BATF2在胃癌组织中的表达及与患者临床病理特征和预后的关系

目的 探讨碱性亮氨酸拉链转录因子2(basic leucine zipper ATF-like transcription factor 2,BATF2)在胃癌组织中的表达及与患者临床病理特征和预后的关系。方法 收集我院2016年6月至2017年11月134例胃癌患者手术切除的胃癌组织及癌旁组织标本,采用qRT-PCR法测定BATF2的mRNA表达,免疫组化法检测BATF2蛋白表达。分析胃癌患者BATF2表达与临床病理特征间的关系。采用Cox回归分析胃癌患者预后影响因素,Kaplan-Meier法分析BATF2表达与患者预后的关系。结果 胃癌组织中BATF2 mRNA和蛋白表达均显著低于癌旁组织(P<0.05),淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、细胞浸润程度为T_(3)~T_(4)、细胞分化程度为低分化的胃癌患者BATF2蛋白阳性表达比例显著低于淋巴结未转移、TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期、细胞浸润程度为T_(0)~T_(2)、细胞分化程度为中/高分化的患者(P<0.05)。多因素Cox分析结果表明,淋巴结转移、TNM分期、细胞分化程度、BATF2是胃癌患者预后、复发或死亡的影响因素(P<0.05);Kaplan-Meier法分析结果表明,胃癌患者5年内预后良好率为74.63%(100/134),BATF2高表达患者5年预后良好率(93.33%)显著高于BATF2低表达患者(69.23%)(χ~2=6.445,P<0.05)。结论 BATF2表达与胃癌患者临床病理特征具有密切关系,是胃癌患者复发或死亡的影响因素,BATF2表达上调可能提高胃癌患者生存率。

p38/ATF-2通路参与C反应蛋白诱导的内皮细胞活化

目的：考察p38 MAPK／ATF-2通路在C反应蛋白（ CRP）诱导的内皮细胞活化中的作用。方法：采用培养的人冠状动脉内皮细胞（ HCAEC）第3～7代用于实验。 CRP刺激诱导内皮细胞活化，给予p38抑制剂SB203580和SB202190干预。免疫印迹法检测p-eNOS、p-p38和p-ATF2的水平；ELISA法测定HCAEC分泌的黏附分子ICAM-1、VCAM-1和MCP-1的变化。结果： CRP呈浓度依赖性地抑制p-eNOS水平， CRP诱导HCAEC分泌ICAM-1、VCAM-1和MCP-1；CRP激活p38／ATF-2通路；SB203580和SB202190部分恢复p-eNOS水平和抑制CRP诱导的ICAM-1、VCAM-1和MCP-1分泌。结论：p38 MAPK／ATF-2通路参与CRP诱导的HCAEC活化。

活化转录调控因子2(ATF-2)在下颌骨髁突软骨细胞中调控bcl-2机制的研究

目的:研究ATF-2通过bcl-2影响髁突软骨生长发育的机制。方法:应用体外培养原代小鼠髁突软骨细胞,原代细胞基因转染,蛋白印迹杂交等技术,阐明ATF-2调控bcl-2表达的机制。结果:外源性的ATF-2在髁突软骨细胞中,与bcl-2的调控子中CRE结合,增强bcl-2调控子的活性;当CRE位点的序列改变,ATF-2不能在髁突软骨细胞中对bcl-2调控子的活性产生影响。结论:ATF-2在软骨细胞中,通过影响有凋亡抑制作用的bcl-2的活性和表达,参与下颌骨髁突软骨的生长发育。

ATF-PAI2CD融合蛋白基因在毕赤酵母中克隆、表达和鉴定

为了克隆尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)的氨基末端片段与纤溶酶原激活剂抑制物 2型(PAI 2 )突变体所构成的融合蛋白基因 ,并在Pichiapastoris中表达 ,应用PCR获得了人ATF PAI2CD融合蛋白基因cDNA(简称ATF PAI2CD) ,将其克隆到酵母表达载体pPIC9K ,获得融合基因表达质粒pZWY ATF PAI2CD .该质粒转化毕赤酵母菌GS115 ,用G4 18 YPD平板筛选高拷贝转化子 ,然后用甲醇诱导表达 .工程菌用摇瓶发酵 ,表达产物ATF PAI2CD占培养液中总蛋白 5 0 %以上 .经硫酸铵沉淀、分子筛和离子交换层析纯化得到的目标表达产物纯度达 95 % .Western印迹检测具有PAI 2与uPA的免疫原性 ,经牛奶板法检测具有纤溶抑制活性 .经流式细胞仪 (FCM )检测 ,能与肿瘤细胞特异性结合 .结果表明 ,ATF PAI2CD融合蛋白成功地在毕赤酵母中表达 ,且具有抑制uPA及与肿瘤细胞表面uPAR特异性结合的双重功能 .提示该融合蛋白可能具有良好的应用前景 .

N-乙酰半胱氨酸对氟诱导雄性大鼠海马细胞凋亡及ATF-6蛋白表达的影响

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对氟诱导雄性大鼠海马细胞凋亡及ATF-6蛋白表达的影响。方法:选用4~5周龄雄性健康SD大鼠48只,随机分为对照组、Na F组、Na F+NAC组和NAC组,每组12只,灌胃染毒7周后处死动物,进行海马体质量和海马组织氟含量的测定,采用TUNEL法检测大鼠海马细胞凋亡情况,采用免疫组化法检测大鼠海马组织中ATF-6蛋白的表达情况。结果:Na F可减少海马体质量;NAC可增加海马体质量(P<0.001)。Na F可升高海马组织氟含量、海马细胞凋亡指数和ATF-6蛋白相对表达量(P<0.001);NAC可降低海马组织氟含量、海马细胞凋亡指数和ATF-6蛋白相对表达量(P<0.001)。Na F和NAC对海马体质量、海马组织氟含量、海马细胞凋亡指数和海马组织中ATF-6蛋白相对表达量的交互作用差异有统计学意义(P<0.001)。结论:NAC能够保护海马细胞避免Na F引起的凋亡,也能拮抗Na F诱导的ATF-6蛋白表达上调。

ATF-3在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨激活转录因子-3(ATF-3)在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化法检测ATF-3在乳腺浸润性导管癌、导管原位癌和癌旁乳腺组织中的表达情况及其与乳腺癌临床病理特征间的关系。结果:ATF-3在乳腺浸润性导管癌、导管原位癌及癌旁乳腺组织中的阳性表达率分别为80.95%(85/105)、48.98%(24/49)和11.43%(12/105),乳腺浸润性导管癌组ATF-3的阳性表达率显著高于导管原位癌组和癌旁乳腺组织,导管原位癌组ATF-3的阳性表达率显著高于癌旁乳腺组织,差异均具有统计学意义(P<0.016 7)。ATF-3的表达与乳腺癌的组织学分级、淋巴结转移及临床分期相关,而与患者年龄及肿瘤大小无关。结论:ATF-3与乳腺癌的发生、发展、侵袭和转移有关,可能作为预测乳腺癌恶性程度和评估乳腺癌患者预后的重要指标。

肾脏缺血再灌注损伤大鼠肾组织JNK/ATF-2信号通路表达及意义

目的探讨JNK/ATF-2信号通路在肾脏缺血再灌注损伤(IR)中的作用。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(对照组)和缺血再灌注组(IR组),每组30只。IR组制备IR模型。各组分别于再灌注0、10、30 min及1、24 h各处死6只大鼠,取其肾组织,采用免疫组化及RT-PCR法检测不同时间点肾小管上皮细胞JNK、ATF-2磷酸化蛋白及mRNA表达水平。结果 IR组JNK、ATF-2 mRNA及蛋白表达早期即有增加,再灌注30min出现高峰,再灌注1 h表达略减弱,24 h仍有高表达,与假手术组比较,差异均有统计学意义。结论肾脏缺血再灌注后JNK/ATF-2信号通路在肾小管上皮细胞表达明显上调,抑制其表达可减轻肾脏损伤。

基于复杂网络表征ATF时间序列动力学特性

针对空中交通流仿真、预测与控制工作中普遍需要空中交通流时空动态基本特征的问题,应用复杂网络方法从实测监视数据中挖掘空中交通流的内在特性。探索了运用复杂网络对空中交通流时间序列的非线性特性进行分析,通过网络度分布的分析验证了航路交通流具有混沌和分形特性。此外还发现交通流HVG转换算法网络度分布近似符合指数函数p(k)~exp(-γk)且混沌的强弱程度与参数值γ大小存在正相关关系,验证了交通流VG转换算法网络度分布幂指数λ与Hurst指数的线性关系。基于复杂网络理论的研究工作从全新的视角审视了空中交通流,丰富了刻画时间序列非线性动力特性的手段。

基于小型盘盘型摩擦试验机的ATF油摩擦性能评定

提出采用小型盘盘型摩擦试验机(WAZAU)评价自动传动液(ATF)的抗颤性。采用WAZAU对2种ATF的抗颤性进行评价,并与传统的低速摩擦磨损试验机(LVFA)评价结果进行比较。结果表明:WAZAU与LVFA 2种摩擦试验机测得的摩擦特性曲线(摩擦因数-速度曲线)具有高拟合度,且试验后钢片表面发生摩擦化学反应成膜的主要成分也基本一致,从而证实2种摩擦试验机的试验结果具有很高的正相关性。WAZAU试验机是LVFA试验机的微型版,相比LVFA具有用油量小、操作简单的优点,且在检测噪声、震动、舒适性上比LVFA更具直观性,可作为快速模拟评价手段用于ATF的摩擦特性研究。

人重组pEGFPC1-uPA ATF质粒的构建及表达的研究

目的构建含人uPA ATF基因的真核表达质粒,并研究其对小鼠细胞株Pam212细胞的影响。方法设计引物,利用PCR从原核表达质粒中扩增人uPA ATF基因片断,并导入真核表达载体的绿色荧光蛋白pEGFPC1中,利用电泳和测序检测构建状况,荧光显微镜观察和免疫细胞化学检测转染情况,通过MTT、体外迁移实验检测对小鼠Pam212细胞株的影响。结果电泳和测序表明构建的质粒准确,uPA ATF cDNA阅读框完整,连接部位序列正确;质粒转染Pam212细胞株成功,并且能抑制细胞的增殖和迁移。结论成功构建了真核表达载体pEGFPC1-uPA ATF质粒,明确了人uPA ATF基因片断能降低小鼠细胞的增殖和迁移,为进一步在体实验研究打下了基础。

ATF-2基因RNA干扰表达载体的构建及鉴定

目的:构建活化转录因子2(ATF-2)基因RNA干扰的真核表达载体,观察其对HepG2肝癌细胞株增殖及凋亡的影响。方法:根据ATF-2 mRNA序列,合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入质粒载体PBA-siU6,DNA测序鉴定重组质粒PBA-siATF-2。脂质体介导质粒转染HepG2细胞。Westernblot法检测ATF-2蛋白表达;MTT方法检测细胞增殖率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率。结果:ATF-2基因RNA干扰载体经测序分析证实插入64 bp序列正确无误;Westernblot法显示干扰组细胞内ATF-2蛋白表达量明显降低;ATF-2基因的下调导致HepG2细胞增殖阻滞和凋亡发生。结论:成功构建了ATF-2基因RNAi真核表达载体,下调HepG2细胞ATF-2基因表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡。

ATF对自动变速器工作性能的影响

现代汽车配用自动变速器的越来越多,使用中经常遇到自动变速器故障,这些故障与自动变速器油(ATF)有关,正确使用和检查ATF可以减少变速器故障,延长自动变速器使用寿命,所以在检查自动变速器油质时,不能忽视ATF对变速器性能的影响,通过实例分析从油液颜色、气味和所含杂质,推断出自动变速器的故障部位,从而快速排除故障,同时增强车辆用户对自动变速器的维护保养。

矿用自卸车自动变速器ATF使用方法

国产矿用自卸车大量装备进口自动变速器提升其使用性能,自动变速器的自动换挡过程是靠液压传动实现的,ATF在变速器工作当中起着决定性作用,而由ATF引起的自动变速器故障屡见不鲜,分析其原因,主要是对ATF的功能和使用方法了解不够,只有正确使用ATF,才能确保自动变速器性能发挥,降低自动变速器维护维修费用,提高矿用自卸车工作效率,所以,在发现ATF出现变色、有焦糊味或油位不正常时,要立即停车检修,不能带故障行驶,以免造成更大损失。

一种改进的基于ATF算法的直扩通信干扰抑制技术

提出了直扩通信中一种改进的基于ATF(自适应时频)算法的干扰抑制方法。对原有算法进行了优化并给出了相应的自适应去干扰算法。采用自适应滤波技术取代子带剔除法,自适应地跟踪窄带干扰,改善了有用信号的丢弃情况,有效地抑制了窄带干扰。分析和仿真结果表明,基于ATF算法的自适应小波包时频干扰抑制方法比传统的子带剔除法在性能上更为优越,干扰定位速度也较快,干扰抑制能力强。

ATF品质对自动变速器性能的影响

ATF作为自动变速器的重要组成部分,它的优劣直接关系到自动变速器甚至整车的使用性能。由于ATF工作环境特殊,因而对ATF的品质提出较高的要求,要求其有适当的粘度、良好的热氧化性、良好的摩擦性能、良好的抗泡沫性等。使用过程中需严格按照规定选用ATF,并定期检查,否则将引起自动变速器故障。

直扩通信中基于ATF算法的窄带干扰抑制技术优化

提出了一种直扩通信中基于ATF算法的窄带干扰抑制技术的优化方法。采用自适应滤波技术取代子带剔除法,自适应地跟踪窄带干扰,改善了有用信号的丢弃情况,有效地抑制了窄带干扰。仿真结果表明,该算法在性能上更优越,干扰定位速度更快,干扰抑制能力得到较大提高。

ATF-2的致癌与抑癌双重功能

激活转录因子-2(activating transcription factor-2,ATF-2)是碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper,bZIP)蛋白家族中与特定序列相结合的DNA结合蛋白,在调控正常细胞的生长发育、应激反应、DNA损伤应答中发挥作用.ATF-2需形成同二聚体或与其他bZIP蛋白如c-Jun形成异二聚体而发挥转录活性.ATF-2具有致癌与抑癌双重功能,它的亚细胞定位与之具有相关性,PKCε可影响ATF-2的亚细胞定位,从而决定其功能.ATF-2的致癌作用与其核内定位相关,而ATF-2胞浆定位则发挥肿瘤抑制功能.此外,ATF-2表达的改变以及亚细胞定位与肿瘤的分期和预后也密切相关.

延边黄牛ATF3基因组织表达及其多态性与肉质性状的相关性分析

本研究旨在分析转录激活因子3(activating transcription factor 3,ATF3)基因在延边黄牛各组织中的表达差异及其多态性与肉质性状的相关性。以70头30月龄的健康延边黄牛为研究对象,用实时荧光定量PCR比较ATF 3基因在延边黄牛心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、后腿肌、眼肌、西冷、上脑和皮下脂肪10个部位的表达水平差异;进一步对ATF 3基因的第4外显子进行PCR扩增,通过Sanger直接测序筛选出SNPs位点,用PCR-RFLP对筛选出的SNPs进行酶切验证,并与肉质性状进行关联分析。结果发现,ATF 3基因在延边黄牛10个组织中均有表达,其中在皮下脂肪组织中表达量极显著高于其他组织(P<0.01);西冷中ATF 3基因相对表达量与肌内脂肪(IMF)含量呈极显著正相关(P<0.01),相关系数为0.996;眼肌中ATF 3基因表达量与IMF含量呈显著正相关(P<0.05),相关系数为0.999;上脑和后腿肌中ATF 3基因表达量与IMF含量无显著相关(P>0.05),相关系数分别为0.757和0.658。ATF 3基因1428 bp处存在G→C突变,存在3种基因型:GG、GC、CC,其中GC和CC基因型的脂肪含量、背膘厚均显著高于GG基因型(P<0.05);大理石花纹等级极显著优于GG基因型(P<0.01)。说明该突变位点可作为延边黄牛肉质性状潜在的分子标记,ATF 3基因可能是影响延边黄牛脂肪沉积的候选基因。

一种带宽优化选取的ATF方法及其在齿轮故障诊断中的应用

自适应时变滤波(adaptive time-varying filtering,ATF)方法是一种基于数据驱动的非平稳信号处理方法,可有效分离变转速下的齿轮故障信号;但在ATF方法中,滤波带宽的选取需依据经验人为选取,具有较大的主观性。因此,针对ATF方法中滤波带宽的自适应优化选取,以齿轮啮合阶次与其临近阶次的能量比作为指标,提出了一种基于带宽优化选取的ATF方法;该方法先采用线调频小波路径追踪算法估计齿轮故障信号中的瞬时频率,然后设置不同的滤波带宽值构建自适应时变滤波器,再对滤波后的信号进行阶次分析,并计算齿轮啮合阶次与其临近阶次的能量比,最后挑选出最佳能量比所对应的滤波带宽作为最优带宽值来对信号进行滤波分析,进而诊断齿轮故障。对变转速下的齿轮局部故障进行了仿真和实例分析,并将之与集合经验模态分解(ensemble empirical mode decomposition,EEMD)方法对比,结果表明,该方法不仅可自适应选取滤波带宽,减少滤波误差,而且能有效提取齿轮故障特征信号,凸显齿轮故障特征。

凡纳滨对虾ATF-2分子克隆及表达特征分析

激活转录因子-2(ATF-2)作为细胞内应激活化蛋白激酶下游效应分子,参与调控了生物体诸如细胞增殖、凋亡以及免疫炎症反应等许多细胞生物学过程.本研究首次从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)中克隆得到了ATF-2基因全长编码序列,命名为Lv ATF-2.序列分析表明,Lv ATF-2基因开放阅读框长1 719 bp,可编码572个氨基酸.其编码的蛋白具有特征性的锌指结构和碱性亮氨酸拉链结构域,并且在N端具有两个保守的苏氨酸磷酸化位点(Thr71和Thr73).进一步的系统进化树分析显示,Lv ATF-2蛋白与脊椎动物及软体动物ATF-2蛋白聚为一簇,且与软体动物ATF-2蛋白亲缘关系更近.半定量RT-PCR结果显示,Lv ATF-2基因在所检测的各个组织中均有转录,但在鳃和肠道中转录量较高.此外Lv ATF-2基因在白斑综合症病毒(WSSV)感染早期转录水平显著下降,提示该基因与WSSV感染密切相关,可能参与了对虾应答病毒的免疫反应过程.本文通对Lv ATF-2基因的克隆与表达特征分析,为将来研究该基因在对虾免疫应答过程中的功能提供了依据.