高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法测定荔枝果实中29种农药多残留

采用高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱技术结合优化的QuEChERS方法,建立了荔枝全果中29种农药的多残留检测分析方法。样品经乙腈提取,利用无水硫酸镁吸水和氯化钠盐析作用,进行离心分层后,取部分乙腈上清液进行净化,净化剂为无水MgSO_(4)、N-丙基乙二胺吸附剂、石墨化碳黑吸附剂,采用电喷雾离子源正负离子交换扫描方式对29种农药数据信息进行采集。29种农药在质量浓度0.001~0.2 mg/L内具有较好线性相关性(相关系数R^(2)均大于0.99),在3个添加水平(0.01、0.1、0.5 mg/kg)下,29种农药的回收率均值为70.2%~102.4%,相对标准偏差为2.4%~6.2%。方法检出限为0.1~3μg/kg,定量限为0.3~10μg/kg。该方法具有操作便捷、回收率高和灵敏度高等特点,可用于同时快速测定荔枝中29种农药的多残留。

感音神经性耳聋患者外周血miR-34c、miR-29b的表达及意义

目的探讨感音神经性耳聋(SNHL)患者外周血miR-34c、miR-29b的表达情况及临床意义。方法筛选2020年6月至2023年6月我院收治的神经性耳聋患者140例为观察组,同期选取体检健康者40例为对照组。根据听力损伤情况将SNHL患者分为轻度耳聋组63例,中度耳聋组42例,重度耳聋组35例。采用qRT-PCR检测miR-34c、miR-29b的表达,并检测VEGF、氧化应激水平(TAC、SOD、MDA)、NO和Cx26;采用Pearson检验进行相关性分析,采用logistic回归分析SNHL病情严重程度的独立危险因素,采用ROC曲线评估miR-34c、miR-29b对SNHL患者病情严重程度的预测价值。结果4组NO、TAC、SOD、Cx26水平比较,重度耳聋组<中度耳聋组<轻度耳聋组<对照组(P<0.05);VEGF和MDA水平比较,重度耳聋组>中度耳聋组>轻度耳聋组>对照组(P<0.05)。4组miR-34c mRNA和miR-29b mRNA表达水平比较,重度耳聋组>中度耳聋组>轻度耳聋组>对照组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,SNHL患者外周血miR-34c、miR-29b与VEGF、MDA呈正相关,与NO、TAC、SOD、Cx26呈负相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,VEGF、MDA、NO、Cx26、TAC、SOD、miR-34c、miR-29b是影响SNHL病情严重程度的独立因素。结论miR-34c、miR-29b在SNHL患者中过表达,可作为预测评估SNHL患者病情严重程度的血清标志物。

艾司洛尔对急性心肌梗死PCI患者炎性因子及血清miR-29a、GDF-15的影响

目的 探究艾司洛尔对急性前壁ST段抬高型心肌梗死经皮冠状动脉介入(PCI)术患者的治疗效果,以及对患者炎性因子及血清微小核糖核酸-29a(miR-29a)、生长分化因子-15(GDF-15)的影响。方法 前瞻性选取2021年4月至2023年6月于新乡市中心医院行PCI术治疗的120例急性前壁ST段抬高型心肌梗死患者。按照随机数字表法分为艾司洛尔组和对照组,每组60例。对照组予以常规治疗,艾司洛尔组在常规治疗基础上予以艾司洛尔注射液治疗24 h,比较两组安全性、心功能指标、炎性因子水平、心肌酶学、miR-29a、GDF-15的差异。结果 两组在症状性低血压、症状性心动过缓以及恶性心律失常发生率方面比较差异没有统计学意义(P>0.05)。两组治疗1周后左心室射血分数与治疗前比较升高,左心室收缩末期容积指数、左心室舒张末期内径和BNP与治疗前比较降低(P<0.05);且艾司洛尔组治疗1周后左心室射血分数、左心室收缩末期容积指数、左心室舒张末期内径和BNP的变化优于对照组(P<0.05)。两组治疗1周后CRP、髓过氧化物酶、IL-6、CK-MB、cTnI与治疗前比较均降低(P<0.05);且艾司洛尔组治疗1周后CRP、髓过氧化物酶、IL-6、cTnI的变化均优于对照组(P<0.05)。重复测量分析结果显示,两组治疗3 d、1周miR-29a、GDF-15与治疗前相比均降低(P<0.05),且治疗1周miR-29a、GDF-15低于治疗3 d(P<0.05)。艾司洛尔组治疗3 d、治疗1周miR-29a、GDF-15优于对照组(P<0.05)。结论 艾司洛尔应用于行PCI术的急性前壁ST段抬高型心肌梗死患者可有效改善心功能,降低炎性因子水平,减少心肌损伤,并降低血清miR-29a、GDF-15水平,同时安全性较好。

miR29c下调S100A4蛋白表达参与人胃癌细胞增殖促进凋亡

目的探讨miR-29c对人胃腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其与转移相关蛋白S100A4的关系。方法采用细胞培养人胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901和人正常胃粘膜上皮GES-1细胞,应用qRT-PCR检测各株细胞miR29c的表达。用hsamiR29c-mimics类似物(miR29c组),hsa-miR29c-inhibitor(阴性对照组)分别转染BGC-823细胞,空白对照组加入转染液,用CCK8及MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测S100A4相关肿瘤相关蛋白的表达。结果与正常胃粘膜上皮细胞GES-1表达率(1.131±0.069)相比,MiR-29c在胃癌细胞BGC823(0.254±0.025),SGC-7901(0.466±0.057)(F=57.5,P<0.05)。BGC823细胞转染miR29c模拟物后MiR-29c的表达量为:4.126±0.231,0.405±0.174,0.557±0.102,差异具有统计学意义(F=850.1,P<0.05)。转染24h、48h、72h后,MiR-29c组细胞的OD450值分别为:1.074±0.127、1.609±0.178、2.008±0.104;阴性对照组为:0.419±0.169、0.477±0.092、0.738±0.153,空白对照组为:0.830±0.305。其中,转染48h、72h后,MiR-29c组明显高于对照组(F=59.46,P<0.05)。细胞转染24h后,miR29c组细胞凋亡率分别是(6.900±0.414)%、(4.490±0.316)%、(3.850±0.243)%,,阴性对照组凋亡率分别是(10.830±0.231)%、(11.940±0.279)%、(13.530±0.941)%,空白对照组凋亡率分别是:(10.190±0.188)%、(11.76±0.569)%、(13.260±0.987),(P<0.001).各组S100A4蛋白的表达分别为0.770±0.028、1.109±0.083、1.024±0.042,(P=0.0021)。结论miR29c在胃癌细胞系中表达降低,通过抑制S100A4抑制人胃癌细胞增殖并促进胃癌细胞凋亡。

多发性骨髓瘤组织中miR-29c、miR-195表达水平变化及其与临床病理特征及预后的关系

目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)组织中miR-29c、miR-195表达水平变化及其与临床病理特征及预后的关系。方法 选取75例MM患者作为病例组,另选取同期就诊的75例骨髓象检查为正常的非血液系统疾病患者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(q-PCR)检测骨髓组织中miR-29c、miR-195表达水平,根据检测平均值将miR-29c、miR-195分为高水平组和低水平组,分析miR-29c、miR-195表达水平与临床病理特征及预后的相关性。结果 病例组骨髓组织miR-29c、miR-195表达水平低于对照组(P<0.05)。miR-29c低水平组中ISS分期Ⅲ期及血清白蛋白水平<35 g/L的患者占比高于高水平组(P<0.05);miR-195低水平组中ISS分期Ⅲ期及血清白蛋白水平<35 g/L的患者占比高于高水平组(P<0.05);miR-29c低水平组的生存期低于高水平组(P<0.05),miR-195低水平组的生存期低于高水平组(P<0.05)。miR-29c、miR-195表达水平与ISS分期呈负相关(P<0.05),与血清白蛋白、生存期呈正相关(P<0.05)。结论miR-29c、miR-195均在MM患者骨髓组织中低表达,且低表达miR-29c、miR-195患者的生存期较短。miR-29c、miR-195表达水平与ISS分期呈正相关,与血清白蛋白、生存期呈负相关。

miR-29c-3p调控ERLIN2抑制肺腺癌发展的作用

目的:探讨miR-29c-3p在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)发生发展中的作用。方法:利用公共数据库分析miR-29c-3p和ERLIN2在肺腺癌中的表达及其与临床病理参数的相关性。采用qRT-PCR检测miR-29c-3p在LUAD细胞系和正常支气管上皮细胞系中的表达,CCK8、细胞克隆形成、Transwell和伤口愈合实验评估miR-29c-3p在细胞增殖、迁移和侵袭中的作用,利用生物信息学工具预测miR-29c-3p下游靶基因,并通过双荧光素酶报告基因分析验证靶向关系。结果:miR-29c-3p在肺腺癌组织和细胞中低表达。miR-29c-3p低表达患者的预后较差,miR-29c-3p是肺腺癌患者的独立预后因素,并与淋巴结转移状态和临床分期密切相关。细胞实验表明,抑制miR-29c-3p可促进A549细胞的增殖、迁移和侵袭。生物信息学分析表明,ERLIN2是miR-29c-3p的靶基因,二者表达呈负相关。通过双荧光素酶报告基因测定验证了上述靶向关系。在UALCAN数据库中,ERLIN2在肺腺癌组织中高表达,并与患者年龄、性别、吸烟、肿瘤分期、淋巴结转移和TP53突变状态密切相关,ERLIN2高表达患者总生存率低于低表达患者。结论:miR-29c-3p通过靶向ERLIN2抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,是肺腺癌患者的独立预后因素。

尿外泌体miR-29c对器官和非器官局限性膀胱尿路上皮癌临床结局的预测价值

目的 探讨尿外泌体微小RNA(miR)-29c对器官和非器官局限性膀胱尿路上皮癌(BUC)临床结局的预测价值。方法 2017年1月~2022年3月,从我院泌尿外科选取152例BUC病人作为验证集。另外,从我院体检中心选择了126例非癌对照。采用实时荧光定量PCR法检测尿外泌体miR-29c表达水平。结果 验证集BUC病人尿外泌体miR-29c水平低于非癌对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而尿外泌体miR-17-5p水平和miR-590-5p水平比较无明显差异(P>0.05)。尿外泌体miR-29c水平诊断BUC的ROC曲线下面积为0.969(95%CI:0.953~0.986),相应的敏感性和特异性分别为92.1%和90.2%。亚型分析中,非器官局限性BUC病人尿外泌体miR-29c水平较器官局限性BUC病人进一步降低(P=0.009)。预后分析中,尿外泌体miR-29c高表达组病人总生存期、无病生存期和疾病特异性生存期均更长(P<0.05)。结论 尿外泌体miR-29c低水平是BUC病人不利的预后因子,有希望作为器官和非器官局限性BUC不良临床结局的预测标志物。

miR-29b通过KLF4调控血管平滑肌细胞增殖及表型蛋白表达

目的探讨微小RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)通过靶向作用于Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)信号通路对血管平滑肌细胞增殖及表型蛋白表达的影响。方法将血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)分为4组:无义序列对照组(control+NC)、miR-29b过表达对照组(control+miR-29b)、无义序列模型组(ox-LDL+NC)、miR-29b过表达模型组(ox-LDL+miR-29b)。对照组细胞正常培养;模型组细胞采用80 mg/L氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导24 h建立模型。细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测VSMCs的增殖情况;实时荧光定量PCR检测miR-29b、单核细胞化学趋化因子1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、MCP-3、α平滑肌肌动蛋白(smooth muscleα-actin,SMα-actin)、平滑肌肌球蛋白重链(smooth muscle myosin heavy chain,SM MHC)及KLF4的mRNA表达水平;酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测培养上清中MCP-1、MCP-3水平;Western blot检测蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-29b对KLF4的靶向作用。结果ox-LDL刺激VSMCs后,细胞中miR-29b表达量显著下降。与ox-LDL+NC组相比,ox-LDL+miR-29b组细胞增殖减少,炎症因子MCP-1和MCP-3的表达降低,收缩表型蛋白SMα-actin、SM MHC的表达显著升高,KLF4表达下降。双荧光素酶报告基因实验结果表明,miR-29b能与KLF4 mRNA的3′端非翻译区(3′UTR)结合。过表达KLF4可抑制miR-29b的作用。结论miR-29b可靶向作用于KLF4,调控ox-LDL诱导的VSMCs增殖、炎症因子的表达及表型蛋白表达的变化。

妊娠期糖尿病孕妇血清微小RNA-29a-3p、胰岛素样生长因子-1表达水平及其对胎儿生长受限的预测价值

目的探究妊娠期糖尿病(GDM)孕妇血清微小核糖核苷酸(micro RNA,miR)-29a-3p、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)表达水平及其对胎儿生长受限的预测价值。方法选择2019年8月—2022年12月在本院202例就诊分娩的GDM患者(132例)及同期体检健康孕妇(70名)作为研究对象,就诊分娩的GDM患者为患病组,同期体检健康孕妇为对照组。根据GDM患者是否伴有胎儿生长受限分为GDM组和胎儿生长受限组,GDM组88例,胎儿生长受限组44例。qRT-PCR法检测血清miR-29a-3p水平,放射免疫法检测血清IGF-1表达。TargetScanHuman网站预测miR-29a-3p与IGF-1靶向关系。分析miR-29a-3p、IGF-1及其与胰岛素水平、新生儿体重、新生儿身长的相关性;Logistic回归分析GDM孕妇发生胎儿生长受限的影响因素;ROC曲线分析血清miR-29a-3p,IGF-1水平评估GDM孕妇发生胎儿生长受限的预测价值。结果患病组孕妇血清miR-29a-3p水平高于对照组,IGF-1水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);GDM组患者血清miR-29a-3p水平低于胎儿生长受限组,IGF-1水平高于胎儿生长受限组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-29a-3p直接靶向作用于IGF-1表达;GDM组和胎儿生长受限组孕妇胰岛素、新生儿体重、新生儿身长比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。相关性分析表明,血清miR-29a-3p与IGF-1水平呈负相关(r=-0.402,P<0.05);血清miR-29a-3p水平与新生儿体重、新生儿身长呈负相关,IGF-1与新生儿体重、新生儿身长呈正相关(P<0.05)。Logistic回归分析表明,miR-29a-3p,IGF-1是GDM孕妇发生胎儿生长受限的影响因素(P<0.05)。血清miR-29a-3p,IGF-1水平联合评估GDM孕妇发生胎儿生长受限的曲线下面积(AUC)为0.877(95%CI:0.808-0.928),显著高于两指标单独检测(Z_(miR-29a-3p-联合)=2.893,P=0.004;Z_(IGF-1-联合)=2.810,P=0.005)。结论GDM孕妇血清miR-29a-3p水平上调,IGF-1水平下调,与胎儿生长受限密切相关,二者联合对GDM孕妇发生胎儿生长受限有较好预测价值。

不明原因复发性流产患者血清lncRNA-KCNQ1OT1、miR-29a-3p及SOCS3mRNA水平的表达及其相关性

复发性流产是指与同一性伴侣在妊娠28周之前,连续2次及以上发生自然流产的情况,其病因复杂,至今仍有50%以上的复发性流产病因尚未明确,即不明原因复发性流产(URSA)^([1-2])。有研究表明URSA患者子宫蜕膜存在明显的炎症微环境,可以引起性激素紊乱,与URSA的发生及发展密切相关^([3])。细胞因子信号传导抑制因子3 (SOCS3)是一个具有多项调节功能的蛋白质分子,可以调节机体免疫炎症反应,能够促进滋养细胞和T细胞增殖分化,从而影响着复发性流产的发生和发展^([4-5])。

Mo_(0.05)Ti_(1.95)Nb_(10)O_(29)/C复合负极材料的制备与性能研究

Ti_(2)Nb_(10)O_(29)具有理论容量高、结构稳定、安全性好等优势,是非常有应用前景的锂离子电池和锂离子电容器用新型负极材料,但其电子导电率极低,限制了应用。采用Mo掺杂和碳包覆双协同策略,经优化葡萄糖添加量所制Mo_(0.05)Ti_(1.95)Nb_(10)O_(29)/C复合负极材料显著提升了充放电性能,0.1C充放电的可逆容量达到了313.6mAh/g,10C倍率下的可逆容量比Ti_(2)Nb_(10)O_(29)的提升了72.3mAh/g,高达174.3mAh/g,且0.5C循环100圈后容量损失仅2.4%。第一性原理分析证明,该电性能的提升主要归因于Mo掺杂导致的Ti_(2)Nb_(10)O_(29)材料本征电子导电性提高及碳包覆导致的材料颗粒间电子传输行为改善。

昆磨高速公路K5至K29两侧土壤和玉米重金属污染研究

基于昆磨高速K5至K29两侧农田土壤及玉米野外调查采样,测定分析土壤及玉米中Pb、Cd和Cu的含量。采用综合污染指数法对玉米和土壤中重金属污染状况进行评价。随着公路两侧距离的增加,土壤、玉米中Pb含量逐渐减少,说明土壤中Pb主要来源于汽车尾气排放,建议在距离公路50m外种植玉米。玉米中Cd含量非常低,不受公路远近的影响。土壤Cu污染严重,但玉米均未受到Cu污染,说明土壤Cu未迁移转化到玉米可食用部分。

miRNA-29b及膜联蛋白A2在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的 探讨miRNA-29b(miR-29b)及膜联蛋白A2(ANXA2)在子宫内膜癌(EC)组织中的表达及其与预后的关系。方法 收集72例EC(EC组)、40例子宫内膜上皮瘤样病变(EIN组)和30例子宫良性疾病(对照组)患者的子宫内膜组织,检测各组miR-29b和ANXA2的表达水平,采用Pearson相关分析探索二者的相关性。根据miR-29b及ANXA2表达的中位值,将EC患者分为miR-29b低表达组、miR-29b高表达组和ANXA2低表达组、ANXA2高表达组,采用χ^(2)检验分析不同分组间临床病理特征的差别,采用Kaplan-Meier法和Cox回归分析其与术后总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的关系;双荧光素酶报告基因实验验证miR-29b与ANXA2的靶向关系。结果 与对照组和EIN组比较,EC组子宫内膜组织中miR-29b的表达水平明显降低,ANXA2的表达水平明显升高(P<0.05);miR-29b与ANXA2表达呈负相关(r=-0.321,P<0.05)。高miR-29b组患者的OS和PFS高于低miR-29b组(P<0.05),而高ANXA2组患者的OS和PFS低于低ANXA2组(P<0.05);miR-29b高表达是EC患者OS的保护因素(HR:0.177,95%CI:0.064~0.492,P<0.05),而ANXA2高表达是EC患者PFS的危险因素(HR:2.281,95%CI:1.139~4.567,P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实ANXA2是miR-29b的靶基因。结论 miR-29b可能通过靶向负调控ANXA2的表达参与EC的进展,二者均可作为EC患者潜在的预后指标。

基于miRNA-29c/白血病抑制因子轴探讨针刺调节脾虚大鼠肠道炎症机制研究

目的观察针刺调节miRNA-29c/白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)轴改善脾虚大鼠结肠炎症机制,探讨“健脾益气”针刺疗法改善脾虚便溏症状现代作用机理。方法将60只SD雄性大鼠以随机数字表法分为正常组、模型组、非经非穴组、针刺组,每组15只。除正常组外,其余3组采用劳倦过度和不规律饮食复合方法建立脾虚证大鼠模型。造模成功后,针刺组电针“足三里”穴及“脾俞”穴干预治疗,非经非穴组给予电针尾尖作为对照干预,每日1次/20 min,共治疗14 d。治疗结束后,取大鼠结肠组织及全血。qPCR检测大鼠结肠组织miRNA-29/LIF轴相关基因的表达;Western blot检测大鼠白介素-6(interleukin6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)的表达;ELISA检测结肠组织中白介素-1β(interleukin1β,IL-1β)、白介素-18(interleukin18,IL-18)的含量;HE染色法观察大鼠结肠组织病理形态变化;TUNEL染色观察各组结肠组织凋亡情况;流式细胞术观察外周血单个核细胞(PBMC)凋亡状况。结果与正常组相比,模型组大鼠结肠组织LIF的表达水平明显下降(P<0.05),miRNA-29、IL-1β、IL-6、白介素-8(interleukin18,IL-8)、TNF-αmRNA表达以及IL-6、TNF-α蛋白表达水平有所升高(P<0.05);与模型组相比,针刺组大鼠结肠组织LIF表达水平明显升高(P<0.05),miRNA-29c、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达以及IL-6、TNF-α蛋白表达水平有所降低(P<0.05),非经非穴组差异无统计学意义(P>0.05);与正常组相比,模型组大鼠结肠组织中促炎因子IL-1β、IL-18表达水平明显升高(P<0.05),与模型组相比,针刺组大鼠结肠组织中促炎因子IL-1β、IL-18的表达水平有所降低(P<0.05)。另外HE染色结果显示,针刺治疗可有效减轻结肠黏膜组织中炎症细胞浸润和杯状细胞的损失;TUNEL染色结果显示,针刺可以抑制miRNA-29c/LIF轴,改善脾虚大鼠结肠炎症,抑制结肠黏膜细胞凋亡;流式细胞术结果显示与正常组相比,模型组、非经非穴组大鼠PBMC凋亡率明显升高(P<0.05),与模型组相比,针刺组大鼠PBMC细胞凋亡率有所降低(P<0.05)。结论电针“足三里”“脾俞”穴可以调节miRNA-29c/LIF轴,抑制肠道炎症和促炎症介质的表达,进而抑制血液、结肠黏膜细胞凋亡,提高机体免疫力,从而改善脾虚便溏症状。

lncR-HOXA-AS3靶向miR-29a对前列腺癌细胞凋亡和自噬的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncR)HOXA-AS3和微小RNA-29a(miR-29a)对前列腺癌(PCa)细胞凋亡、自噬的影响。方法 体外培养人PCa细胞(DU-145、LNCaP、C4-2B)和人正常前列腺细胞RWPE-1,采用RT-qPCR法检测细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达。应用双荧光素酶报告基因实验验证lncR-HOXA-AS3和miR-29a之间的靶向调控关系。取对数生长期LNCaP细胞,分为si-NC组、si-HOXA-AS3组、si-HOXA-AS3+anti-miR-NC组和si-HOXA-AS3+anti-miR-29a组,利用脂质体转染法分别将si-NC、si-HOXA-AS3、si-HOXA-AS3+anti-miR-NC、si-HOXA-AS3+anti-miR-29a转染至各组LNCaP细胞,应用RT-qPCR法检测各组细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达,应用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,应用Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白Caspase-3及自噬相关蛋白LC3II、LC3I、Beclin 1表达。结果 与正常前列腺细胞相比,人PCa细胞中lncR-HOXA-AS3表达均明显升高(P均<0.05),而miR-29a表达均降低(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因显示lncR-HOXA-AS3能靶向miR-29a抑制荧光素酶活性(P<0.05)。与si-NC组比较,si-HOXA-AS3组LNCaP细胞lncR-HOXA-AS3表达降低(P<0.05),miR-29a表达升高(P<0.05),细胞凋亡率升高(P均<0.05),Caspase-3、LC3Ⅱ/LC3I及Beclin 1蛋白表达升高(P均<0.05)。与si-HOXA-AS3+anti-miR-NC组比较,si-HOXA-AS3+anti-miR-29a组LNCaP细胞miR-29a表达下降(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Caspase-3、LC3Ⅱ/LC3I及Beclin1蛋白表达下降(P均<0.05)。结论 抑制lncR-HOXA-AS3表达能靶向调控miR-29a基因促进PCa细胞凋亡和自噬。

柚皮素通过调控miR-29b的高表达对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用

目的 探讨柚皮素(Nar)调控微小RNA-29b(miR-29b)的高表达对人肝癌细胞HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)的作用,为研究Nar对糖尿病的防治作用机制做铺垫。方法 用100 nmol/L胰岛素刺激HepG2细胞建立HepG2细胞IR模型(IR-HepG2),分别用不同浓度(0、25、50、100μg/ml)的Nar干预IR-HepG2细胞;用葡萄糖试剂盒测定Nar对IR-HepG2细胞葡萄糖消耗的影响;对50μg/ml Nar干预组IR-HepG2细胞转染miR-29b mimic和miR-29b inhibitor,分别用实时定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法检测胰岛素信号传导通路中胰岛素受体底物-1(IRS-1)、蛋白激酶B/磷酸化蛋白激酶B(Akt/p-Akt)、葡萄糖转运子4(GLUT4)基因和蛋白的表达。结果 与IR-HepG2模型组比较,不同浓度Nar干预组细胞的葡萄糖消耗量升高(P<0.01),其中50μg/ml Nar干预IR组最明显(P<0.001),不同浓度Nar干预组IRS-1、Akt的mRNA表达增加(P<0.05),其中50μg/ml Nar干预组IRS-1、Akt的mRNA表达增加最明显(P<0.001),且50μg/ml Nar干预组GLUT4的mRNA表达增加(P<0.05),同时,不同浓度Nar干预组IRS-1、p-Akt的蛋白表达增加(P<0.001)。与IR-HepG2模型组相比,miR-29b mimic转染组细胞中IRS-1、Akt、GLUT4的mRNA表达和IRS-1、p-Akt蛋白表达降低(P<0.001),miR-29b inhibitor转染组中IRS-1、Akt、GLUT4的mRNA表达量和IRS-1、p-Akt蛋白表达无差异,Nar干预模型组和Nar干预转染miR-29b mimic组IRS-1、Akt、GLUT4的mRNA表达增加(P<0.001),IRS-1、p-Akt的蛋白表达增加(P<0.05)。与Nar干预模型组比较,Nar干预转染miR-29b mimic组IRS-1、Akt、GLUT4的mRNA表达无变化,IRS-1、p-Akt蛋白表达增加(P<0.05),Nar干预转染miR-29b inhibitor组IRS-1、Akt、GLUT4的mRNA表达和IRS-1、p-Akt的蛋白表达下降(P<0.001)。结论 Nar干预可增加IR-HepG2细胞葡萄糖的消耗,提高胰岛素抵抗HepG2细胞中IRS-1、Akt、GLUT4基因的表达量,增加IRS-1、p-Akt蛋白的表达量,Nar通过抑制miR-29b高表达增加IR-HepG2细胞IRS-1、p-Akt蛋白的表达,改善HepG2细胞IR,Nar有望作为糖尿病有效防治前景的植物化合物。

TRIM29在卵巢癌组织中的表达及其与卵巢癌顺铂化疗耐药性的关系

目的探讨三结构域蛋白29(TRIM29)在卵巢癌组织中的表达及其与化疗耐药性的关系。方法选取2019年1月至2021年1月儋州市人民医院手术切除的86例卵巢癌组织及对应的癌旁组织作为研究对象,采用免疫组织化学法测定TRIM29表达情况,分析TRIM29的表达与患者顺铂化疗耐药性的关系。结果TRIM29在癌组织中的表达显著高于癌旁组织(79.07%vs.4.65%,χ^(2)=10.216,P=0.001);卵巢癌患者癌组织中TRIM29的表达与国际妇产科联盟(FIGO)分期、病理分级及淋巴结转移有关(P<0.05)。TRIM29阳性表达患者化疗耐药性为48.53%,高于TRIM29阴性表达患者的11.11%(χ^(2)=9.457,P=0.002)。Cox回归分析显示,FIGO分期、淋巴结转移、TRIM29阳性表达是影响卵巢癌患者顺铂化疗耐药性的因素(P<0.05)。随访截至2023年1月30日,TRIM29阳性表达患者总体生存率为72.10%,低于TRIM29阴性表达患者的94.40%(χ^(2)=3.873,P=0.049)。结论TRIM29在卵巢癌组织中呈高表达,TRIM29阳性表达可显著增加卵巢癌顺铂化疗耐药性,且可提示患者预后情况。

半滑舌鳎突触体相关蛋白29基因(SNAP29)克隆及其组织分布和时序表达分析

为了分析半滑舌鳎突触体相关蛋白29基因(SNAP29)的分子生物学特征、组织分布特点以及感染海藻希瓦氏菌后的时序表达规律,通过RT-PCR、生物信息学网站、qRT-PCR技术对半滑舌鳎SNAP29基因进行了扩增、生信分析和表达特征研究。结果表明,半滑舌鳎SNAP29基因CDS区长度为789 bp,编码262个氨基酸,理论等电点(pI)为5.39,分子质量为29.71781 ku,有2个典型的SNARE结构域;二级结构主要由α-螺旋和无规卷曲组成,二级结构和三级结构基本一致;多序列比对结果显示,半滑舌鳎与欧洲鲈鱼SNAP29基因相似性最高;SNAP29基因在健康半滑舌鳎所测的各组织中均有表达,在鳃组织中表达最高,在脑组织中表达量最低;利用海藻希瓦氏菌人工感染半滑舌鳎后,SNAP29基因在肠道组织、心脏组织和脑组织中表达量主要呈现上调趋势,在肝脏、头肾、脾脏组织中主要呈现下调表达,SNAP29基因在健康半滑舌鳎组织中均有表达;海藻希瓦氏菌感染半滑舌鳎的肠道、脑、心脏、肝脏、头肾、脾脏组织中SNAP29基因呈现差异表达。综上,SNAP29可能参与机体免疫应答过程或病理生理过程。

渤中29-6油田超大位移井钻井液技术可行性分析

渤中29-6油田油气资源丰富,具有较高的开发价值。由于开发位置区域限制性,只能采取超大位移钻井进行开发。但油田主要储油存在地层疏松,失稳周期短,井壁易垮塌;断层多,安全密度窗口小,清洁井眼要求高,漏失风险大,摩阻扭矩大等各种难题。针对上述问题,从钻井液角度对渤中29-6超大位移井井壁稳定、井眼清洁、防漏堵漏、储层保护几个方面进行技术分析,结合渤海以及国内现有钻井液技术,给出解决方案,阐明渤中29-6油田超大位移井钻井液技术可行性,同时为渤海区域各油田提供超大位移井的开发提供新钻井液技术思路。

基于miR-29b/TGF-β/Smad信号通路探讨复方血栓通对糖尿病视网膜病变大鼠作用的机制 分析

目的基于miR-29b/转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路探讨复方血栓通对糖尿病视网病变(DR)大鼠的的作用机制。方法100只雄性SD大鼠,其中80只建立糖尿病模型,20只作为正常组。通过腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)成功建立糖尿病DR大鼠模型72只,按照随机数字表法将其分为模型组、二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组,每组各18只。二甲双胍组通过灌胃二甲双胍184 mg/kg,复方血栓通1组通过灌胃复方血栓通片100 mg/kg,复方血栓通2组通过灌胃复方血栓通片200 mg/kg,给药10周。正常组大鼠随意给予正常饮食和饮用水,而模型组、二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠喂以高脂肪饮食,直至第16周末。测定并比较各组大鼠血清胰岛素与血糖水平,比较各组大鼠血清细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6]、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛水平。实时荧光定量PCR与蛋白印迹法分别检测各组大鼠视网膜组织中miR-29b表达与TGF-β/Smad信号通路蛋白表达。结果与正常组相比,模型组大鼠血清胰岛素及30、60、90 min内血糖均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠血清胰岛素及30、60、90 min内血糖水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与正常组相比,模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与正常组相比,模型组血清中的血清SOD活性显著降低,丙二醛含量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠血清SOD活性显著增加,丙二醛含量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。正常组大鼠眼球视网膜视盘结构清晰,各层细胞排列整齐;模型组大鼠部分视网膜细胞水肿,层次模糊,排列稀疏紊乱,盘间隙呈空泡状,核染色质致密;二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠上述视网膜病变显著逆转。与正常组相比,模型组大鼠视网膜组织中miR-29b、TGF-β、p-Smad-3蛋白水平均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠视网膜组织中miR-29b、TGF-β、p-Smad-3蛋白水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组组间大鼠以上各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论复方血栓通可显著改善大鼠视网膜病变通过抑制机体氧化应激与炎症因子水平,其机制可能与抑制miR-29b/TGF-β/Smad信号通路相关。