咪达唑仑通过调节Nrf2/HO-1信号通路对宫颈癌细胞铁死亡的作用及机制研究

目的探究咪达唑仑诱导宫颈癌细胞铁死亡的作用与机制。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,将其分为5个组,L-咪达唑仑组/M-咪达唑仑组/H-咪达唑仑组分别注入5、10、20μmol/L咪达唑仑、高剂量咪达唑仑+核因子E2相关因子2激活剂组注入20μmol/L咪达唑仑和80 nmol/L Bardoxolone、另设正常培养的HeLa细胞为Control组,继续培养24 h。采用CCK-8、克隆形成实验检测细胞增殖;PI染色检测细胞死亡率;透射电镜观察线粒体形态变化;试剂盒检测铁、活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平;Western blot检测Nrf2/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路相关蛋白及GSH过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达情况。结果与Control组比较,L-咪达唑仑组、M-咪达唑仑组、H-咪达唑仑组HeLa细胞活力下降,克隆数减少,细胞死亡率增加,线粒体呈现显著铁死亡特征,细胞中铁、ROS、MDA水平升高,GSH水平及GPX4、核Nrf2、HO-1蛋白表达下降,且H-咪达唑仑组变化更明显(P<0.05)。与H-咪达唑仑组比较,H-咪达唑仑+Nrf2激活剂组HeLa细胞活力升高,克隆数增加,细胞死亡率减少,线粒体铁死亡损伤程度减轻,细胞中铁、ROS、MDA水平下降,GSH水平及GPX4、Nrf2、HO-1蛋白表达升高(P<0.05)。结论咪达唑仑能以剂量依赖性方式抑制HeLa细胞增殖,诱导其铁死亡,可能通过抑制Nrf2/HO-1信号通路实现。

五酯胶囊对健康受试者咪哒唑仑及其代谢物1′-羟基咪哒唑仑药动学的影响

目的:研究健康受试者合用中药制剂五酯胶囊(Wuzhi-capsule,WZ)前后CYP3A4探针药咪哒唑仑(Midazolam,MDZ)及其代谢物1′-羟基咪哒唑仑(1′-hydroxymidazolam,1′-OH-MDZ)的动力学过程,以证实WZ是否影响MDZ的代谢过程,从而间接证明WZ对CYP3A4的影响。方法:研究分两期,12名健康男性志愿者在第一周期单剂量口服MDZ15mg后,开始连续服用WZ3粒,bid×7d,在第二周期依然单剂口服MDZ15mg,同时服用WZ3粒。每期口服MDZ后即按设计的时间采血,用LC/MS/MS法测定血浆MDZ及1′-OH-MDZ浓度,并分别计算药动学参数。结果:合用WZ前后MDZ的主要药动学参数:AUC0-24分别为(578±227)和(1186±320)μg·L-1·h;t1/2分别为(3.4±1.0)、(3.6±1.1)h;CL(s)分别为(31±17)、(14±6)L/h;tmax分别为(0.8±0.5)、(1.6±1.2)h;Cmax分别为(171±70)、(282±152)μg/L;V/F(C)分别为(149±98)、(67±24)L。合用WZ前后1′-OH-MDZ的主要药动学参数:AUC0-24分别为(141±699)、(129±49)μg.L-1.h;t1/2分别为(5.6±3.3)、(5.0±2.1)h;CL(s)分别为(130±68)、(134±72)L/h;tmax分别为(0.8±0.3)、(1.6±1.2)h;Cmax分别为(48±23)、(36±28)μg/L;V/F(C)分别为(918±499)、(935±544)L。结论:与使用WZ前相比,使用WZ后MDZ的AUC0-24和Cmax分别增加119.4%、85.6%,CL(s)降低52.1%,tmax延迟1倍。WZ能显著增加MDZ的血浓度和生物利用度。推测WZ可能是一种CYP3A4抑制剂或含有具有CYP3A4抑制作用的成分。

HPLC法测定大鼠血浆中1’-羟基咪达唑仑及咪达唑仑的浓度

目的:建立大鼠血浆中咪达唑仑及其代谢产物1'-羟基咪达唑仑测定的高效液相色谱(HPLC)方法。方法:血浆样品以地西泮为内标,经碳酸盐缓冲液碱化后,由混合有机溶剂(正己烷:二氯甲烷=7:3,v/v)提取。采用Hypersil BDS C_(18)(250mm×4.6 mm,5μm)柱,以KH_2PO_4(0.02 mol·L^(-1))缓冲液-乙腈-甲醇(38:20:42)为流动相,柱温40℃,流速1.0 ml·min^(-1),于紫外230 nm处检测1'-羟基咪达唑仑及咪达唑仑浓度。结果:在该试验条件下,血浆中1'-羟基咪达唑仑的线性范围为8.32～832 ng·ml^(-1),最低检测限为8.32 ng·ml^(-1);咪达唑仑的线性范围为25～2 500 ng·ml^(-1),最低检测限为25 ng·ml^(-1)。其日间和日内精密度均小于8%,提取回收率为84～90%。结论:本方法专属性强、灵敏度高、重复性好,适用于实验室评价药物间相互作用研究。

内皮素-1对兔离体气管平滑肌收缩力的影响及咪唑安定对其的抑制作用

目的 :探讨内皮素 - 1(ET- 1)对气管平滑肌的收缩作用特点及咪唑安定对其的影响 ,为 ET- 1表达和释放增加的患者选用理想的镇静、遗忘药提供参考依据。方法 :采用 3× 10 - 8mm ol/L ET- 1诱发兔离体气管平滑肌收缩 ,用肌力换能器、走纸记录仪测定张力变化 ,研究 0 .15 mmol/L的咪唑安定对其的影响。结果 :0 .15 mmol/L的咪唑安定可完全抑制 ET- 1诱发的气管平滑肌收缩。结论 :咪唑安定对 ET- 1诱发兔离体气管平滑肌收缩有显著的抑制作用 ,提示临床上使用咪唑安定 ,对 ET-

咪达唑仑对套细胞淋巴瘤细胞系JeKo-1的作用及机制研究

本研究探讨咪达唑仑(midazolam)对套细胞淋巴瘤细胞系JeKo-1的作用及相关机制。采用CCK8法观察咪达唑仑对JeKo-1细胞增殖的影响;流式细胞术分析咪达唑仑对JeKo-1细胞凋亡的影响;Western blot法检测咪达唑仑对JeKo-1细胞BCL-2、细胞色素C(Cyto-C)、pro-caspase-9、pro-caspase-8、pro-caspase-3蛋白表达的影响。结果表明,咪达唑仑能明显抑制JeKo-1细胞增殖,48 h的半数抑制浓度(IC50)约为40μmol/L;不同浓度咪达唑仑处理48 h后JeKo-1细胞出现凋亡,呈现剂量依赖性;同时,JeKo-1细胞内BCL-2、pro-caspase-9、pro-caspase-3蛋白表达呈剂量依赖性降低,Cyto-C蛋白表达呈相应增加,而pro-caspase-8蛋白表达则未发生变化。结论:咪达唑仑可能通过下调JeKo-1细胞BCL-2的表达,触发线粒体凋亡途径,但不活化死亡受体途径,导致线粒体Cyto-C的释放,并引发caspase-9、caspase-3的活化,启动了caspase级联反应,最终导致了JeKo-1细胞的凋亡。

大鼠体内咪达唑仑及其代谢物1'-羟基咪达唑仑的药动学研究

目的建立快速、灵敏的LC-MS/MS法测定大鼠血浆中咪达唑仑及其代谢物1'-羟基咪达唑仑的血药浓度,并研究其在大鼠体内的药动学行为。方法按1 kg体质量给予大鼠20 mg.kg-1咪达唑仑的剂量灌胃给药,LC-MS/MS法测定不同时间点的血药浓度。色谱条件:色谱柱为Alltima C18(150 mm×2.1mm,5μm),流动相为甲醇-0.025%(体积分数)甲酸(体积比85∶15),流速为0.3 mL.min-1,柱温为40℃;质谱条件:采用正离子模式,以多反应离子监测(MRM)配对离子方式进行定量。采用PKSolution2.0软件计算其药动学参数。结果咪达唑仑及其代谢物1'-羟基咪达唑仑的线性范围分别为1～1 000ng.mL-1和1～100 ng.mL-1,最低检测限分别为0.5、0.25 ng.mL-1,专属性、精密度、稳定性和基质效应都满足要求。咪达唑仑、1'-羟基咪达唑仑的t1/2分别为(0.748±0.05)h、(1.65±0.33)h;AUC分别为(1 038.3±413.2)ng.mL-1.h、(169.5±38.6)ng.mL-1.h。结论本方法专属性强、灵敏度高、准确性好,可用于咪达唑仑及其代谢物1'-羟基咪达唑仑的含量测定及药动学研究。

微透析与LC-MS^n联用测定脑组织中咪达唑仑/1'-羟基咪达唑仑及其脑内药代特征的研究

目的建立灵敏、快速、准确的LC-MSn方法测定咪达唑仑/1'-羟基咪达唑仑及其在大鼠脑内的药代动力学过程。方法 SD大鼠股静脉注射CYP3A探针药物咪达唑仑(剂量5 mg·kg-1)。采用微透析技术,在2μl·min-1流速下收集脑微透析液样品2.4 h,收集时间间隔为8 min。以LC-MSn法在线检测微透析样品。选用Agilent Eclipse Plus-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3.5μm),流动相为2 mmol·L-1乙酸铵水溶液和乙腈,梯度方式洗脱。采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测模式(MRM),咪达唑仑m/z:326.1/291.1;1'-羟基咪达唑仑m/z:342.1/324.1;内标地西泮m/z:285.1/154.0。结果咪达唑仑和1'-羟基咪达唑仑的线性范围分别为0.78~100和0.195~12.5μg·L-1,最低定量下限0.2μg·L-1,批内、批间RSD均<7%,RE值在-1.34^-8%范围内。结论此检测方法快速、灵敏,可用于脑微透析液中咪达唑仑/1'-羟基咪达唑仑的含量测定,结合微透析技术有助于深入进行脑代谢的相关研究。

1-苯基-3-(2-羟基苯基-5-芳基)-2-吡唑啉的合成与生物活性

研究1-苯基吡唑啉类化合物的合成及其EcMetAP酶活抑制活性。以查尔酮衍生物与苯肼为原料合成啉类化合物。利用IR、1 H NMR和MS对它们进行表征。利用分光光度法测试化合物的EcMetAP酶活性抑制作用,利用生物分子结构分析软件FieldTemplater和FieldAlign计算化合物和已知的EcMetAP酶抑制剂的空间作用力场的相似性。共合成了6个1-苯基-3-(2-羟基苯基-5-芳基)-2-吡唑啉类化合物,但只有化合物5对EcMetAP酶活性有抑制作用,抑制率为31.62%,空间作用力场的相似度为0.615。说明化合物5可作为先导化合物进行结构优化,得到优良的EcMetAP酶抑制活性化合物。

LC-MS直接沉淀法测定人体咪哒唑仑和1-羟咪哒唑仑及应用

目的:建立简便液质联用(LC—MS)直接沉淀法测定人体血浆咪哒唑仑及1-羟咪哒唑仑的浓度。方法:Waters XterraC_(18)(150 mm×2.1mm,5μm)色谱柱,流动相为10 mmol·L^(-1)甲酸铵-乙腈(40:60,v/v),流速为0.2 mL·min^(-1),进样体积为20μL,柱温为40℃,样品室温度为5℃。结果:咪哒唑仑线性范围为0,56～287 ng·mL^(-1),1-羟咪哒唑仑线性范围为0.56～285 ng·mL^(-1),咪哒唑仑和1-羟咪哒唑仑最低检测限低于0.14 ng·mL^(-1)和0.28 ng·mL^(-1),方法灵敏、稳定,特异性高,已成功地应用到人体血浆咪哒唑仑及1-羟咪哒唑仑药代动力学研究。结论:该方法简便、准确,重复性好,可以准确地测定人体血浆咪哒唑仑及1-羟咪哒唑仑的浓度。

异丙酚和咪唑安定对发绀型心脏病患儿心内直视手术心肌AngⅡ和HO-1的影响

目的观察比较异丙酚和咪唑安定对发绀型心脏病患儿心内直视手术的心肌保护作用及机制。方法选择ASAⅠ～Ⅱ级行心内直视手术的发绀型心脏病患儿32例,随机分为异丙酚复合小剂量芬太尼组(PF组,n=16)和咪唑安定复合小剂量芬太尼组(MF组,n=16)。观察患儿血流动力学变化,检测开放静脉通路时(T0)、主动脉开放后2 h(T3)、术后24 h(T4)的静脉血血浆中肌钙蛋白I(cTnI)含量。检测主动脉阻断后10～20 min(T1)和主动脉开放后10～20 min(T2)时的心肌组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量和血红素加氧酶-1(HO-1)的表达。结果 2组患儿围手术期血流动力学和同时点血cTnI水平无显著性差异;2组患儿T2时点心肌中AngⅡ含量均高于T1时点水平,T2时点心肌中AngⅡ含量PF组高于MF组(P<0.05);2组心肌HO-1表达T2时点均高于T1时点(P均<0.01),PF组同时点HO-1表达均高于MF组(P均<0.05)。结论异丙酚和咪唑安定对发绀型心脏病患儿体外循环心内直视手术心肌保护作用相当,咪唑安定抑制心肌AngⅡ表达的作用比异丙酚强,而异丙酚刺激心肌HO-1表达的作用优于咪唑安定。

右美托咪定全凭静脉麻醉对肺癌患者围术期外周血单核细胞HMGB-1表达、氧化应激与细胞免疫因子的影响

目的探讨右美托咪定全凭静脉麻醉对肺癌患者围术期外周血单核细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)表达、氧化应激与细胞免疫因子的影响。方法选择在我院择期行肺癌根治术患者80例,随机分为观察组及对照组,对照组采用咪达唑仑行麻醉诱导和维持,观察组采用右美托咪定行麻醉诱导和维持。在麻醉后手术前(T_0)、手术开始2h(T_1)、手术结束24h(T_2)等时间点取血分离单核细胞,采用免疫印迹法测定HMGB-1表达水平,采用流式细胞术测定2组患者T_0、T_1、T_2时间点的外周血CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞(Treg)及其胞内细胞因子IL-10及转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的水平,测定及比较2组患者T_0、T_1、T_2时间点血清超氧阴离子(O-2)、羟自由基(OH)、过氧化氢(H_2O_2)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)含量,并分别测定T_0、T_1、T_2时间点2组患者血BUN、血Cr、尿NAG/Cr比值、尿β_2微球蛋白/Cr比值。结果 2组患者HMGB-1表达量在T_0时间点比较无明显差异(P> 0. 05);在T_1、T_2时间点,观察组HMGB-1表达量均明显低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。2组血BUN、血Cr、尿NAG/Cr、尿β_2-MG/Cr在T_0时间点上差异无统计学意义(P> 0. 05),而在T_1、T_2时间点上观察组血BUN、血Cr、尿NAG/Cr、尿β_2-MG/Cr均显著低于对照组(P <0. 05)。在T_1时间点,2组患者氧化应激指标比较差异无统计学意义(P> 0. 05);在T_1与T_2时间点,观察组血清O-2、OH、H_2O_2、MDA含量均较对照组下降,SOD、GSH-Px含量均较对照组上升(P <0. 05)。在T_0时间点,2组Treg、IL-10、TGF-β_1水平比较无明显差异(P>0. 05); 2组患者T_1与T_2时间点的Treg、IL-10、TGF-β_1水平均明显低于T_0;但在T_1与T_2时间点,观察组Treg、IL-10、TGF-β_1水平均明显高于对照组(P <0. 05)。结论右美托咪定抗氧化应激能力强于咪达唑仑,可以有效缓解手术应激引起的细胞免疫抑制,右美托咪定可能通过改善Treg活性来发挥抗应激的免疫麻醉效果。同时右美托咪定可明显减少肺癌患者围术期外周血单核细胞HMGB-1的表达,显著改善患者的肾功能指标,对肾具有一定的保护效应。

咪达唑仑对低氧/复氧诱导的HK-2细胞凋亡及Nrf2/HO-1通路的影响

目的:探讨咪达唑仑对低氧/复氧诱导HK-2细胞凋亡的作用,及对核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路的影响。方法:HK-2细胞分为正常对照组、低氧/复氧组、不同浓度(2,4,8μmol·L;)咪达唑仑组,CCK-8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,试剂盒检测细胞活性氧簇(ROS)和丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性,蛋白质免疫印迹技术(WB)检测HK-2细胞Nrf2和HO-1表达水平。结果:相较于正常对照组,低氧/复氧组细胞活性及SOD活性明显降低(P<0.05),细胞凋亡率、ROS和MDA含量明显升高(P<0.05)。相较于低氧/复氧组,咪达唑仑各浓度组细胞活性、SOD活性及Nrf2和HO-1表达明显升高(P<0.05),细胞凋亡率、ROS和MDA含量明显降低(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论:咪达唑仑可促进Nrf2/HO-1信号通路,提高细胞抗氧化能力,抑制低氧/复氧诱导的HK-2细胞凋亡。

咪达唑仑通过NLRP3/caspase-1途径改善脂多糖诱导H9c2心肌细胞损伤

目的 研究咪达唑仑轮对于脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的H9c2心肌细胞损伤的作用及其分子生物学机制.方法 比较经不同浓度、不同时间的咪达唑仑和LPS刺激的H9c2细胞活力以确定达唑仑最佳给药条件;将H9c2心肌细胞分为对照组、咪达唑仑组、LPS组和LPS+咪达唑仑组,比较各组细胞凋亡率、线粒体膜电位变化情况、氧化应激指标、炎性因子水平和NOD样受体蛋白3(NOD-like re-ceptor protein3,NLRP3)/胱天蛋白酶1(caspase-1)途径相关蛋白表达水平,并用NLRP3激活剂尼日利亚菌素验证咪达唑仑的作用.结果 咪达唑仑可降低LPS介导的H9c2心肌细胞凋亡率,减轻氧化应激和炎性反应,提高NLRP3/caspase-1通路相关蛋白表达水平.结论 咪达唑仑对LPS介导的H9c2心肌细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制NLRP3/caspase-1通路相关.

LC-MS/MS法同时测定人血浆中咪达唑仑和1-羟基咪达唑仑的浓度

目的:建立同时测定人血浆样本中咪达唑仑和1-羟基咪达唑仑浓度的LC-MS/MS方法。方法:以d_(4)-咪达唑仑为内标,血浆样本加入含内标的乙腈处理后进样分析。色谱柱为Kinetex C_(18)(2.1 mm×50 mm,2.6μm),流动相为乙腈-1 mmol·L^(-1)甲酸铵溶液(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1),进样量为3.0μL。质谱条件采用电喷雾正离子源,扫描方式为多重反应监测,用于定量分析的检测离子分别为m/z 325.9→291.0(咪达唑仑)、m/z 342.0→324.1(1-羟基咪达唑仑)、m/z 329.9→295.0(d_(4)-咪达唑仑)。结果:咪达唑仑和1-羟基咪达唑仑分别在0.300~200 ng·mL^(-1)和0.150~100 ng·mL^(-1)线性关系良好,定量下限分别为0.300 ng·mL^(-1)和0.150 ng·mL^(-1),批内和批间精密度均小于15%,准确度在-4.7%~9.9%,基质效应为95.5%~101.4%,提取回收率为100.6%~102.4%。血浆样本室温放置12 h、3次冻融循环及-40℃冰冻12个月稳定性良好,待测溶液进样器放置24 h稳定。结论:本研究建立的分析方法灵敏、准确,样本前处理简便、快捷,可用于人血浆样本中咪达唑仑和1-羟基咪达唑仑浓度的测定。

高效液相色谱-电喷雾质谱法同时测定人血浆中咖啡因、咪哒唑仑和代谢产物及其在药物代谢研究中的应用

目的:建立高效液相色谱-电喷雾质谱法同时测定人体血浆中咖啡因及代谢物1,7-二甲基黄嘌呤、咪哒唑仑及代谢产物1-羟咪哒唑仑。并将它应用于中药止咳橘红颗粒对CYP3A4和CYP1A2抑制作用的研究。方法:血浆样品先经液-液萃取纯化浓缩后,以ODS-C18为固定相,甲醇-0.01%甲酸不同比例为梯度洗脱流动相,内标物为阿普唑仑。经HPLC分离后的化合物在电喷雾离子源中被电离,电离后以选择离子方式检测各化合物的分子离子峰,以峰的保留时间及质荷比进行定性,以峰面积进行定量。结果:咖啡因、1,7-二甲基黄嘌呤、咪哒唑仑、1-羟咪哒唑仑分别在50～5000 ng·mL-1(r=0.9971),22.4～2240 ng·mL-1(r=0.9982),1.23～123 ng·mL-1(r=0.9997),0.84～84 ng·mL-1(r=0.9983)的范围内呈良好的线性关系。4种化合物的平均回收率均大于90%,日内及日间RSD均小于10%。结论:此方法简便,快速,灵敏,可同时测定人体血浆中咖啡因、咪哒唑仑及各自的主要代谢产物。

HPLC法测定CYP 3A4酶活性的研究

目的建立一种快速、准确的以咪达唑仑作为＂探针药物＂评价或测定细胞色素酶（CYP3A4）酶活性的高效液相色谱（high-performance liquid chromatography,HPLC）-紫外检测（UV detection,VWD）方法。方法采用的色谱柱为依立特C18柱（4.6mm×100mm,5μm）,流速0.8ml/min,紫外检测波长254nm,柱温40℃。咪达唑仑（midazo-lam,MDZ）与大鼠肝微粒体温孵后,加入甲醇在低温下终止反应,再加入定量内标地西泮（diazepam,DZP）,涡旋后高速离心,取上清液50μl进样。结果1′-羟基咪达唑仑（1-hydroxymidazolam,1′-OHMDZ）与内标DZPtR分别为7.02min、10.51min,峰形对称且分离充分（R＆gt;1.5）,线性范围为15.6-780ng.ml-1,最低定量限（lower li mit of quantitation,LLOQ）为15.6ng.ml-1,高中低浓度提取回收率为106.3%、102.5%和102.6%,待测物的日内、日间相对标准偏差（rela-tive standard deviation, RSD）小于10％。肝微粒体Km=15μmol·L^-1，Vmax=0．08159nM·min^-1·mg^-1。结论温孵体系中的其他内源性物质不干扰测定。该方法快速、稳定、灵敏度高，适合体外DZP及其代谢产物1′-羟基咪达唑仑的测定，可用于体外CYP3A酶活性测定或酶动力学研究。

氟康唑联用咪达唑仑血药浓度测定方法及相互作用

目的:建立可同时进行氟康唑和咪达唑仑生物样品前处理的方法,应用RP-HPLC法分别测定氟康唑、咪达唑仑、1-羟基咪达唑仑的血药浓度;同时考察氟康唑与咪达唑仑联用对咪达唑仑血药浓度的影响。方法:1 mL血清样品加入内标后以5 mL乙酸乙酯提取,有机相用氮气吹干,以100μL甲醇溶解,分别在不同的色谱条件下以20μL进样测定。结果:氟康唑、咪达唑仑、1-羟基咪达唑仑及内标能够在同一条件下被提取。氟康唑在0.5～20μg/mL范围内线性关系良好(r=0.997 0,n=6),咪达唑仑在0.03～7.29μg/mL范围内线性关系良好(r=0.998 5,n=16),1-羟基咪达唑仑在0.09～7.29μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 3,n=5)。联用氟康唑和咪达唑仑组较单用咪达唑仑组中咪达唑仑血药浓度明显增高。结论:该法灵敏、准确、简单、快速,可用于同时测定氟康唑、咪达唑仑及其代谢产物的血药浓度。联用氟康唑和咪达唑仑与单用咪达唑仑比较,咪达唑仑血药浓度明显增高。

高效液相色谱法同时测定肝微粒体中咪达唑仑及代谢产物含量

目的:建立高效液相色谱法测定大鼠肝微粒体中咪达唑仑及1-OH咪达唑仑的含量。方法:色谱柱为COSMOSIL C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇∶乙腈∶水(V∶V∶V=55∶11∶34),流速为1.0 ml/min,柱温为25℃,检测波长为220 nm。结果:咪达唑仑和1-OH咪达唑仑线性范围分别是1.0~64.0μm(r=0.999 2)和0.125~8.0μm(r=0.999 4),呈良好的线性关系。咪达唑仑的批内、批间精密度为3.7%~11.2%和4.2%~13.1%,提取回收率为(91.46±9.03)%^(94.54±7.62)%;1-OH咪达唑仑的批内、批间精密度为5.9%~10.4%和7.7%~12.3%,提取回收率为(92.27±8.11)%^(95.16±5.72)%。咪达唑仑和1-OH咪达唑仑在室温保存8 h、反复冻融3次和-20℃保存1周含量稳定,与新鲜样品比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本法快速、准确、重现性好,可同时测定大鼠肝微粒体中咪达唑仑及1-OH咪达唑仑的浓度。

异丙酚与咪唑安定在婴幼儿体外循环心脏手术期间的抗炎效果与预后比较

目的比较先天性心脏病患儿应用异丙酚与咪唑安定的抗炎效果和预后情况。方法选择先天性心脏病患儿24例,随机分成异丙酚复合小剂量芬太尼组(PF组)和咪唑安定复合小剂量芬太尼组(MF组)。持续监测血流动力学变化,脉搏血氧饱和度(SPO2)及鼻咽和直肠温度,并记录术后拔管时间及术后重症监护病房(ICU)停留时间,采集入手术室时(t0)、诱导后10 m in(t1)、主动脉夹闭后15 m in(t2)、主动脉开放后15 m in(t3)、主动脉开放后2 h(t4)及术后24 h(t5)的新鲜血,观察细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-8的变化,取不同时点的心肌组织,观察心肌形态学变化以及核因子-κB(NF-κB)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达。结果与MF组比较,PF组术后的拔管及ICU停留时间明显缩短(P<0.05);PF组心肌形态学的变化不如MF组明显,两组的NF-κB和ICAM-1的灰度值在主动脉开放20 m in均低于体外循环手术(CPB)开始之前(P<0.05),但PF组的灰度值高于MF组(P<0.05);PF组血液中IL-6,IL-8在主动脉夹闭及开放后15 m in时较MF组也明显降低(P<0.05)。结论异丙酚和咪唑安定均能抑制NF-κB、ICAM-1及手术中细胞因子的表达,但异丙酚复合小剂量芬太尼麻醉的抗炎效果和预后优于咪唑安定。

依托咪酯与咪达唑仑防治儿童紫绀型心脏病心内直视手术心肌损伤作用比较

目的比较依托咪酯与咪达唑仑对儿童紫绀型心脏病心内直视手术时心肌损伤的防治作用。方法选择NYHA心功能I-Ⅱ级行心内直视手术的紫绀型心脏病儿童患者36例,随机等分为两组:依托咪酯复合小剂量芬太尼组(EF组)和咪达唑仑复合小剂量芬太尼组(MF组)。观察患者围术期血流动力学、脉搏血氧饱和度和体温变化,记录术后拔管时间和ICU停留时间。检测开放静脉通路时(t0)、麻醉诱导后10min(t1)、主动脉阻断后20min(t2)、主动脉开放后20min(t3)、主动脉开放后2h(t4)和术后24h(t5)静脉血浆中Ang-Ⅱ(AngⅡ)的含量;检测t2和t3时心肌组织中AngⅡ含量,并观察心肌血红素加氧酶-1(HO-1)的表达;检测t0、t4、t5的静脉血浆中肌钙蛋白I(cTnI)含量。结果EF组患者术后拔管时间和ICU停留时间较MF组患者短(P<0.05);两组患者t3时点心肌中Ang-Ⅱ含量均高于t2时点水平,而且EF组t3时点心肌中Ang-Ⅱ含量高于MF组(P<0.05);两组患者t4时点cTnI的水平均高于t0和t5时点(均P<0.01),t5时点cTnI的水平高于t0时点(P<0.01);两组患者心肌HO-1灰度值t2时点均高于t3时点(均P<0.01),EF组t2、t3时点HO-1灰度值均低于MF组同时点值(均P<0.05)。结论依托咪酯与咪达唑仑对儿童紫绀型心脏病心内直视手术时心肌均有保护作用,咪达唑仑抑制心肌AngⅡ表达的作用比依托咪酯强,而依托咪酯刺激心肌HO-1表达的作用优于咪达唑仑,且依托咪酯更利于患者的术后恢复。