4E吸收塔再循环泵变频器节能效果评估分析

在工业生产中,能源的消耗不可避免。在当今我国提倡建设节约型社会的大背景下,节能降耗成为工业未来发展的主题,因此有效避免能源浪费、节约生产成本成为能源利用的重点。变频器是工业生产中常用的一种节能设备,其能够在保证设备正常运行的前提下尽可能地降低能耗,被广泛应用于各个领域。以4E吸收塔再循环泵变频器为例,对其节能效果进行评估分析。

真核翻译起始因子4E在初治多发性骨髓瘤患者中的表达和临床意义

目的:探讨初治多发性骨髓瘤(NDMM)患者骨髓标本中真核翻译起始因子4E(eIF4E)的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组织化学染色方法分析75例NDMM患者和25例良性骨髓疾病ITP患者骨髓活检标本中eIF4E蛋白的表达情况。收集临床资料,分析NDMM患者骨髓标本中eIF4E蛋白表达与临床特征的相关性及其预后意义。结果:NDMM患者骨髓标本中eIF4E蛋白表达阳性率明显高于良性骨髓疾病患者(P<0.001)。eIF4E蛋白表达阳性与NDMM患者血清乳酸脱氢酶升高存在相关。单因素和多因素分析结果表明,eIF4E蛋白表达阳性与NDMM患者总生存期(OS)缩短显著相关,是影响NDMM患者OS的独立危险因素。结论:eIF4E蛋白表达阳性是NDMM患者OS的独立不良预后因素。

具有喷射制冷的SOFC/TRCC电冷联供系统4E分析

提出了一种通过跨临界CO_(2)循环(TRCC)和喷射制冷循环(ERC)回收固体氧化物燃料电池/燃气轮机(SOFC/GT)余热的新型电冷联供系统.在工程求解器(EES)软件环境下建立了系统的数学模型,从能量、㶲、环境和经济(4E)的角度对系统进行研究,分析了关键参数变化对系统性能的影响.结果表明:联供系统在设计工况下净输出功率为272.874 kW,可向用户提供15.785 kW冷负荷,系统总成本为0.288 8元/(kW·h);系统总发电效率、总㶲效率和能源综合利用效率分别为68.12%、66.60%和72.06%;增加燃料利用率或提高SOFC入口温度和增大TRCC透平入口压力都可提高联供系统的㶲效率,当空燃比达到10.88时,系统㶲效率达到最大值66.94%;增大燃料利用率和SOFC入口温度或降低TRCC透平入口压力可降低系统总成本,在空燃比为10.57时达到最小值0.280 8元/(kW·h).

非小细胞肺癌组织中磷酸化4E结合蛋白1表达及其与根治术后复发的关系

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中磷酸化4E结合蛋白1(p-4EBP1)表达及其与根治术后复发的关系。方法:选取本院2020年1月—2021年1月收治的111例行根治术的NSCLC患者,收集患者手术切除的肺癌组织和癌旁组织,采用免疫组化法检测肺癌组织及癌旁组织中p-4EBP1蛋白表达,比较不同临床病理特征NSCLC患者肺癌组织p-4EBP1蛋白表达情况。随访统计NSCLC患者术后1年复发情况,对比复发组(20例)和未复发组(91例)肺癌组织p-4EBP1蛋白表达,并采用多因素Cox回归模型分析NSCLC根治术后复发的影响因素。结果:肺癌组织p-4EBP1蛋白阳性表达率高于癌旁组织(70.27%vs 16.22%,P<0.05);临床分期Ⅲa期、低分化、淋巴结转移患者肺癌组织p-4EBP1蛋白阳性表达率分别高于临床分期Ⅰ/Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移患者(P<0.05);术后1年,111例患者的复发率为18.02%(20/111),复发组肺癌组织p-4EBP1蛋白阳性表达率高于未复发组(90.00%vs 65.93%,P<0.05);复发组有吸烟史、临床分期Ⅲa期、低分化、淋巴结转移占比均高于未复发组(P<0.05);多因素回归模型分析结果显示,吸烟史、临床分期Ⅲa期、低分化、淋巴结转移、肺癌组织p-4EBP1蛋白阳性表达均是NSCLC患者根治术后复发的危险因素(P<0.05)。结论:NSCLC患者癌组织中p-4EBP1蛋白阳性表达率高于癌旁组织,且与临床病理特征和术后复发关系密切,可能是NSCLC患者根治术后复发的危险因素。

疥螨eIF4E和UPP基因的克隆表达及免疫鉴定

目的克隆、表达疥螨(Sarcoptes scabiei,S.scabiei)真核翻译起始因子(eukaryotic translation initiation factor 4E,eIF4E)和尿苷磷酸化酶(Uridine phosphorylase,UPP),并鉴定其免疫原性。方法首先提取兔疥螨总RNA,通过反转录聚合酶链式反应得到cDNA,根据NCBI数据库eIF4E和UPP序列设计引物,PCR扩增获得疥螨eIF4E、UPP完整基因序列,对基因序列进行生物信息学分析,构建pET-32a(+)重组质粒,SDS-PAGE验证重组蛋白表达情况,最后免疫印迹法鉴定其免疫原性。结果疥螨eIF4E基因的开放阅读框(ORF)长度约为561 bp,编码186个氨基酸,疥螨UPP基因的ORF长度约为939 bp,编码312个氨基酸。与其他物种氨基酸序列比对显示,eIF4E、UPP氨基酸序列与粉尘螨、屋尘螨、热带无爪螨亲缘关系较近,进化树分析eIF4E、UPP氨基酸序列与节肢类动物在同一分支。同时,成功诱导表达了疥螨重组eIF4E和UPP蛋白,免疫印迹结果表明重组eIF4E和UPP蛋白可与自然感染疥螨的兔血清结合,具有较好的免疫原性。结论疥螨重组eIF4E和UPP蛋白均具有较好的免疫原性。

脾相关酪氨酸激酶、蛋白激酶B、真核翻译起始因子4E、细胞周期蛋白依赖性激酶4在胃癌及癌前病变中的表达及相关性

目的探讨脾相关酪氨酸激酶(SYK)、蛋白激酶B(AKT)、真核翻译起始因子4E(EIF4E)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)在胃癌及癌前病变中的表达及相关性。方法收集90例患者的胃黏膜组织进行蛋白质印迹实验,其中癌旁正常组织30例,萎缩性胃炎组织30例,胃癌组织30例。另收集胃癌组织、萎缩性胃炎组织、癌旁正常组织存档蜡块各30例进行免疫组化实验。分别采用蛋白质印迹法和免疫组化法检测各组织中SYK、AKT、EIF4E、CDK4表达情况。分析萎缩性胃炎组织与胃癌组织中SYK、AKT、EIF4E、CDK4的相关性。结果癌旁正常组织中SYK蛋白表达水平及阳性表达率均高于萎缩性胃炎组织,萎缩性胃炎组织中SYK蛋白表达水平及阳性表达率均高于胃癌组织;癌旁正常组织中AKT、EIF4E、CDK4蛋白表达水平及阳性表达率均低于萎缩性胃炎组织,萎缩性胃炎组织中AKT、EIF4E、CDK4蛋白表达水平及阳性表达率均低于胃癌组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,胃癌组织和萎缩性胃炎组织中SYK与AKT、EIF4E、CDK4表达均呈负相关(P<0.05),AKT、EIF4E、CDK4三者表达均呈正相关(P<0.01)。结论SYK、AKT、EIF4E、CDK4可能通过相互作用共同参与了胃癌的发生,其可能的机制与磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/AKT信号通路有关。SYK、AKT、EIF4E、CDK4有希望成为胃癌诊断和防治的靶标,检测SYK、AKT、EIF4E、CDK4对胃癌诊断、早期治疗及预防具有重要价值。

RIP3/MLKL通过激活4EBP1-eIF4E通路诱导程序性坏死

目的:程序性坏死是一种由受体相互作用蛋白3(receptor interacting protein 3,RIP3)和混合谱系激酶域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)介导的细胞死亡形式,有研究指出哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路可能参与程序性坏死的调控,真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(eukaryotic translation initiation factor 4Ebinding protein 1,4EBP1)-真核起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF4E)通路是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白最重要的下游分子通路之一,然而此通路是否参与程序性坏死的发生,目前尚无相关研究。本研究旨在探索4EBP1-eIF4E通路在程序性坏死中是否发生改变。方法:首先向小鼠上皮样成纤维细胞系L929细胞中加入程序性坏死诱导剂TSZ(TNF-α/SM-164/Z-VAD-FMK),在光学显微镜下观察细胞坏死情况;进一步向敲除RIP3和MLKL基因的L929细胞中加入TSZ,采用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色观察细胞坏死情况,实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测4EBP1和eIF4E的mRNA和蛋白质表达水平。结果:野生型L929细胞用TSZ处理后,坏死细胞增加,4EBP1的mRNA和蛋白质表达水平明显下调且磷酸化的4EBP1(phosphorylated 4EBP1,p-4EBP1)/4EBP1值增加(P<0.05或P<0.01),eIF4E的mRNA表达水平明显上调且磷酸化的eIF4E(phosphorylated eIF4E,p-eIF4E)/eIF4E值增加(均P<0.01);在敲除L929细胞中的RIP3和MLKL基因后,PI阳性坏死细胞明显减少,4EBP1的mRNA和蛋白质表达水平明显上调且p-4EBP1/4EBP1值下降(P<0.05或P<0.01),eIF4E的mRNA表达水平明显下调且p-eIF4E/eIF4E值下降(均P<0.01)。结论:4EBP1-eIF4E通路在RIP3/MLKL介导的程序性坏死中发生活化。

C-myb蛋白、4E-BP1蛋白在NK/T细胞淋巴瘤中的表达与预后的关系

目的探讨转录激活因子Myb(C-myb)、真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白-1(4E-BP1)蛋白在NK/T细胞淋巴瘤中的表达及与预后的关系。方法回顾性选取2017年12月至2019年12月在秦皇岛市第一医院治疗的NK/T细胞淋巴瘤患者34例作为观察组,同时选取腺样体肥大组织30例作为对照组。采用免疫组织化学法检测C-myb、4E-BP1表达,比较两组患者C-myb、4E-BP1表达情况,分析观察组C-myb、4E-BP1表达与临床病理关系。采用Spearman秩相关分析C-myb和4E-BP1表达相关性。随访患者总体生存时间,分析C-myb、4E-BP1表达与预后的关系。结果观察组C-myb和4E-BP1阳性表达率分别为55.88%和61.76%,明显高于对照组(10.00%、6.67%),差异均有统计学意义(P<0.05)。临床分期Ⅲ~Ⅳ患者C-myb阳性表达率为91.67%,明显高于Ⅰ~Ⅱ患者(36.36%),差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、原发部位、B症状、国际预后指数(IPI)指数及淋巴结侵犯患者C-myb阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。IPI指数≤2分患者4E-BP1阳性表达率为76.00%,明显高于IPI指数>2分患者(22.22%),差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、原发部位、B症状、临床分期及淋巴结侵犯患者4E-BP1阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);C-myb和4E-BP1表达呈正相关(r_(s)=0.642,P<0.05);C-myb阳性表达和阴性表达患者中位总生存时间比较,差异无统计学意义(P>0.05);4E-BP1阳性表达患者中位总生存时间为24个月(95%CI:21.15~26.85),明显短于4E-BP1阴性表达患者的33个月(95%CI:32.20~33.80),差异有统计学意义(P<0.05)。结论NK/T细胞淋巴瘤中C-myb和4E-BP1蛋白表达上调,与临床分期、IPI指数有一定关系,其中4E-BP1表达与患者预后可能有一定联系。

基于4E模式的早期康复干预在ICU机械通气患者中的应用价值

目的 探讨基于4E模式的早期康复干预在重症监护室(ICU)机械通气患者中的应用价值。方法 按照组间基本资料具有可比性的原则将2020年1—12月医院收治的86例ICU机械通气患者分为对照组和观察组,每组43例。对照组采用常规护理,观察组采用基于4E模式的早期康复干预。观察两组患者预后情况、肌力水平、Barthel评分、ICU谵妄发生率、ICU谵妄持续时间以及ICU获得性衰弱(ICU-AW)发生率。结果 观察组患者机械通气、ICU住院时间及总住院时间均比对照组短,差异具有统计学意义(P<0.05)。干预前,两组患者肌力评分以及Barthel评分比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后,观察组肌力评分和Barthel评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组ICU谵妄发生率、ICU-AW发生率均低于对照组,观察组ICU谵妄持续时间短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 基于4E模式的早期康复干预可促进ICU机械通气患者的康复,改善患者肌力程度和日常生活能力,降低ICU-AW和谵妄发生率,减少ICU住院时间、谵妄持续时间。

eIF4E3与肝细胞癌患者预后的关联性及其作用机制分析

目的分析真核翻译起始因子4E家族成员3(eIF4E3)与肝细胞癌(HCC)患者预后的关联性及其作用机制。方法通过肿瘤免疫评估资源(TIMER)数据库、癌症基因集分析(GSCA)数据库、肝细胞癌整合分子数据库(HCCDB)以及UALCAN数据库分析eIF4E3在HCC和正常肝组织中的表达差异。应用UALCAN数据库分析eIF4E3的转录水平与HCC患者临床病理特征的关系。应用GSCA数据库和Kaplan-Meier Plotter数据库进行生存分析。应用Linked Omics数据库对eIF4E3的共表达基因进行探索,对其共表达基因作基因本体论(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析。通过肿瘤免疫相互作用数据库(TISIDB)和Sanger Box平台分析eIF4E3与肿瘤微环境中免疫浸润的关系。结果HCC组织中eIF4E3的表达水平显著低于正常肝组织(P<0.05)。在HCC患者中,eIF4E3低表达组的总生存期(OS)、无病生存期(DFS)、无病进展生存期(PFS)和无疾病间隔(DFI)均较eIF4E3高表达组显著缩短(P<0.05)。功能富集分析结果显示,eIF4E3的功能主要富集于细胞黏附、细胞周期以及免疫反应(P<0.05)。eIF4E3表达水平与初始CD4+T细胞、静息自然杀伤(NK)细胞、单核细胞、静息肥大细胞及嗜酸性粒细胞的浸润丰度呈显著负相关(P<0.05),与静息CD4记忆T细胞、活化CD4记忆T细胞、M1巨噬细胞、活化树突状细胞、静息树突状细胞及中性粒细胞浸润丰度呈正相关(P<0.05)。结论eIF4E3是一种潜在的抑癌基因,可能通过影响HCC肿瘤微环境的免疫浸润状态来影响患者预后,有作为HCC免疫治疗靶点的应用前景。

基于mTOR-p70S6K/4EBP1信号通路探讨淫羊藿苷抑制病毒性心肌炎模型小鼠心肌损伤的实验研究

目的探讨淫羊藿苷对病毒性心肌炎小鼠雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)/真核细胞起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)信号通路的影响。方法健康雄性BALB/c小鼠65只,分为对照组(n=11)和模型组(n=54)。模型组采用柯萨奇病毒B3标准株腹腔接种建立病毒性心肌炎小鼠模型,对照组给予等体积不含病毒的培养液腹腔注射。将造模成功的小鼠随机分为模型组(n=11)、淫羊藿苷低浓度组(n=12)、淫羊藿苷高浓度组(n=12)和卡托普利组(n=11)。模型组与对照组分别予以0.5%羧甲基纤维素钠;淫羊藿苷低、高浓度组分别予以8、16 mg/mL淫羊藿苷混悬液;卡托普利组予以10 mg/mL卡托普利混悬液;各组药物灌胃剂量均为10 mL/kg,每日1次,连续干预60 d。检测比较各组小鼠心脏超声指标,心肌组织病理评分,心肌胶原容积分数(CVF),血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)、Ⅲ型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)、转化生长因子β1(TGF-β1)含量,以及心肌组织磷酸化mTOR(p-mTOR)、磷酸化p70S6K(p-p70S6K)、磷酸化4EBP1(p-4EBP1)表达水平。结果干预后,与模型组比较,各组小鼠左室收缩末期内径(LVEDs)、左室舒张末期内径(LVEDd)较低,左室内径缩短率(FS)水平较高,心肌组织病理学评分较低,心肌CVF较低,血清PⅠCP、PⅢNP、TGF-β1含量较低,心肌组织p-mTOR、p-p70S6K、p-4EBP1表达水平较低,差异有统计学意义(P<0.05),且淫羊藿苷干预组呈一定量效关系。结论淫羊藿苷能剂量依赖性地改善病毒性心肌炎小鼠心脏收缩舒张功能,减轻心肌组织病理损伤,延缓心肌纤维化,其作用可能与抑制mTOR-p70S6K/4EBP1信号通路活性有关。

联合敲减eIF4E和YB1基因对人宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的 探究在宫颈癌HeLa和C33a细胞中联合敲减YB1和eIF4E基因对细胞增殖、侵袭和迁移行为的影响。方法 将细胞分组并转染(HeLa细胞系:mock空白对照组、NC组(sh-YB1组、Si-eIF4E组、共敲减shYB1+Si-eIF4E组;C33a细胞系:mock空白对照组、NC组、shYB1组、Si-eIF4E组、shYB1+Si-eIF4E组),24 h后RT-qPCR检测转染效率,48 h后western blot检测蛋白表达情况,CCK-8法和平板细胞克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell法测细胞侵袭迁移能力。结果 敲减YB1和eIF4E基因后mRNA和蛋白表达量明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞增殖实验结果表明,sh-YB1组、Si-eIF4E组及共敲减YB1+eIF4E组与mock组及NC组之间细胞吸光度差异有统计学意义(P<0.05)。敲减YB1和(或)eIF4E基因后,细胞吸光度下降明显(P<0.05),且sh-YB1+Si-eIF4E组吸光度较sh-YB1或Si-eIF4E均减小,差异有统计学意义(P<0.05)。平板细胞克隆形成实验表明,sh-YB1组、Si-eIF4E及共敲减YB1+eIF4E组克隆形成数量明显低于mock组及NC组(P<0.05)。HeLa细胞系、C33a细胞系中与mock组相比,sh-YB1组及Si-eIF4E组和共敲减YB1+eIF4E组平板细胞克隆形成率显著降低(P<0.05)。Transwell实验结果表明,sh-YB1组、Si-eIF4E组和共敲减YB1+eIF4E组相比于mock组及NC组之间穿过小室的细胞明显减少(P<0.05),且共敲减YB1+eIF4E组、sh-YB1组/Si-eIF4E组、mock组、NC组穿过小室的细胞数目依次增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 联合敲减YB1和eIF4E基因对宫颈癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力有抑制作用。

基于IEEE802.15.4e标准的工业物联网安全时间同步策略

IEEE802.15.4e是一个面向工业物联网应用的MAC层标准,其采用时间同步关键技术实现高可靠、低功耗的工业无线网络.网络空间中存在各式各样攻击,由于时间同步机制是工业无线网络中的核心支撑技术,其可能成为首选的攻击目标.假如攻击者对时间同步协议发起攻击,破坏节点之间的同步,将导致网络通信、节点定位以及数据融合等方面应用不能正常工作.针对基于IEEE802.15.4e标准的工业物联网中时间同步协议安全性不足问题,提出了一个安全时间同步策略.首先,提出了Sec_ASN算法保护单跳的ASN时间同步和TOF算法保护单跳的Device-to-Device时间同步;其次,提出了Rank-based入侵检测算法保护多跳时间同步;最后通过理论分析和实验测试证明,该安全时间同步策略具有时间同步精度高和开销低特点,并且能有效防御外部攻击和内部攻击.

eIF4E基因在非小细胞肺癌中的表达及意义

背景与目的以往研究表明,真核细胞翻译起始因子(eukaryotic initiation factor-4E,eIF4E)在多种实体肿瘤中高表达,与恶性肿瘤发生、浸润和转移密切相关。本研究旨在采用免疫组化方法研究eIF4E在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及意义。方法 70例NSCLC石蜡标本制成组织芯片,以19例癌旁组织、20例正常肺组织为对照,均采用Envision两步法进行免疫组化检测。结果 eIF4E在NSCLC中的阳性表达率高于在癌旁组织和正常肺组织的表达率;eIF4E在淋巴结转移组阳性表达率高于在无淋巴结转移组中表达率;eIF4E在低分化组中阳性表达率高于在中高分化组中表达率。eIF4E阳性表达与患者性别、年龄、肿块大小、吸烟情况无统计学差异(P>0.05)。结论 eIF4E在NSCLC中有较高的表达率,且与淋巴结转移密切相关,提示NSCLC的发生、侵袭和转移可能与eIF4E相关,eIF4E有可能作为肺癌新的标志物以及评估肺癌进展客观指标。

子宫内膜癌中elF4E与VEGF的表达及其临床意义

背景与目的:真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF4E)是蛋白翻译过程中的调控因子,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是血管生成过程中的关键因子,eIF4E及VEGF的表达异常可能参与肿瘤的发生、发展。本研究旨在探讨eIF4E及VEGF与子宫内膜癌发生、发展的关系及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测eIF4E与VEGF在27例子宫内膜腺癌(endometrial adenocarcinoma,EA)、16例Ⅱ型子宫内膜癌及20例正常子宫内膜中的表达情况,并分析两者与子宫内膜癌临床病理特征的关系以及两者表达的相关性。结果:eIF4E在Ⅰ型及Ⅱ型子宫内膜癌中表达的MVD值分别为0.18±0.05和0.20±0.07(P=0.224),两组表达与正常组相比,差异均有统计学意义(P<0.000);VEGF在Ⅰ型及Ⅱ型子宫内膜癌表达的MVD值分别为0.16±0.06和0.18±0.07(P=0.387),两组与正常组相比,差异均有统计学意义(P<0.000)。eIF4E表达与子宫内膜腺癌FIGO分期、组织学分级及淋巴转移呈正相关(P<0.05),与年龄及浸润深度无关(P>0.05);VEGF表达与FIGO分期、组织学分级、淋巴转移及浸润深度呈正相关(P<0.05)。eIF4E及VEGF在子宫内膜癌中的表达呈正相关(r=0.565,P=0.001)。结论:eIF4E及VEGF与子宫内膜癌的发生、发展及生物学行为关系密切,可初步考虑作为子宫内膜癌恶性改变的分子标志。

结肠腺癌细胞中eIF-4E调节NF-κB表达及对乙酰肝素酶转录表达和活性的影响

背景与目的:近期研究显示,人类肿瘤细胞部分转录因子可能受真核细胞起始因子-4E(eukaryoticinitiationfactor4E,eIF-4E)在翻译水平上的调节,此关键转录因子表达水平的变化可从转录水平改变某些恶性相关基因产物的表达。本研究旨在探讨结肠腺癌LS-174T细胞中eIF-4E对转录因子NF-κB表达和活性的影响,并观察NF-κB活性水平对乙酰肝素酶基因转录的作用。方法:将与eIF-4EmRNA翻译起始区互补的反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)经脂质体包裹后转染人结肠癌细胞LS-174T,以阻抑eIF-4E表达。随之使用Westernblot和电泳迁移改变分析(electrophoreticmobilityshiftassays,EMSA)方法检测NF-κB蛋白表达量及活性水平。通过RT-PCR、Westernblot方法观察乙酰肝素酶转录水平和蛋白表达量的改变;乙酰肝素酶活力采用特异酶活性检测方法,以放射性标记的硫酸乙酰肝素做为底物,凝胶过滤层析分离酶降解产物来分析。结果:针对eIF-4E的20个残基的ASODN经脂质体转染LS-174T细胞后,eIF-4E基因表达在转录和翻译水平都受到显著阻滞。eIF-4E基因阻抑表达引起结肠癌LS-174T细胞NF-κB蛋白表达量及其活性的显著下降;此外,转录因子NF-κB的下调也导致乙酰肝素酶基因的转录表达下降。

eIF4E、VEGF-A和VEGF-C在胃癌组织中的表达及其与淋巴结侵袭转移的相关性

目的通过检测真核细胞起始因子4E(eIF4E)、血管内皮生长因子(VEGF)-A和VEGF-C蛋白在胃癌组织中的表达,探讨它们在肿瘤侵袭和淋巴结转移过程中的作用。方法采用免疫组织化学SP法检测58例胃癌组织和25例正常胃黏膜组织中eIF4E、VEGF-A和VEGF-C蛋白的表达。结果 eIF4E、VEGF-A和VEGF-C在胃癌组织中蛋白表达阳性率分别为89.7%(52/58)、65.5%(38/58)、60.3%(35/58),明显高于它们在正常胃黏膜组织中的阳性表达率4.0%(1/25)、12.0%(3/25)、8.0%(2/25),差异均有统计学意义(P<0.05)。eIF4E、VEGF-A和VEGF-C的阳性表达率与患者的年龄、性别均无明显相关性(P>0.05),而与肿瘤的浸润深度、淋巴转移及临床分期有关(P<0.05)。eIF4E和VEGF-C还与肿瘤分化程度有关。胃癌中elF4E的阳性表达与VEGF-A和VEGF-C均呈正相关。结论 eIF4E在胃癌的发生、发展中起关键调控作用,VEGF-A和VEGF-C有助于肿瘤浸润和淋巴结转移。联合检测有助于对胃癌恶性程度的判定和评估。

4E-BP1、p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中作用的实验研究

目的:探讨真核起始因子4E(eIF-4E)结合蛋白1(4E-BP1)、核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中的作用。方法:体外培养人胃癌MKN-28、N-87细胞,给予RAD001干预后通过细胞计数、流式细胞术、Western-blot检测肿瘤细胞生长、细胞周期分布及p70S6k、4E-BP1蛋白表达及磷酸化情况。结果:细胞计数结果显示RAD001作用于胃癌细胞株MKN-28,N-8724h即开始出现对细胞生长的抑制作用,随着作用时间延长至48、72h,抑制作用逐渐增强。流式细胞术结果显示RAD001作用24h后MKN-28、N-87细胞株细胞周期发生改变,停滞在G0～G1期细胞比例增加,在实验中显示细胞系N87对于RAD001作用相对敏感。Western-blot结果显示RAD001作用24h后MKN-28、N-87的4E-BP1和p70S6K表达下降,同时去磷酸化。结论:RAD001是通过抑制mTOR的活性,进而阻断4E-BP1及p70S6K的磷酸化和蛋白质翻译进而调节着细胞周期以发挥抑制胃癌细胞生长的作用。

宫颈鳞癌和癌前病变中eIF-4E表达及其与HPV16/18感染的关系

目的探讨真核翻译启始因子eIF-4E在宫颈鳞癌和癌前病变中的表达规律及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染之间的关系。方法采用免疫组化ABC法和原位杂交技术检测eIF-4E蛋白和HPV16/18DNA在10例正常宫颈鳞状上皮,29例低级别上皮内瘤变(CIN1级),31例高级别上皮内瘤变(CIN2、3级)和31例宫颈鳞癌中的表达。结果eIF-4E在正常宫颈鳞状上皮中呈阴性表达,随着上皮病变级别升高,表达逐渐增强:低级别<高级别上皮内瘤变<宫颈鳞癌(P<0.05),且在宫颈鳞癌中表达更强;HPV16/18DNA在四组中的阳性表达率,除高级别上皮内瘤变和宫颈鳞癌两组之间没有差别(均为96.8%)以外,其余各组之间差异均有显著性(P<0.01);在低级别、高级别上皮内瘤变和宫颈鳞癌三组中eIF-4E蛋白表达和HPV感染均呈明显正相关(P<0.01)。结论宫颈鳞癌的发生与eIF-4E蛋白表达及HPV16/18感染密切相关;二者在宫颈鳞癌的发病机制中可能起着协同作用。

eIF-4E在喉癌和下咽癌组织中的表达及意义

【目的】 检测真核生物蛋白合成启始因子4E(eIF-4E)在喉癌和下咽癌?癌旁组织?安全边缘和正常黏膜的表达,探讨在喉癌?下咽癌发生?发展中的意义?【方法】25例标本中,喉癌18例,下咽癌7例?采用RT-PCR和Western blot分析喉癌和下咽癌的肿瘤核心,癌旁组织,安全切缘及喉腔正常黏膜中eIF-4E的表达水平?【结果】 eIF-4E的mRNA和蛋白在正常黏膜(0.27±0.11和12.20±5.56)?安全边缘组织(0.27±0.10 和12.90±5.08)?癌旁组织(0.49±0.15和 36.32±10.42)和癌肿核心组织(0.82±0.25和75.81±20.77)的表达呈递增趋势?【结论】 eIF-4E在喉癌和下咽癌中均过度表达,可考虑作为喉癌和下咽癌分子水平的肿瘤标志?