基于网络药理学研究银丹心脑通软胶囊调控AKT抑制血管内膜增生的作用机制

目的采用网络药理学方法并结合体内实验验证,探讨银丹心脑通软胶囊(YDXNT)对血管内膜增生的干预效应及其机制。方法从TCMSP、Symmap数据库中检索YDXNT活性成分及其作用靶点,通过OMIM、DisGeNET、GeneCards数据库获取血管内膜增生的疾病靶点,并对YDXNT与血管内膜增生的靶点取交集。利用Cytoscape软件对交集基因构建“成分-疾病-靶点-通路”网络并可视化,应用Metascape进行GO和KEGG富集分析,CytoNCA插件获取核心靶点,利用autodock软件进行核心靶点与活性成分的分子对接。采用球囊损伤法制作大鼠血管内膜增生模型,给予YDXNT干预。通过苏木素-伊红(HE)染色分析各组血管形态学变化,免疫组织化学法检测内膜增生血管中核心靶蛋白的表达。结果网络药理学分析提示YDXNT可通过槲皮素、木犀草素、黄芩素等药理成分作用于血管内膜增生关键靶点AKT1(蛋白激酶B的一种亚基),HE结果显示YDXNT能有效抑制血管内膜增生,免疫组化检测结果显示模型组中AKT、p-AKT(Thr308)蛋白较假手术组表达增高,YDXNT给药组较模型组AKT、p-AKT(Thr308)蛋白表达下调。结论YDXNT可通过调控AKT表达及其磷酸化进而发挥抗血管内膜增生作用。

“胃络通心”理论探析

“胃络通心”理论源出《黄帝内经》,揭示了胃、心二者之间的生理、病理关系。通过对《黄帝内经》相关条文辨析,明确胃、心二者经络相连、生理相通、病理相关及五行相生,故而概括衍化为“胃络通心”理论。以“胃络通心”为基础,解析症状,明确病源,梳理相关病机学说,确立了6类常见病因病机:阳明实热,循络扰神;温邪循络,上扰神志;风邪入腑,循络及心;胃不养心,舌窍失用;移邪攻心,痛证居多;心病及胃,胃症屡见。据理立法,概括“胃络通心”指导下的6种治法:通腑泄热,宁心安神;宣通郁遏,苦辛泄化;温阳散寒,建中理上;益火补土,助胃消化;清心泻火,子母同治;补土伏火,土厚火宁。并提出代表性方药,为理论的临证应用提供参考。

参七脉心通胶囊治疗急性缺血性卒中疗效及对Lp-PLA2、hs-CRP的影响

目的 评估参七脉心通胶囊治疗急性缺血性卒中的临床疗效及对脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)的影响。方法 将2022年1—11月广州中医药大学附属广州中西医结合医院收治的72例急性缺血性卒中患者随机分为治疗组36例和对照组36例。2组均进行西医常规治疗,治疗组在此基础上给予参七脉心通胶囊口服,共治疗12周。比较2组患者治疗前后血清Lp-PLA2、hs-CRP水平及颈动脉内膜中层厚度、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,统计2组治疗后临床疗效、颈动脉内膜中层厚度治疗效果、日常生活能力Barthel指数≥75分者占比、改良Rankin量表(mRS)评分≤2分者占比,并评价2组治疗安全性。结果治疗组和对照组各30例完成研究。治疗后,治疗组血清Lp-PLA2、hs-CRP水平及颈动脉内膜中层厚度、NIHSS评分均明显低于治疗前及对照组(P均<0.05),对照组仅血清Lp-PLA2水平和NIHSS评分明显低于治疗前(P均<0.05)。治疗组、对照组临床总有效率分别为86.7%(26/30)、63.3%(19/30),颈动脉内膜中层厚度治疗总有效率分别为66.7%(20/30)、40.0%(12/30),2组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。治疗组日常生活能力Barthel指数≥75分者和mRS评分≤2分者占比分别为63.3%(19/30)、73.3%(22/30),对照组分别为33.3%(10/30)、46.7%(14/30)(P<0.05),2组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。2组均未见明显不良反应发生。结论 参七脉心通胶囊能显著降低急性缺血性卒中患者血清血清Lp-PLA2、hs-CRP水平,缩小斑块,有助于神经功能康复及改善预后。

通心络胶囊对实验性心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:观察通心络胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤的干预影响。方法:以穿线结扎左冠脉制备心肌缺血再灌注模型,48只大鼠随机分成假手术组、心肌缺血再灌注组及通心络胶囊干预组,检测各组心肌梗死范围、血浆肌酸激酶(CK)活性及心肌组织病理学变化。结果:心肌缺血再灌注后心肌梗死范围明显,血浆CK活性增高,心肌细胞坏死增多。通心络胶囊干预后心肌梗死范围缩小,血浆CK活性下降,心肌坏死程度较轻。结论:通心络胶囊可缩小大鼠缺血再灌注后心肌梗死范围,降低血浆CK水平,对缺血再灌注心肌有保护作用。

参松养心胶囊联合通心络胶囊治疗冠心病合并室性早搏疗效及安全性的系统评价

目的 系统评价参松养心胶囊联合通心络胶囊治疗冠心病合并室性早搏的有效性及安全性.方法 计算机检索2005年至2015年Cochrane图书馆临床对照试验数据库、Pubmed、万方、中国学术期刊全文数据库、维普数据库（VIP）等,收集参松养心胶囊联合通心络胶囊治疗冠心病合并室性早搏的临床随机对照试验（RCT）,由2名评价者按纳入、排除标准独立选择,提取资料,并交叉核对、评估质量方法学,使用RevMan 5.0软件进行Meta分析.结果 共纳入5项研究的434例患者.Meta分析结果显示,联合应用参松养心胶囊与通心络胶囊治疗冠心病合并室性早搏的疗效优于对照组（OR=2.91,95％CI 1.73～4.91,P＜0.05）,心电图有效率治疗组优于对照组（OR =7.78,95％CI 4.22～14.35,P＜0.05）;治疗组的不良反应率明显低于对照组（OR=0.21,95％CI 0.09～0.51,P＜0.05）,差异有统计学意义.结论 参松养心胶囊合用通心络胶囊在治疗冠心病合并室性早搏方面具有较好的临床疗效,且不良反应发生率较低.

通心络胶囊对脑缺血—再灌注大鼠保护作用的实验研究

目的 探讨通心络胶囊保护神经元缺血性损伤的作用机制。方法 2 8只Wistar大鼠随机分为 5组 :空白对照组 (4只 )、伪手术组 (4只 )、通心络胶囊小剂量组 (8只 )、通心络胶囊大剂量组 (8只 )、华佗再造丸组 (4只 )。分离培养鼠脑毛细血管内皮细胞 (CCEC)和多形核白细胞 (PMN) ,利用微管吸吮技术 ,观察PMN与CCEC间粘附力学特性的变化。结果 脑缺血—再灌注后各时间点的PMN与CCEC粘附力和粘附应力均明显高于正常对照组和伪手术组 (P均 <0 .0 1) ;加通心络胶囊后 ,细胞粘附力和粘附应力均明显下降 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 脑缺血—再灌注损伤后通心络胶囊使PMN与CCEC粘附力减小 ,粘附应力下降 ;

通心络的临床疗效及其作用机理探讨

目的 :观察通心络对冠心病不稳定型心绞痛的临床疗效 ,并探讨其作用机理。方法 :72例不稳定型心绞痛患者随机分为通心络组 (3 7例 ,常规西药加通心络胶囊治疗 )与对照组 (3 5例 ,单用常规西药治疗 ) ,观察治疗前后临床症状、心电图等的变化。结果 :通心络对血粘度的恢复及缓解心绞痛的总有效率 (83 .8% )均优于对照组 ,心电图的改善与对照组接近 ,并可使血压下降 (P <0 .0 5 ) ,心律失常明显减少 (P <0 .0 1) ,血镁升高 (P <0 .0 5 )。结论 :通心络对血镁的影响可能是其作用机理之一 ,加用通心络治疗冠心病比单用西药更好。

反相高效液相色谱法同时测定金马通络胶囊中东茛菪碱及士的宁含量

目的： 建立一种反相高效液相色谱法检测金马通络胶囊中东莨菪碱及士的宁含量。方法： 用Ｃ１８ＯＤＳ柱为固定相。甲醇－ 水（５８∶４２） （ 水相含０－０５ ｍｏｌ·Ｌ－１ 醋酸盐缓冲液及０－００２ ５ ｍｏｌ·Ｌ－ １ 十二烷基硫酸钠） 为流动相。检测波长２２６ ｎｍ 。结果： 该方法回收率氢溴酸东莨菪碱为１００－５ ％ ， ＲＳＤ＝ ２－３％ （ ｎ ＝ ５）； 士的宁为９７－５％ ， ＲＳＤ＝ ２－４ ％ （ｎ ＝５）。结论： 该方法操作简便、快捷、专一、准确性好， 可用于金马通络胶囊质量控制。

通心络抑制缺氧诱导的血管内皮细胞凋亡及机制研究

目的 :研究通心络对缺氧诱导的血管内皮细胞凋亡及Caspase 3活性的影响。方法 :培养的牛主动脉内皮细胞分为三组 :正常对照组 ,缺氧组和缺氧加通心络组 ,2 4h后检测凋亡细胞数并计算凋亡百分比 ,以及Caspase 3蛋白的表达与活性。结果 :三组细胞凋亡百分比分别为 7± 0 12 % ,2 8 85± 2 4 6 %和 11 4 8± 1 4 % (P <0 0 5 ) ;通心络对缺氧后血管内皮细胞的Caspase 3蛋白表达无影响 ,但可抑制其活性增高 (41 2± 5 5U/mlvs 6 7 8± 7 2U/ml,P <0 0 5 )。结论 :通心络减少缺氧所致血管内皮细胞凋亡与抑制Caspase 3的活性有关。

丹黄通络胶囊对小鼠抗应激作用的影响

目的观察丹黄通络胶囊对小鼠抗应激作用的影响。方法120只小鼠随机分为对照组、丹黄通络胶囊低、中、高剂量组共4组,小鼠灌胃给药后,进行自主活动实验、负重游泳实验和常压耐缺氧实验。结果与对照组比较,丹黄通络胶囊组小鼠自主活动次数明显减少,负重游泳时间和常压耐缺氧存活时间显著延长(P<0.05,P<0.01)。结论丹黄通络胶囊对小鼠具有镇静作用,能增强小鼠抗疲劳和耐缺氧能力,提高小鼠的抗应激能力。

猪急性心肌梗死再灌注后微血管内皮细胞损伤及通心络的保护作用

目的评价猪急性心肌梗死(AM I)再灌注后微血管内皮细胞结构和功能损伤,以及中药通心络的保护作用和机制。方法 30只中华小型猪随机分成假手术组、模型组、小剂量、中剂量和大剂量通心络治疗组,每组6只。建立AM I再灌注模型,观察不同区域心肌组织内细胞黏附分子和内皮细胞间连接蛋白的含量和变化。结果与正常区比较,模型组再灌注区和无再流区P-选择素(P-selectin)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1蛋白及mRNA水平升高,再灌注区内皮钙黏素(VE-cadherin)、无再流区VE-cadherin和β连环蛋白含量降低。与模型组比较,中剂量组再灌注区和无再流区P-selectin和ICAM-1蛋白降低;大剂量组再灌注区P-selectin、ICAM-1蛋白和mRNA含量降低,无再流区P-selectin蛋白和mRNA及ICAM-1蛋白含量降低。大剂量组再灌注区和无再流区VE-cadherin表达升高。结论中药通心络通过抑制细胞黏附分子的表达,减少中性粒细胞浸润和炎症反应,保护AM I再灌注过程内皮细胞屏障功能完整性。

通心络治疗急性冠脉综合征对血清sCD40L的影响

目的观察通心络胶囊治疗急性冠脉综合征患者血清可溶性CD40L(sCD40L)的变化,了解其对斑块稳定和免疫炎症抑制的影响。方法50例急性冠脉综合征患者,随机分为通心络治疗组(n=33)和他汀类治疗组(n=17),测定治疗前后血清sCD40L水平的变化。结果两组患者血清治疗前后sCD40L水平明显下降,通心络组下降34.6%,他汀类组下降33.4%,与治疗前比较均有统计学差异(P<0.01);而两组用药前比较和用药后比较均无统计学差异(P>0.05)。结论急性冠脉综合征患者早期予以通心络胶囊治疗一疗程,可明显降低sCD40L的水平,有利于动脉粥样硬化斑块的稳定。

基质金属蛋白酶及其抑制剂在家兔血管成形术后血管重构中的作用

目的:探讨基质金属蛋白酶及其抑制剂(MMPs/TIMPs)在家兔血管成形术后血管重构中的作用及中药通心络的影响。方法:(1)家兔65只分4组(对照组5只,拉伤组20只,高脂组20只,通心络组20只)采用高胆固醇(1·5g·kg-1·d-1)喂养加两次腹主动脉损伤的方法制成动脉粥样硬化和血管成形术模型,X光下行血管成形术。术后分别治疗4周处死,取血管标本进行检测。(2)HE染色计算机图像分析血管形态的变化。(3)MMP2和TIMP1免疫组化分析,RT-PCR方法测定MMP2、TIMP1的mRNA表达量。结果:(1)HE染色证实有动脉粥样硬化斑块形成,腹主动脉造影显示有管腔狭窄。(2)RT-PCR结果显示通心络组的MMP2和TIMP1mRNA表达量低于高脂拉伤组P<0·05;MMP2和TIMP1比值更接近1。(3)免疫组化染色通心络组MMP2和TIMP1的阳性细胞吸光度(%)明显低于高脂拉伤组,P<0·05。(4)内膜面积通心络组低于高脂拉伤组P<0·05;而管腔面积高于高脂拉伤组P<0·05;并且管腔面积的增加与内膜面积的减少不相等。结论:MMP2和TIMP1参与家兔血管成形术后的血管重构,通心络可以调整MMP2和TIMP1的比值。

通心络体外促进人外周血内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附的研究

目的:研究中药通心络对体外培养的人外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、黏附的影响。方法:采用密度梯度离心法分离培养人外周血单个核细胞,经FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色鉴定为正在分化的EPCs。进一步采用流式细胞仪检测其表面标志CD34、CD133,采用MTT比色法、transwell小室、细胞计数法分别观察50、100、200、500、750和1000μg/ml通心络超微粉溶液和500μg/ml通心络超微粉溶液作用0、6、12、24和36h后,对EPCs增殖、迁移、黏附的影响。结果:不同水平的通心络均改善了EPCs的增殖、迁移、黏附的功能,且在500μg/ml时作用最为显著。采用500μg/ml的通心络进行时效作用的研究显示,通心络呈时间依赖性地增强EPCs增殖、迁移、黏附能力,在36h达到高峰(P<0.01)。结论:通心络能显著改善外周血内皮祖细胞增殖、迁移、黏附能力,这可能是通心络防治心脑血管疾病的新机制。

通心络胶囊对颈动脉粥样硬化患者血小板活化功能的影响

目的探讨通心络胶囊对颈动脉粥样硬化(CAS)患者血小板活性的影响。方法54例CAS患者予通心络胶囊治疗8周,服药前、后应用流式细胞仪检测血小板P选择素(CD62p)和溶酶体膜蛋白53(CD63)的表达及血小板单核细胞凝集性。结果服用通心络胶囊8周后,血小板CD62p的阳性率和单核细胞CD41的阳性率均较服药前下降,血小板CD63的阳性率无变化。对不同程度CAS进行研究后发现,通心络胶囊可使Ⅰ型和Ⅱ型CAS患者血小板CD62p的阳性率下降,使Ⅰ型CAS患者单核细胞CD41的阳性率下降。结论通心络胶囊可降低CAS患者血小板活性,尤其对程度较轻的CAS作用明显。

应用AMSTAR声明评价通心络疗效及安全性系统评价的文献方法学质量的报告

目的:使用AMSTAR声明评价有关通心络疗效及安全性的系统评价文献的方法学质量。方法:计算机检索包括中国期刊全文数据库(CJFD)、重庆维普中文科技期刊数据库(VIP)、中国知网数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数据库(Wan Fang Data)和中国中医药期刊文献数据库(TCM)、Medline数据库、Pubmed数据库、ISI Web of Knowledge数据库、Web of Science数据库在内的国内外各大数据库,检索时限从建库至2014年12月20日。由5名评价者根据纳入与排除标准独立进行文献筛选,并应用AMSTAR声明清单对纳入的所有系统综述文献逐一进行评价。结果:最终纳入22篇文献。其中17篇系统评价,5篇Meta分析,所有文献在方法学及报告质量上都存在不同程度的缺陷,主要集中在方案与注册、文献的检索收集、纳入排除标准、真实性评价、数据处理及基金等几个方面;纳入的所有文献对AMSTAR声明的平均报告率为57.02%。结论:从目前平均报告率的高低可以看出,应用AMSTAR声明评价有关通心络疗效及安全性的系统评价报告的方法学质量相对偏低,影响了文章的质量,说明目前系统评价在论文报告的各个环节都存在不同程度的缺陷,这势必会影响临床证据的可靠性及临床决策的判定,提示撰写此类文章需遵照AMSTAR声明条目以提高文章报告的方法学质量。

通心络和他汀类药物对人内皮祖细胞数量与功能的影响

目的:观察中药通心络和他汀类药物对外周血内皮祖细胞(EPCs)数量和功能的影响。方法:采用密度梯度离心法分离培养人外周血EPCs,经FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色鉴定后,并进一步通过流式细胞仪检测其表面标志CD34、CD133,将贴壁细胞随机分为:对照组、阿托伐他汀组(终浓度10μmol/L)、通心络组(终浓度0、50、100、200、500、750和1000μg/ml),作用不同时间(0、12、24、48、60和72h)后,检测细胞形态及计数,再采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)、Transwell小室、黏附功能检测评价其增殖、迁移和黏附能力。结果:不同浓度通心络组、阿托伐他汀组均能较对照组明显提高EPCs数量,显著改善其增殖、迁移、黏附能力,通心络在500μg/ml时对细胞数量及功能改善最为显著。采用500μg/ml的通心络进行时效作用的研究,各组呈时间依赖性增强,EPCs的数量和功能在72h达到高峰。结论:通心络和阿托伐他汀均能在体外提高内皮祖细胞的数量及功能。

银丹心脑通软胶囊治疗2型糖尿病合并冠心病临床疗效的系统评价

目的:评价银丹心脑通软胶囊联合常规疗法治疗2型糖尿病合并冠心病的疗效和安全性。方法:计算机系统检索中国生物医学文献数据库(CBMDisc)、《中国医学学术会议论文数据库》(CMAC)、中国期刊全文数据库(CNKI)、中文科技期刊全文数据库(VIP)、万方数据库、美国国立医学图书馆数据库(Pub Med)、医学文摘数据库(EMbase)、美国科技信息所科学引文索引数据库(Web of Science),检索时限:建库至2013年12月。纳入银丹心脑通软胶囊联合常规疗法治疗2型糖尿病合并冠心病的随机对照试验(RCT)。由2位研究人员根据纳入与排除标准独立进行文献筛选、数据提取、质量评价并交叉核对结果,采用Rev Man 5.1.0软件进行Meta分析。结果:共纳入9个RCT,共667例2型糖尿病合并冠心病患者。Meta分析结果显示银丹心脑通软胶囊联合常规疗法治疗心绞痛的有效率明显高于常规治疗组,其差异有统计学意义(OR=4.01,95%CI[2.37-6.79]),P<0.000 01,说明银丹心脑通软胶囊联合常规治疗能够控制心绞痛临床症状。由于纳入数据的限制,银丹心脑通软胶囊联合常规疗法控制心绞痛持续时间、心绞痛发作频率、空腹血糖有可能优于常规治疗组,两组治疗后比较差异有统计学意义。银丹心脑通软胶囊可改善冠心病合并2型糖尿病患者的血流变,降低血液高黏滞状态而起到治疗心绞痛的作用。结论:基于当前临床证据,银丹心脑通软胶囊治疗冠心病合并2型糖尿病的疗效优于常规治疗组,但研究结果具有一定局限性,尚需设计严格的大样本、多中心、双盲对照试验进一步验证。

通心络对动脉硬化兔胸主动脉LOX-1表达干预的实验研究

目的:探讨通心络对动脉硬化兔胸主动脉植物血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)表达的影响及机制。方法:将24只雄性新西兰大白兔随机分为正常饮食组、高脂饮食组及高脂饮食加通心络干预组,应用免疫组化测定兔胸主动脉中LOX-1的蛋白表达水平,用RT-PCR测定兔胸主动脉中LOX-1基因表达的水平。结果:高脂组及高脂饮食加通心络干预组胸主动脉中LOX-1蛋白及基因表达水平明显高于正常饮食组(P<0.05),通心络干预组胸主动脉中LOX-1蛋白及基因表达水平明显低于高脂饮食组(P<0.05)。结论:动脉硬化兔LOX-1蛋白及基因表达水平明显升高,通心络能够明显抑制动脉硬化兔LOX-1蛋白及基因表达。

渴络欣胶囊的血清药物化学研究

目的:研究渴络欣胶囊吸收入血的主要物质基础及特征。方法:采用HPLC-DAD体系,建立渴络欣胶囊大鼠血清的HPLC指纹图谱;差示分析渴络欣胶囊、空白血清及含药血清指纹图谱,获得大鼠口服渴络欣胶囊后血液中移行成分概况。结果:所建大鼠血清指纹图谱方法具有良好的精密度、重复性和稳定性;基于该方法分析渴络欣胶囊大鼠含药血清,共检出移行成分13个,其中原型成分9个、代谢成分4个,原型成分中包括芦荟大黄素及大黄酸。结论:吸收入血的13种成分可能是渴络欣胶囊发挥药效的主要物质基础。