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两个杂交组合中转基因小麦外源1Dx5基因的遗传 被引量:5
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作者 何光源 樊秀花 +1 位作者 汪越胜 覃建兵 《华中科技大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第12期118-120,共3页
利用杂交组合川89-107×B72-8-11b和绵阳26×B72-8-11b的亲本、F1、F2代,研究转基因小麦B72-8-11b中外源品质基因1Dx5表达的遗传.结果表明:外源1Dx5基因在F1代中呈现显性,在F2代中呈现3(有):1(无)的分离,有功能拷贝整合在1个位... 利用杂交组合川89-107×B72-8-11b和绵阳26×B72-8-11b的亲本、F1、F2代,研究转基因小麦B72-8-11b中外源品质基因1Dx5表达的遗传.结果表明:外源1Dx5基因在F1代中呈现显性,在F2代中呈现3(有):1(无)的分离,有功能拷贝整合在1个位点,遵从孟德尔遗传模式,这对杂交育种选择策略的制订具有指导意义. 展开更多
关键词 转基因小麦 外源1dx5基因 单个位点 孟德尔遗传规律
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转基因小麦1Dx5基因沉默的遗传表达和品质效应分析 被引量:3
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作者 武茹 高德荣 +3 位作者 别同德 张晓 赵芸 程顺和 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期991-996,共6页
为了明确通过RNA干扰技术(RNAi)获得的转基因小麦品系"Glu-1Dx5-RNAi"中1Dx5基因的遗传规律,以"Glu-1Dx5-RNAi"为供体亲本,以弱筋品种扬麦18和扬麦13为轮回亲本进行回交,采用半籽粒SDS-PAGE法检测亲本、F_1、F_2和B... 为了明确通过RNA干扰技术(RNAi)获得的转基因小麦品系"Glu-1Dx5-RNAi"中1Dx5基因的遗传规律,以"Glu-1Dx5-RNAi"为供体亲本,以弱筋品种扬麦18和扬麦13为轮回亲本进行回交,采用半籽粒SDS-PAGE法检测亲本、F_1、F_2和BC_1F_1籽粒的高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)组成。结果表明,1Dx5基因的沉默效应在杂交后代中表现为显性遗传,在F_2和BC_1F_1世代1Dx5亚基不表达的种子数与1Dx5亚基表达的种子数的比例分别符合13:3和3:1的分离比例,说明转小RNA基因导致1Dx5基因沉默是单基因显性遗传。对转基因小麦"Glu-1Dx5-RNAi"及其受体品种Bobwhite进行品质测试表明,Glu-1Dx5-RNAi蛋白质含量(13.28%)比转化受体Bobwhite(12.83%)高0.45个百分点,硬度指数、微量SDS沉降值比受体品种分别降低3.13和3.7 mL。1Dx5基因沉默对弱筋小麦育种可能会有一定的利用价值。 展开更多
关键词 小麦 1dx5亚基 RNAI 转基因沉默 品质 遗传
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外源1Dx5基因导致小麦高分子量麦谷蛋白亚基表达变异 被引量:8
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作者 李三和 李举 +1 位作者 王娜丽 何光源 《生物技术通讯》 CAS 2007年第2期217-219,共3页
目的:为了结合基因枪转化和传统杂交方法培育优质小麦品种,对转基因小麦和国内主栽小麦品种杂交后代外源基因遗传表达行为进行了研究。方法:采用SDS-PAGE对2个小麦杂交组合川89-107×B72-8-11b和鄂麦18×B72-8-11b的杂交及回交... 目的:为了结合基因枪转化和传统杂交方法培育优质小麦品种,对转基因小麦和国内主栽小麦品种杂交后代外源基因遗传表达行为进行了研究。方法:采用SDS-PAGE对2个小麦杂交组合川89-107×B72-8-11b和鄂麦18×B72-8-11b的杂交及回交后代籽粒进行高分子量麦谷蛋白亚基遗传表达分析。结果:在亲本中能够稳定超量表达的外源基因1Dx5在杂交后代中出现了不同的表达量,而且在外源基因的影响下,杂交后代出现了新的、杂交亲本并不表达的高分子量麦谷蛋白亚基。结论:多拷贝的外源基因在不同于受体环境的细胞质中的表达发生了变化,且由于外源基因的插入引起了内源高分子量麦谷蛋白亚基组成的变异。 展开更多
关键词 转基因小麦 外源1dx5基因 表达变异 高分子量麦谷蛋白亚基
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基因枪法获得无选择标记的1Dx5基因表达的转基因小麦 被引量:2
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作者 王勇 覃建兵 +1 位作者 范玲 祝长青 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期191-196,共6页
利用基因枪将无选择标记的优质高分子量麦谷蛋白亚基基因1Dx5导入新疆耐盐小麦品种新冬26,为利用优质基因进行小麦品质改良奠定基础。构建无选择标记的线性1Dx5表达框。利用基因枪将其转入不含该亚基的小麦品种新冬26幼胚盾片中,经PCR... 利用基因枪将无选择标记的优质高分子量麦谷蛋白亚基基因1Dx5导入新疆耐盐小麦品种新冬26,为利用优质基因进行小麦品质改良奠定基础。构建无选择标记的线性1Dx5表达框。利用基因枪将其转入不含该亚基的小麦品种新冬26幼胚盾片中,经PCR二分法筛选,从转化的1 000块幼胚盾片中共获得3株转基因阳性植株,转化效率0.3%。利用SDS-PAGE分析目的基因在转基因后代籽粒中的表达。转基因植株后代种子分析表明,1Dx5在转基因后代部分种子中表达。本研究成功地将无选择标记的线性1Dx5片段导入普通小麦新冬26中,并在后代部分种子中得到了表达。为利用优质亚基基因改良小麦加工品质奠定基础。 展开更多
关键词 小麦 选择标记 1dx5 基因枪
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小麦高分子量谷蛋白1Dx5亚基特异PCR标记 被引量:2
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作者 赵辉 闫华晓 王宪泽 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第1期22-26,共5页
本研究为 1Dx5亚基基因 (Glu -D1- 1b )设计了一对特异引物 ,对HMW -GS在Glu -Dx1位点已知的 11个小麦品种进行了PCR扩增 ,以检测PCR标记的准确性。结果表明 ,凡具有 1Dx5亚基的 4个品种都能扩增出一条 4 5 0bp的特异带 ,而其它品种则... 本研究为 1Dx5亚基基因 (Glu -D1- 1b )设计了一对特异引物 ,对HMW -GS在Glu -Dx1位点已知的 11个小麦品种进行了PCR扩增 ,以检测PCR标记的准确性。结果表明 ,凡具有 1Dx5亚基的 4个品种都能扩增出一条 4 5 0bp的特异带 ,而其它品种则不能扩增出这一特异带 ,与HMW -GS的蛋白质电泳结果一致。用这一特异标记对山东省推广种植面积较大的 35个品种进行PCR检测 ,发现仅有 9个品种携带 1Dx5基因 ,占待测材料总数的 2 5 .7% ,明显低于北美小麦品种。研究发现 ,与蛋白质的HMW -GS标记相比 ,PCR标记更快速、简便、准确。 展开更多
关键词 小麦 高分子量谷蛋白 1dx5亚基 PCR标记 品质
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小麦HMW-GS1Dx5基因的克隆及其特异性表达 被引量:5
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作者 刘广田 《生命科学研究》 CAS CSCD 1999年第2期143-149,共7页
显微切割了普通小麦钢82-122(Triticumaestivum2n=42)具有1Dx5+1Dy10亚基的1D染色体长臂端,利用PCR扩增得到了HMW-GS1Dx5亚基的5(端400bp序列片段.以此作为探针从基因... 显微切割了普通小麦钢82-122(Triticumaestivum2n=42)具有1Dx5+1Dy10亚基的1D染色体长臂端,利用PCR扩增得到了HMW-GS1Dx5亚基的5(端400bp序列片段.以此作为探针从基因的组织特异性和特定发育阶段的表达两个方面研究了HMW-GS1Dx5基因表达的规律.结果表明,干种子及萌发种子中存在此基因,而在发育的幼苗中此基因未表达.HMW-GS1Dx5基因可能从开花初期开始表达.HMW-GS1Dx5基因在籽粒成熟期表达,然而在营养器官如叶片中未表达,其表达存在组织特异性.HMW-GS1Dx5基因在蜡熟期籽粒表达水平最高,其次是乳熟期籽粒.从开花15d至蜡熟期籽粒,表达趋于增加.开花15d其mRNA水平是蜡熟期籽粒mRNA的28%,灌浆期为40%、乳熟期为72%、完熟期为54%. 展开更多
关键词 HMW-GS1dx5 探针 特异性表达 小麦 克隆
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1Dx5+1Dy10品质基因共转化小麦后代的胚乳特异性表达及检测分析
7
作者 施农农 王慧中 +1 位作者 何光源 李克秀 《科技通报》 2007年第2期198-201,206,共5页
采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的方法对可育转基因栽培小麦鄂恩1号(EN1)和鄂麦11号(EM11)植株的T1代种子中的谷蛋白亚基成份进行分析,验证种子中是否含有对增强小麦展弹性有显著作用的转基因胚乳特异性表达产物——... 采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的方法对可育转基因栽培小麦鄂恩1号(EN1)和鄂麦11号(EM11)植株的T1代种子中的谷蛋白亚基成份进行分析,验证种子中是否含有对增强小麦展弹性有显著作用的转基因胚乳特异性表达产物——优质高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)。转基因株D193种子中连锁表达两种亚基基因1DX5和1Dy10,转基因株D185和D186则均表达其中的1Dx5亚基基因,不同基因型受体可能影响转基因的连锁表达。2χ检验表明鄂麦1号、鄂麦11号二种基因型T1代种子中转基因表达蛋白1Dx5和1Dx5+1Dy10产生的表型比均符合预期分离比31∶(P>0.05),两种外源基因在小麦基因组中可能均为单位点整合。表明遗传转化分子育种可以成为改良我国小麦加工品质的有效途径。同时并讨论了SDS-PAGE有效检测转基因在早期世代表达的关键步骤。 展开更多
关键词 转基因小麦 SDS—PAGE 1dx5 1Dy10 Χ^2检验
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1Dx5高分子量麦谷蛋白亚基研究进展 被引量:1
8
作者 温亮 龙小玲 靳晓杰 《安徽农业科学》 CAS 2016年第5期149-151,158,共4页
综述了1Dx5亚基的基因序列、高级结构、分子标记、氨基酸序列一级、二级结构的研究进展以及在小麦品质改良中的应用,以期为更高效地运用1Dx5亚基提高小麦品质提供理论依据。
关键词 小麦 高分子量麦谷蛋白亚基 1dx5 品质改良
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转基因小麦T_1代中外源基因的检测和分析
9
作者 周继阳 祝长青 覃建兵 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期204-207,共4页
该研究采用Multiplex PCR和SDS-PAGE技术对转1 Dx5基因(ORF)T1代小麦进行了检测和分析.结果显示,Multiplex PCR能够扩增出转基因T1代材料中1 Dx2基因和1 Dx5基因的特征片段,表明外源基因已整合到受体基因组中;SDS-PAGE检测到一新的蛋白... 该研究采用Multiplex PCR和SDS-PAGE技术对转1 Dx5基因(ORF)T1代小麦进行了检测和分析.结果显示,Multiplex PCR能够扩增出转基因T1代材料中1 Dx2基因和1 Dx5基因的特征片段,表明外源基因已整合到受体基因组中;SDS-PAGE检测到一新的蛋白质亚基X,表明外源基因的插入引起了转基因T1代籽粒中HMW-GS组成的变化.该研究不仅验证了线性基因片段遗传转化策略的可行性,而且印证了普通小麦Glu-1D等位基因的多重PCR分子标记体系的有效性,为培育安全型的转基因作物新种质打下坚实的基础,加快小麦分子育种进程. 展开更多
关键词 转基因小麦 线性1dx5核心片段 蛋白质检测 多重PCR 外源基因整合
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通过代换导入了染色体1D的六倍体小大麦的面包制作品质
10
作者 J.Ballesteros 谢国禄 《国外作物育种》 2004年第1期9-10,共2页
为了改良小大麦的面筋强度,把含有1Dx5+lDy10等位基因的染色体1D通过染色体代换比如(1H^ch)1D和(1A)1D导入了六倍体小大麦中。本文报道了(1H^ch)和(1A)1D代换了的小大麦的加工特性和农艺表现。
关键词 六倍体小大麦 面筋强度 染色体代换 1dx5+lDy10等位基因 高分子量麦谷蛋白亚基
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小麦麦谷蛋白高分子量亚基N端序列克隆及原核表达分析
11
作者 王志成 王琦 +4 位作者 张长付 张聪聪 王泽濠 张霞 王金水 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第4期60-66,共7页
为了探究麦谷蛋白高分子量亚基(HMW-GS)的N-末端结构域对面粉品质的影响,以HMW-GS的1Dx5的N-末端结构域(1Dx5-N)为目的基因进行序列克隆及原核表达,研究大肠杆菌BL21(DE 3)为载体菌进行转化,鉴定阳性克隆,以IPTG和乳糖作为诱导剂,并通... 为了探究麦谷蛋白高分子量亚基(HMW-GS)的N-末端结构域对面粉品质的影响,以HMW-GS的1Dx5的N-末端结构域(1Dx5-N)为目的基因进行序列克隆及原核表达,研究大肠杆菌BL21(DE 3)为载体菌进行转化,鉴定阳性克隆,以IPTG和乳糖作为诱导剂,并通过正交试验,筛选最佳的诱导条件。结果表明:1Dx5-N序列基因全长267 bp,共编码氨基酸89个,预测分子质量为16.211 kDa;经转化、阳性克隆鉴定后,证明了该表达载体能够在大肠杆菌中稳定遗传;IPTG和乳糖均可诱导1Dx5-N进行表达;SDS-PAGE表明1Dx5-N重组蛋白多为包涵体蛋白;IPTG诱导蛋白最佳表达条件为温度30℃,浓度0.6 mmol/L,诱导时间16 h;乳糖诱导蛋白最佳表达条件为温度30℃、质量浓度9 g/L、诱导时间16 h。通过对比发现,乳糖可代替IPTG诱导1Dx5-N蛋白表达。 展开更多
关键词 麦谷蛋白高分子量亚基 1dx5-N 末端结构域 原核表达
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转基因小麦与普通小麦杂交后代中稳定株系的筛选 被引量:5
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作者 李举 李三和 +4 位作者 王娜丽 房敬业 丁莉萍 汪越胜 何光源 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期589-592,共4页
为了给小麦品质改良提供优异的种质,以小麦转1Dx5和1Ax1基因品系为父本,以长江中下游冬麦区小麦栽培品种为母本配制杂交组合,获得BC1F1、BC1F2、BC1F3和BC1F4代。在各杂交后代中,采用系谱选择法结合SDS-PAGE检测技术,鉴定各系的HMW-GS组... 为了给小麦品质改良提供优异的种质,以小麦转1Dx5和1Ax1基因品系为父本,以长江中下游冬麦区小麦栽培品种为母本配制杂交组合,获得BC1F1、BC1F2、BC1F3和BC1F4代。在各杂交后代中,采用系谱选择法结合SDS-PAGE检测技术,鉴定各系的HMW-GS组成,获得了多个外源1Dx5或1Ax1基因稳定超表达的小麦新型纯系。 展开更多
关键词 转基因小麦 1dx51Ax1基因 杂交 SDS-PAGE
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转基因小麦外源基因在主栽小麦种质中的遗传规律 被引量:6
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作者 李三和 林刚 +1 位作者 张金锐 何光源 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期23-26,共4页
为了研究转基因小麦中外源品质基因1D x 5在我国主栽小麦种质中的遗传规律,以转基因小麦B 72-8-11b为父本,主栽品种川89-107和鄂麦18为母本进行杂交,采用SDS-PAGE技术检测并分析各组合亲本、F1、F2、BC1F2、BC2F1、BC2F2代的HMW-GS组成... 为了研究转基因小麦中外源品质基因1D x 5在我国主栽小麦种质中的遗传规律,以转基因小麦B 72-8-11b为父本,主栽品种川89-107和鄂麦18为母本进行杂交,采用SDS-PAGE技术检测并分析各组合亲本、F1、F2、BC1F2、BC2F1、BC2F2代的HMW-GS组成。结果表明,外源基因有效地整合到主栽小麦的基因组中,并能够遵循孟德尔遗传模式稳定地遗传给下一代。 展开更多
关键词 转基因小麦 1dx5基因 遗传规律
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甘肃冬小麦品种(系)面筋强度、黄色素含量和PPO活性相关基因的分子检测 被引量:3
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作者 周喜旺 宋建荣 +7 位作者 岳维云 张耀辉 曹世勤 吕莉莉 刘鸿燕 王娜 南海 赵尚文 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期54-60,共7页
为了明确甘肃冬小麦品种(系)中品质相关基因的分布状况,提高品质育种效率,以141份小麦品种(系)为材料,利用高分子量麦谷蛋白亚基1Dx5的特异PCR标记、与黄色素含量相关的八氢番茄红素合酶(phytoene synthase,Psy)基因Psy-A1的标记YP7A及... 为了明确甘肃冬小麦品种(系)中品质相关基因的分布状况,提高品质育种效率,以141份小麦品种(系)为材料,利用高分子量麦谷蛋白亚基1Dx5的特异PCR标记、与黄色素含量相关的八氢番茄红素合酶(phytoene synthase,Psy)基因Psy-A1的标记YP7A及多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性基因Ppo-A1的标记PPO18分别进行1 Dx5、Psy-A1和Ppo-A1的基因型检测.结果表明:含1 Dx5基因的材料56份,分布频率为39.7%;Psy-A1位点存在Psy-A1a和Psy-A1b2种等位变异类型,分布频率分别为62.4%和37.6%;Ppo-A1位点存在Ppo-A1a和Ppo-A1b2种等位变异类型,分布频率分别为42.6%和57.4%.1 Dx5、Psy-A1和Ppo-A1的基因类型在不同地区分布频率存在明显差异,1 Dx5和Psy-A1b基因在天水地区频率最高,分别为51.0%和40.8%;Ppo-A1b基因在庆阳地区频率最高,为77.8%,Psy-A1a基因在3地区的分布频率明显高于Psy-A1b基因.参试材料中,聚合1 Dx5、Psy-A1b和Ppo-A1b基因的材料有19份,这些材料可作亲本资源,在小麦品种面筋强度和面粉色泽的改良中加以利用. 展开更多
关键词 普通小麦 1dx5 黄色素 多酚氧化酶活性 分子检测
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青海春小麦高分子量谷蛋白亚基分子标记辅助回交选择 被引量:1
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作者 刘永安 陈志国 +2 位作者 王海庆 沈裕琥 窦全文 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期410-414,共5页
为了改良青海省现有小麦主栽品种的品质性状,以青海省春小麦主栽品种青春533和高原602为轮回亲本,以具有1Dx5+1Dy10基因且综合性状良好的宁春4号为非轮回亲本,利用与1Dx5基因共分离的PCR分子标记对BC1F1、BC2F1和BC3F1植株进行目标基因... 为了改良青海省现有小麦主栽品种的品质性状,以青海省春小麦主栽品种青春533和高原602为轮回亲本,以具有1Dx5+1Dy10基因且综合性状良好的宁春4号为非轮回亲本,利用与1Dx5基因共分离的PCR分子标记对BC1F1、BC2F1和BC3F1植株进行目标基因检测;将筛选到的具有1Dx5基因的BC3F1植株进行自交,获得了BC3F2种子,利用SDS-PAGE电泳对BC3F2种子进行HMW-GS分析,分别从青春533×宁春4号和高原602×宁春4号的BC3F2中筛选出5粒和2粒具有纯合5+10亚基的种子,且中选植株的农艺性状基本接近轮回亲本。 展开更多
关键词 春小麦 分子标记辅助选择 品质改良 1dx5+1Dy10
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一种检测转1Dx5基因小麦植株的新方法 被引量:1
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作者 祝长青 周继阳 覃建兵 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期56-58,共3页
目的:建立一种有效区分Glu-1D等位基因的Multiplex-PCR体系,快速检测转1Dx5小麦植株。方法:根据1Dx5和1Dx2亚基基因的区别设计特异的PCR引物,通过多重PCR技术检测花粉管通道法转化1Dx5核心片段的转基因T1代植株。结果:Multiplex-PCR能... 目的:建立一种有效区分Glu-1D等位基因的Multiplex-PCR体系,快速检测转1Dx5小麦植株。方法:根据1Dx5和1Dx2亚基基因的区别设计特异的PCR引物,通过多重PCR技术检测花粉管通道法转化1Dx5核心片段的转基因T1代植株。结果:Multiplex-PCR能够在转基因T1代材料中扩增Glu-1D等位基因的特征条带,分别为343bp、320bp的1Dx5基因特异片段以及361bp的1Dx2基因特异片段,与预期结果一致。结论:该技术能够检测多个靶基因,有效地区分转基因Glu-1D上的等位基因,证实外源1Dx5基因已整合到受体基因组中,对检测基因组庞大、外源基因序列GC含量高且与内源基因同源性高的转基因小麦十分有效。 展开更多
关键词 转基因小麦 线性1dx5核心片段 多重PCR
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The Isogene 1-Deoxy-D-Xylulose 5-Phosphate Synthase 2 Controls Isoprenoid Profiles, Precursor Pathway Allocation, and Density of Tomato Trichomes 被引量:12
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作者 Heike Paetzold Stefan Garms +7 位作者 Stefan Bartram Jenny Wieczorek Eva-Maria Uros-Gracia Manuel Rodriguez-Concepcion Wilhelm Boland Dieter Strack Bettina Hause Michael H. Walter 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2010年第5期904-916,共13页
Plant isoprenoids are formed from precursors synthesized by the mevalonate (MVA) pathway in the cytosol or by the methyl-D-erythritol 4-phosphate (MEP) pathway in plastids. Although some exchange of precursors occ... Plant isoprenoids are formed from precursors synthesized by the mevalonate (MVA) pathway in the cytosol or by the methyl-D-erythritol 4-phosphate (MEP) pathway in plastids. Although some exchange of precursors occurs, cytosolic sesquiterpenes are assumed to derive mainly from MVA, while plastidial monoterpenes are produced preferentially from MEP precursors. Additional complexity arises in the first step of the MEP pathway, which is typically catalyzed by two divergent 1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate synthase isoforms (DXS1, DXS2). In tomato (Solanum lycopersicum), the SIDXS1 gene is ubiquitously expressed with highest levels during fruit ripening, whereas SIDXS2 transcripts are abundant in only few tissues, including young leaves, petals, and isolated trichomes. Specific down-regulation of SIDXS2 expression was performed by RNA interference in transgenic plants to investigate feedback mechanisms. SIDXS2 down-regulation led to a decrease in the monoterpene β-phellandrene and an increase in two sesquiterpenes in trichomes. Moreover, incorporation of MVA-derived precursors into residual monoterpenes and into sesquiterpenes was elevated as determined by comparison of ^13C to ^12C natural isotope ratios. A compensatory up-regulation of SIDXS1 was not observed. Down-regulated lines also exhibited increased trichome density and showed less damage by leaf-feeding Spodoptera littoralis caterpillars. The results reveal novel, non-redundant roles of DXS2 in modulating isoprenoid metabolism and a pronounced plasticity in isoprenoid precursor allocation. 展开更多
关键词 Isoprenoid biosynthesis methyI-D-erythritol 4-phosphate (MEP) pathway 1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate synthase 2 (DXS2) RNA interference (RNAi) TRICHOMES cross-talk feedback regulation GC-C-IRMS.
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