抑郁症患者血清紧密连结蛋白-5和内源性配体-13水平变化及其与病情发展和睡眠障碍的关系

目的探讨抑郁症患者血清紧密连结蛋白-5(claudin-5)和内源性配体-13(Apelin-13)水平变化及其与病情发展和睡眠障碍的关系。方法选取2021年6月至2023年7月期间酒泉市人民医院收治的128例抑郁症患者作为观察组,另选取同期体检者128例作为对照组。分析抑郁症患者血清claudin-5、Apelin-13表达水平与汉密顿抑郁量表(HAMD)评分的相关性以及血清claudin-5和Apelin-13对抑郁症患者病情严重程度的诊断价值。结果观察组患者血清claudin-5表达水平高于对照组,随病情严重程度的加重而升高(P<0.05),与HAMD评分呈正相关(r=0.713,P<0.05),且睡眠障碍组患者血清claudin-5表达水平高于无睡眠障碍组(P<0.05),Apelin-13表达水平变化趋势与之相反;年龄、首发抑郁年龄和claudin-5为抑郁症患者睡眠障碍的危险因素,Apelin-13为保护因素(P<0.05);血清claudin-5和Apelin-13联合检测优于各自单独检测(Z_(二者联合-claudin-5)=2.393、Z_(二者联合-Apelin-13)=1.964,P=0.016、0.044)。结论抑郁症患者血清claudin-5和Apelin-13表达水平与病情发展及睡眠障碍有关,二者联合检测对重度抑郁症具有较高的诊断价值。

基于血清IL-13、D-D和MUC5AC水平建立机械排痰肺炎支原体肺炎患儿气道堵塞的列线图预测模型

目的探讨基于血清白细胞介素-13(IL-13)、D-二聚体(D-D)和黏蛋白5AC(MUC5AC)水平建立机械排痰肺炎支原体肺炎(MPP)患儿气道堵塞的列线图预测模型。方法选取2020年3月至2022年11月邢台医学高等专科学校第二附属医院收治的122例MPP患儿,按照支气管镜检结果将其分成气道堵塞组(n=38)和无气道堵塞组(n=84)。对两组MPP患儿的基线资料和血生化指标进行比较,采用多因素logistic回归分析确定MPP患儿气道堵塞的影响因素,应用R软件建立列线图气道堵塞预测模型。结果多因素logistic回归分析结果表明,累及肺叶数>2叶、年龄、血清IL-13、血清D-D和血清MUC5AC等是机械排痰MPP患儿气道堵塞的影响因素。基于多因素logistic回归分析结果建立机械排痰MPP患儿气道堵塞的列线图预测模型,应用Bootstrap法内部验证列线图预测模型,抽样800次,区分度评价指标列线图预测气道堵塞发生的C-index为0.736(95%CI:0.650~0.834),校准预测曲线和理想曲线拟合良好。结论基于血清IL-13、D-D和MUC5AC建立的列线图预测模型可应用于预测机械排痰MPP患儿气道堵塞,值得临床进一步研究和推广。

miR-1271-5p靶向F13A1基因对口腔鳞状细胞癌的调控作用

目的:探讨miR-1271-5p靶向F13A1基因对口腔鳞状细胞癌增殖和凋亡的调控作用。方法:培养OSCC细胞系SCC154细胞和人正常口腔角质形成细胞NHOK,检测miR-1271-5p、F13A1的表达。将细胞分为mimics NC组、mimics miR-1271-5p组,MTT检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,RT-qPCR和WB检测F13A1的表达。双荧光素酶报告验证miR-1271-5p与F13A1的靶向关系。将细胞分为mimics NC组、mimics miR-1271-5p组、mimics miR-1271-5p+OE-F13A1组,MTT检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡。结果:与人正常口腔角质形成细胞NHOK比,OSCC细胞miR-1271-5p表达降低,F13A1表达升高。相比于mimics NC组,mimics miR-1271-5p组细胞活力降低,细胞凋亡率增加,F13A1表达显著降低(P<0.05),inhibitors miR-1271-5p组F13A1表达显著升高(P<0.05)。相对于mimics miR-1271-5p组,过表达F13A1逆转miR-1271-5p对OSCC的抗增殖和促凋亡作用(P<0.05)。结论:miR-1271-5p靶向F13A1基因抑制OSCC细胞增殖,促进细胞凋亡。

miR-186-5p靶向CXCL13基因通过Wnt/β-catenin信号调节胃癌HGC-27细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移和侵袭

目的探讨miR-186-5p对胃癌HGC-27细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法在胃癌HGC-27细胞中通过脂质体转染miR-186-5p模拟物(mimics),采用实时荧光定量PCR检测转染效果,MTT实验分析HGC-27细胞增殖水平,流式细胞术分析细胞周期变化和细胞凋亡情况,Transwell实验分析HGC-27细胞迁移和侵袭能力,生物信息学、双荧光素酶报告基因实验以及Western blotting分析miR-186-5p和CXCL13的靶向关系,Western blotting分析Wnt/β-catenin信号通路活化情况。结果体外转染miR-186-5p mimics可上调HGC-27细胞中miR-186-5p的表达。上调miR-186-5p表达能够抑制HGC-27细胞体外增殖、细胞周期进程、迁移和侵袭能力,并促进细胞凋亡。miR-186-5p可靶向抑制CXCL13的表达,上调miR-186-5p表达能够抑制β-catenin和c-Myc的表达。结论miR-186-5p可靶向抑制CXCL13的表达,阻断Wnt/β-catenin信号通路,并抑制胃癌HGC-27细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。

血清PP-13、PLGF和SFRP5检测对妊娠期糖尿病不良妊娠结局的诊断价值

目的观察血清胎盘蛋白-13(PP-13)、胎盘生长因子(PLGF)和分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)检测对妊娠期糖尿病(GDM)不良妊娠结局的诊断效能。方法选择2020年1月至2021年12月该院诊断的GDM患者121例为GDM组。选择同期在该院行产检的健康孕妇78例为正常妊娠组。根据糖化血红蛋白(HbA1c)水平,将GDM组患者分为糖尿病控制良好组、糖尿病控制不良组和高风险组;根据GDM组患者随访结局分为妊娠结局不良组、妊娠结局良好组。观察GDM组和正常妊娠组血清PP-13、PLGF、SFRP5和尿微量清蛋白(mAlb)水平的变化,采用单因素和多因素分析影响妊娠结局的因素,分析血清PP-13、PLGF、SFRP5和尿mAlb水平与血糖控制程度和不良妊娠结局的关系,以及其对GDM患者不良妊娠结局的诊断效能。结果GDM组血清PP-13、PLGF和SFRP5水平明显低于正常妊娠组(P<0.01)。糖尿病控制良好组血清PP-13、PLGF和SFRP5水平高于糖尿病控制不良组和高风险组(P<0.01),尿mAlb水平低于糖尿病控制不良组和高风险组(P<0.01)。妊娠结局不良组GDM患者的HbA1c、空腹血糖、尿mAlb水平明显高于妊娠结局良好组(P<0.01),而血清PP-13、PLGF和SFRP5水平明显低于妊娠结局良好组(P<0.01),而两组年龄、孕周、体质量指数和孕次差异无统计学意义(P>0.05)。多因素Logistic回归分析发现,血清PP-13、PLGF和SFRP5是不良妊娠结局的保护因素(P<0.05),而尿mAlb是不良妊娠结局的危险因素(P<0.05)。血清PP-13、PLGF和SFRP5检测诊断不良妊娠结局的效能明显高于尿mAlb(P<0.05),联合检测的灵敏度为96.4%,特异度90.3%,曲线下面积(AUC)为0.964,其明显高于单项指标PP-13(Z=3.083,P<0.01)、PLGF(Z=2.602,P<0.01)和SFRP5(Z=3.569,P<0.01),而3项指标之间的AUC比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清PP-13、PLGF和SFRP5水平与GDM患者糖尿病控制程度具有一定的联系,联合检测有助于提高对GDM患者不良妊娠结局的诊断效能。

miR-155-5p和TRIP13在结直肠癌组织中的表达及与预后的关系

目的探讨miR-155-5p及甲状腺激素受体因子13(TRIP13)在结直肠癌(CRC)中的表达水平及与预后的关系。方法选取2015年1月—2017年5月本院经病理确诊的78例CRC患者为研究对象。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测CRC组织及癌旁组织中的miR-155-5p、TRIP13 mRNA表达情况,免疫组化染色法测定CRC组织及癌旁组织中TRIP13蛋白表达情况;分析miR-155-5p、TRIP13蛋白表达对CRC患者预后的影响;采用Kaplan-meier分析组织中miR-155-5p、TRIP13蛋白对CRC患者预后的影响;采用Pearson检验分析CRC组织中miR-155-5p与TRIP13 mRNA表达水平的相关性;多因素Cox回归分析CRC患者预后的影响因素。结果CRC组织miR-155-5p、TRIP13 mRNA表达水平及TRIP13蛋白的阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.05);CRC组织中miR-155-5p、TRIP13蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、浸润深度无关(P>0.05),与患者TNM分期、肿瘤分化、淋巴结转移具有显著相关性(P<0.05)。miR-155-5p高表达组5年内生存率(42.50%)低于低表达组(71.05%);TRIP13蛋白阳性组5年内生存率(43.48%)低于阴性组(75.00%);CRC组织中miR-155-5p与TRIP13 mRNA表达水平呈正相关(r=0.491,P<0.05);Cox回归显示,肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移、miR-155-5p、TRIP13是CRC患者预后的影响因素(P<0.05)。结论CRC组织中miR-155-5p、TRIP13表达上调,并与CRC的进展和患者的预后有关,检测miR-155-5p、TRIP13表达情况有助于患者的预后评估。

LncRNA LUCAT1靶向调控miR-937-5p/MMP13轴对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移能力的影响

目的 探究长链非编码核糖核酸(LncRNA)肺癌相关转录物1(LUCAT1)靶向调控微小RNA-937-5p(miR-937-5p)/基质金属蛋白酶13(MMP-13)轴对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移的影响。方法 采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测NSCLC组织和细胞中LUCAT1、miR-937-5p和MMP-13 mRNA相对表达水平。将A549细胞分为Control组、sh-NC组、sh-LUCAT1组、sh-LUCAT1+anti-miR-937-5P组、sh-LUCAT1+OE-MMP-13组。并进行相应转染处理后,qRT-PCR和蛋白印迹检测转染效率,CCK-8和BrdU检测细胞活力和增殖;Transwell检测细胞迁移。双荧光素酶用于验证LUCAT1、miR-937-5p和MMP-13之间关系。异种移植肿瘤实验用于证实LUCAT1对肿瘤生长的影响,分为sh-NC组和sh-LUCAT1组。结果 LUCAT1和MMP-13 mRNA在NSCLC组织和细胞系中高表达,而miR-937-5p表达下调(P<0.05)。敲低LUCAT1在体外抑制A549细胞增殖和迁移,并在体内抑制肿瘤生长(P<0.05)。miR-937-5p被预测并被鉴定为LUCAT1的直接靶标,MMP-13被预测并被鉴定为miR-937-5p的靶基因,LUCAT1可通过miR-937-5p调控MMP-13表达(P<0.05)。抑制miR-937-5p或过表达MMP-13可部分逆转敲低LUCAT1在体外对细胞增殖和迁移的抑制作用(P<0.05)。结论 敲低LUCAT1通过靶向miR-937-5p间接下调MMP-13表达,抑制NSCLC细胞增殖和迁移。

结直肠癌中CXCR5、CXCL13、MMP-12和MMP-13的表达及意义

目的观察结直肠癌组织中趋化因子CXCR5及其配体CXCL13以及MMP-12、MMP-13的表达,探讨其与临床病理特征、预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测236例结直肠癌及其切缘正常肠黏膜组织以及62例结直肠腺瘤组织中CXCR5、CXCL13、MMP-12和MMP-13蛋白表达。结果 (1)CXCR5、CXCL13、MMP-12、MMP-13在结直肠癌组织中的表达率为43.6%、41.5%、83.5%和80.5%均高于在切缘正常肠黏膜组织中的表达率(4.2%、5.5%、11.9%和13.1%)及在结直肠腺瘤组织中的表达率(24.2%、17.7%、69.4%和64.5%)(P均<0.05)。(2)CXCR5、CXCL13、MMP-12、MMP-13蛋白表达与淋巴结转移、远处转移、肿瘤分期及复发呈正相关(P<0.05)。CXCL13蛋白表达与组织分化程度呈正相关(P<0.05)。(3)CXCR5与CXCL13蛋白表达呈正相关(P<0.05)。CXCR5、CXCL13蛋白表达分别与MMP-12和MMP-13呈正相关(P<0.05)。结论 CXCR5、CXCL13、MMP-12、MMP-13的表达促进结直肠癌的发生、发展以及转移、复发,可作为预测结直肠癌转移和复发的有价值指标。

Apelin-13对5-Aza诱导脐带间充质干细胞向心肌细胞分化的影响

目的探讨apelin-13蛋白在体外对5-氮胞苷(5-Aza)诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)向心肌细胞分化的影响。方法采用组织块贴壁法培养hUC-MSCs,胰酶消化传代;取P2代细胞置于不同分化条件的培养液中分化培养14d,实验分为A、B、C、D组(apelin-13浓度分别为0、1×10-6、2×10-6和10×10-6mol/L),各组培养基中5-Aza浓度均为10×10-6mol/L。采用流式细胞仪检测hUC-MSCs表面免疫标记,MTT法检测细胞在570nm处的吸光度(A)值,RTPCR检测肌钙蛋白T(cTnT)、GATA-4 mRNA表达水平,免疫组织化学染色法检测心肌细胞表面标志物cTnT的表达。结果流式细胞仪鉴定结果表明,hUC-MSCs表达CD44、CD90、CD105、CD73、经典人类白细胞抗原Ⅰ类抗原(HLAABC),不表达CD34、CD45、经典人类白细胞抗原Ⅱ类抗原(HLA-DR)。MTT检测显示,0、10×10-6mol/L apelin-13处理的hUC-MSCs在570nm处的A值分别为0.841±0.290、0.875±0.325,差异无统计学意义(P>0.05)。B、C、D组cTnT mRNA表达水平分别是A组的2.09±1.35、5.24±1.30、1.17±0.63倍,B、C、D组GATA-4 mRNA表达水平分别是A组的2.68±1.18、4.82±0.14、2.14±0.27倍;C组与B、D组比较,cTnT、GATA-4 mRNA表达差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫组化染色显示,诱导14d后C组细胞cTnT蛋白表达呈阳性。结论 10×10-6mol/L apelin-13对hUC-MSCs无毒性作用,一定浓度的apelin-13蛋白可增强5-Aza诱导hUC-MSCs向心肌细胞分化的效率,浓度为2×10-6mol/L时增强作用最明显。

13-cis-维A酸-5-氟尿嘧啶酯的合成、表征及其活性研究

在比较DCC-DMAP和HMPA两种不同合成方法的基础上,在室温下顺利地将在通常反应条件下极易异构化的13-cis-维A酸合成了其衍生物13-cis-维A酸-N1-(2-四氢呋喃烷基)-N3-乙基-5-氟尿嘧啶酯(5,RAFU),其结构通过1HNMR、13CNMR和MS进行了表征。生物活性测试表明,该化合物对肝癌细胞、舌癌细胞等癌细胞都具有抗癌活性。

不同类型过敏性结膜炎患者眼表组织中白细胞介素-4、5和13的表达

背景 过敏性结膜炎的发病机制尚未完全明确.研究表明,白细胞介素-4（IL-4）、IL-5和IL-13在过敏性结膜炎中发挥重要作用,但这些因子对不同类型的过敏性结膜炎患者的作用是否一致尚有待证明.目的 探讨IL-4、IL-5和IL-13在不同类型过敏性结膜炎患者眼表组织中的表达及其在不同类型过敏性结膜炎发病中的作用.方法 采用前瞻性队列研究设计.纳入2013年4月至2014年9月在山西省眼科医院就诊的春季角结膜炎（VKC）患者20例40眼、季节性过敏性结膜炎（SAC）患者20例40眼和常年性过敏性结膜炎（PAC）患者20例40眼,并纳入同期健康志愿者20人40眼作为正常对照.用消毒刮刀在上睑结膜刮取结膜上皮细胞,分别采用免疫组织化学法、实时荧光定量PCR法检测结膜上皮细胞中IL-4、IL-5和IL-13蛋白及其mRNA的表达;采用1μl毛细玻璃管于受试者下睑颞侧睑缘处吸取泪液4μl,Luminex液相芯片测定受试者泪液中IL-4、IL-5和IL-13的表达.结果 免疫组织化学法染色表明,VKC组、SAC组和PAC组患者结膜上皮细胞的细胞质中均可见到IL-4、IL-5和IL-13的阳性表达,而在正常对照组受试者结膜上皮细胞中未发现IL-4、IL-5和IL-13的表达.以正常对照组IL-4、IL-5和IL-13 mRNA的表达量为对照,VKC组、SAC组和PAC组中IL-4 mRNA的相对表达量分别为4.11±1.24、2.71±0.71和2.00±0.80,IL-5 mRNA的相对表达量分别为4.02±0.43、2.07±0.45和1.47±0.50,IL-13 mRNA的相对表达量分别为6.44±0.66、4.35±1.26和2.39±0.86,4个组间IL-4、IL-5和IL-13 mRNA相对表达量的总体比较差异均有统计学意义（F=51.32、220.18、162.49,均P＜0.01）;其中VKC组IL-4、IL-5和IL-13 mRNA的相对表达量明显高于SAC组和PAC组,SAC组IL-4、IL-5、IL-13 mRNA的相对表达量高于PAC组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.正常对照组受试者泪液中未检测到IL-4、IL-5和IL-13表达,VKC组泪液中IL-4、IL-5和IL-13蛋白质量浓度分别为（14.06±3.50）、（10.88±1.82）和（34.28±8.42） pg/ml,SAC组分别为（7.71±0.65）、（5.10±1.33）、（23.77±6.29） pg/ml,PAC组分别为（3.30±1.50）、（2.43±1.28）和（17.67±4.28） pg/ml,组间总体比较差异均有统计学意义（F=200.29、260.49、128.23,均P＜0.01）;其中VKC组IL-4、IL-5、IL-13蛋白质量浓度明显高于SAC组和PAC组,SAC组IL-4、IL-5和IL-13蛋白质量浓度明显高于PAC组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.结论 IL-4、IL-5和IL-13参与多种类型过敏性结膜炎的发病,但在不同类型过敏性结膜炎患者中眼表的表达均有差异.

13-甲基十四烷酸对H_2O_2诱导SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用

目的:探讨13-甲基十四烷酸(13-MTD)对过氧化氢(H2O2)诱导SH-SY5Y神经细胞损伤的影响。方法:采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞H2O2损伤模型。光镜观察细胞形态,SRB法检测细胞存活率,AO/EB双重染色法检测细胞凋亡,MTT法检测线粒体活性。结果:与正常对照组相比,H2O2损伤模型组细胞出现明显病理改变,细胞存活率、线粒体活性均显著下降(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01);13-MTD10、20、40μg/mL可显著提高细胞存活率(P<0.01);13-MTD5、10、20μg/mL可显著下调细胞凋亡率(P<0.01);13-MTD5、10、20、40μg/mL可显著提高细胞MTT代谢率(P<0.01);且存在一定量效差异(P<0.05,P<0.01)。结论:不同剂量的13-MTD对H2O2诱导的SH-SY5Y神经细胞氧化损伤具有保护作用。

5-氮-2’脱氧胞苷诱导肺癌细胞系CDH13基因去甲基化及其表达

目的观察去甲基化制剂5-氮-2’脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)对人肺癌细胞系A549和LTEP-a2中CDH13基因启动子区甲基化状态及表达的影响,探讨肺癌细胞CDH13基因失活的机制及去甲基化制剂对CDH13基因表达的调控作用。方法 5-Aza-dC处理体外培养的肺癌细胞A549、LTEP-a2及正常肺细胞系HFL1后,用甲基化特异性PCR(MSP)法检测处理前后细胞中CDH13基因的甲基化状态,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测用药前后细胞中CDH13 mRNA表达的变化。结果正常肺细胞中未见CDH13启动子甲基化,肺癌细胞A549、LTEP-a2均发现CDH13启动子甲基化现象;应用5-Aza-dC能使CDH13基因启动子区CpG岛发生去甲基化。肺癌细胞A549、LTEP-a2均可见CDH13 mRNA表达,但与正常肺细胞比较表达较弱,经药物处理癌细胞后其CDH13 mRNA的表达较前明显增强。结论启动子区异常甲基化是肺癌细胞CDH13基因失活的主要原因之一,去甲基化制剂5-Aza-dC能完全逆转CDH13基因甲基化状态,从而调控CDH13基因表达。

lncRNA LINC00308作为ceRNA通过调控miR-361-5p/TRIP13轴促进前列腺癌PC3细胞的增殖和侵袭

目的:探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)LINC00308对前列腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移的影响及其相关作用机制。方法:利用基因芯片在前列腺癌组织与癌旁对照组织中筛选差异表达的lncRNA及mRNA,并确定LINC00308及甲状腺激素受体因子13(thyroid hormone receptor interactor13,TRIP13)为研究对象。MTT实验、平板克隆及Transwell和划痕实验检测LINC00308对前列腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,应用裸鼠移植瘤在体内验证上述影响,应用Western blotting及免疫组化实验在瘤组织和癌细胞中探究LINC00308对TRIP13表达的影响。生物信息学分析技术与RNA免疫共沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)及qPCR和双荧光素酶基因报告实验预测并探究miR-361-5p与LINC00308及TRIP13之间的相互作用机制,并利用平板克隆、Transwell侵袭实验对癌细胞恶性生物行为进行验证。结果:芯片结果及qPCR共同证实LINC00308(P<0.01)与TRIP13(P<0.05)在前列腺癌组织及4种细胞系中均异常高表达;细胞功能实验结果表明过表达LINC00308可以促进前列腺癌细胞PC3的增殖、侵袭及迁移能力(均P<0.05),而下调前列腺癌细胞中LINC00308表达起相反作用。裸鼠移植瘤实验证实,LINC00308能够在体内促进前列腺癌PC3细胞的成瘤(P<0.05或P<0.01),且能够在体内体外促进TRIP13表达(P<0.05)。生物信息学分析与RIP及qPCR和双荧光素酶基因报告实验结果证实miR-361-5p能够分别与LINC00308与TRIP13的3'-UTR靶向结合,且LINC00308能够通过吸附miR-361-5p而作为内源性竞争RNA(competing endoge-nous RNA,ceRNA)调控TRIP13的表达,MTT、平板克隆及Transwell实验检测癌细胞的增殖、克隆形成和侵袭能力变化证实了三者之间的调控作用。结论:在前列腺癌组织和细胞中异常高表达的LINC00308通过发挥ceRNA的功能抑制miR-361-5p表达而增强TRIP13表达,从而促进前列腺癌的增殖、侵袭及迁移能力。

miR-214-5p调控HOXA13抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞炎症反应及纤维化

目的探讨miR-214-5p通过调节同源盒蛋白(HOXA)13表达抑制高糖诱导的HMC细胞炎症反应和纤维化的作用机制。方法采用RT-qPCR检测高糖干预的HMC细胞中miR-214-5p、细胞间黏附分子(ICAM)-1、骨形态发生蛋白(BMP)-7和纤维连接蛋白(FN)表达。将miR-214-5p抑制剂(inhibitors)转染至HMC细胞后以30 mmol/L D-葡萄糖处理细胞,Western印迹检测细胞中ICAM-1、BMP-7和FN蛋白表达。采用Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因实验和Western印迹实验验证miR-214-5p与HOXA13的靶向关系。Western印迹检测过表达HOXA13对HMC细胞中ICAM-1、BMP-7和FN蛋白表达的影响。共转染miR-214-5p inhibitors和HOXA13 siRNA,检测细胞中TGF-β1蛋白表达。结果与5 mmol/L D-葡萄糖干预的HMC细胞相比,高糖诱导的细胞中miR-214-5p mRNA、ICAM-1和FN蛋白表达上调、BMP-7蛋白表达下调。在HMC细胞中抑制miR-214-5p或过表达HOXA13细胞中miR-214-5p mRNA、ICAM-1和FN蛋白表达水平降低而BMP-7蛋白表达水平升高。Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因实验和Western印迹实验结果显示,miR-214-5p能够靶向调控HOXA13蛋白表达。在高糖诱导的HMC细胞中抑制HOXA13表达可逆转miR-214-5p对TGF-β1蛋白表达的抑制作用。结论miR-214-5p能够通过靶向HOXA13调节相关蛋白表达,抑制高糖诱导的HMC细胞炎症反应和纤维化。

小剂量地塞米松对新生儿胎粪吸入综合征患儿血清IL-5、IL-13和TNF-α的影响

目的探讨小剂量地塞米松对新生儿胎粪吸入综合征患儿血清中白介素-5(IL-5)、白介素-13(IL-13)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法新生儿胎粪吸入综合征患儿40例,随机分为治疗组和对照组,除了治疗组从第1、2、3天加用小剂量地塞米松[0.5mg/(kg·d)]治疗外,两组其余治疗方案均相同;以足月顺产的正常新生儿20例作为正常组。检测3组研究对象第1、4、7天血清IL-5、IL-13、TNF-α的变化。结果对照组第1、4、7天血清IL-5、IL-13、TNF-α水平均高于正常组(P<0.05);对照组和治疗组第4天血清IL-5、IL-13、TNF-α明显升高,且对照组的水平高于治疗组(P<0.05)。结论在新生儿胎粪吸入综合征患儿治疗过程中,小剂量地塞米松可抑制炎症反应,减轻气道高反应性。

糖皮质激素对IL-13诱导的小鼠肺组织黏蛋白基因Muc5ac表达的影响

目的:研究糖皮质激素对白细胞介素(IL)13诱导的小鼠肺组织黏蛋白基因Muc5ac表达的影响,探讨其对气道黏液分泌的作用。方法:24只清洁级BALB/c小鼠被随机分为对照组、IL13组和地塞米松组。IL13组于d1、d3和d5分别鼻腔滴入重组鼠IL13100μg/只;地塞米松组分别于小鼠首次鼻腔滴入IL13(同上述方法)前24小时、1小时以及随后的连续4天(d0～d5,共6天)腹腔注射0.5mg/kg地塞米松;对照组不进行任何处理。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并计数嗜酸细胞;用RTPCR和免疫组化法分别检测Muc5acmRNA和蛋白在小鼠肺组织的表达。结果:IL13处理后,Muc5acmRNA和蛋白在肺部的表达以及BALF中的嗜酸细胞计数均显著高于对照组(均P<0.01);经地塞米松处理后,除BALF中的嗜酸细胞计数外,Muc5acmRNA和蛋白在肺部的表达较IL13组无明显降低。结论:IL13能够上调Muc5acmRNA和蛋白在肺组织的表达,通过黏液诱导活性在气道黏液分泌中起重要作用;地塞米松可显著抑制IL13诱导的肺组织嗜酸细胞浸润,但并不抑制黏液分泌。

中等强度跑台运动对高脂饮食小鼠膝关节软骨MMP-13、LRP5的影响

目的探讨跑台运动对高脂饲料喂养小鼠膝关节软骨的作用机制。方法 30只雄性C57BL-6小鼠平均分为正常组、高脂组和跑台组。高脂组和跑台组以40%高脂饲料喂养8周后,跑台组进行为期4周、每周5次、每次45 min的中等强度跑台训练。采用HE、番红固绿染色并进行Mankin评分观察小鼠膝关节软骨形态变化,免疫组化分析膝关节基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)表达情况,RT-PCR法检测膝关节软骨MMP-13、LRP5、β-catenin水平。结果与高脂组比较,跑台组小鼠体质量、Lee’s指数下降(P<0.05),但Mankin评分证实膝关节软骨退化明显(P<0.05),关节软骨MMP-13 mRNA表达升高(P<0.05);免疫组化结果也显示,跑台组小鼠膝关节MMP-13、LRP5表达较高脂组升高(P<0.001)。结论中等强度跑台运动加剧高脂饲料喂养小鼠膝骨关节炎进程,关节软骨MMP-13、LRP5表达水平增高可能诱发膝骨关节炎。

雾化吸入利多卡因对哮喘大鼠肺组织水通道蛋白5含量及白细胞介素-13表达的影响

目的观察雾化吸入利多卡因对大鼠支气管哮喘模型肺组织中水通道蛋白5(AQP5)表达及血清中白细胞介素-13(IL-13)浓度的影响。方法 Wistar大鼠32只,随机均分为四组:哮喘组(A组)、地塞米松组(D组)、利多卡因组(L组)和对照组(C组)。A组用鸡卵清蛋白辅以氢氧化铝为佐剂注射致敏,2周后雾化吸入鸡卵清蛋白诱发哮喘。D组、L组大鼠用同样方法致敏,但在激发前分别雾化吸入0.02%地塞米松和0.04%利多卡因20 min。C组用生理盐水代替鸡卵清蛋白进行注射和吸入。末次雾化吸入后24 h内采集静脉血,测定血清中IL-13的浓度;取肺组织,计算湿干重比(W/D),观察AQP5表达及肺组织病理学结果。结果与C组相比,A组肺组织AQP5表达降低,血清IL-13浓度及W/D增高(P<0.05);与A组相比,D、L组肺组织AQP5表达增高,血清中IL-13的浓度及W/D降低(P<0.05)。A组肺组织呈支气管壁增厚、炎性细胞浸润表现,D、L组病理损伤程度减轻。结论利多卡因雾化吸入可通过增加肺组织AQP5的表达,降低血清IL-13的浓度,减轻致敏原所激发的哮喘大鼠气道炎症。