基于OPG/RANKL/RANK信号通路探讨傣药肾叶山蚂蝗的抗骨质疏松作用

目的探讨傣药肾叶山蚂蝗对去卵巢骨质疏松大鼠模型的作用及其机制。方法60只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、仙灵骨葆组(0.24 g·kg^(-1))、肾叶山蚂蝗低(1.35 g·kg^(-1))、中(2.70 g·kg^(-1))和高剂量组(5.40 g·kg^(-1))。采用双侧卵巢切除术建立骨质疏松模型,药物干预14周后,检测血清中骨钙素(Bone gamma-carboxyglutamic-acid-containing Proteins,BGP)、骨保护素(Ostoeprotegerin,OPG)和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)的含量,苏木精-伊红(HE)染色法观察骨组织中骨小梁的变化;实时荧光定量PCR(qPCR)检测大鼠胫骨中OPG/RANKL/RANK信号通路相关基因的表达。另取破骨细胞前体细胞株RAW264.7,分为阴性对照组、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)组、仙灵骨葆组、肾叶山蚂蝗低、中、高剂量组。阴性对照组不加RANKL,其余各组使用50 ng·mL^(-1) RANKL诱导,药物组同时分别加入不同浓度的仙灵骨葆和肾叶山蚂蝗含药血清进行干预。10天后进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,观察破骨细胞分化情况,qPCR测定OPG/RANKL/RANK信号通路相关基因的表达。结果与假手术组比较,模型组血清中OPG含量显著降低(P<0.01),ALP和BGP显著升高(P<0.01),骨小梁显著减少,断裂,排列稀疏,骨小梁之间间距大,胫骨组织OPG mRNA表达显著减少(P<0.01),RANKL、肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)、活化T-细胞核因子1(NFATc1)、组织蛋白酶K(CTK)和降钙素受体(CalcR)mRNA水平的表达升高(P<0.01),肾叶山蚂蝗干预后能显著改善以上指标。RAW264.7培养10天后,与阴性对照组比较,RANKL组破骨细胞明显增多,肾叶山蚂蝗能显著降低破骨细胞的数量,OPG/RANKL/RANK通路相关基因表达趋势和动物实验一致。结论肾叶山蚂蝗能有效改善去卵巢大鼠模型的骨质疏松,其作用机制可能是通过抑制破骨细胞增殖分化,调节OPG/RANKL/RANK信号通路来实现。

Research Progress on Chemical Constituents and Biological Activity of Kummerowia striata(Thunb.) Schindl.

The purpose of this paper is to review the research progress on the chemical composition and pharmacological action of Kummerowia striata(Thunb.)Schindl.,so as to provide reference for the chemical research of natural medicine and the discovery of new drugs.K.striata(Thunb.)Schindl.contains a variety of active constituents,such as flavonoid glycosides,phenols and amino acids,and has a wide range of pharmacological activities,including anti-allergy,analgesia and anti-inflammation,anti-oxidation,anti-tumor and so on.It is mainly used in the folk for the treatment of cold and fever,summer-heat and dampness,vomiting and diarrhea,dysentery and so on.

达乌里胡枝子根解剖结构与其抗旱性的关系

为了探讨达乌里胡枝子(Lespedeza davurica(Laxm.)Schindl)适应干旱环境的结构特征变化规律,揭示解剖结构与其抗旱性之间的关系,采用石蜡切片法对山西6个野生达乌里胡枝子居群的根解剖结构进行观测,并运用方差分析、聚类分析、相关分析和隶属函数综合评价其抗旱性。结果表明:根据方差分析结果并结合植物学知识选定10个指标,聚成3类,分别反映根的维管组织特征、维管柱结构和根的宏观特性。通过相关分析将导管直径、木质部面积/根横切面积、导管密度、维管柱直径、根直径作为各类的典型指标,应用隶属函数法综合评价其抗旱能力由强到弱依次为阳泉>交口>沁源>太谷>静乐>沁水。根维管柱直径、导管直径和导管密度与当地降水量呈显著负相关关系,根直径和木质部面积/根横切面积与降水量之间呈负相关,但相关性较低。

水分胁迫及复水对达乌里胡枝子酶促防御系统影响

选用来自山西的6个生态型达乌里胡枝子(Lespedeza davurica)在干旱胁迫和复水后,研究植物叶片含水量、膜脂过氧化物和保护酶活性变化来探索不同生态型达乌里胡枝子在水分胁迫下和复水后酶促防御系统与抗旱性关系。结果表明:随干旱胁迫时间延长,达乌里胡枝子的叶片相对含水量和植株相对生长率逐渐下降,脯氨酸含量和丙二醛(MDA)含量上升,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性先升高后下降。复水后,各指标均有不同程度恢复,SOD、POD、CAT 3种酶活性比复水前低,而且比对照低,降低幅度最大的是SOD酶,其次是CAT和POD酶。干旱胁迫下,抗旱性强的阳泉、交口生态型MDA积累少,细胞膜受到伤害较轻,3种酶彼此协调保持酶系统的防御能力较强。抗旱性弱的沁水、沁源生态型MDA积累较多,细胞膜受到伤害较重,POD、CAT两种酶相互协调作用,而SOD同POD、CAT协调性较差。6个生态型达乌里胡枝子的抗旱性由强到弱顺序是:阳泉>静乐>太谷>交口>沁水>沁源。

不同居群达乌里胡枝子叶片解剖结构研究

运用光学显微镜对山西6个居群野生达乌里胡枝子(Lespedeza daurica(Laxm.)Schindl)的叶片解剖结构进行研究分析,并且运用方差分析、聚类分析、相关分析和隶属函数综合评价其抗旱性。结果表明:13个指标中10个差异显著,并聚为3类,分别反映了叶片特征、叶肉组织结构特点和叶片气孔特性;通过相关分析选择叶片厚度、叶紧密度、气孔密度分别为各类的典型指标,应用隶属函数法综合评价其抗旱能力由强到弱依次为:阳泉>静乐>交口>太谷>沁水>沁源。

水分胁迫及复水对达乌里胡枝子光合特性的影响

以来自山西的6个生态型达乌里胡枝子(Lespedeza davurica(Laxm.)Schindl)为材料,通过测定干旱胁迫和复水后植物叶片净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)、水分利用效率(WUE)、胞间CO2浓度(Ci)和叶绿素含量等指标,研究了不同生态型达乌里胡枝子在水分胁迫下和复水后光合特性与抗旱性的关系。结果表明:随干旱胁迫程度加剧,6个生态型达乌里胡枝子Pn,Tr和Gs值均有较大幅度的降低,水分利用效率呈下降趋势,光合作用减弱。其中沁水和沁源生态型的Pn下降速度快、幅度大、抗旱性差,阳泉和交口生态型的Pn下降速度慢、幅度小、抗旱性强;复水后抗旱性强的生态型恢复至正常状态的能力强,其WUE比抗旱性差的生态型高。抗旱性由强到弱的顺序是:阳泉>交口>太谷>静乐>沁源>沁水。

达乌里胡枝子种子发芽吸水规律及吸水模型研究

试验选用5个地区的野生达乌里胡枝子(Lespedeza daurica (Laxm.) Schindl.)及其对应的栽培种种子进行32 h的浸种处理,分别在2、4、6、8、10、12、14、16、18、22、26、32 h测定种子的吸水量来研究其发芽过程中的吸水规律,并运用动力学隔室理论建立吸水模型,为生产中需水量供应和理解种子吸水机制提供理论依据。结果表明:无论是野生种还是栽培种,在萌发过程中吸水量同千粒重呈正相关;从种子的吸水变化趋势来看种子发芽时的吸水过程可以分为吸胀阶段(物理吸水阶段)和萌发阶段(胚的生长阶段);运用动力学隔室理论对其变量建立模型,确定达乌里胡枝子种子物理吸水阶段模型为单室模型:W=-e-5.7t×10-3,胚生长阶段模型亦为单室模型:W=1.4728+e-t×10-3,对模型值与观察值进行拟合度检验,物理吸水过程的拟合度R2=0.7256(P<0.01),胚芽生长过程的拟合度R2=0.9350(P<0.01)。

密度对三种豆科牧草生产力和水分利用率的影响

研究播种密度对3种豆科牧草生产力和水分利用效率的影响,以探讨其在草地农业系统中的合理优化模式。结果表明：沙打旺（Astragelus adsurgens）在高密区第2年生产力最高（18321 kg.hm^-2）,第3年开始下滑;苜蓿（Medicago sativa）在中、高密区生产力的增幅和增量差别不显著,以第3年最高（22563和22108kg.hm-2）;胡枝子（Lespedeza daurica）在中密区第3年最高（7856 kg.hm^-2）;加大密度使沙打旺提早进入生长盛期,第2年即达到高生产力和较高水分利用效率;苜蓿以中密区（20-30株/m^2）效果最好;达乌里胡枝子的生产力和水分利用率偏低,在黄土塬区草地农业中没有优势。

水肥条件对达乌里胡枝子叶绿素荧光参数的影响

采用盆栽控制试验,比较研究了3种水分(高水(HW-80%FC)、中水(MW-60%FC)和低水(LW-40%FC))以及4种养分(CK,N,P,NP)处理对生长旺期达乌里胡枝子(Lespedeza davurica(Laxm.)Schindl)叶绿素荧光动力学参数的影响。结果表明:不同养分处理下,随着土壤含水量的降低,达乌里胡枝子叶片Fv/Fm值降低,表明水分胁迫降低了其PSⅡ反应中心的光化学效率。HW和MW水平下,N处理的叶片F0显著高于其他养分处理(P<0.05),而Fv/Fm值则显著低于其他养分处理(P<0.05),表明氮肥对其叶片PSⅡ反应中心的活性和光能转化效率的提高作用较小;P处理的叶片ΦPSⅡ,ETR和qP显著高于其他养分处理(P<0.05),说明施磷提高了叶片PSⅡ反应中心光化学反应效率、开放程度和电子传递速率。LW水平下,4种养分处理间Fv/Fm值无显著差异,表明在重度水分胁迫条件下,施肥对提高叶片光化学效率无明显效果。

黄土高原半灌木达乌里胡枝子和铁杆蒿对土壤干旱胁迫的生理响应

采用桶栽称量法,对重度干旱、中度干旱和适宜水分〔分别为田间最大持水量的35%、55%和75%(CK)〕条件下达乌里胡枝子〔Lespedeza daurica(Laxm.)Schindl.〕和铁杆蒿(Artemisia sacrorum Ledeb.)叶片的7个生理生化指标的动态变化进行研究。结果表明:在干旱条件下,随处理时间延长,达乌里胡枝子和铁杆蒿叶片的SOD活性逐渐增加,总体上与对照差异不明显;二者的POD活性呈先升高后降低的变化趋势、CAT活性总体上呈降低-升高-降低的变化趋势、APX活性则呈现不同的波动规律,但POD、CAT和APX活性峰值及出现的时间有差异,其中在重度干旱条件下POD、CAT和APX活性的变化幅度均最大。在干旱条件下,达乌里胡枝子和铁杆蒿叶片MDA含量均随处理时间延长呈先升高后降低的趋势且MDA峰值均明显低于对照,但二者的MDA含量水平及其峰值出现的时间有一定的差异;在不同处理条件下,二者叶片的游离脯氨酸含量随处理时间延长呈现不同的波动规律,其中,在中度干旱条件下游离脯氨酸含量变化幅度均最大;在干旱条件下,二者可溶性蛋白质含量均随处理时间延长逐渐增加,但总体上与对照差异不显著。研究结果说明:达乌里胡枝子和铁杆蒿对干旱胁迫的生理响应有一定差异,但作为黄土高原乡土植物,二者具有相似的抗旱机制,表现出较强的抵御和适应干旱的能力。

三叶人字草对IgA肾病模型大鼠的影响

【目的】观察三叶人字草对IgA肾病模型大鼠的影响。【方法】选用KM小鼠随机分为空白对照组,云南白药胶囊对照组(剂量为0.411 g.kg-1.d-1),人字草高、中、低剂量组(剂量分别为24.660、12.330、6.165 g.kg-1.d-1),持续给药7 d后,采用激光多普勒血流仪记录小鼠耳廓微循环的血流速度,观察微循环的改善情况。选用SD大鼠随机分为空白对照组,云南白药胶囊对照组(剂量为0.206 g.kg-1.d-1),人字草高、中、低剂量组(剂量分别为12.340、6.170、3.085 g.kg-1.d-1),连续给药7 d后取血,采用血液流变学测变仪检测血液流变学指标。选用SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,雷公藤多苷组(剂量为0.0165 g.kg-1.d-1),人字草高、中、低剂量组(剂量分别为16.0、8.0、4.0 g.kg-1.d-1),除空白对照组外,其他组均采用牛血清白蛋白+脂多糖+CCl4联合运用8周复制实验性IgA肾病模型,于第8周开始给药至第12周末,各组大鼠均于腹主动脉取血检测尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)和血清超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量。【结果】人字草高、中、低剂量组均可显著增强小鼠耳廓微动脉的血流速度(P<0.05或P<0.01),且呈一定的剂量效应关系。人字草高剂量组可显著降低高切、中切、低切全血黏度(P<0.01),改善大鼠血液流变学指标。除人字草低剂量组对血清MDA含量无显著影响外,其他各给药组均可显著降低模型大鼠BUN、SCr、MDA含量,升高SOD活力(P<0.05或P<0.01)。【结论】三叶人字草治疗IgA肾病的效应可能与其能改善微循环和血液流变学指标,清除自由基,提高抗氧化酶活力有关。

尖叶胡枝子营养成分研究

研究生长2年和3年的尖叶胡枝子（Lespedegahedysaroides）营养成分及茎叶比。结果表明：尖叶胡枝子粗蛋白质含量11．12％～15．08％、粗脂肪1．69%～2．48G、粗纤维22．83％～33．87％、无氮浸出物37-61％～49.13％、钙1．61％～1．98％、磷0．88％～1．22％、胡萝卜素20．75~94．47mg／kg、茎叶比为1：1．53～1：2．48；同时比较研究尖叶胡枝子营养成分与达乌里胡枝子、截叶铁扫帚和二色胡枝子的差异。

鸡眼草属两种植物中总黄酮的含量测定

目的测定鸡眼草属两种植物鸡眼草和长萼鸡眼草中总黄酮的含量。方法采用分光光度法,以芦丁为对照品,并利用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色方法,对鸡眼草属几种植物中的总黄酮含量进行测定。结果在最大吸收波长510 nm处芦丁测定的线性方程是Y=0.0124X-0.0087,r=0.9994(n=6),测得的平均回收率为99.6%(n=6),RSD=1.09%。结论该方法的测定结果准确可靠、快速、重复性好,适用于鸡眼草属植物中总黄酮的含量测定。

假木豆脂溶性成分研究

对假木豆(Dendrolobium triangulare(Retz.)Schindl)的化学成分进行研究,从乙醇提取物乙酸乙酯部位分离得到六个化合物,经理化常数和波谱分析,鉴定为正三十三烷醇(1),正二十八烷酸(2),正三十二烷醇(3)正三十四烷酸(4),正三十二烷(5),正二十九烷(6).化合物1-6均是首次从该属植物中分离得到.

反相高效液相色谱法测定人字草中槲皮素和木犀草素的含量

目的建立人字草中槲皮素和木犀草素含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,色谱柱为Zorbax SB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm);检测波长360nm,流动相为甲醇-0.2%磷酸(50∶50),柱温30℃,流速1.0mL/min。结果槲皮素、木犀草素的回归方程分别为Y=2545.36X+86.37,Y=3261.65X+61.29;r分别为0.9995和0.9991;质量浓度线性范围分别是5.28-26.4μg/mL,4.12-20.6μg/mL;槲皮素、木犀草素的加样回收率分别为101.5%和99.6%,RSD分别为1.2%和0.83%;样品分别含槲皮素、木犀草素2.33mg/g,0.316mg/g。结论该方法适合同时测定人字草中槲皮素和木犀草素的含量,方法简便可行,重复性好,结果可靠。

微波辅助提取鸡眼草中的黄酮类物质

[目的]优化鸡眼草中黄酮类化合物的提取条件。[方法]以鸡眼草的总黄酮提取率为评价指标,通过单因素试验对微波辅助提取鸡眼草黄酮类化合物的工艺条件进行了研究,再运用正交分析法确定最佳提取条件。[结果]微波辅助提取鸡眼草中的黄酮类物质的最佳条件为:乙醇浓度为50%、料液比1∶30(W/V,g/ml,下同)、微波功率300 W,微波处理时间25 min;在此条件下,鸡眼草的总黄酮提取率为3.28%。[结论]微波辅助提取鸡眼草中的黄酮类物质,操作简单易行,提取率较高,是一种理想的提取方法。

与达乌里胡枝子混播下白羊草光合对干旱及短期补水的响应

为揭示黄土丘陵区优良乡土草种白羊草[Bothriochloa ischaemum(L.)Keng]和达乌里胡枝子[Lespedeza davurica(Laxm.)Schindl.]混播时的光合生理特征及其与土壤水分的关系,采用盆栽控制试验,按照生态替代法设置了白羊草(B)和达乌里胡枝子(D)6种混播比例组合(2︰10、4︰8、6︰6、8︰4、10︰2、12︰0),标记为B2D10、B4D8、B6D6、B8D4、B10D2、B12D0;设置高水(80%土壤田间持水量,HW)、中水(60%土壤田间持水量,MW)和低水(40%土壤田间持水量,LW)3种水分供应条件,并在白羊草拔节期进行短期补水处理:即分别从中水提到高水(MHW)、低水提到高水(LHW)和低水提高到中水(LMW)。连续测定和比较了不同处理下白羊草光合生理特征——净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)和水分利用效率(WUE)的动态变化。结果表明:1)在恒定水分供应条件下,各混播比例中白羊草叶片光合生理参数在HW处理下显著最高,LW处理下显著最低,说明水分是限制其叶片光合作用的主要因子;2)短期补水后,白羊草叶片光合生理参数均是在LHW下增加幅度最大,LMW下增加幅度最小;各混播比例中白羊草光合生理参数在MHW下恢复到稳定水平时间最快,说明较高的补水幅度和土壤前期含水量有利于补水后叶片光合作用提高;3)在B10D2和B8D4混播比例下,白羊草不仅具有较高的Pn、较低的Tr和较高的WUE,且短期补水后Pn和WUE增加幅度较大,Tr增幅较小,说明这两种混播比例有利于改善其光合作用。综合表明,经历短期干旱胁迫后补水,白羊草光合生理活性出现恢复现象,恢复速度和程度与混播比例和补水前土壤水分水平相关。

白城地区盐碱生态环境3种植物的结构

采用光学显微镜技术对白城地区盐碱生态环境生长的豆科3种植物进行结构研究,首次在苦参叶的下表皮及叶柄的表皮上发现了盐腺。紫穗槐以聚盐和泌盐两种方式抗盐。兴安胡枝子在叶柄的皮层中以及韧皮部和木质部间以及髓细胞中都有少数含晶细胞分布。兴安胡枝子的抗盐方式属于聚盐型。

反相高效液相色谱法测定药用植物大红袍中的两个生物活性成分

建立了反相高效液相色谱-二极管阵列检测器(RP-HPLC-DAD)测定药用植物大红袍中具有抗菌活性的异黄酮类化合物3′-geranyl-5,7,4′-trihydroxyisoflavone(化合物1)及具有良好免疫抑制活性的紫檀烯类化合物8,9-dihydroxy-1-methoxy-[6′,6′-dimethylpyrano(2′,3′:2,3)]pterocarpene(化合物2)含量的方法。采用的色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0mL/min;柱温30℃。化合物1和化合物2分别在4.4～13.2μg和0.428～1.284μg范围内呈线性关系;平均回收率分别为99.65%和99.11%,相对标准偏差分别为1.83%和2.59%(n=5)。该方法快速简便,灵敏度和分离度好,适用于大红袍药材中活性黄酮类成分的测定。

人字草抗炎活性部位的筛选

目的:从人字草的4个化学提取部位中筛选出抗炎活性部位。方法:采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型观察人字草各部位抗炎作用。结果:人字草乙酸乙酯部位高低剂量均能明显减轻小鼠耳肿胀,显示良好的抗炎作用。结论:人字草乙酸乙酯部位具有明显的抗炎作用,为人字草的抗炎活性部位。