年龄、肿瘤类型、糖尿病、手术时间、术后卧床时间、血红蛋白、血清TLR4、HMGB1、NF-κB均是全麻妇科腹腔镜术后肺部感染的危险因素(P<0.05);ROC分析显示,血清TLR4预测全麻妇科腹腔镜术后肺部感染的曲线下面积(AUC)为0.970,95%CI为0.948~1.000,HMGB1的AUC为0.983,95%CI为0.962~1.000,NF-κB的AUC为0.932,95%CI为0.846~1.000。结论:血清TLR4、HMGB1、NF-κB对全麻妇科腹腔镜术后肺部感染有较好的预测价值,临床上应予以密切关注。

杂种白杨717-1B4组培技术研究

为保持杂种白杨717-1B4的优良性状,解决生根困难瓶颈,建立了生理年龄一致性和容器化生根炼苗的组织培养繁育技术。结果表明:外植体为母株根蘖的根际萌芽,以有效氯1.0%的乙氰脲酸钠溶液灭菌25 min,接种在MS培养基上效果最好,再生不定芽达75.91%;以再生不定芽3个以上的外植体进行继代培养,继代周期为30 d,平均再生不定芽12.2个;外植体再生的不定芽扩繁1次转移至营养钵基质上生根和练苗,增殖系数达3.73,增殖培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;生根培养基中IBA为2.0 mg/L生根最好,生根率达98.89%;揭开培养瓶盖驯化小植株容器苗,使之适应自然环境,驯化成活率达92.5%。

1，4-双[3-脂肪基／苯基-1，2，4-三唑并[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]芳基衍生物的合成与生物活性

在三氯氧磷催化下,6种3-脂肪基-1,2,4-三唑(1a^1f)和3-苯基-1,2,4-三唑(1g)分别与对苯二甲酸和2-氨基-1,4-对苯二甲酸发生环化反应,高产率合成了14种双枝三唑并噻二唑稠环衍生物(2和3),并对其进行了结构表征及药物活性测试.目标化合物对Cdc25B和PTP1B抑制活性筛选结果表明,化合物2f,3a和3g对Cdc25B有较高的抑制活性,IC50值分别为(3.45±0.60),(0.69±0.10)和(1.52±0.19)μg/mL;化合物3a和3b对PTP1B表现出较高的抑制活性,IC50值分别为(0.98±0.13)和(2.00±0.16)μg/mL.

共刺激分子4-1BBL和B7-1在人脑胶质瘤细胞中的表达

背景与目的:4-1BBL和B7-1为诱导和维持T细胞活化提供了重要的共刺激信号,目前被认为是提高抗肿瘤免疫的治疗靶点。本研究探讨4-BBL和B7-1在7株胶质瘤细胞系表面的表达情况。方法:用流式细胞仪检测7株胶质瘤细胞株表面的共刺激分子4-1BBL和B7-1的表达,同时用MTT法分析胶质瘤细胞系对抗癌药物长春新碱(VCR)敏感性,并分析4-1BBL的表达与耐药性的相关性。结果:发现在所检测的胶质瘤细胞表面有不同程度的表达4-1BBL,但均不表达B7-1。其中T98G和MGR1细胞表面的4-1BBL表达>30%,对VCR不敏感,UW28、SKMG1、MGR2、SF767、SKMG4细胞表面的4-1BBL表达<10%,对VCR敏感。结论:本研究所检测的胶质瘤细胞均不表达共刺激分子B7-1,但有不同程度的表达4-1BBL,并且4-1BBL高表达的胶质瘤细胞对长春新碱敏感性差。

参地颗粒对慢性肾小球肾炎脾肾亏虚证患者细胞毒T淋巴细胞相关抗原-4/外周单个核细胞B7-1介导的免疫炎症紊乱的影响

【目的】观察参地颗粒对于脾肾亏虚型慢性肾小球肾炎(CGN)患者外周细胞毒T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)、外周单个核细胞B7-1(CD80)水平和血清白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、干扰素γ(IFN-γ)的影响,探讨参地颗粒对CGN患者的CTLA-4/B7-1介导的免疫炎症紊乱的干预作用。【方法】将60例脾肾亏虚型CGN患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例;另选择20例同期健康体检者作为正常组。2组患者均给予西医常规治疗,治疗组同时给予参地颗粒治疗,对照组同时给予缬沙坦胶囊治疗,疗程12周。观察2组治疗前后24 h尿蛋白定量(24hUPr),外周血B7-1、IL-2、IL-6、IFN-γ及尿B7-1水平的变化情况,并评价2组的疗效。【结果】(1)治疗组剔除2例,对照组剔除3例,最终治疗组28例、对照组27例完成试验。(2)治疗后,2组患者的中医证候积分均较治疗前下降(P<0.05),且治疗组的降低作用明显优于对照组(P<0.05)。(3)治疗组和对照组的中医证候疗效总有效率分别为92.86%、55.56%,临床疾病疗效总有效率分别为89.29%、62.96%,治疗组的中医证候疗效和临床疾病疗效均优于对照组(P<0.05)。(4)治疗后各个时点,对照组的24hUPr含量与治疗前比较均无统计学差异(P> 0.05);治疗组在治疗8周、12周后的24hUPr含量均较治疗前明显降低(P <0.05),且其降低作用明显优于对照组(P <0.05)。(5)治疗前,2组患者血清IL-2水平均较正常组下降,IL-6、IFN-γ水平均较正常组升高(P <0.05)。治疗后,2组患者血清IL-2水平均较治疗前升高(P <0.05),IL-6、IFN-γ水平均较治疗前下降(P <0.05);组间比较,治疗组对血清IL-6、IFN-γ表达水平的降低作用优于对照组(P <0.05)。(6)治疗后,2组患者血清和尿B7-1表达水平均较治疗前下降(P <0.05),但治疗后组间比较,差异均无统计学意义(P> 0.05)。【结论】CGN患者体内CTLA-4/B7-1信号系统存在紊乱,引起Th1/Th2细胞失衡,造成炎症因子的分泌和免疫复合物的沉积,导致系膜增生、系膜基质增多,肾小球损害加重。参地颗粒可以减少24hUPr,调节慢性肾小球肾炎患者共刺激信号系统,下调IFN-γ、IL-6等细胞炎症因子,平衡Th1/Th2细胞,抑制免疫紊乱的继续,减轻肾脏病理损害。