FK506结合蛋白样蛋白在疾病中的作用的研究进展

FK506结合蛋白样蛋白(FK506-binding protein like,FKBPL)是亲免素家族的一员,其功能十分广泛,可以调控类固醇受体的信号转导,抑制肿瘤干细胞及肿瘤细胞的生长,并且能够作为肿瘤预后的生物学标志物。最新研究发现,它的N端区域存在抗血管生成结构域,可在体内和体外发挥抗血管生成作用。此外,FKBPL还与炎症、眼部疾病、心理疾病等诸多问题相关。文章主要从FKBPL的结构和功能出发,对FKBPL的功能研究进展进行综述,并探讨其在临床应用中的前景。

FKBP8介导的线粒体自噬在重复性离心运动诱导骨骼肌损伤中的作用

目的:探讨重复性离心运动对大鼠骨骼肌线粒体结构、功能及自噬的影响,分析FK506结合蛋白8(FKBP8)介导的线粒体自噬在运动致骨骼肌线粒体损伤中的作用。方法:32只成年雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为2周安静对照组(2C组,n=8)、4周安静对照组(4C组,n=8)、2周运动组(2E组,n=8)和4周运动组(4E组,n=8)。2E组和4E组大鼠分别运动2周和4周,均采取持续性下坡跑,跑台坡度为-16°,速度为16 m/min,每天运动90 min,每周5天。在末次离心运动训练结束后休息24 h,对所有大鼠施加一次性力竭运动,分别在力竭运动之前及之后通过尾静脉测定其血乳酸值,并记录完成力竭运动的距离。采用透射电子显微镜观察比目鱼肌线粒体超微结构的变化;应用Western blot方法检测大鼠比目鱼肌线粒体琥珀酸脱氢酶亚基B(SDHB)、细胞色素C氧化酶亚基1(MTCO1)、FKBP8和微管相关蛋白1轻链3(LC3)的蛋白表达;使用免疫荧光双标技术检测比目鱼肌FKBP8与LC3、LC3与线粒体膜蛋白细胞色素C氧化酶亚基COXⅣ(COXⅣ)、COXⅣ与溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)共定位的量。结果:(1)2E组大鼠完成一次力竭运动的距离和运动之前、之后血乳酸值均明显高于2C组与4E组(P<0.05或P<0.01),4E组力竭运动距离亦显著高于4C组(P<0.01),但4E组大鼠力竭运动之前、之后血乳酸值与4C组相比差异不具有显著性(P>0.05)。(2)2E组与4E组大鼠比目鱼肌线粒体均出现明显肿胀、肌膜下积聚等超微结构异常变化,有自噬体和自噬溶酶体形成,同时线粒体数量明显减少(P<0.05),且4E组比目鱼肌线粒体损伤程度较2E组更为严重。(3)2E组与4E组大鼠比目鱼肌线粒体SDHB和MTCO1蛋白表达均明显低于同期2C组与4C组,且4E组显著低于2E组(P<0.05或P<0.01)。(4)2E组与4E组大鼠比目鱼肌线粒体FKBP8和LC3蛋白表达,以及FKBP8与LC3、LC3与COXⅣ、COXⅣ与LAMP2共定位的量均明显高于同期2C组与4C组,且4E组显著高于2E组(P<0.05或P<0.01)。结论:重复性离心运动后骨骼肌线粒体结构、数量和功能受损,同时FKBP8信号激活介导线粒体自噬发生,但仍可能不足以降解清除受损的线粒体,从而导致大鼠骨骼肌损伤及其运动能力先升高后下降。

FKBPs家族调控的细胞自噬与肿瘤关系的研究进展

FK506结合蛋白(FKBPs)家族是一类具有肽基脯氨酰顺式/反式异构酶活性的高度保守的蛋白质家族,与肿瘤发生、转归密切相关。近年来许多研究发现,FKBPs家族成员如FKBP12、FKBP38和FKBP51等与细胞自噬紧密联系,且通过调控细胞自噬参与肿瘤的发生与发展。为了更好地了解FKBPs家族与细胞自噬的关系,进而为开发以细胞自噬为基础的肿瘤诊治方案提供理论依据,本文拟对FKBPs家族调控细胞自噬与肿瘤关系的研究进展进行综述。

狼疮性肾炎患者外周血中IL-18的表达以及FK506、CsA和DEX的抑制作用

目的 :探讨IL 18在活动性狼疮性肾炎 (LN)患者中的表达以及免疫抑制剂FK5 0 6、环孢霉素A(CsA)和地塞米松 (DEX)对其表达的抑制作用。方法 :取 16例活动性LN患者和 10例正常人空腹静脉全血 ,分为未刺激组、脂多糖 /植物血凝素(LPS/PHA)刺激组、LPS/PHA +FK5 0 6组、LPS/PHA +CsA组和LPS/PHA +DEX组在体外培养 2 4h ,采用ELISA法检测培养上清中IL 18的水平 ,应用半定量的RT PCR检测全血培养细胞中IL 18mRNA的表达 ,以及FK5 0 6、CsA和DEX对其表达的抑制作用。结果 :活动性LN患者全血培养的细胞自发及以LPS/PHA刺激后 ,IL 18mRNA和其蛋白的表达显著高于正常对照组 (P <0 .0 1) ;FK5 0 6、CsA和DEX对LPS/PHA刺激的LN患者全血培养细胞IL 18mRNA及其蛋白表达的抑制作用明显大于对正常对照组的抑制作用。结论 :IL 18在活动性LN患者LN的发病机制中可能起着重要的作用 ,抑制IL

FK506对肝移植受者T细胞亚群上CD152和PD-1的调节研究

目的:动态观察肝移植受者外周血T细胞表面CT-LA-4/CD152和PD-1的表达,探讨FK506对负性协同刺激分子的调节作用。方法:采用酶增强免疫分析法测定FK506的血药浓度。外周血T细胞亚群和T细胞表面CD152和PD-1分子的表达利用流式细胞术(FCM)进行检测。结果:各时间组间FK506血药浓度无统计学意义(P>0.05)。随治疗时间延长,CD4+T细胞持续下降,至治疗3月时已明显低于健康对照组(P<0.05)。而各治疗组CD4+T细胞百分率均明显低于疾病对照组(P<0.05)。各时段治疗组CD8+T细胞均明显高于疾病对照组(P<0.05)。肝移植术后,CD4+和CD8+T细胞上CD152的表达较健康对照组升高(P<0.05),治疗2周和1月组还高于疾病对照组(P<0.05)。治疗2月和3月组CD4+CD152+T细胞的表达较治疗2周和1月组下降(P<0.05)。治疗3月组CD8+CD152+T细胞的表达较治疗2周和1月组降低(P<0.05)。术后T细胞亚群上PD-1的表达有升高趋势。CD4+T细胞上PD-1的表达在治疗2周开始明显高于健康对照组(P<0.05)。CD8+T细胞上PD-1的表达从治疗1月时明显高于疾病对照组(P<0.05)。结论:FK506能上调T细胞表面负性协同刺激分子CD152和PD-1的表达,可能参与抑制效应T细胞的过度增殖与活化,维持移植受者的存活和免疫稳态。

FK506纳米粒对大鼠角膜移植排斥反应的影响

目的观察FK506纳米粒对大鼠角膜移植排斥反应模型的作用。方法Wistar大鼠为供体,对70只SD大鼠行异体穿透角膜移植,14只SD大鼠接受自体角膜移植,观察不同组别植片的存活时间及免疫病理改变。结果各组植片存活时间分别为Ⅰ组(不用药)(7.90±1.20)d;Ⅱ组(PLGA)(8.44±0.88)d;Ⅲ组(0.05%地塞米松)(10.44±1.42)d;Ⅳ组(0.05%FK506)(11.60±2.55)d;Ⅴ组(0.01%FK506纳米胶体)(15.09±4.81)d。Ⅰ组与Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组植片存活时间有显著统计学差异。Ⅴ组与Ⅲ、Ⅳ组植片存活时间也有显著统计学差异。排斥反应的植片有多量CD8+、中等量CD4+T细胞浸润和巨噬细胞浸润,ICAM、VEGF等免疫分子与炎症和排斥反应程度吻合。Ⅴ、Ⅳ组植片的炎性细胞较少。结论FK506局部滴眼可延长植片存活时间,FK506纳米胶体较FK506滴眼液能维持更长时间的植片透明。

肾移植受者FK506治疗窗浓度的临床观察

目的 :寻求适合国人肾移植受者FK5 0 6理想治疗窗浓度范围。 方法 :应用MEIA法测定口服FK5 0 6 1 2h后全血谷浓度。 结果 :统计资料显示 ,术后第 1个月应为 1 2～ 1 8μg/L ,第 2～ 3个月为 8～ 1 3μg/L ;第 4个月后为 5～ 8μg/L。 结论 :此浓度范围既能达到满意的免疫抑制效果 ,又能减少排斥反应和FK5 0

免疫抑制剂FK506所致血糖升高副作用的机制研究

目的:探讨FK506对血糖调节的副作用,并研究其机制。方法:健康SD大鼠12只,随机分为2组:对照组(生理盐水,1 mL·kg-1·d-1)、给药组(FK506,1 mg·kg-1·d-1)。每天监测体重,每2 d测空腹血糖。在第15天取脂肪组织,实时荧光定量PCR检测脂联素(adiponectin)、瘦素(leptin)、内酯素(visfatin)、抵抗素(resistin)、视黄醇结合蛋白4(RBP4)及氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)mRNA的表达;Western blotting检测PPAR-γ及脂联素蛋白的表达。结果:第10天开始,给药组大鼠空腹血糖逐渐升高,显著高于对照组(P<0.05);第14天,给药组空腹血糖由(5.10±0.62)mmol/L升到(7.73±0.73)mmol/L,对照组空腹血糖无明显变化;与对照组相比,给药组大鼠脂肪组织adiponectin和leptin mRNA的表达量显著降低(P<0.01),而visfatin、resistin和RBP4 mRNA表达明显升高(P<0.05);与对照组相比,给药组脂肪组织PPAR-γmRNA表达量降低(P<0.01);与对照组相比,给药组脂肪组织PPAR-γ及脂联素蛋白表达量明显降低(P<0.01)。结论:FK506可能通过抑制PPAR-γ的表达,影响脂肪因子的表达,影响血糖。

小肠移植术后肠内营养因素对FK506血药浓度的影响

目的 探讨小肠移植术后 FK5 0 6血药浓度的影响因素 ,为临床合理化用药提供依据 .方法 观察活体部分小肠移植术后肠内营养等因素对 FK5 0 6血药浓度的影响 .结果 肠内营养物质重量、移植肠造口排出量与 FK5 0 6血药浓度关系密切 .结论 小肠移植术后应常规性的监测 FK5 0 6血药浓度 。

FK506对大鼠面神经损伤后面运动神经元凋亡及bcl-2,bax表达的影响

目的研究FK506对大鼠面神经损伤后运动神经元凋亡及bcl-2和bax表达的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,制作大鼠单侧面神经总干切断模型,实验组每日腹腔注射FK506注射液,对照组给予相同剂量的盐水,在术后各时间点,通过Nissl染色观测面神经核神经元的形态学变化;TUNEL检测细胞凋亡;免疫组化检测bcl-2和bax表达的变化。结果面神经损伤后,FK506组与盐水组相比较,FK506组运动神经元凋亡明显减少,bcl-2表达增加,bax表达降低。结论 FK506有助于增加面神经损伤后运动神经元bcl-2的表达、降低bax表达,抑制细胞凋亡,为药物在神经损伤疾病的临床应用提供了实验依据。

不同血药浓度FK506在肝移植术后应用的比较

目的总结肝脏移植术后应用免疫抑制药他克莫司(FK506)的经验。方法回顾性分析52例乙肝后肝硬化失代偿期肝移植患者的临床资料,依据术后应用FK506的浓度分为两组,观察其两组的术后存活率、移植肝功能及并发症发生情况。结果术后1年人/肝存活率、急性排斥反应及HBV再感染发生率,两组差异无统计学意义,肝功能在术后3、6个月两组之间差异有统计学意义,其余时间点差异无统计学意义,而术后肺部感染、新发糖尿病及高血脂发生率情况,两组差异有统计学意义。结论肝移植术后应用低剂量FK506更安全有效,术后一些并发症的发生和该药物的浓度有一定的相关性。

FK506和环孢素A对肾移植患者血脂的影响

目的 :研讨FK5 0 6和环孢素A(CsA)对肾移植术后患者脂质代谢的影响。 方法 :对我们近三年以FK5 0 6或CsA为主要免疫抑制剂的肾移植患者术后 1年血脂变化进行统计及初步分析 ,明确两组患者脂质代谢的不同之处。 结果 :CsA组 (1 98例 )术后患者血脂增高的比例明显高于FK5 0 6 (36例 ,1 7 1 7%vs 2 78% ,P <0 0 5 )且CsA组血脂增高患者的手术前、后血脂水平亦有明显差异 (4 3± 1 2mmol/Lvs 4 9± 1 6mmol/L ,P <0 0 1 )。 结论 :肾移植患者术后应用FK5 0

FK506预处理下骨髓移植诱导同种异体小鼠皮肤移植耐受的实验研究

目的探讨短期大剂量FK506作为宏嵌合诱导供体特异性耐受中,骨髓移植前对受体预处理方法的可行性及临床实用性。方法100只雄性C57BL/6和60只雌性BALB/C小鼠分别作为皮肤移植的供体和受体,雄性ICR小鼠15只作为无关第三品系用以检测移植耐受状态的特异性。将60只受体小鼠随机分为5组,即无处理对照组、单纯FK506组、单纯骨髓细胞移植(BMT)组、实验组(FK506+BMT)和无关供体对照组,每组12只。FK506诱导及维持方案是皮肤移植前对受体小鼠先给予大剂量FK506腹腔注射(3mg/kg×2d),移植当天尾静脉输注2×107个骨髓细胞,再以小剂量FK506(05mg/kg×7d)短期维持治疗。观察皮肤移植存活时间、对第三方皮肤的排斥反应及对供体鼠的单向混合淋巴细胞反应,并用多聚酶链式反应(PCR)检测嵌合体的形成。结果常规剂量的骨髓输注或短期FK506治疗并不能延长移植物的存活时间,也没有宏嵌合形成。实验组皮肤移植物存活时间(240±15)d比无处理对照组(96±11)d、单纯FK506组(105±16)d、单纯骨髓细胞移植组(103±15)d、无关供体对照组(98±11)d明显延长(P<005)。混合淋巴细胞反应实验组供者特异性抑制率8055%±1410%明显高于单纯FK506组3865%±1243%及单纯骨髓细胞移植组3541%±899%(P<005),实验组宏嵌合呈阳性。

FK506纳米粒制备及在兔眼组织中的分布

目的 研究FK5 0 6 PLGA纳米粒溶液滴眼时在眼组织中的药物浓度和分布。方法 以盐析法制备FK 5 0 6 PLGA纳米粒 ,进行形态和粒径大小考察。酶联免疫方法检测FK5 0 6 PLGA纳米粒滴眼后 ,全血和眼组织FK5 0 6含量。结果 FK5 0 6 PLGA纳米粒均匀圆整 ,粒径为 166 5 6nm± 5 3 96nm。FK5 0 6纳米粒 10 μg滴眼后 ,16h内房水中的药物质量浓度 15～ 2 9ng/mL。FK5 0 6在角膜组织中含量最高 ,结膜中药物质量浓度次之 ,角膜、结膜和巩膜组织均可测到有效治疗质量浓度的KF5 0 6。全血中未检测到FK5 0 6(低于 0 3ng/mL)。 结论 FK5 0 6 PLGA可以促进和延长眼局部的FK5 0 6吸收。

免疫抑制剂FK506预处理对内毒素休克的干预作用

目的 探讨FK5 0 6预处理对内毒素休克的干预作用。方法 以脂多糖 (LPS)诱导内毒素休克小鼠 15 5只为研究对象 ,将实验小鼠随机分为LPS组 (n =80 )、LPS +FK组 (n =75 )。随机抽取LPS组小鼠 2 0只 ,LPS+FK组小鼠 15只进行生存率观察 ,两组剩余小鼠给予LPS注射后 ,分时间段采血 ,剖胸、腹取肺脏及肝脏组织 ,测定肺干重/湿重比值 (W/D) ,血清TNF α、IL 1β和ALT、AST值。HE染色光镜观察肝脏病理改变。结果 与LPS组相比 ,LPS +FK组小鼠平均存活时间明显延长 ,72h存活率达 4 6 .6 % ;各时间点肺干重/湿重比值及血清ALT、AST含量均显著降低 ;血清TNF α、IL 1β含量明显降低 ,肝、肺组织病理学改变明显改善。结论 FK5 0 6预处理可减轻内毒素休克所致的多器官损害 ,具有下调炎症反应的作用。

FK506和RS-61443对大鼠异体肢体移植的联合免疫抑制作用

目的 通过大鼠异体肢体移植模型 ,旨在分析 FK5 0 6和 RS- 6 14 4 3对大鼠异体肢体移植中急性排斥反应的免疫抑制作用。 方法 选择雄性 Wistar和 SD大鼠为供、受体 ,以 FK5 0 6和 RS- 6 14 4 3为免疫抑制剂 ,对照组为术后不用药组 ,实验组根据用药剂量和药物不同分为 6组 ,各组用药时间均为 5周 (每日 1次共 2周 ,然后每周 2次共 3周 ) ,进行了 10 1例异体肢体移植动物实验。观察大鼠一般情况、移植肢体排斥反应及存活时间。 结果 对照组肢体平均存活时间为 (7.0 0± 0 .78)天 ;实验组 1～ 6组移植肢体平均存活时间分别为 (17.0 8± 4 .5 0、2 3.2 0± 5 .0 5、11.19±2 .2 8、16 .33± 1.83、13.33± 3.2 2和 5 8.76± 6 .81)天。 结论 FK5 0 6和 RS- 6 14 4 3能抑制大鼠同种异体肢体移植术后急性移植排斥反应的发生 ,并能延长移植肢体的存活时间。

免疫抑制剂FK506加速周围神经损伤修复后功能恢复的初步临床报告

目的 探讨免疫抑制剂FK506加速临床周围神经损伤修复后功能恢复的可能性。方法 严格选择15例肢体神经断裂修复术后1d～3个月志愿者,男性12例,女性3例,年龄18～45岁。口服FK506胶囊,1mp～8mg,定期监测血药浓度并以此调节剂量,实际用药时间2～6月。定期评价神经再生及功能恢复。结果15例患者均有效,Tinel征、肌电图、临床神经功能恢复评价等综合显示神经再生速度达2.2～4.0mm/d,平均 3.1mm/d,快于同期肢体神经断裂修复术后非免疫抑制对照组1.2mm/d的速度。FK506血药浓度维持在3～5ng/ml,所有患者未出现明显的药物副作用。结论 免疫抑制剂FK506可用于周围神经损伤修复后的临床治疗,促进神经快速再生,加速肢体功能恢复,值得进一步探讨。

FK506胶原药膜抑制兔角膜移植的免疫排斥反应

目的 探讨FK5 0 6胶原药膜治疗和预防兔高危角膜移植术后免疫排斥反应的有效性和可行性。方法 2 4只新西兰大白兔建立严重的碱烧伤的高危角膜移植动物模型 ,然后施行穿透性角膜移植术 ,将全部大白兔的右眼定为实验组、左眼定为对照组 ,术后右眼用缓释胶原药膜载FK5 0 6给药 ,左眼局部滴FK5 0 6眼液 ,用酶联免疫吸附 (ELISA)方法测定术后 1、2、4、8、2 4、72h的角膜、结膜、房水的药物浓度和持续时间 ;观察植片不同时期的角膜移植排斥反应发生率 ,平均随访 3个月。结果 实验组 1h角膜浓度 (84 .1±2 0 .6 )ng·g-1、结膜浓度 (2 9.2± 10 .3)ng·g-1、房水浓度 (2 5 .6± 6 .8)ng·L-1,4h后分别为 (2 30 .2± 2 6 .6 )、(15 4 .5± 19.4 )、(15 .3± 5 .7)ng·L-1;72h后分别为 (2 3.5± 11.2 )、(13.8± 9.3)、(11.2± 2 .4 )ng·L-1,而对照组的 1h角膜、结膜、房水的药物浓度分别为(4 1.2± 11.6 )、(30 .5± 10 .5 )、(8.2± 2 .1)ng·L-1,4h后分别为 (17 8± 6 .5 )、(18.5±6 3)、(6 .7± 1.2 )ng·L-1;8h以后检测到药物浓度非常低 ,不能达到有效药物浓度。在实验期间 ,实验组的植片排斥反应的发生率及上皮愈合质量 2个指标均明显优于对照组。结论 FK5 0

FK506预处理对内毒素诱导急性肝损伤的保护作用

目的 :探讨FK5 0 6预处理对内毒素急性肝损伤小鼠的保护研究作用及其可能机制 .方法 :LPSip诱导小鼠急性肝损伤模型 ,实验小鼠随机分为LPS、LPS +FK组 ,绘制生存曲线 ,行两组间生存率动态分析 ;测定LPS注射后 0 ,0 .5 ,2 ,4 ,6 ,8h血清TNF α ,IL 1 β ,ALT ,AST含量 ,光镜下观察肝组织病理改变 .结果 :LPS +FK组小鼠 72h存活率为4 6 .6 7% ,而LPS组小鼠仅 1 0 .0 0 % (P <0 .0 1 ) .两组小鼠血清TNF α、IL 1 β含量变化均呈先升后降趋势 ,TNF α于 2h达峰值 ,IL 1 β于 4h达峰值 ,相同时间LPS +FK组TNF α、IL 1 β含量低于LPS组 (P均 <0 .0 1 ) .LPS +FK组小鼠 8h血清ALT、AST含量分别为 (1 .0 6± 0 .1 5 )、(1 .2 1± 0 .1 3)μkat/L ,低于LPS组 (2 .5 1± 0 .4 7)、(3.97± 0 .36 ) μkat/L(P均 <0 .0 1 ) .肝组织病理示LPS +FK组小鼠肝细胞肿胀坏死、胞质嗜酸性变及肝小叶炎细胞浸润均较LPS组减轻 .结论 :FK5 0 6预处理可减轻内毒素所致的急性肝损伤 ;FK5 0 6可能通过降低血清TNF α、IL 1 β含量 ,下调炎症反应而发挥抗炎作用 .

肾移植术后抗排斥药FK506的临床应用

目的 :研究FK5 0 6预防肾移植术后排斥反应的效果和安全性。 方法 :肾移植患者 2 2例 ,其中 1 8例为始用组 ,4例为切换组。FK5 0 6起始用 0 2mg/ (kg·d) ,以后逐步减量 ,3个月后维持血浓度于 3～ 1 2 μg/L水平。切换组于停用CsA 2 4h后应用FK5 0 6 ,剂量和血浓度与始用组相同。同时合并应用MMF 0 5g ,每日 3次口服 ,以及术后前 1 0天大剂量甲基强的松龙静滴 ,第 1 1天改强的松口服并减量 ,6个月后维持强的松 1 5mg/d。所有病例均严密观察并行血尿等生化分析。 结果 :始用组移植肾功能好 ,平均血肌酐水平 1 0 2 μmol/L ,无一例出现排斥反应。切换组中 2例异常的肝功能好转 ;肾功能进行性减退的 2例切换后 ,血肌酐相对稳定。有血糖升高 4例和高血压 5例 ,用药后能控制 ,其他副反应有上呼吸道和下尿路感染、胸痛、恶心、呕吐、腹泻、腹部不适等。 结论 :FK5 0 6是肾移植术后有确切疗效的基础抗排斥药 ,与MMF、皮质醇合用能有效地预防急性排斥的发生 ,并可控制慢性排斥的进展。应用剂量适当 ,无明显的肝、肾毒副作用 ,但有血糖升高及高血压副作用 ,药物可以控制。其它呼吸道、尿路、消化道和神经系统副反应轻 。