桑叶提取物1-DNJ对甜菜夜蛾幼虫生长和保护酶活性的影响

为研究桑树活性物质1-DNJ对甜菜夜蛾幼虫生长和体内保护酶活性的影响,将被不同浓度1-DNJ浸泡30 s后的甘蓝小叶饲喂4龄的甜菜夜蛾幼虫。结果表明:甜菜夜蛾4龄幼虫对1-DNJ在24、48 h的拒食率分别为77.20%、92.01%,拒食中浓度AFC50分别为0.48、0.21 g/L;生长抑制检测表明,1-DNJ对于甜菜夜蛾生长的抑制率最高达到92.34%,说明1-NDJ对甜菜夜蛾的生长具有明显抑制作用;1-DNJ对甜菜夜蛾体内保护酶活性具有明显的影响,其中SOD和CAT活性,在各时段的检测结果均呈现先被诱导后被抑制,CAT活性较对照下降幅度明显,与对照组差异达到显著水平(P<0.05),而1-DNJ对甜菜夜蛾体内POD活性影响不大。1-DNJ对甜菜夜蛾幼虫拒食和抑制生长的作用时间上滞后于对保护酶系统的破坏作用,表明甜菜夜蛾幼虫体内保护酶系统对桑树活性物质1-DNJ反应敏感。本研究结果说明:桑树活性物质1-DNJ对甜菜夜蛾的生长和保护酶活性具有一定的影响,其结果可为将桑树作为开发植物源杀虫剂的原料提供基础资料和理论依据。

桑叶提取物1-DNJ对甜菜夜蛾幼虫生物活性的影响

[目的]为桑叶植物源农药的开发提供科学依据。[方法]以甜菜夜蛾为研究对象,利用桑树叶片提取物1-DNJ饲喂甜菜夜蛾4龄幼虫,研究1-DNJ对甜菜夜蛾拒食、触杀、胃毒和生长等生物活性的影响。[结果]1-DNJ浓度为0.25 g/L,48 h检测的拒食率高于69%,浓度为2.00 g/L时拒食率达到99%以上;1-DNJ浓度越大,对甜菜夜蛾幼虫的生长发育抑制作用越明显,1.00 g/L处理的试虫体重在48和72 h均较24 h时低,出现负增长。随着1-DNJ浓度的升高,甜菜夜蛾化蛹率显著下降,但对甜菜夜蛾的蛹重作用不大。1-DNJ对甜菜夜蛾的触杀和胃毒作用效果不如其对拒食和生长抑制的作用明显。[结论]桑叶1-DNJ主要通过拒食作用影响甜菜夜蛾生长,进而达到防控的目的。

桑叶提取物1-DNJ对小菜蛾幼虫生物活性的影响

为研究桑树叶片生物活性物质1-DNJ的杀虫作用机理,以小菜蛾(Plutella xylostella L.)为研究对象,利用桑树叶片提取物1-DNJ饲喂小菜蛾3龄幼虫,研究1-DNJ对小菜蛾拒食、触杀、胃毒和生长等生物活性的影响。结果表明,1-DNJ处理后,小菜蛾48 h和72 h的拒食率分别是93.33%和89.25%,拒食中浓度为0.34和0.58 g/L。同时,1-DNJ对小菜蛾幼虫的生长发育具有明显抑制,小菜蛾化蛹率随着1-DNJ浓度增加而显著下降,但对小菜蛾的蛹重作用不大。1-DNJ对小菜蛾的触杀和胃毒作用效果没有拒食和生长抑制的作用明显。结果说明,桑树叶片中的1-DNJ主要通过拒食作用影响小菜蛾生长,进而达到防控的目的。

超声波提取桑叶中1-DNJ的响应曲面法优化研究

为了探索超声法对桑叶中1-DNJ(1-脱氧野尻霉素)进行提取的最佳方案,利用超声波取技术,依次用响应面法考查料液比、提取温度、提取时间以及超声功率对桑叶中1-DNJ提取率的影响,优选出桑叶1-DNJ(1-脱氧野尻霉素)在使用超声法提取装置时提取的最佳工艺。结果显示:响应面法的最佳提取条件为:液料比1∶21.98、提取温度52.11℃、时间34.89min、超声功率75w,预期的1-DNJ得率0.743%。

桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)的开发现状与前景展望

1-脱氧野尻霉素(DNJ)作为桑资源中特有的物质,具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒等生物活性,有较高的利用价值。为进一步促进DNJ的开发和利用,本文对现阶段DNJ的提取方法、生物活性以及应用领域进行整理,分析和展望了DNJ现阶段及未来的研究状况。发现随着DNJ提取工艺的进步,DNJ的提取效率在逐步提升,并且得益于DNJ所具备的降血糖活性、抗病毒活性、抗肿瘤活性与抗氧化和抗炎活性,使其在动物生产、医药、食品领域有着良好的应用前景。相信随着对DNJ研究与开发的深入,能使DNJ得到更充分的应用,从而推动桑资源的多元化利用。

9个桑树品种的硒、类黄酮、1—DNJ含量的分析

桑树被国家卫生部确认为"药食同源"植物。基于开发桑树药食功能的目的,选取安康9个栽培桑树品种,检测桑叶中硒、类黄酮、1-DNJ含量。结果表明:桑树的桑芽叶硒含量比桑片叶含量低,桑树芽(片)叶硒含量品种之间存在差异,桑树芽(片)叶富硒能力强;桑树芽叶类黄酮含量与片叶类黄酮含量因桑树品种不同有差异,桑叶类黄酮含量比茶叶低;桑树的桑芽叶1-DNJ含量比桑片叶高,桑树芽(片)叶1-DNJ含量品种之间存在差异,桑叶的1-DNJ含量比茶叶高。

加工方法对全蚕粉1-脱氧野尻霉素含量的影响

以全蚕粉为研究对象,探讨蚕品种、干燥方法、灭菌方法、脱脂方法等对全蚕粉中主要活性物质1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)的影响。结果表明,菁松全蚕粉的1-DNJ含量最高;蚕粉干燥方法以5龄幼蚕饥饿24 h、-40℃冷冻干燥或100℃烘干较佳,微波长时间干燥最差,但干燥蚕粉用微波短时间灭菌处理对1-DNJ含量影响不大。为提高生产效率,生产上应采用菁松蚕品种,饲喂至5龄第3天,饥饿24 h排空肠道,冷冻干燥制成全蚕粉,同时进行脱脂、离心、80℃烘干处理,微波灭菌3 min,有利于全蚕粉高品质保存、产业化利用等。

桑皮中1-脱氧野尻霉素的提取技术研究

1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)是桑皮提取物中的一种功能性成分。1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)是一种哌啶生物碱,其化学名称是3,4,5-三羟基-2-羟甲基四氢吡啶,分子式为C6H13NO4,分子量为163。DNJ作为α-葡萄糖苷酶的抑制剂,具有降血糖、抗病毒、抗肿瘤转移等作用。目前工业化生产大多采用沸水提取的方法,此法虽然简单易操作,但提取物中1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)的含量都在1.5%以下。本文分别采用不同浓度乙醇、提取温度和提取时间进行三水平三因素正交试验,经过脱溶脱水和干燥粉碎后,气相色谱法检测各正交试验粉未1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)的含量分别为2.53%、2.85%、2.75%、2.68%、3.28%、2.86%、2.77%、2.84%、2.71%。得到的最优工艺提取条件为:浓度乙醇60%,提取温度60℃,提取时间2小时。

不同全蚕粉中的1-脱氧野尻霉素含量及其对小鼠血糖浓度的影响

为探讨全蚕粉中1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojimycin,1-DNJ)含量与降血糖效果的关系以及蚕体内1-DNJ的来源,测定了7个家蚕品种或杂交组合以及用5个桑品种和不同叶质桑叶饲养5龄蚕制备的全蚕粉中1-DNJ含量,同时测定了由相应的全蚕粉配制的蚕粉复合物对小鼠食后1.5 h血糖值的影响。结果表明,不同家蚕品种以及用不同桑品种和不同叶质桑叶饲养家蚕制备的全蚕粉复合物的降血糖效果均存在显著差异,凡是降血糖效果显著的全蚕粉,1-DNJ含量都处于较高水平,而1-DNJ含量低的全蚕粉其降血糖效果均较差,但降血糖活性与1-DNJ含量之间并不存在显著正相关关系,说明全蚕粉中还存在其它降血糖活性成分。养蚕用桑中的1-DNJ含量与蚕体内1-DNJ含量存在高度正相关性,而且用不含桑叶粉的人工饲料饲养的家蚕幼虫不含1-DNJ,因此证实了蚕体内的1-DNJ来源于桑叶,家蚕本身不能产生1-DNJ。

桑树资源中1-脱氧野尻霉素的测定及其生物活性分析

目的测定桑树资源中1-脱氧野尻霉素(DN J)并分析其生物活性。方法以氯甲酸芴甲酯(FM OC-C l)柱前衍生RP-HPLC荧光检测法对DN J进行分析;在酶水平测定样品的α-糖苷酶抑制曲线,在离体水平用反转肠囊实验测定样品的α-糖苷酶抑制活性。结果建立了DN J的定量方法,并应用于桑树资源中DN J的定量;这些中药材与DN J对照品呈现了平行的α-糖苷酶抑制曲线,对淀粉水解和葡萄糖吸收具有较好的抑制作用。结论桑树资源可以作为α-糖苷酶抑制剂治疗糖尿病。

响应面法优化提高发酵桑叶茶中1-脱氧野尻霉素含量工艺

为优化提高发酵桑叶茶中1-脱氧野尻霉素含量工艺,采用响应面分析法,以发酵温度、发酵时间及接种量为自变量,1-脱氧野尻霉素含量为响应值,设计三因素三水平响应面回归分析。结果表明:提高发酵桑叶茶中1-脱氧野尻霉素含量工艺的最佳工艺条件为发酵温度30℃、发酵时间5.6 h、黑曲霉∶日本根霉∶绿色木霉=2∶1∶2菌液接种量3.75×107 CFU/100 g,在此条件下发酵桑叶茶中1-脱氧野尻霉素含量为133.882 mg/100 g。

不同产地桑叶的1-脱氧野尻霉素含量比较

目的:比较不同产地桑叶中1-脱氧野尻霉素的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱:HiQSiLC18(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相:乙腈-0.1%醋酸(55∶45,V/V);流速:1.0 ml/min;柱温25℃;荧光检测器激发波长254nm,发射波长322 nm。结果:不同产地桑叶中1-脱氧野尻霉素的含量有较大差异,且同一产地不同品种相差也较大。结论:本测定结果可为开发利用桑叶资源提供依据。

反相高效液相色谱法检测不同品种和叶位桑叶中1-脱氧野尻霉素

建立以芴甲氧酰氯(FMOC-Cl)为衍化剂的柱前衍生化-反相高效液相紫外线检测法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量的方法,并对不同品种、不同叶位桑叶中DNJ含量进行检测。结果表明:以0.05mol/LHCl为溶剂提取桑叶粉中的DNJ,用芴甲氧酰氯(FMOC-Cl)为衍生化试剂,在pH8.50硼酸盐缓冲液条件下,衍生化和RP-HPLC检测效果最好。反相高效液相色谱-紫外检测法检测DNJ时,流动相中乙腈:0.1%醋酸为55:45(V/V)时色谱分离效果最好,DNJ-FMOC的峰面积与DNJ浓度呈高度正相关关系,相关系数为0.9852。不同品种的桑叶中DNJ含量不同,本研究的15个样品中青阳青桑的DNJ含量最高,达到0.1486%,皮桑含量最低,为0.04291%。不同叶位桑叶的DNJ含量不同,第1叶位至第5叶位桑叶的DNJ含量逐渐降低,说明桑叶随着发育成熟,DNJ的含量逐渐降低。结果显示该方法快捷、稳定、灵敏、准确度高,适合桑叶中DNJ含量的检测。

桑叶中降血糖组分1-脱氧野尻霉素的富集与纯化研究

1-脱氧野尻霉素(DNJ)是中药桑叶降血糖组分多羟基生物碱中的一种重要成分,研究膜分离技术结合树脂法富集纯化桑叶水提物浸膏中的DNJ,建立用于DNJ定量分析的高效液相色谱-示差折光检测法.将桑叶水提物浸膏预处理后经氧化铝陶瓷膜微滤与聚醚砜膜超滤富集,然后再利用三种树脂进行纯化,所得产品用高效液相色谱-示差折光检测法测定其中DNJ的质量分数.经过膜分离技术富集后,桑叶水提物浸膏中DNJ的质量分数从1.32%提高到7.84%,收率为88.06%;经树脂纯化后DNJ的质量分数达到51.19%,总收率为12.28%.本研究首次采用微滤与超滤结合技术富集DNJ,优势明显,不仅工艺流程简单、快速,而且产品中DNJ的质量分数与收率均较高.

柱前衍生化高效液相色谱-荧光检测法测定桑叶中的1-脱氧野尻霉素

采用柱前衍生化高效液相色谱-荧光检测法测定了桑叶中的1-脱氧野尻霉素(DNJ)。用0.05mol/LHCl提取桑叶中的DNJ,采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)试剂在pH8.5硼酸盐缓冲液下对DNJ进行衍生化,以0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH5.0)-乙腈(体积比为85∶15)为流动相,利用C18色谱柱(5μm,250mm×4.6mm)分离,在激发波长为250nm、发射波长为395nm条件下进行荧光检测,DNJ的AQC衍生物与衍生化试剂的水解产物分离良好。方法的线性范围为0.5～25mg/L,检出限为0.02mg/L(S/N=3)。实验测得桑叶中DNJ含量为0.12%;回收率为96.1%～98.6%。

高效液相色谱-串联四极杆质谱法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素

目的:建立高效液相色谱-串联四级杆质谱联用测定桑叶中1-脱氧野尻霉素含量的方法。方法:以乙腈-0.1%甲酸水溶液(12∶88,v/v)为流动相,SHIMADZUHRC-NH2柱分离,采用大气压化学电离源(APCI),164.1/146.1,164.1/110.2两对离子,多反应监测(MRM)。结果:1-脱氧野尻霉素保留时间为2.87min,标准曲线在482～2410μg/L范围内线性关系良好(r=0.9993),平均加样回收率为95.8%,最低检测限为53.6μg/L。结论:该方法选择性强、灵敏度高,可为桑叶中1-脱氧野尻霉素的含量测定提供参考。

桑白皮药材中1-脱氧野尻霉素的两种含量测定方法的比较

目的:建立和比较两种测定桑白皮中1-脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin,简称DNJ)的方法。方法:方法1:采用Hypersil NH2柱,以乙腈-水(78∶22)为流动相;ELSD检测器。方法2:采用ZORBAX SB-C18柱,以乙腈-0.1%醋酸溶液(25∶75)为流动相;DAD检测器,检测波长为265nm。结果:两种HPLC法测定结果基本一致,经t检验无显著性差异(P>0.05)。结论:两种方法的重现性好,灵敏度高,均可有效控制桑白皮中DNJ的含量。

桑叶中黄酮及1-脱氧野尻霉素的含量影响因素与检测方法

黄酮是具有2-苯基色原酮结构的化合物,1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)是哌啶类多羟基生物碱,二者均为桑叶的主要有效成分,因其资源丰富、功效显著,近年来备受关注。本文综述了影响桑叶中黄酮与1-DNJ含量的因素及其检测方法。

家蚕及其副产物中1-脱氧野尻霉素含量变化研究

目的:研究不同生长期家蚕及其副产物中1-脱氧野尻霉素的含量变化。方法:采用HPLC法,色谱柱:H iQS iL C18(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相:乙腈-0.1%醋酸(55∶45,V/V);流速:1.0 mL/m in;柱温25℃;荧光检测器激发波长254 nm,发射波长322 nm。结果:不同生长期家蚕及其副产物中1-脱氧野尻霉素的含量有较大差异,且呈一定规律性变化。结论:初步揭示了1-脱氧野尻霉素在家蚕体内的代谢规律。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定桑白皮中1-脱氧野尻霉素的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定桑白皮中1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojifimycin,简称 DNJ)含量。方法:采用氨丙基键合硅胶为填充剂的色谱柱,流动相为乙腈-水(78:22),流速:0.8 mL·min^(-1),ELSD 检测器的漂移管温度为50℃,载气流速2.0×10~5 Pa。结果:DNJ 在2.12～21.20μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9999;平均加样回收率为97.43%(n=6)。结论:该方法重现性好,灵敏度高,可有效控制桑自皮中 DNJ 的含量。