解毒通络方对大鼠心肌纤维化的影响及作用机制

目的:基于氧化应激和NF-κB探讨解毒通络方对异丙肾上腺素(ISO)所诱导大鼠心肌纤维化的影响及作用机制。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、卡托普利(5 mg/kg)阳性对照组及解毒通络方低(1.8 g/kg)、中(3.6 g/kg)、高(7.2 g/kg)剂量组。除正常对照组外,其余各组大鼠均采用皮下注射ISO(5 mg/kg)连续7 d的方法建立大鼠心肌纤维化模型,造模成功后第2天开始灌胃,连续28 d。HE、Masson染色观察大鼠心肌组织病理改变和胶原纤维沉积;DHE染色观察各组大鼠心肌组织ROS表达;碱水法检测大鼠心肌组织中HYP水平;ELISA法检测大鼠血清LDH、CK-MB水平;试剂盒检测大鼠血清和心肌组织中氧化应激指标;qPCR和Western Blot检测大鼠心肌组织NF-κBP65、TGF-β_1、CTGF mRNA及蛋白和Smad2/3、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达。结果:与模型组比较,各给药组大鼠心肌结构紊乱和胶原纤维沉积明显改善,心肌组织中ROS及心脏指数和心肌损伤标志物LDH、CK-MB水平显著降低,血清及心肌组织SOD、GSH水平显著升高,MDA水平显著降低,心肌组织NF-κBP65、TGF-β_1、CTGF mRNA及蛋白和Smad 2/3、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达显著降低。结论:解毒通络方能有效缓解ISO诱导的心肌纤维化大鼠心肌结构紊乱和间质胶原纤维化沉积,其作用机制可能与抗氧化应激和抑制NF-κB信号通路有关。

化浊解毒活血通络方联合通督调神针刺法治疗急性脑梗死疗效及NLRP3信号通路研究

目的观察化浊解毒活血通络方联合通督调神针刺法治疗急性脑梗死(ACI)的疗效,以及对患者神经功能和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体信号通路的影响。方法80例ACI患者采用随机数字表法分为两组,对照组采用化浊解毒活血通络方治疗,观察组采用化浊解毒活血通络方联合通督调神针刺治疗。观察两组疗效、神经功能、残疾程度、NLRP3炎性小体信号通路相关分子mRNA表达、炎症因子和氧化应激的差异。结果观察组治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。两组治疗后中医证候积分、美国国立卫生院脑卒中量表(NIHSS)、改良RANKIN量表(mRS)评分,外周血单核细胞NLRP3 mRNA、凋亡相关点样蛋白(ASC)mRNA、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)mRNA表达,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)水平较治疗前降低(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)水平较治疗前增高(P<0.05)。观察组治疗后中医证候积分、NIHSS、mRS评分,外周血单核细胞NLRP3 m RNA、ASC mRNA、Caspase-1 mRNA表达,血清TNF-α、IL-6、MDA水平低于对照组(P<0.05),SOD水平高于对照组(P<0.05)。结论化浊解毒活血通络方联合通督调神针刺法可更有效抑制NLRP3炎性小体信号通路,缓解炎症反应和氧化应激,改善神经功能,减轻残疾程度,提高临床疗效。

基于“毒损”理论探讨“态靶结合”治疗糖尿病大血管病变

糖尿病大血管病变作为糖尿病的重要并发症之一,其病理机制复杂,为糖尿病并发症防治过程中的难点和重点。中医认识本病从“毒损”理论角度切入,正虚邪盛,痰、瘀、湿、浊蕴结不解而成毒,损伤脉管,致使结构和组织功能失常。朴春丽教授根据“态靶结合”辨证组方思想,以正虚毒损为态,痰瘀湿浊、糖脂之毒、动脉粥样硬化为靶,补虚、解毒、通络,开创解毒通络开痹方,态靶同调,取得良好临床疗效。

解毒通络生津方对阴虚型干燥综合征患者外周血PD-1及其配体表达影响的临床研究

目的观察解毒通络生津方联合西药治疗阴虚型干燥综合征的临床疗效及其对外周血单核细胞程序性死亡分子-1(PD-1)和配体表达的影响。方法将60例阴虚型干燥综合征患者随机分为治疗组与对照组,每组30例。对照组予醋酸泼尼松加羟基氯喹治疗,治疗组在对照组治疗措施基础上,加用解毒通络生津方。两组疗程均为3个月,观察中医证候积分、疾病损害评分、疾病活动度评分、生活质量评分及外周血单核细胞PD-1、PD-L1、PD-L2、CD20的表达情况。结果 1治疗前后组内比较,两组中医证候积分差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗前后中医证候积分的差值大于对照组(P<0.05)。2治疗前后组内比较,两组SSDDI评分差异均有统计学意义(P<0.05);组间治疗后比较,SSDDI评分的差值差异无统计学意义(P>0.05)。3治疗前后组内比较,两组ESSDAI评分差异均有统计学意义(P<0.05);组间治疗后比较,ESSDAI评分差异无统计学意义(P>0.05)。4治疗前后组内比较,两组生活质量评分总分(PCS)差异均有统计学意义(P<0.05);组间治疗前后,PCS评分差值差异无统计学意义(P>0.05)。5治疗前后组内比较,对照组PD-1、PD-L1、PD-L2、CD20的差异无统计学意义(P>0.05),而治疗组有统计学意义(P<0.05);组间PD-1、PD-L1、PD-L2、CD20治疗前后差值差异有统计学意义,治疗组优于对照组(P<0.05)。结论解毒通络生津方联合西药治疗阴虚型干燥综合征,可显著改善患者的临床症状,可能与提高外周血单核细胞PD-1及其配体表达有关。

针药结合对原发性干燥综合征疾病相关指数影响的临床观察

[目的]研究针药结合治疗无内脏累及原发性干燥综合征(p SS)患者的临床疗效与安全性,寻求治疗p SS的新方法。[方法]对60例无内脏累及p SS患者进行随机分组,其中针药结合治疗组30例,西药对照组30例,针药结合治疗组所有患者采用针灸和解毒通络生津方中药内服治疗,西药对照组选用羟基氯喹片每次0.1 g,每日2次口服治疗。观察患者的欧洲抗风湿联盟干燥综合征患者报告指数(ESSPRI)、欧洲抗风湿联盟干燥综合征疾病活动指数(ESSDAI)评分,唾液流率、Schirmer’s试验、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、血清免疫球蛋白及补体,治疗过程中检查不良反应,1个月为1个疗程,治疗3个疗程后判定总体临床疗效。[结果]治疗组总有效率为83.33%,对照组总有效率为60.00%,治疗组优于对照组(P<0.05)。治疗组在ESSPRI评分、中医证候积分、唾液流率、ESR改善方面明显优于对照组,两组有显著差异(P<0.05)。在ESSDAI、Schirmer’s试验、免疫球蛋白、补体、CRP指标治疗前后比较有显著性意义(P<0.05)。在改善CRP、血清免疫球蛋白G(immunoglobulin G,Ig G)、补体等实验室指标方面两组疗效相当,无显著差异(P>0.05)。[结论]针药结合可以有效改善患者疾病相关指数,主观症状及客观指标,提高患者生活质量,且疗效明显优于对照组,是无内脏累及原发性干燥综合征患者安全有效的治疗方法。

中医综合疗法治疗气阴两虚血瘀型糖尿病周围神经病变的临床疗效

目的研究中医综合疗法治疗气阴两虚血瘀型糖尿病周围神经病变(DPN)的临床疗效及作用机制。方法将110例气阴两虚血瘀型DPN患者随机分为对照组和治疗组,每组55例。对照组和治疗组分别给予口服甲钴胺片和益气养阴活血解毒方联合通络外洗方浴足治疗。对比两组治疗后临床疗效,多伦多临床评分系统(TCSS)评分,右下肢腓总神经和胫神经的运动神经传导速度(MNCV)、感觉神经传导速度(SNCV)及神经营养因子[血清胰岛素样生长因子(IGF-1)和脑源性营养因子(BNDF)]改善情况。结果治疗组和对照组总有效率分别为94.0%和74.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组各神经传导速度较对照组显著加快,TCSS评分较对照组明显降低(P<0.05),差异有统计学意义。治疗组IGF-1、BNDF均较对照组有大幅度的增加(P<0.05),差异有统计学意义。结论中医综合疗法可明显改善DPN患者的临床症状,加快神经传导速度,疗效优于单纯口服甲钴胺片,其作用机制可能与增加DPN患者的IGF-1和BNDF表达,从而修复受损神经有关。

解毒通络方对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的:探讨解毒通络方对脑缺血再灌注损伤的防治作用。方法:制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型,随机分为假手术组、模型组、尼莫地平阳性药组、解毒通络方高、中、低剂量组,观察各组大鼠神经功能损伤症状、脑梗死面积、脑组织各指标的变化。结果:解毒通络方高、中剂量组能显著降低神经功能缺失症状评分,各剂量组均能显著减少脑梗死面积,解毒通络方可提高模型大鼠脑组织中SOD含量,降低MDA含量,可明显降低NO、IL-1β、IL-6、i NOS、NF-κB的水平。结论:解毒通络方通过缓解大鼠神经功能损伤症状,减少脑梗死面积对脑缺血再灌注损伤大鼠起到保护作用。

化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤小鼠血清IL-6和TNF-α水平的影响

目的:观察化浊解毒活血通络方对小鼠脑缺血再灌注损伤的局部炎症反应的影响。方法:将50只昆明小鼠随机均分为模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、尼莫地平组、假手术组。采用双侧颈总动脉结扎法合并尾端放血制造脑缺血再灌注模型。手术造模成功分别给予高、低剂量组化浊解毒活血通络方中药灌服。在治疗后用放免法检测各组小鼠血清中IL-6、TNF-α的表达水平。结果:化浊解毒活血通络方高剂量组小鼠中IL-6和TNF-α的表达水平明显低于模型组,与假手术组及尼莫地平组比较无统计学意义。结论:化浊解毒活血通络方可以抑制小鼠脑缺血再灌注损伤时炎症细胞因子的表达,减少白细胞的浸润,降低脑缺血再灌注损伤的程度。

解毒通络生津方治疗原发性干燥综合征血液系统损害的临床研究

目的:探讨解毒通络生津方治疗干燥综合征血液系统损害的疗效及安全性。方法:将72例原发性干燥综合征患者随机分为治疗组和对照组,每组36例。治疗组以解毒通络生津方联合羟氯喹治疗,对照组以醋酸泼尼松联合羟氯喹治疗。2组1个疗程均为12周。比较2组治疗前后血常规、红细胞沉降率、C-反应蛋白、补体、免疫球蛋白(Ig)、SSDDI评分、骨代谢、感染事件等,进行疗效及安全性评价。结果:治疗后,2组白细胞降低、贫血、血小板减少、红细胞沉降率、C-反应蛋白均有改善,但组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组可升高补体C3,对照组可升高补体C4,组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2组治疗前后SSDDI评分均<4分,治疗前后均未出现其他系统损害。2组均可降低IgG,治疗组可降低IgA,对照组可降低IgM,但组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组25羟基维生素D水平较基线值显著降低(P<0.05),治疗组无明显变化(P>0.05)。对照组的感染事件多于治疗组(P<0.05)。2组均可改善患者的中医症状,但治疗组疗效更显著(P<0.05)。结论:解毒通络生津方联合羟氯喹对干燥综合征血液系统损害有治疗作用,可改善患者的炎症指标、抑制自身免疫,对患者的骨代谢影响更小,安全性较好。

基于JNK传导通路探析解毒通络调肝方调控内质网应激治疗2型糖尿病的实验研究

观察解毒通络调肝方对肝脏JNK传导途径的影响。方法选用50只ZDF大鼠,饲养12周后48只成模,随机分组为模型组12只、二甲双胍组9只、解毒通络调肝方高、中、低剂量组各9只,ZL大鼠10只为空白对照组。模型组与空白组以蒸馏水,给药组给予相应药物,灌胃12周。定期对大鼠进行糖耐量实验,24周末切除肝脏,用于Western blot检测。结果与模型组比较,解毒通络调肝方高、中、低计量组和二甲双胍组各时点OGTT水平差异均有统计学意义(P<0.01);解毒通络调肝方高剂量与低剂量组比较,各时点差异均有统计学意义(P<0.05)。解毒通络调肝方高、中、低剂量组和二甲双胍组稳态葡萄糖输注率均较模型组提高,差异有统计学意义(P<0.01)。解毒通络调肝方高、中、低剂量组和二甲双胍组JNK及p-JNK表达量均较模型组下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论解毒通络调肝方改善治疗糖尿病可能的机制之一是抑制了JNK信号通路,降低了JNK磷酸化水平;糖毒性和胰岛素抵抗可能通过炎症激活JNK信号通路,增强JNK活性导致肝细胞损害。

解毒通络调肝方对INS-1细胞糖毒性的保护作用研究

目的研究解毒通络调肝方对大鼠胰岛细胞瘤细胞(islet cell tumor cells,INS-1)糖毒性的保护作用机制。方法以大鼠胰岛细胞瘤细胞为研究对象,用MTT比色法检测解毒通络调肝方干预后INS-1细胞存活率的情况;不同浓度的解毒通络调肝方干预高糖诱导的INS-1细胞;通过葡萄糖刺激胰岛素分泌(glucose-stimulated insulin secretion test,GSIS)检验胰岛素分泌量;实时逆转录聚合酶链反应法测定INS1、INS2、胰十二指肠同源盒因子1(pancreatic and duodenal homeobox 1,PDX1)和MafA的mRNA表达水平;蛋白印迹实验检测INS-1细胞中内质网的跨膜蛋白[阻抗性激酶lα(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)、双链RNA依赖性蛋白激酶样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)和活化的转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)]的表达。结果通过从TCMSP数据库中总结分析解毒通络调肝方中潜在成分,表明该方具有较好的稳定性和重复性;不同浓度的解毒通络调肝方对INS-1细胞活力无抑制作用(P>0.05),但能够抑制高糖诱导的胰岛素分泌的降低(P<0.05),提高INS1、INS2、PDX1和MafA的mRNA表达(P<0.05),抑制IRE1α、PERK、ATF6蛋白表达(P<0.05)。结论解毒通络调肝方能够通过提高胰岛素合成相关基因的表达,促进INS-1细胞的胰岛素分泌,降低内质网应激,以恢复细胞内稳态平衡,减少糖毒性对β细胞损伤。

薛鸾运用解毒通络生津法治疗干燥综合征经验

干燥综合征作为一种慢性自身免疫性疾病,中医界对其中医病机的认识各家不一。薛鸾教授认为本病的中医病机关键在于燥毒内犯致气血同病,终致虚、瘀、毒三者胶结为患。基于对本病病机的认识,提出以解毒、通路、生津三法并举的治疗思想,并认为在此三法中解毒以祛其标、通络以使邪无所附、生津以固其本。临床实践中以此治疗思想为法则,灵活运用解毒、通路、生津三法,实践证明本法在改善患者症状及实验室检查方面均有较好的疗效。本文通过剖析薛鸾教授运用解毒通络生津法治疗干燥综合征之理论及实践,旨在总结学习其治疗本病的思想及个人经验,发掘中医治疗本病之特色,为今后临床治疗本病提供理论依据及实践经验,以期为中医在治疗慢性自身免疫性疾病方面有所贡献。

解毒通络生津方对干燥综合征NOD小鼠PD-1/PD-L1信号通路的影响

目的观察解毒通络生津方对干燥综合征(SS)模型NOD小鼠PD-1/PD-L1通路的影响,探讨其作用机制。方法将24只8周龄雌性NOD小鼠随机分为3组,即模型组(Model)、解毒通络生津方组(TCM)、解毒通络生津方加抗PD-L1单抗阻断组(TCM+α-PD-L1),每组8只。另选8只8周龄雌性ICR小鼠作为正常对照组(Ctrl)。12周龄时开始中药干预,TCM组按照每天24.4 g·kg^(-1)解毒通络生津方灌胃,TCM+α-PD-L1组在每天给予24.4 g·kg^(-1)解毒通络生津方灌胃的基础上,腹腔注射抗PD-L1抗体,1周2次,每次100μg,Ctrl组和Model组给予同等剂量的生理盐水灌胃,实验期间记录各组小鼠第9、12、16、20周龄时的日均饮水量,干预8周后,小鼠统一麻醉下摘取颌下腺。HE染色观察各组小鼠颌下腺中炎症细胞浸润情况;流式细胞仪检测小鼠颌下腺CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)PD-1^(+)Treg细胞的表达;Western Blot检测小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达。结果随着小鼠周龄的增长,Ctrl组小鼠日均饮水量基本不变,Model组小鼠的日均饮水量有明显上升趋势,TCM组小鼠日均饮水量下降,TCM+α-PD-L1组小鼠日均饮水量上升;与Model组比较,TCM组炎症细胞浸润灶明显减少(P<0.001);与TCM组比较,TCM+α-PD-L1组炎症细胞浸润增多(P<0.001);与Ctrl组比较,Model组CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)PD-1^(+)Treg的表达降低(P<0.001),与Model组比较,TCM组CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)PD-1^(+)Treg表达升高(P<0.01);与TCM组比较,TCM+α-PD-L1组CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)PD-1^(+)Treg的表达降低(P<0.01);与Ctrl组比较,Model组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达降低(P<0.01);与Model组比较,TCM组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达升高(P<0.01);与TCM组比较,TCM+α-PD-L1组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达降低(P<0.001)。结论解毒通络生津方可能通过PD-1/PD-L1信号通路促进SS模型小鼠Treg细胞活化,上调Foxp3的表达,增强Treg细胞抑制免疫炎症的作用,PD-1/PD-L1可能是解毒通络生津方治疗SS的一个作用靶点。

化浊解毒活血通络方通过调控核因子E2相关因子2/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1通路发挥对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织抗氧化作用的机制研究

目的 观察化浊解毒活血通络方通过调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)通路对脑缺血再灌注损伤大鼠的抗氧化作用,探讨其可能的神经保护机制。方法 将80只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组,每组16只。除假手术组外,其余组采用Longa法制备大脑中动脉闭塞模型大鼠。造模成功后,化浊解毒活血通络方高、低剂量组给分别予化浊解毒活血通络方25、6.25 g/(kg·d)灌胃,尼莫地平组予尼莫地平混悬液9.375 mg/(kg·d)灌胃,模型组及假手术组均予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃。灌胃3 d后比较各组大鼠改良神经功能缺损评分(mNSS),评分后处死取脑,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色比较各组大鼠脑梗死体积;制作苏木精-伊红(HE)染色切片观察脑组织病理变化;干湿法测量脑组织含水量;检测脑组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;蛋白免疫印迹法检测脑组织Nrf2、Keap1蛋白表达量;逆转录聚合酶链式反应检测脑组织Nrf2、Keap1基因表达。结果 与假手术组比较,模型组、尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组mNSS均升高(P<0.05);与模型组比较,尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组mNSS均降低(P<0.05);与尼莫地平组比较,化浊解毒活血通络方高、低剂量组mNSS均升高(P<0.05);与化浊解毒活血通络方高剂量组比较,化浊解毒活血通络方低剂量组mNSS升高(P<0.05)。假手术未见明显脑梗死灶,其余组脑组织均见白色梗死灶。与假手术组比较,模型组、尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组脑梗死体积均升高(P<0.05);与模型组比较,尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组脑梗死体积均降低(P<0.05);与尼莫地平组比较,化浊解毒活血通络方高、低剂量组脑梗死体积均升高(P<0.05);与化浊解毒活血通络方高剂量组比较,化浊解毒活血通络方低剂量组脑梗死体积升高(P<0.05)。光镜下可见假手术组大鼠脑组织神经元细胞密集,排列整齐,胞浆丰富,染色均匀,胞核居中,核仁清楚,未见明显异常;模型组缺血区脑组织神经元细胞排列紊乱,水肿明显,胞浆染色变淡,出现核固缩、碎裂、溶解现象。与模型组比较,尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组缺血坏死区有所减少,细胞排列紊乱、水肿、胞浆淡染色变淡、细胞核固缩、碎裂、溶解现象均有减轻。尼莫地平组、化浊解毒活血通络方高剂量组缺血坏死区减少更为明显。与假手术组比较,模型组、尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组脑组织含水量均升高(P<0.05);与模型组比较,尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组脑组织含水量均降低(P<0.05);与尼莫地平组比较,化浊解毒活血通络方低剂量组脑组织含水量均升高(P<0.05);与化浊解毒活血通络方高剂量组比较,化浊解毒活血通络方低剂量组脑组织含水量升高(P<0.05)。尼莫地平组与化浊解毒活血通络方高剂量组脑组织含水量比较差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,模型组、尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组脑组织MDA含量均升高(P<0.05),SOD、CAT活性均降低(P<0.05);与模型组比较,尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组脑组织MDA含量均降低(P<0.05),SOD、CAT活性均增高(P<0.05);与尼莫地平组比较,化浊解毒活血通络方低剂量组脑组织MDA含量升高(P<0.05),SOD、CAT活性降低(P<0.05);与化浊解毒活血通络方高剂量组比较,化浊解毒活血通络方低剂量组脑组织MDA含量升高(P<0.05),SOD、CAT活性降低(P<0.05)。尼莫地平组与化浊解毒活血通络方高剂量组脑组织MDA含量及SOD、CAT活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,模型组、尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组脑组织Nrf2蛋白表达水平及mRNA表达水平均降低(P<0.05),Keap1蛋白表达水平及mRNA表达水平均升高(P<0.05);与模型组比较,尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组脑组织Nrf2蛋白表达水平及mRNA表达水平均升高(P<0.05),Keap1蛋白表达水平及mRNA表达水平均降低(P<0.05);与尼莫地平组比较,化浊解毒活血通络方低剂量组脑组织Nrf2蛋白表达水平及mRNA表达水平均降低(P<0.05),Keap1蛋白表达水平及mRNA表达水平均升高(P<0.05);与化浊解毒活血通络方高剂量组比较,化浊解毒活血通络方低剂量组脑组织Nrf2蛋白表达水平及mRNA表达水平均降低(P<0.05),Keap1蛋白表达水平及mRNA表达水平均升高(P<0.05)。尼莫地平组与化浊解毒活血通络方高剂量组脑组织Nrf2、Keap1的蛋白表达水平及mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 化浊解毒活血通络方具有减轻脑缺血再灌注损伤的作用,其作用机制可能与其通过调控Nrf2/Keap1通路减轻氧化应激反应对机体的损伤作用有关。

补肾解毒通络方阻止白血病复发机制的网络药理学分析

目的:探讨补肾解毒通络方(BSJDTLF)的作用机制。方法:使用网络药理与蛋白组学相结合的研究方法,对其靶点与作用通路进行了分析、预测。将补肾解毒通络方进行液相色谱质谱分析,对质谱结果中的化合物通过TCMSP与CTD数据库进行分析,得到对应化合物的作用靶点,再通过NCBI和GENE CARD数据库筛选与白血病相关的作用靶点基因。分选给药小鼠的间充质干细胞进行高通量蛋白组学分析筛选出差异蛋白。将差异蛋白与靶点基因进行比对,经GO、KEGG和K核分析得到BSJDTLF作用机制通路。结果:共筛选到潜在靶点50个,关键靶点10个,包括Mmp2、Stmn1、Icam1等。主要涉及慢性白血病、急性白血病、VEGF信号等通路。结论:预测了补肾解毒通络方作用于间充质干细胞的具体机制。

益气解毒通络方治疗乙肝肝硬化有效性及其控制癌变的研究

目的探讨分析益气解毒通络方治疗乙肝肝硬化有效性及其控制癌变的研究。方法选取我院2018年1月至2019年1月收治的乙肝肝硬化患者50例进行研究,随机分为两组,其中研究组行益气解毒通络方治疗,对比组行常规西药治疗,统计记录两组患者接受治疗后癌变发生率以及肝功能指标,并进行对比。结果两组患者经过不同治疗后,研究组患者癌变发生率低于对比组患者,其肝功能指标优于对比组患者(P<0.05),差异有统计学意义。结论益气解毒通络方应用在乙肝肝硬化临床治疗中,肝功能得以恢复,同时降低了肝区癌变的概率,疗效显著,值得临床推广。

解毒通络化湿方治疗湿热型原发性干燥综合征的随机双盲对照研究

目的:评估解毒通络化湿方结合羟基氯喹片治疗无内脏累及的湿热型原发性干燥综合征(pSS)患者的临床疗效,寻求治疗pSS的新方法。方法:采用随机双盲对照研究方法,纳入86例无内脏累及的湿热型pSS患者,分为治疗组43例和对照组43例。治疗组患者给予解毒通络化湿方联合羟基氯喹片口服,对照组患者给予安慰剂联合羟基氯喹片口服,治疗周期为12周。评价两组患者的临床疗效,并采用患者可接受症状状态(PASS)和临床最小重要改善(MCII)达标率来进一步判定临床疗效;治疗前后评估并比较两组患者的中医证候总积分、欧洲抗风湿联盟干燥综合征患者报告指数(ESSPRI)评分、欧洲抗风湿联盟干燥综合征疾病活动指数(ESSDAI)评分;采用未刺激状态下唾液流率评价患者的口干情况,采用Schirmer’s试验、BUT试验评价患者的眼干情况;治疗前后检测并比较两组患者的血清免疫球蛋白(Ig)G、补体C3、补体C4水平及外周血CXC型趋化因子配体13(CXCL13)表达情况。结果:研究过程中,治疗组2例患者剔除或脱落,对照组3例患者剔除或脱落,最终纳入统计分析者治疗组41例、对照组40例。①治疗后,治疗组患者的临床总有效率为82.93%,对照组为60.00%,治疗组的疗效明显优于对照组(P<0.01)。②治疗后,两组达到PASS患者的比例较治疗前均明显升高(P<0.05,P<0.01),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,根据ESSPRI,治疗组中达到MCII的患者比例较对照组明显升高(P<0.05)。③治疗后,两组患者的中医证候总积分较治疗前均明显降低(P<0.05,P<0.01),且治疗组患者的积分降低程度优于对照组(P<0.05)。④治疗后,治疗组患者的ESSPRI评分及干燥、疲乏、疼痛维度评分较治疗前均明显降低(P<0.05,P<0.01),对照组患者的ESSPRI评分及疼痛维度评分较治疗前亦明显降低(P<0.05),且治疗组患者的ESSPRI评分及干燥、疲乏维度评分降低程度优于对照组(P<0.05)。⑤治疗后,两组患者的ESSDAI评分较治疗前均明显降低(P<0.05,P<0.01),但其评分降低程度组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。⑥治疗后,两组患者的未刺激状态下唾液流率较治疗前均升高(P<0.05,P<0.01),但其升高程度组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。⑦治疗后,治疗组患者的IgG、CXCL13水平较治疗前明显降低(P<0.01),且治疗组患者的CXCL13水平降低程度优于对照组(P<0.05)。结论:解毒通络化湿方结合羟基氯喹片治疗pSS,可有效改善患者的主观症状及客观指标,其作用可能与抑制CXCL13改善腺体功能、减少pSS的病情活动相关。

基于Treg细胞功能的稳定性探讨解毒通络生津方对干燥综合征模型鼠免疫调节的作用

目的:观察不同剂量解毒通络生津方对干燥综合征模型NOD/Ltj小鼠血清白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及颌下腺叉头框转录因子P3(FoxP3)表达的影响,探讨解毒通络生津方对NOD/Ltj小鼠免疫调节的作用机制。方法:将30只8周龄NOD/Ltj小鼠随机分为模型组,解毒通络生津方低、中、高剂量组和羟氯喹组共5组,12周龄开始每日分别灌服等量的生理盐水,含生药9、18、36 g·kg^(-1)的解毒通络生津方和60 mg·kg^(-1)的羟氯喹,同时选取6只ICR小鼠作为空白组,给予等量的生理盐水灌胃。实验期间记录各组小鼠第9、12、16周龄的日均饮水量、唾液流量,给药4周后摘取组织计算颌下腺指数、脾脏指数,苏木素-伊红(HE)染色观察颌下腺组织病理形态,Meso Scale Discovery(MSD)法检测小鼠血清IL-6、TNF-α、IL-10水平,免疫组化检测颌下腺FoxP3的表达和分布,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠颌下腺FoxP3蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠颌下腺FoxP3、TNF-α mRNA的表达。结果:与空白组ICR小鼠比较,模型组小鼠饮水量增多、唾液流量减少、颌下腺指数降低、颌下腺组织病理学评分升高,血清IL-6、TNF-α表达升高,IL-10表达降低,颌下腺FoxP3蛋白表达降低,颌下腺FoxP3 mRNA表达降低、TNF-α mRNA表达升高(P<0.05)。与模型组比较,解毒通络生津方低、中、高剂量组饮水量均明显减少,唾液流量均明显增加(P<0.05),且中、高剂量组疗效更显著;解毒通络生津方中剂量组颌下腺指数升高(P<0.05),解毒通络生津方高剂量组脾脏指数降低(P<0.05);解毒通络生津方低、中、高剂量组颌下腺组织病理评分均降低(P<0.05),高剂量组疗效更显著;解毒通络生津方低、中、高剂量组血清IL-6、TNF-α表达均降低,IL-10表达升高,颌下腺TNF-α mRNA表达降低(P<0.05);解毒通络生津方中、高剂量组颌下腺FoxP3蛋白表达升高,颌下腺FoxP3 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:解毒通络生津方可能通过促进FoxP3+调节性T细胞(Treg)功能的稳定,抑制炎症细胞因子的分泌,从而缓解干燥综合征全身免疫炎症的进展。

化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠线粒体自噬相关蛋白PINK1和Parkin的影响

目的:研究化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及对线粒体自噬相关蛋白PTEN诱导激酶1(PINK1)、Parkin的影响。方法:将48只雄性SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组(化浊解毒活血通络方)、抑制剂组[3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制剂],每组12只。按照Longa法制备大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠模型,造模成功给药3 d后,行大鼠神经功能缺损评分,HE染色观察脑组织病理改变,TTC染色观察脑梗死体积,Western Blot检测脑组织PINK1、Parkin蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测脑组织中PINK1、Parkin mRNA的表达。结果:与假手术组比较,模型组神经功能缺损评分和脑梗死体积显著增加(P<0.05),病理损伤加重,PINK1、Parkin蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,中药组大鼠神经功能缺损评分和脑梗死体积显著减少(P<0.05),病理损伤减轻,PINK1、Parkin蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与模型组及中药组比较,抑制剂组大鼠神经功能缺损评分和脑梗死体积显著增加(P<0.05),病理损伤加重,PINK1、Parkin蛋白及mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。结论:化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠具有脑保护作用,其机制可能与上调线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin的表达相关。

解毒通络生津方治疗原发性干燥综合征的临床观察

目的:探讨解毒通络生津方治疗轻度原发性干燥综合征(primary Sjogren’s Syndrome,p SS)患者的临床疗效。方法:纳入90例轻度p SS患者,随机分成治疗组和对照组,每组45例。治疗组采用解毒通络生津方治疗,对照组采用硫酸羟基氯喹片治疗,疗程为12周。分别于治疗前后检测两组患者的外周血C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)及人软骨糖蛋白-39(YKL-40)的水平,并比较两组患者的p SS疾病活动度指数(Sjogren’s Syndrome disease activity index,SSDAI)评分的变化。结果:治疗后,两组患者的CRP、ESR及血清YKL-40水平较治疗前均明显降低(P<0.01),且治疗组患者的CRP、ESR及血清YKL-40水平低于对照组(P<0.01)。治疗后,两组患者的SSDAI评分较治疗前均明显降低(P<0.01),且治疗组患者的SSDAI评分低于对照组(P<0.01)。结论:解毒通络生津方可明显降低轻度p SS患者的疾病活动度,缓解病情发展,其作用机制可能与调节体内失调的免疫反应进而发挥有效的抗炎作用有关。