猪笼液蛋白酶消减牛乳蛋白致敏表位的研究

目的:利用废弃猪笼液中的蛋白酶来消减牛乳主要致敏原蛋白的致敏性。方法:首先采集了米兰达猪笼草(Nepenthes×Miranda)的猪笼液,经过滤、5 kDa膜超滤、真空冷冻干燥和复溶获得酶活为126.276 U/mL的猪笼液蛋白酶液。然后用此酶对牛乳蛋白进行酶解,通过液相色谱-二级质谱法(LC-MS/MS)鉴定酶解后肽段产物,对比致敏原表位数据库以判断蛋白酶对表位的酶切情况。结果:牛乳主要致敏原蛋白中P1位的K、V、F、R、Y、I、S和L以及P1’位的D、A、V、I、L、F、E、R、Y、N、T、Q、S、W和P的肽键被有效酶解,酶切位点位于相对应的表位内,且位于蛋白表面和内部的表位均有被酶解。其中,来自α-LA的表位Eα-LA1中的K-V以及表位Eα-LA2中的K-V和K-A被酶解频率较高,来自β-LG的被酶解频率高的表位处的肽键为Eβ-LG1和Eβ-LG2中的L-D、V-Y和Y-V,来自αs1-CN的表位Eαs1-CN1中大部分的R-F和F-F被高频酶解,来自αs2-CN的表位Eαs2-CN1中的L-N、R-Y、K-F和K-T和表位Eαs2-CN2中的K-T、K-L和K-I被酶解频率较高,β-CN中被酶解频率较高的表位为Eβ-CN1和Eβ-CN2中的L-Q、S-W、D-V、L-T、T-D和E-N。结论:猪笼液蛋白酶水解对牛乳蛋白致敏原蛋白表位表现出不同程度的破坏作用,猪笼液有望成为新型蛋白酶开发的资源,实现农业废弃物再利用。

玉竹地上部位化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

目的:研究玉竹地上部位的化学成分及其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。方法:采用大孔吸附树脂HP-20、Sephadex LH-20、MCI gel CHP 20P、Chromatorex C18、半制备型高效液相等色谱法对玉竹地上部位75%甲醇提取物进行分离纯化,通过1H-NMR、13C-NMR等波谱技术对化合物进行结构鉴定,并采用α-葡萄糖苷酶活性筛选模型对部分化合物进行活性筛选。结果:从玉竹地上部位中分离得到16个化合物,分别鉴定为:对羟基苯甲酸(1)、芹菜素-6-C-葡萄糖苷(2)、异金雀花素(3)、异槲皮苷(4)、肥皂草苷(5)、山柰酚-3-O-β-芸香苷(6)、芦丁(7)、异鼠李素-3-O-芸香苷(8)、牡荆素-2″-O-葡萄糖苷(9)、牡荆素-4″-O-葡萄糖苷(10)、牡荆素-2″-O-β-D-(6‴-乙酰基)-葡萄糖苷(11)、异牡荆素-2″-O-β-D-葡萄糖苷(12)、芹菜素-6-C-阿拉伯糖-葡萄糖苷(13)、槲皮素-7-O-[α-L-鼠李糖-(1→6)-β-D-半乳糖苷](14)、金圣草黄素-7-O-槐糖苷(15)、金圣草黄素-7-O-[β-D-芹菜糖-(1→6)]-β-D-葡萄糖苷(16),并筛选了部分化合物的α-葡萄糖苷酶抑制活性。结论:其中,化合物2~6、10~16为首次从该植物中分离得到。化合物2具有显著的α-葡萄糖苷酶抑制活性。

玉竹(Polygonatum odoratum(Mill.) Druce)凝集素的荧光淬灭研究

百合科植物玉竹(Polygonatum odoratum(Mill.)Druce)的根状茎经生理盐水浸取、硫酸铵分级沉淀、CM-Sepharose柱离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶过滤,得到经SDS-PAGE检测为14.2kD的单一蛋白条带的玉竹凝集素(Polygonatum odoratumlectin,简称POL).荧光淬灭剂丙烯酰胺、KI和CsCl对POL的内源荧光淬灭研究表明它们对凝集素分子荧光的淬灭过程属动态淬灭机制.其中玉竹凝集素中Trp残基对中性淬灭剂丙烯酰胺的可接近程度达到81%,而阴离子淬灭剂I-、阳离子淬灭剂Cs+仅淬灭POL 50%和45%的荧光.表明玉竹凝集素产生荧光的氨基酸残基大部分是位于分子表面和近表面带电荷的沟槽内,并且Trp残基周围有大约等量的正、负电荷分布.

Two new homoisoflavanones from Polygonatum odoratum (Mill.) Druce

Two new homoisoflavanones were isolated from the rhizomes of Polygonatum odoratum(Mill.) Druce and their structures were elucidated as(3R)-5,7-dihydroxy-8-methoxy-3-(4-methoxybenzyl)-6-methylchrom-an-4-one(1) and(3R)-5,7,8-trihydroxy-3-(4- hydroxybenzyl)-6-methylchroman-4-one(2),on the basis of spectral analysis.

六月雪对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用研究

目的:研究六月雪对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法:将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组及六月雪组,每组10只,通过腹腔注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病肾病大鼠模型。干预6周后,比较各组大鼠的空腹血糖(FBG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)及24 h尿蛋白定量(24 h-UP);HE染色及PAS染色观察肾脏组织病理的变化,计算并比较各组病理评分;ELISA法检测各组大鼠肾脏组织中TGF-β1及IL-6的表达水平并进行比较。结果:六月雪组大鼠的FBG、BUN、Scr及24 h-UP较模型组降低(P<0.01);与模型组比较,六月雪组大鼠的肾脏病理改变有所减轻,病理评分降低(P<0.01);与模型组比较,六月雪组大鼠TGF-β1及IL-6表达有所下降(P<0.05)。结论:六月雪能够改善肾功能,减少尿蛋白,减轻肾脏损伤,其肾脏保护作用可能与TGF-β1及IL-6的表达下调有关。

玉竹提取物对大鼠多囊卵巢综合症的疗效研究

目的观察玉竹提取物(POD)对多囊卵巢综合症(PCOS)模型大鼠卵巢功能及炎症的影响。方法本研究选择3周龄雌性SD大鼠,采用来曲唑进行灌胃21 d复制PCOS模型,造模成功后,采用不同浓度POD对PCOS模型大鼠进行灌胃处理。记录大鼠每日饮水及摄食量、体重变化情况及动情周期,检测血液相关指标、测定血清睾酮水平,检测大鼠糖耐量,采用苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织形态学变化,通过蛋白质免疫印迹法(WB)、实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)及免疫组织化学法(IHC)检测卵巢组织内抗苗勒激素(AMH)、炎性细胞因子白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。结果与对照组相比,PCOS模型大鼠动情周期紊乱、卵巢呈多囊样改变,血清睾酮水平显著上升、卵巢AMH表达上调、糖耐量异常(P<0.01),IL-1β和TNF-α表达增加(P<0.01);不同浓度POD处理PCOS模型大鼠后,大鼠动情周期逐渐恢复正常、卵巢中黄体数量增加、囊性卵泡数量减少、血清睾酮水平下调、糖耐量异常缓解(P<0.01),卵巢组织炎性细胞因子IL-1β、TNF-α表达下调。结论POD可以改善PCOS模型大鼠卵巢功能并且抑制炎症反应,对模型大鼠的PCOS有一定的治疗效果。

不同浓度萘和芘处理对红树植物秋茄胚轴萌发和幼苗生长的影响

在实验室条件下,分别以0.1、1和10 mg/L三个浓度的萘和芘培养红树植物秋茄(Kandelia candel(L.)D ruce)幼苗,培养基盐度15,培养期60 d,以不加污染物培养为对照,分析了萘和芘对幼苗萌发和生长的影响.研究结果表明:低浓度萘和芘(0.1 mg/L)对秋茄胚轴萌发没有影响,对幼苗生长甚至有一定的刺激作用.高浓度处理(10 mg/L)则对胚轴第二对叶的展开有明显的抑制作用.高浓度萘处理的幼苗根、茎、叶及总量与对照组相比分别降低了95.2%、89.7%、85.5%和91.6%;高浓度芘处理则分别降低了50.4%,52.9%、73.9%和57.6%.在抑制程度上,萘处理明显大于芘处理.

玉竹中性多糖的分离纯化及单糖组成分析

采用水提醇沉方法提取玉竹(Polygonatum odoratum(Mill)Druce)粗多糖,通过DEAE-纤维素离子交换层析和Sepharose CL-6B分子筛层析分离纯化得到玉竹中性多糖。应用紫外光谱分析中性多糖的纯度,凝胶过滤法测定其分子质量,红外光谱和高效液相色谱对其结构和单糖组成进行初步分析。结果表明:玉竹多糖主要为中性多糖,同时含有少量酸性多糖;玉竹中性多糖平均分子质量为1.21×106D,主要由甘露糖和葡萄糖组成,其物质的量比为5:1,同时含有少量半乳糖。

玉竹的研究开发现状与展望

玉竹作为一种药、食两用草本植物,具有独特的营养与保健功能,近几年来受到了人们的广泛关注。本文综述了国内10余年来玉竹的研究开发进展与现状,并对玉竹的深度开发研究作了展望。

中药玉竹有效成分研究

自江苏海门产百合科植物玉竹［Ｐｏｌｙｇｏｎａｔｕｍｏｄｏｒａｔｕｍ（Ｍｉｌｌ．）Ｄｒｕｃｅ］根茎的乙醇提取物中分得六个单体化合物，根据化学性质和光谱解析，鉴定其化学结构分别为β－谷甾醇（Ｓ－Ａ）），β－谷甾醇－３－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖甙（Ｓ－Ｂ），２５（Ｒ，Ｓ）螺甾－５－烯－３β－醇－３－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基－（１→２）－［β－Ｄ－吡喃木糖基－（１→３）］－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基（１→４）－β－吡喃半乳糖甙（ＰＯＤ－Ｉ），２５（Ｒ）螺甾－５－烯－３β，１４ａ－二醇－３－０－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基－（１→２）－［β－Ｄ－吡喃木糖基－（１→３）］－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基－（１→４）－β－Ｄ－吡喃半乳糖甙（ＰＯＤ－ＩＩ），２５（Ｒ，Ｓ）螺甾－５－烯－３β，１４ａ－二醇－３－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基－（１→２）－［β－Ｄ－吡喃葡萄糖基－（１→３）］－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基（１→４）－β－Ｄ－吡喃半乳糖甙（ＰＯＤ－ＩＩＩ）和２５（Ｒ，Ｓ）螺甾－５－烯－３β－醇－３－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基－（１－２）－［β－Ｄ－吡喃葡萄糖基－（１→３）］－β－Ｄ－吡喃哺葡萄糖基（１→４）－β－Ｄ－吡喃半乳糖甙（ＰＯＤ－ＩＶ）。ＰＯＤ－?

淹水胁迫对秋茄(Kandelia candel)幼苗叶片C、N及单宁含量的影响——一个关于碳素-营养平衡假说的实验

通过在福建厦门同安湾潮间带滩涂种植红树植物秋茄,测定不同滩面高程(黄海高程1.6,1.0,0.4m)下1年生秋茄幼苗叶片单宁、C、N、叶绿素含量及幼苗的生长指标,研究了淹水胁迫对秋茄幼苗次生代谢物质单宁的影响及作用机理。结果表明,随着滩面高程的降低,淹水胁迫增强,秋茄幼苗生物量、叶片C/N及单宁含量显著降低,在滩面高程0.4m处,与1.0m和1.6m相比,幼苗生物量分别降低了18.2%和47.0%,叶片C/N比值分别降低了17.5%和20.0%,相应地,叶片单宁含量也分别降低了44.6%和70.5%。秋茄幼苗叶片单宁含量与叶片C/N比值呈显著正相关(R=0.8425),表明秋茄幼苗叶片中C、N含量及单宁含量对淹水胁迫的响应符合碳素/营养平衡假说。

秋茄幼苗叶片单宁、可溶性糖和脯氨酸含量对Cd胁迫的响应

在温室条件下,采用土壤盆栽技术研究了红树植物秋茄的幼苗在不同浓度的Cd（0～50 mg·kg^-1）胁迫下叶片单宁、可溶性糖和脯氨酸的含量变化.研究表明：秋茄幼苗叶片中的单宁、可溶性糖和脯氨酸含量均随着Cd胁迫浓度的增加出现不同程度先升后降的趋势,这表明秋茄幼苗对低浓度的Cd有一定的抵抗能力,但在高浓度的Cd胁迫下则受到伤害;单宁、可溶性糖和脯氨酸的含量分别在土壤Cd处理浓度为30mg·kg^-1、20mg·kg^-1、40mg·kg^-1时达到最高,相应地,单宁、可溶性糖和脯氨酸浓度最高分别达到66.2mg·g^-1、105.0mg·g^-1和12.22mg·g^-1; Cd胁迫对脯氨酸含量的影响极显著,因此可以作为秋茄对Cd污染的检测指标.

玉竹化学成分研究

目的研究黄精属植物玉竹[Polygonatum odoratum(Mill.)Druce]的化学成分。方法用硅胶,Sephadex LH-20,ODS柱层析和制备HPLC等分离纯化,通过波谱及质谱分析鉴定化合物结构。结果分离得到5种化合物,分别鉴定为N-反式阿魏酸酪酰胺(N-trans-feruloyl tyramine,Ⅰ),5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethyl-2-furfural,Ⅱ),(-)-丁香树脂酚[(-)-syringaresinol,Ⅲ],3β,14α-二羟基-(25S)-螺甾烷醇-5-烯[3β,14α-dihydroxy-(25S)-spirost-5-ene,IV]和β-谷甾醇(β-sitosterol,V)。结论化合物I系首次从黄精属中分离得到,化合物Ⅱ、Ⅲ系首次从玉竹中分离得到。

九龙江口秋茄和白骨壤的渗透调节剂及其贡献

于1994年和1995年，在福建省九龙江口龙海市海岸采集秋茄和白骨壤样品，采用原子吸收分光光度法、而定法和比色法分析了其叶片组织中无机和有机渗透调节剂的含量及其贡献。结果表明，秋茄和白骨壤的无机渗透调节剂在总渗透调节中的贡献分别为87.8％和87．4％，有机渗透调节剂的贡献仅分别为12．2％和12．6％。在无机渗透调节剂中，Na+和Cl-占主导地位，其次为K+，而Ca2+、Mg2+和NO3-的贡献很小。在有机渗透调节剂中，可溶性糖占主导地位，游离氨基酸和有机酸的贡献较小。另外，秋茄和白骨壤根据分析的无机和有机渗透调节剂浓度计算出的渗透调节能力均小于实测值，说明存在其它一些未知的渗透调节剂。

黄花倒水莲与六月雪中6种金属元素的测定

本文采用火焰原子吸收光谱法对中草药黄花倒水莲、六月雪中茎部的Ca、Zn、Mn、Mg、Fe、Cu的含量进行了测定,方法简单、精密度好,回收率在93%—100%之间,结果令人满意。

中国红树林北缘区秋茄树种群空间分布格局和结构特征分析

对位于中国红树林北缘区福鼎市的秋茄树〔Kandelia candel （ Linn.） Druce〕天然林和人工林的高度结构和径级结构进行了分析，并以“空间替代时间”的方法研究了秋茄树天然林和人工林的空间分布格局以及天然林的种群结构特征。结果表明：不同滩位秋茄树天然林和人工林的高度结构及径级结构明显不一致。天然林中株高0.0~0.5和1.5~2.0 m的个体占多数；而人工林以株高1.5~2.0 m的个体为主，无株高0.0~0.5 m的幼苗，株高超过2.0 m的植株也极少，表明天然林的高度结构均匀而人工林的高度结构极不合理。根据基径（ D）可将秋茄树种群分为13个径级，其中天然林不同径级个体数量随径级增大依次减少，而人工林中径级Ⅲ（6 cm≤D〈10 cm）的植株数量最多，且没有径级Ⅸ（30 cm≤D〈34 cm）以上的个体，表明天然林的径级结构良好。从分布格局看，天然林幼苗群呈现聚集分布，而其小树群、大树群和老树群均为随机分布；人工林无幼苗群和老树群，小树群呈均匀分布，大树群呈聚集分布。种群静态生命表分析结果表明：秋茄树天然林种群的期间死亡率和消失率在龄级1（D〈2 cm）和龄级7（22 cm≤D〈26 cm）达到最大，在其他龄级均较小且处于稳定状态；其个体生存率单调下降、累计死亡率单调上升，仅在龄级1时个体生存率高于累计死亡率，从龄级2（2 cm≤D〈6 cm）开始均表现为累计死亡率高于生存率；其存活曲线属于典型的Deevey-Ⅲ型，表明秋茄树天然林种群中幼苗丰富但期间死亡率较高，成树的期间死亡率相对较低且个体数量稳定。

六月雪水提取物对实验性胃黏膜损伤的修复作用

目的研究六月雪水提取物对实验性胃黏膜损伤的修复作用。方法采用无水乙醇胃饲诱发急性胃黏膜损伤大鼠模型并于伤后给药2 d处死大鼠,测定给药后胃黏膜损伤面积,病理组织学观察其修复情况。结果六月雪水提取物对大鼠乙醇诱发的胃黏膜损伤有明显的修复作用。结论六月雪水提取物对实验性胃黏膜损伤有明显的修复作用。

猴腿蹄盖蕨、玉竹总黄酮的体外抗氧化活性研究

探索猴腿蹄盖蕨及玉竹总黄酮的体外抗氧化活性。采用NaNO_2-Al(NO_3)_3-NaOH法测定猴腿蹄盖蕨及玉竹提取液中的总黄酮含量,采用分光光度法测定猴腿蹄盖蕨及玉竹总黄酮的还原力及对各种自由基、亚硝酸盐的清除能力。研究结果表明,猴腿蹄盖蕨及玉竹总黄酮提取液对DPPH·、·OH、·O_2^-、NaNO_2、ABTS^+·均具有清除活性,同时具有一定的还原能力,而且随着质量浓度的增加,对各种自由基、亚硝酸盐清除率均逐渐增加。玉竹总黄酮提取液对DPPH·的清除能力弱于VC溶液,对·OH、·O_2^-、NaNO_2、ABTS^+·的清除能力及还原力均强于VC溶液;猴腿蹄盖蕨总黄酮提取液对DPPH·、ABTS^+·、NaNO_2的清除能力及还原力均弱于VC溶液,对·OH的清除能力高于VC溶液,低浓度时猴腿蹄盖蕨总黄酮提取液对·O_2^-的清除能力明显强于VC溶液。本研究结果为猴腿蹄盖蕨和玉竹的进一步开发利用提供了试验依据。

微波法辅助提取玉竹多糖的工艺

以玉竹为原料,研究其多糖的微波辅助提取工艺条件。采用单因素试验和正交试验,对料液比[玉竹粉∶水(g∶mL)]、提取次数、醇沉浓度、提取时间、微波功率等因素对玉竹多糖提取率的影响,并以提取率为评价指标,确定优化提取工艺条件:醇沉浓度85%,提取时间10 min,微波功率400 W,提取次数2次,料液比1∶20(g∶mL)为最佳工艺条件,在此条件下玉竹多糖的平均提取率为3.76%。

毛麝香的化学成分研究(Ⅱ)

采用硅胶、凝胶、半制备液相等分离技术,对毛麝香Adenosma glutinosum(L.)Druce乙醇提取物的乙酸乙酯、石油醚以及正丁醇部位进行化学成分研究,从中分离得到了12个化合物。根据核磁共振、质谱等谱图数据和文献对照等研究方法,鉴定化合物结构分别为:30-醛基-白桦脂酸(1),1,3,5-三甲氧基苯(2),3,5-二甲氧基苯乙酮(3),β-谷甾醇(4),豆甾醇(5),大黄素甲醚(6),芝麻素(7),早熟素Ⅱ(8),棕榈酸(9),正二十六醇(10),D-阿洛醇(11),芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸丁酯(12)。所有化合物均为首次从毛麝香属中分离得到。