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Cleavage of the Carboxyl-Terminus of LEACS2, a Tomato 1-Aminocyclopropane-l-Carboxylic Acid Synthase Isomer, by a 64-kDa Tomato Metalloprotease Produces a Truncated but Active Enzyme
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作者 Jian-Feng LI Robert QI +2 位作者 Liang-Hu QU Autar K Mattoo Ning LI 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2005年第11期1352-1363,共12页
1-Aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC) synthase (ACS) is the principal enzyme in phytohormone ethylene biosynthesis. Previous studies have shown that the hypervariable C-terminus of ACS is proteolytically pro... 1-Aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC) synthase (ACS) is the principal enzyme in phytohormone ethylene biosynthesis. Previous studies have shown that the hypervariable C-terminus of ACS is proteolytically processed in vivo. However, the protease responsible for this has not yet been identified. In the present study, we investigated the processing of the 55-kDa full-length tomato ACS (LeACS2) into 52-, 50- and 49-kDa truncated isoforms in ripening tomato (Lycopersicon esculentum Mill. cv. Cooperation 903) fruit using the sodium dodecyl sulfate-boiling method. Meanwhile, an LeACS2-processing protease was purified via multi-step column chromatography from tomato fruit. Subsequent biochemical analysis of the 64-kDa purified protease revealed that it is a metalloprotease active at multiple cleavage sites within the hypervariable C-terminus of LeACS2. N-terminal sequencing and matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight analysis indicated that the LeACS2-processing metalloprotease cleaves at the C-terminal sites Lys^438, Glu^447, Lys^448, Asn^456, Ser^460, Ser^462, Lys^463, and Leu^474, but does not cleave the N- terminus of LeACS2. Four C-terminus-deleted (26-50 amino acids) LeACS2 fusion proteins were overproduced and subjected to proteolysis by this metalloprotease to identify the multiple cleavage sites located on the N-terminal side of the phosphorylation site Ser^460. The results indisputably confirmed the presence of cleavage sites within the region between the α-helix domain (H14) and Ser^460 for this metalloprotease. Furthermore, the resulting C-terminally truncated LeACS2 isoforms were active enzymatically. Because this protease could produce LeACS2 isoforms in vitro similar to those detected in vivo, it is proposed that this metalloprotease may be involved in the proteolysis of LeACS2 in vivo. 展开更多
关键词 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid synthase cleavage sites METALLOPROTEASE proteolytic processing.
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石蒜1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶基因LrACS的克隆及功能鉴定
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作者 樊雅婷 李雪纯 +1 位作者 李晓丹 汪仁 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期74-82,共9页
为了解1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶(ACS)基因在石蒜〔Lycoris radiata(L'Hér.)Herb.〕乙烯合成中的作用,对石蒜ACS基因LrACS进行了克隆,并通过系统进化树和氨基酸序列比对分析明确LrACS与其他同源蛋白的进化关系。利用亚细胞定位... 为了解1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶(ACS)基因在石蒜〔Lycoris radiata(L'Hér.)Herb.〕乙烯合成中的作用,对石蒜ACS基因LrACS进行了克隆,并通过系统进化树和氨基酸序列比对分析明确LrACS与其他同源蛋白的进化关系。利用亚细胞定位分析LrACS在细胞中的定位,对LrACS重组蛋白进行体外活性检测,并利用实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)分析不同生长时期LrACS的组织特异性表达。结果显示:LrACS的开放阅读框长度为1473 bp,编码490个氨基酸。LrACS的理论相对分子质量为54954.97,理论等电点为pI 8.21。系统进化树分析结果表明LrACS与忽地笑〔Lycoris aurea(L'Hér.)Herb.〕LaACS的亲缘关系最近,均属于Ⅰ型ACS蛋白。亚细胞定位结果显示LrACS主要定位于细胞质基质。体外活性检测结果证实LrACS重组蛋白能够催化S-腺苷甲硫氨酸(SAM)生成1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)。qRT-PCR分析结果显示:LrACS在花期和叶期的石蒜各组织中均有表达,但其表达具有组织特异性,其中,花期花瓣中LrACS的相对表达量极显著(P<0.01)高于根、鳞茎、花茎,叶期根中LrACS的相对表达量极显著高于鳞茎和叶。综上所述,LrACS主要定位于细胞质基质并在石蒜不同生长时期行使催化SAM生成ACC的功能。 展开更多
关键词 石蒜 1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC) 1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶(ACS) 亚细胞定位 酶活 功能鉴定
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血清HAS2、GDF3及CEACAM1在乳腺癌患者行根治术前后的变化特征及其与术后切口部位感染、局部复发的相关性分析
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作者 柯贤锋 向辉 李强 《临床和实验医学杂志》 2024年第15期1630-1634,共5页
目的探讨血清透明质酸合成酶2(HAS2)、人生长分化因子3(GDF3)及癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)在乳腺癌患者行根治术前后的变化特征及其与术后切口部位感染、局部复发的相关性。方法回顾性选取商洛市中心医院2020年10月至2022年10... 目的探讨血清透明质酸合成酶2(HAS2)、人生长分化因子3(GDF3)及癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)在乳腺癌患者行根治术前后的变化特征及其与术后切口部位感染、局部复发的相关性。方法回顾性选取商洛市中心医院2020年10月至2022年10月收治的乳腺癌患者80例作为研究对象,所有患者均采取根治性手术治疗,对所有患者进行1年随访,分别记录所有患者手术前、术后1周、术后1个月及术后1年HAS2、GDF3及CEACAM1水平变化情况。根据患者术后切口部位感染情况分为感染组(n=15)和非感染组(n=65),分析HAS2、GDF3及CEACAM1与术后切口部位感染的关系,并分析影响术后切口部位感染的危险因素。对所有患者进行1年随访,依照其术后1年内局部复发情况分为复发组(n=20)与非复发组(n=60),分析HAS2、GDF3及CEACAM1与术后局部复发的关系,并分析影响术后局部复发的危险因素。结果乳腺癌患者行根治术后1周、术后1个月及术后1年,HAS2表达水平分别为(211.80±23.82)、(173.69±19.75)、(171.43±22.64)pg/mL,均明显低于手术前[(256.57±38.24)pg/mL],GDF3表达水平分别为(121.23±25.16)、(98.27±13.35)、(95.85±17.84)pg/mL,均明显低于手术前[(157.19±26.24)pg/mL],CEACAM1水平分别为(21.57±5.24)、(34.46±4.46)、(25.34±3.75)μg/L,均高于手术前[(7.80±3.82)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。感染组与非感染组患者HAS2水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);感染组GDF3表达水平为(166.35±23.61)pg/mL,高于非感染组[(148.83±30.68)pg/mL],CEACAM1水平为(5.65±1.14)μg/L,低于非感染组[(8.15±2.36)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。GDF3与术后切口部位感染呈正相关(r=0.425,P<0.05),CEACAM1与术后切口部位感染呈负相关(r=-0.537,P<0.05)。且经多因素Logistics回归分析发现,GDF3为乳腺癌根治术后切口部位感染的独立危险因素(P<0.05)。复发组HAS2、GDF3表达水平分别为(315.63±42.63)pg/mL、(179.46±32.53)pg/mL,均明显高于非复发组[(216.83.±27.85)pg/mL、(143.64±21.63)pg/mL],CEACAM1水平为(3.52±1.06)μg/L,低于非复发组[(6.78±2.62)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。HAS2、GDF3与术后局部复发呈正相关(r=0.426、0.634,P<0.05),CEACAM1与术后局部复发呈负相关(r=-0.542,P<0.05)。且经多因素Logistics回归分析发现,HAS2、GDF3为乳腺癌根治术后局部复发的独立危险因素,CEACAM1为乳腺癌根治术后局部复发的保护因素(P<0.05)。结论乳腺癌患者行根治术前后血清HAS2、GDF3及CEACAM1水平均会出现显著变化,且发现GDF3是术后切口部位感染发生的影响因素,HAS2、GDF3及CEACAM1是术后局部复发的影响因素。 展开更多
关键词 伤口感染 复发 乳腺癌 透明质酸合成酶2 人生长分化因子3 癌胚抗原相关细胞黏附分子1
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黄瓜离体培养再生技术及农杆菌介导的ACS1转化 被引量:15
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作者 李泠 潘俊松 +2 位作者 何欢乐 吴爱忠 蔡润 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2007年第1期17-23,29,共8页
利用诱导分化培养基(MS+BA 1.5mg·L-1+ABA 0.5mg·L-1+AgNO3 2.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂5.8g·L-1,pH5.8)对26个黄瓜自交系的子叶进行离体再生培养,其中的S52、S94、S04、S17S44和S47等6个自交系具有较高的不... 利用诱导分化培养基(MS+BA 1.5mg·L-1+ABA 0.5mg·L-1+AgNO3 2.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂5.8g·L-1,pH5.8)对26个黄瓜自交系的子叶进行离体再生培养,其中的S52、S94、S04、S17S44和S47等6个自交系具有较高的不定芽分化率,最高达93%(S44),最低为57%(S94)。除草剂PPT对这6个材料再生分化的抑制程度品种间差异较大。以S52(ff)的子叶为外植体,以pEZT-ACS1为中间载体,利用优化的S52诱导分化培养基MS+BA 2.0mg·L-1+ABA 2.0mg·L-1+AgNO3 2.0mg·L-1进行农杆菌(LBA4404)介导的遗传转化,选择培养基中PPT浓度为2.0mg·L-1,生根培养基中PPT浓度为1.0mg·L-1,获得抗性再生苗,经PCR检测有15株为阳性株,炼苗移栽到温室。 展开更多
关键词 黄瓜 ACS1 PPT 子叶 不定芽
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靶向抑制人SREBP-1基因对高糖刺激下人肾小管上皮细胞脂滴形成的影响 被引量:10
5
作者 郝军 石宏 +2 位作者 赵松 任韫卓 段惠军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期371-377,共7页
目的构建人SREBP-1基因的shRNA载体并转染人肾小管上皮细胞(HKC)明确是否沉默SREBP-1基因的表达可减轻高糖环境引起的细胞内脂滴形成。方法设计两对针对人SREBP-1基因的干扰靶序列及短链寡核苷酸和线性化的pGenesil-1质粒进行连接,筛选... 目的构建人SREBP-1基因的shRNA载体并转染人肾小管上皮细胞(HKC)明确是否沉默SREBP-1基因的表达可减轻高糖环境引起的细胞内脂滴形成。方法设计两对针对人SREBP-1基因的干扰靶序列及短链寡核苷酸和线性化的pGenesil-1质粒进行连接,筛选鉴定并最终命名为pGenesil-1-SREBP1-1和pGenesil-1-SREBP1-2。体外培养人肾小管上皮细胞并随机分组,采用阳离子脂质体法转染细胞后给予高糖刺激48h,在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,半定量RT-PCR和Westernblot分析目标基因表达丰度的变化,并采用油红O染色检测细胞内脂滴。结果经酶切及测序鉴定证明构建的重组载体pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2序列正确;转染HKC细胞后均可表达绿色荧光;RT-PCR和Westernblot显示pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2能够有效抑制高糖环境下HKC细胞SREBP-1的表达,与阴性质粒对照组相比,差异有统计学意义。进一步研究发现在HKC细胞内,SREBP-1基因表达沉默明显抑制了脂肪酸合成酶(FAS)的转录,细胞内脂滴明显减少。结论有效沉默高糖刺激下HKC细胞SREBP-1的基因表达可通过抑制FAS转录而减少细胞内脂滴形成。 展开更多
关键词 固醇调节元件结合蛋白-1 人肾小管上皮细胞 RNA干扰 短发夹状干扰RNA 脂滴形成 脂肪酸合成酶
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X盒子结合蛋白1对肾小管上皮细胞脂质代谢的影响研究 被引量:3
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作者 李宏博 朱琳 +3 位作者 赵松 刘淑霞 赵雪 郝军 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2014年第6期486-490,共5页
目的明确拼接型和非拼接型X盒子结合蛋白1对肾小管上皮细胞脂质代谢的影响。方法体外培养人肾小管上皮细胞,采用脂质体2000转染拼接型和非拼接型XBP-1质粒,培养48h后,免疫细胞化学和Western blot检测XBP-1表达,反转录PCR检测脂肪酸合成... 目的明确拼接型和非拼接型X盒子结合蛋白1对肾小管上皮细胞脂质代谢的影响。方法体外培养人肾小管上皮细胞,采用脂质体2000转染拼接型和非拼接型XBP-1质粒,培养48h后,免疫细胞化学和Western blot检测XBP-1表达,反转录PCR检测脂肪酸合成酶和乙酰辅酶A羧化酶mRNA表达,免疫细胞化学检测脂肪分化相关蛋白表达,油红O检测细胞内脂滴。结果 HKC细胞转染XBP-1拼接型和非拼接型质粒48h后,免疫细胞化学和Western blot证实XBP-1蛋白均明显升高。而拼接型XBP-1质粒转染上调了FASN和ACC mRNA表达,细胞内ADRP表达升高,细胞内脂滴增多。非拼接型XBP-1质粒对FASN、ACC mRNA,ADRP和细胞内脂滴未产生影响。结论拼接型XBP-1上调可导致肾小管上皮细胞脂质代谢关键酶升高和细胞内脂质沉积,可能是多种肾脏脂质沉积疾病的调控因子之一。 展开更多
关键词 X盒子结合蛋白-1 脂质代谢 肾小管上皮细胞 脂肪酸合成酶 乙酰辅酶A羧化酶 脂肪分化相关蛋白
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11,12-环二十碳三烯酸对心脏缺血/再灌注损伤大鼠血红素氧合酶-1的影响 被引量:1
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作者 江瑛 闫丽 +4 位作者 王红霞 芦玲巧 曾翔俊 朱盈芬 张立克 《首都医科大学学报》 CAS 2007年第1期64-67,共4页
目的观察11,12-环二十碳三烯酸(11,12-EET)对缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠心肌血红素氧合酶-1(HO-1)的影响,并探讨其作用机制。方法采用健康雄性Wistar大鼠制备心肌缺血/再灌注模型,实验分为3组:1)缺血/再灌注(I/R)组,2)环氧二十碳三烯酸(E... 目的观察11,12-环二十碳三烯酸(11,12-EET)对缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠心肌血红素氧合酶-1(HO-1)的影响,并探讨其作用机制。方法采用健康雄性Wistar大鼠制备心肌缺血/再灌注模型,实验分为3组:1)缺血/再灌注(I/R)组,2)环氧二十碳三烯酸(EET)组及3)左旋精氨酸甲酯(L-NAME)组。观察缺血60min再灌注30min时心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率及舒张期左心室内压下降的最大变化速率。采用Westernblot法测定心肌HO-1表达水平。采用化学比色法观察大鼠心肌组织NOS及iNOS活性。结果收缩期左心室内压上升的最大变化速率及舒张期左心室内压下降的最大变化速率EET组高于I/R组(P<0.01);L-NAME组低于EET组(P<0.05)。心肌HO-1表达水平EET组高于I/R组(P<0.05),L-NAME组低于EET组(P<0.05)。EET组cNOS活性高于I/R组(P<0.01),L-NAME组cNOS活性低于EET组(P<0.05);EET组iNOS活性低于I/R组(P<0.01),L-NAME组iNOS活性低于EET组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论外源性11,12-EET能改善缺血/再灌注大鼠心功能损伤程度,增加心肌HO-1表达水平和cNOS活性,降低iNOS活性。提示11,12-EET拮抗心肌缺血/再灌注损伤的作用可能与HO-1表达增加有关,且此时HO-1的表达增加至少部分依赖于cNOS的激活。 展开更多
关键词 11 12-环二十碳三烯酸 心肌 缺血/再灌注损伤 血红素氧合酶-1 一氧化氮合酶
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胰岛素对人肾小管上皮细胞SREBP-1、FAS表达及脂质代谢的时效性研究 被引量:1
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作者 郝军 刘淑霞 +5 位作者 刘青娟 赵松 郑书深 姚芳 刘巍 段惠军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期517-521,共5页
目的探讨胰岛素对人肾小管上皮细胞(human renal proximal tubularepithelial cells line,HKCcells)固醇调节元件结合蛋白-1(sterol regulatory element binding protein-1,SREBP-1)和脂肪酸合成酶(fat acid synthase,FAS)表达以及细胞... 目的探讨胰岛素对人肾小管上皮细胞(human renal proximal tubularepithelial cells line,HKCcells)固醇调节元件结合蛋白-1(sterol regulatory element binding protein-1,SREBP-1)和脂肪酸合成酶(fat acid synthase,FAS)表达以及细胞内脂滴形成的时效性影响。方法给予人肾小管上皮细胞100nmol·L-1胰岛素刺激并根据刺激时间分为0、2、4、6、12和24h组。SREBP-1和FAS mRNA采用RT-PCR检测,SREBP-1蛋白的表达用免疫细胞化学和Western blot检测,细胞内脂滴检测采用油红O染色。结果和0h组相比,2h组HKC细胞未见SREBP-1和FAS mRNA表达变化,而4、6、12h组HKC细胞SREBP-1和FAS mRNA表达均升高,其中6h组升高最明显,分别是0h对照组的3.578倍和4.272倍,差异有统计学意义。Western blot检测显示4、6和12h组HKC细胞SREBP-1蛋白的前体和成熟片段表达均较0h和2h组增强,其中也是6h组表达最强,前体和成熟片段分别是0h组的4.106倍和5.167倍。免疫细胞化学技术显示SREBP-1蛋白在人肾小管上皮细胞株中定位于细胞质,在4、6和12h组HKC内其表达明显强于0、2和24h组。油红O染色提示胰岛素刺激6h后HKC细胞内可见明显红染脂滴颗粒,而其他各组HKC细胞未见着色。结论胰岛素呈时间依赖性引起人肾小管上皮细胞SREBP-1和FAS的上调,且作用在6h达到高峰,并最终导致细胞内脂滴沉积,这可能是代谢综合征引起肾脏脂质沉积的重要机制之一。 展开更多
关键词 胰岛素 人肾小管上皮细胞 固醇调节元件结合蛋白-1 脂肪酸合成酶 脂滴形成 时效性影响
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Heme Oxygenase-1对乙酸诱导大鼠胃溃疡的保护作用 被引量:2
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作者 沈锡中 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第9期979-982,共4页
目的研究血红蛋白氧化酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)在乙酸诱导大鼠胃溃疡模型中所起的作用及可能的机制.方法雄性 Sprague-Dawley 大鼠,体质量160 g~180 g,每组8只,乙酸诱导大鼠胃溃疡1,3,7 d 后用 RT-PCR,Westernblotting 和免疫组织... 目的研究血红蛋白氧化酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)在乙酸诱导大鼠胃溃疡模型中所起的作用及可能的机制.方法雄性 Sprague-Dawley 大鼠,体质量160 g~180 g,每组8只,乙酸诱导大鼠胃溃疡1,3,7 d 后用 RT-PCR,Westernblotting 和免疫组织化学分别检测胃粘膜中 HO-1和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide Synthase,iNOS)的表达.同时研究 HO-1抑制剂 tin mesoporphyrin(snMP)对 iNOS 表达、活性及胃粘膜损伤的影响.结果 RT-PCR 结果显示正常大鼠胃粘膜 HO-1仅轻度表达,乙酸诱导大鼠胃溃疡后,胃粘膜内 HO-1表达明显增强.HO 抑制剂 SnMP 处理组大鼠溃疡面积1 d 为(72±6)mm^2,明显大于对照组(51±4)mm^2,(P<0.01);3 d 为(51±4)mm^2,明显大于对照组(35±4)mm^2,(P<0.01);7 d 时(27±4)mm^2和对照组(24±3)mm^2无显著差异.同时 SnMP 能显著增强胃粘膜 iNOS的表达及 iNOS 的活性,溃疡诱导1 d SnMP 组 iNOS 的活性为5.6±0.3,对照组3.2±0.3(P<0.01);3 d SnMP 组6.4±0.6,对照组4.0±0.3(P<0.01);7 d SnMP 组0.6±0.1,对照组0.5±0.1无显著差异(单位,pmol[~3H]瓜氨酸·min^(-1)·g^(-1)蛋白).结论在乙酸诱导的大鼠胃溃疡模型中,HO-1对胃粘膜具有一定的保护作用,抑制 HO-1后加重胃粘膜损伤,同时伴 iNOS表达和活性的增强.提示 HO-1的粘膜保护作用可能通过抑制iNOS 功能,减少一氧化氮产生所介导的. 展开更多
关键词 乙酸 胃溃疡 一氧化氮合酶 免疫组织化学
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高糖对人肾小球系膜细胞SREBP-1、FAS表达的影响
10
作者 郝军 朱琳 +4 位作者 赵松 刘巍 要红叶 刘淑霞 段惠军 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期156-160,共5页
目的探讨高糖环境中人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMC)SREBP-1、FAS表达。方法体外培养HMC细胞,随机分为正常糖组、高糖组,免疫细胞化学、Western Blot和RT-PCR方法检测固醇调节元件结合蛋白1(sterol regulatory element bin... 目的探讨高糖环境中人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMC)SREBP-1、FAS表达。方法体外培养HMC细胞,随机分为正常糖组、高糖组,免疫细胞化学、Western Blot和RT-PCR方法检测固醇调节元件结合蛋白1(sterol regulatory element binding protein-1,SREBP-1)和脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FAS)表达。采用脂质体转染技术将特异性SREBP-1质粒引入细胞内并进行表达,进一步采用RT-PCR方法检测脂肪酸合酶FAS的表达。结果与正常糖组比较,高糖培养的人肾小球系膜细胞固醇调节元件结合蛋白1前体和成熟体以及FAS mRNA表达均升高,差异有统计学意义。质粒转染后HMC细胞经免疫组化和Western blot检测证实特异性质粒能够在细胞内高表达SREBP-1蛋白,进一步对FAS的检测证实了FAS mRNA表达升高。结论高糖可诱导人肾小球系膜细胞固醇调节元件结合蛋白1和FAS表达增强且SREBP-1和FAS之间存在有直接关系。 展开更多
关键词 高糖 人肾小球系膜细胞 固醇调节元件结合蛋白1 脂肪酸合成酶
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Heme Oxygenase-1对乙酸诱导大鼠胃溃疡的保护作用
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作者 沈锡中 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第z1期55-,共1页
目的研究血红蛋白氧化酶-1(Hemeoxygenase-1,HO-1)在乙酸诱导大鼠胃溃疡模型中所起的作用及可能的机制.方法♂Sprague-Dawley大鼠,体质量160g~180g,每组8只,乙酸诱导大鼠胃溃疡1,3,7d后用RT-PCR,Westemblotting和免疫组织化学分别检测... 目的研究血红蛋白氧化酶-1(Hemeoxygenase-1,HO-1)在乙酸诱导大鼠胃溃疡模型中所起的作用及可能的机制.方法♂Sprague-Dawley大鼠,体质量160g~180g,每组8只,乙酸诱导大鼠胃溃疡1,3,7d后用RT-PCR,Westemblotting和免疫组织化学分别检测胃粘膜中HO-1和诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)的表达.同时研究HO-1抑制剂tinmesoporphyrin(SnMP)对iNOS表达、活性及胃粘膜损伤的影响.结果RT-PCR结果显示正常大鼠胃粘膜HO-1仅轻度表达,乙酸诱导大鼠胃溃疡后,胃粘膜内HO-1表达明显增强.HO抑制剂Sn-MP处理组大鼠溃疡面积1d为(72±6)mm2,明显大于对照(51±4)mm2,(P<0.01);3d为(51±4)mm2,明显大于对照(35±4)mm2,(P<0.01),7d时(27±4)mm2和对照(24±3)mm2无显著差异,同时Sn-MP能显著增强胃粘膜iNOS的表达及iNOS的活性,溃疡诱导1dSn-MP组iNOS的活性为5.6±0.3,对照3.2±0.3(P<0.01);3dSn-MP组6.4±0.6,对照4.0±0.3(P<0.01);7dSn-MP组0.6±0.1,对照0.5±0.1无显著差异(单位,pmol[3H])瓜氨酸.min-1@g-1蛋白).结论在乙酸诱导的大鼠胃溃疡模型中,HO-1对胃粘膜具有一定的保护作用,抑制HO-1后加重胃粘膜损伤,同时伴iNOS表达和活性的增强.提示HO-1的粘膜保护作用可能通过抑制iNOS功能,减少一氧化氮产生所介导的. 展开更多
关键词 血红蛋白氧化酶-1 乙酸 胃溃疡 一氧化氮合酶 胃粘膜/损伤 大鼠 中卟啉类
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青钱柳对T2D胰岛素抵抗大鼠肝脏氧化应激、炎症反应及FAS/IRS1的影响 被引量:12
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作者 姚骏凯 高学敏 +6 位作者 李伟 付璐 王玉杰 贾岚 王蕾蕾 罗珍 王景霞 《环球中医药》 CAS 2018年第10期1497-1503,共7页
目的研究青钱柳叶水提物(Cyclocarya paliurus aqueous extract,CPAE)对2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)胰岛素抵抗大鼠肝脏氧化应激、炎症反应及FAS/IRS1的影响。方法将高脂饲料喂养8周结合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ) 30 mg/kg诱... 目的研究青钱柳叶水提物(Cyclocarya paliurus aqueous extract,CPAE)对2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)胰岛素抵抗大鼠肝脏氧化应激、炎症反应及FAS/IRS1的影响。方法将高脂饲料喂养8周结合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ) 30 mg/kg诱导的成模大鼠(空腹血糖>11.1 mmol/L),随机分为模型组,二甲双胍组(0. 3 g/kg),CPAE低、中、高剂量组(0. 25、0. 5、1 g/kg)。连续灌胃4周,给药期间尾静脉取血测大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)。治疗4周后,测空腹胰岛素(fasting insulin,FINS),计算胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,HOMAIR)、胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI);检测血清中甘油三脂(total triglyceride,TC)、总胆固醇(total cholesterol,TG)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(highdensity lipoprotein,HDL)的含量;比色法检测肝脏中过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)的含量;放免法测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6 (interleukin-6,IL-6)的含量;酶免法测脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS1)、磷酸化胰岛素受体底物1(phosphorylated insulin receptor substrate 1,P-IRS1)的含量; RT-qPCR检测肝脏FAS、IRS1 mRNA的表达量。结果与模型组比较:(1) CPAE低、中、高剂量组FPG、HOMA-IR,TC、TG、LDL、HDL显著降低(P<0.05);(2)肝脏CAT、SOD、GSH-PX显著升高(P<0.05),TNFα、IL1β、IL-6,MDA显著降低(P<0.05);(3)肝脏P-IRS1/IRS1蛋白比值和IRS1 mRNA含量显著升高,FAS蛋白表达量及mRNA的含量显著降低(P<0.05)。结论 CPAE提高T2D胰岛素抵抗大鼠肝脏中抗氧化酶的含量,调节氧化应激和炎症反应,缓解胰岛素抵抗,改善T2D大鼠糖脂代谢紊乱,其机制可能与CPAE可提高P-IRS1含量,抑制FAS表达有关。 展开更多
关键词 青钱柳 氧化应激 炎症反应 胰岛素抵抗 脂肪酸合成酶 胰岛素受体底物1
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高效液相色谱法检测大豆1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶活性的研究 被引量:1
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作者 关永贺 杨君 +2 位作者 包永明 刘明 安利佳 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期355-359,共5页
建立了大豆1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶高效液相色谱法活性分析体系。利用KromasilC18(250mm×4.6mm,5μm)反相色谱柱,以260nm为探测波长,以甲醇和1%醋酸水溶液梯度溶液为流动相,流速梯度为初始0.25mL/min,7min降至0.15mL/min,15min升... 建立了大豆1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶高效液相色谱法活性分析体系。利用KromasilC18(250mm×4.6mm,5μm)反相色谱柱,以260nm为探测波长,以甲醇和1%醋酸水溶液梯度溶液为流动相,流速梯度为初始0.25mL/min,7min降至0.15mL/min,15min升至0.5mL/min,确定了S-腺苷蛋氨酸(SAM)、腺嘌呤和腺苷标准品的出峰时间分别为25,12和16min。从大豆黄化幼苗下胚轴中提取ACC合酶,与等体积S-腺苷蛋氨酸标准品在30℃恒温水浴中作用1h,利用高效液相色谱体系检测到的产物峰与腺嘌呤标准品一致,经电喷雾电离质谱(ESI-MS)确定,产物峰中含有m/z为136.1的腺嘌呤准分子离子峰(M+H)+。 展开更多
关键词 高效液相色谱 ACC合酶 S-腺苷蛋氨酸 腺苷 腺嘌呤
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健脾疏肝丸对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝X受体α-固醇调节元件结合蛋白-1-脂肪酸合成酶信号转导通路的影响 被引量:4
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作者 朱达 孙凤霞 +3 位作者 李晓玲 徐春军 李杰 王傲然 《中国肝脏病杂志(电子版)》 CAS 2020年第2期60-67,共8页
目的探讨健脾疏肝丸对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝X受体(liver X receptorα,LXRα)-固醇调节元件结合蛋白-1(sterolregulatory element-binding protein-1,SREBP-1)-脂肪酸合成酶(fatty acid s... 目的探讨健脾疏肝丸对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝X受体(liver X receptorα,LXRα)-固醇调节元件结合蛋白-1(sterolregulatory element-binding protein-1,SREBP-1)-脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)信号转导通路的影响。方法将32只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)SD雄性大鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、健脾疏肝丸组和易善复组,每组8只。正常组进食普通饲料,其他组进食高脂饲料,健脾疏肝丸组给予4.86 g/(kg·d)灌胃,易善复组给予0.123 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予等量蒸馏水灌胃。灌胃与造模同时进行,共8周。检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、甘油三酯(triglycerides,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)及白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平。对大鼠肝组织切片进行HE染色和油红O染色,于光学显微镜下观察。采用免疫组织化学法、蛋白质免疫印迹法及实时荧光定量聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测大鼠LXRα、SREBP-1及FAS的表达水平。结果 (1)正常组、模型组、健脾疏肝丸组和易善复组大鼠ALT[(3.40±0.81)U/L vs(9.98±2.27)U/L vs(7.80±1.52)U/L vs(6.43±1.89)U/L]、AST [(10.61±1.17)U/L vs(23.63±4.82)U/L vs(18.04±2.98)U/L vs(16.42±3.30)U/L]、TNF-α[(2.40±0.96)×10-3μg/L vs(6.64±0.92)×10-3μg/L vs(4.87±1.35)×10-3μg/L vs(4.45±1.39)×10-3μg/L]、IL-6 [(0.95±0.81)pg/ml vs(7.88±3.08)pg/ml vs(3.17±1.26)pg/ml vs(1.64±0.55)pg/ml]、TG [(0.33±0.13)mmol/L vs(0.90±0.24)mmol/L vs(0.62±0.37)mmol/L vs 0.62(0.46,0.66)mmol/L]、TC [(2.10±0.42)mmol/L vs 5.34(5.17,6.12)mmol/Lvs(3.68±0.63)mmol/Lvs(3.41±0.81)mmol/L]、HDL-C [(1.07±0.17)mmol/Lvs(0.62±0.14)mmol/Lvs(0.78±0.13)mmol/Lvs(0.79±0.12)mmol/L]及LDL-C[0.38(0.26,0.41)mmol/L vs(0.69±0.11)mmol/L vs(0.41±0.13)mmol/L vs(0.43±0.10)mmol/L]水平差异均有统计学意义(P <0.05)。与正常组相比,模型组AST、ALT、LDL-C、TG、TC、IL-6及TNF-α显著升高,HDL-C显著降低(P <0.05);与模型组相比,健脾疏肝丸组和易善复组AST、ALT、LDL-C、TG、TC、IL-6、TNF-α显著降低,HDL-C显著升高(P<0.05);与健脾疏肝丸组相比,易善复组大鼠血清TC显著降低(P <0.05),其他各指标差异无统计学意义(P> 0.05)。(2)肝组织HE染色和油红O染色示:与正常组相比,模型组大鼠肝脏脂肪变严重;与模型组相比,健脾疏肝丸组大鼠肝脏脂肪变减轻。(3)免疫组织化学结果表明,正常组、模型组、健脾疏肝丸组和易善复组大鼠LXRα(345872±52737 vs 544998±55506 vs 436319±65076 vs 448588±104641)、SREBP-1(259408±71143 vs 538701±62336vs 399705±102395 vs 394167±158047)和FAS(201683±48205 vs 466884±74934 vs 425589±63672 vs417852±84373)相对表达水平差异有统计学意义(P <0.05)。与正常组相比,模型组各蛋白相对表达水平均显著升高(P <0.05);与模型组相比,健脾疏肝丸组与易善复组各蛋白相对表达水平显著下降(P <0.05);健脾疏肝丸组与易善复组各蛋白相对表达水平差异无统计学意义(P> 0.05)。(4)Western blot结果表明,正常组、模型组、健脾疏肝丸组和易善复组大鼠LXRα[0.80±0.29 vs 1.57(1.30,1.67) vs 1.09±0.30 vs 1.10±0.36]、SREBP-1(0.42±0.12 vs 1.15±0.45 vs 0.86±0.20 vs 0.84±0.20)和FAS(0.43±0.12 vs 1.10±0.40 vs 0.81±0.26 vs 0.80±0.28)相对表达水平差异有统计学意义(P <0.05)。与正常组对比,模型组小鼠各蛋白相对表达水平显著升高(P <0.05);与模型组对比,健脾疏肝丸组及易善复组小鼠LXRα蛋白相对表达水平显著降低(P <0.05),健脾疏肝丸组与易善复组相比,各蛋白相对表达水平差异无统计学意义(P> 0.05)。(5)正常组、模型组、健脾疏肝丸组和易善复组大鼠肝组织LXRα[1.13±0.38 vs 4.14(4.01,4.35) vs 2.65±1.85 vs 1.35(0.54,4.23)]、SREBP-1、FAS[1.37±0.49 vs 4.35±1.97 vs 1.98(1.88,3.22)m RNA相对表达量差异有统计学意义(P <0.05)。与正常组相比,模型组LXRα[1.46±0.51 vs 6.13±1.17 vs 3.82±2.06 vs 1.56(1.19,4.74)]、SREBP-1、FAS vs1.83(1.64,4.29)] m RNA相对表达量显著升高(P <0.05);与模型组对比,健脾疏肝丸组及易善复组LXRα、SREBP-1、FAS m RNA表达均显著降低(P <0.05),健脾疏肝丸组与易善复组相比,LXRα、SREBP-1、FAS m RNA表达差异无统计学意义(P> 0.05)。结论健脾疏肝丸对大鼠NAFLD的改善作用可能与其抑制LXRα-SREBP-1-FAS信号转导通路有关。 展开更多
关键词 健脾疏肝丸 脂肪性肝病 非酒精性 肝X受体α-固醇调节元件结合蛋白-1-脂肪酸合成酶信号转导通路
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三磷腺苷合酶抑制因子1基因敲除对小鼠巨噬细胞线粒体功能和三磷腺苷水平的影响 被引量:2
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作者 于晓晴 钟根深 +4 位作者 熊熙文 梁银明 王辉 章小英 叶建平 《新乡医学院学报》 CAS 2019年第6期501-505,共5页
目的探讨三磷腺苷合酶抑制因子1(ATPIF1)基因敲除对小鼠巨噬细胞内三磷腺苷(ATP)水平及线粒体功能的影响。方法选取5只野生型C57BL/6小鼠为WT组,5只ATPIF1基因敲除小鼠为KO组。处死小鼠后,提取小鼠骨髓细胞进行培养,并诱导其分化成熟为... 目的探讨三磷腺苷合酶抑制因子1(ATPIF1)基因敲除对小鼠巨噬细胞内三磷腺苷(ATP)水平及线粒体功能的影响。方法选取5只野生型C57BL/6小鼠为WT组,5只ATPIF1基因敲除小鼠为KO组。处死小鼠后,提取小鼠骨髓细胞进行培养,并诱导其分化成熟为骨髓来源巨噬细胞(BMDM)。在未加脂多糖(LPS)的基础状态及LPS刺激2、4h后收集细胞,应用ATP检测试剂盒检测细胞内ATP水平,应用细胞能量代谢分析仪检测细胞氧消耗率,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞内三羧酸循环中关键酶丙酮酸激酶(PKm)、异柠檬酸脱氢酶(IDH)、柠檬酸合酶(CS)、α-酮戊二酸脱氢酶(OGDC)mRNA相对表达量。结果与WT组比较,在基础状态下KO组小鼠BMDM内ATP水平、基础氧耗量、用于ATP合成的氧耗量、最大氧耗量及PKm、IDH、CS、OGDCmRNA相对表达量显著增加(P<0.05,P<0.01);LPS刺激2、4h后,KO组小鼠BMDM内ATP水平、基础氧耗量、用于ATP合成的氧耗量和最大氧耗量及CS、OGDCmRNA相对表达量均显著增加(P<0.05)。结论ATPIF1基因敲除可增加小鼠BMDM内ATP水平,并提高三羧酸循环相关酶mRNA表达和线粒体氧化磷酸化水平。 展开更多
关键词 ATP合酶抑制因子1 巨噬细胞 线粒体 三羧酸循环 氧耗量
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按法刺激肌筋膜激痛点模型大鼠局部对TRPV1的影响 被引量:5
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作者 袁媛 蒋全睿 +6 位作者 吴琼 朱晓晴 匡小霞 江玉婷 李铁浪 李武 李江山 《湖南中医药大学学报》 2021年第8期1217-1222,共6页
目的研究按法刺激激痛点是否通过激活辣椒素受体1(transient receptor potential vanillic acid subtype 1,TRPV1)进而产生效应,初步探讨按法止痛的作用机制。方法60只SD大鼠随机分为空白组10只和造模组50只,空白组不进行造模和干预操作... 目的研究按法刺激激痛点是否通过激活辣椒素受体1(transient receptor potential vanillic acid subtype 1,TRPV1)进而产生效应,初步探讨按法止痛的作用机制。方法60只SD大鼠随机分为空白组10只和造模组50只,空白组不进行造模和干预操作,仅正常饲养;造模组以局部击打配合离心跑台法建立大鼠慢性激痛点模型。造模成功后,将40只成模大鼠再随机分为模型组、按法组、按法+抑制剂组、按法+溶剂组,每组10只。模型组不进行干预;按法组给予局部按法治疗;按法+抑制剂组给予腹腔注射辣椒平溶液(TRPV1抑制剂)和局部按法治疗;按法+溶剂组给予腹腔注射溶剂和局部按法治疗。按法操作由自制按法仪器进行。取材后以免疫组化法检测TRPV1;以酶联免疫吸附法测定内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide sgnthase,eNOS)、一氧化氮(nitric oxide,NO)和五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)含量。结果(1)与空白组相比,模型组TRPV1平均光密度值增高(P<0.05);与模型组相比,按法组和按法+溶剂组TRPV1平均光密度值增高(P<0.05),按法+抑制剂组平均光密度值仅有数值降低但差异无统计学意义(P>0.05);与按法组和按法+溶剂组相比,按法+抑制剂组TRPV1平均光密度值降低(P<0.05)。(2)与空白组相比,模型组NO和eNOS含量增高(P<0.05);与模型组相比,按法组、按法+抑制剂组和按法+溶剂组的NO和eNOS含量增高(P<0.05);与按法组和按法+溶剂组相比,按法+抑制剂组的NO和eNOS含量降低(P<0.05)。(3)与空白组相比,模型组5-HT含量增高(P<0.05);与模型组相比,按法组、按法+抑制剂组和按法+溶剂组的5-HT含量降低(P<0.05);与按法组和按法+溶剂组相比,按法+抑制剂组的5-HT含量升高(P<0.05)。结论按法刺激激痛点产生去活化效应,其机制可能与激活TRPV1受体、上调eNOS和NO含量、降低5-HT含量有关。 展开更多
关键词 推拿 按法 激痛点 辣椒素受体1 一氧化氮 内皮型一氧化氮合酶 五羟色胺
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Ethylene Production and 1-Aminocyclopropane-l-Carboxylate (ACC) Synthase Gene Expression in Tomato ( L ycopsicon esculentum Mill.) Leaves Under Enhanced UV-B Radiation 被引量:2
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作者 Lizhe An Xiaofeng Xu +7 位作者 Hongguan Tang Manxiao Zhang Zongdong HOU Yanhong Liu Zhiguang Zhao Huyuan Feng Shijian Xu Xunling Wang 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2006年第10期1190-1196,共7页
Tomato (Lycopslcon esculentum Mill.) plants grown in a greenhouse were irradiated with two different levels of UV-B, namely 8.82 (T1) and 12.6 kJ/m^2 per day (T2). Ethylene production, 1-aminocyclopropane-1-carb... Tomato (Lycopslcon esculentum Mill.) plants grown in a greenhouse were irradiated with two different levels of UV-B, namely 8.82 (T1) and 12.6 kJ/m^2 per day (T2). Ethylene production, 1-aminocyclopropane-1-carboxylate (ACC) content, 1-(malonylamino) cyclopvopane-1-carboxylic acid (MACC) content, gene expression of ACC aynthase (EC 4.4.1.14), and ACC oxidase activity in tomato leaves were determined. The results Indicated that ACC content, the activity of ACC synthase and ACC oxidase, and ethylene production Increased continuously under low doses of UV-B radiation, whereas at high doses of radiation these parameters Increased during the first 12 d and then started to decrease. The MACC content increased continuously over 18 d under both doses of UV-B irradiation. The changes in ACC content, ACC synthaae activity, ACC oxidase activity, the transcriptional level of the ACC synthase gene, and ethylene production were consistent with each other, suggesting that ACC synthase was the key enzyme in ethylene biosynthesis and that ethylene production in tomato leaf tissues under UV-B radiation could be regulated by the expression of the ACC synthase gene. The results also indicate that the change in ethylene metabolism may be an adaptive mechanism to enhanced UV-B radiation. 展开更多
关键词 enhanced UV-B radiation ethylene production gene expression of 1-aminocyclopropane-l-carboxylate (ACC) synthase Lycopsicon esculentum
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Effect of Dangfei Liganning capsule(当飞利肝宁胶囊) on liver X receptor α/steroid regulatory element binding protein-1/fatty acid synthase signal pathway in rats with metabolic-associated fatty liver disease 被引量:4
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作者 LI Xiaoling SUN Fengxia +3 位作者 SHANG Zimeng ZHANG Yingxue LI Jie ZHANG Qiuxiang 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CSCD 2022年第6期940-947,共8页
OBJECTIVE: To study the mechanism of Dangfei Liganning capsule(当飞利肝宁胶囊) in the treatment of rats with metabolic associated fatty liver disease(MAFLD). METHODS: Totally 48 specific pathogen free SpragueDawley ma... OBJECTIVE: To study the mechanism of Dangfei Liganning capsule(当飞利肝宁胶囊) in the treatment of rats with metabolic associated fatty liver disease(MAFLD). METHODS: Totally 48 specific pathogen free SpragueDawley male rats were randomly divided into normal Group, model group, Dangfei Liganning high, moderate, and low-dose groups and Essentiale group which were fed with high fat diet for 8 weeks, and gavage and molding were carried out simultaneously. Dangfei Liganning high, middle and low-dose group were given 0.27, 0.135 and 0.0675 g·kg-1·d-1 respectively by gavage, Essentiale group was given 0.123 g·kg-1·d-1 by gavage, the same amount of distilled water was given by gavage in the normal group and the model group. The rats were weighed at the 0th week, 2nd week, 4th week, 6th week and 8th weekend respectively. The rats were sacrificed at the end of the 8th week. Serum levels of alanine aminotransferase(ALT), alanine aminotransferase(AST),triglyceride(TG), total cholesterol(CHO), high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C), low-density lipoprotein (LDL-C), total protein(TP), albumin(Alb), globulin(GLB), total bilirubin(TBIL), direct bilirubin(DBIL), tumor necrosis factor-α(TNF-α) and interleukin-6(IL-6) were measured. The levels of liver tumor necrosis factor-α(TNF-α), interleukin-6(IL-6) and liver pathology [hematoxylin and eosin(HE) staining, oil red O staining] were detected. The expression levels of liver X receptor α(LXRα), steroid regulatory element binding protein-1(SREBP-1) and fatty acid synthase(FAS) were detected by immunohistochemistry, Western blot and reverse transcription-polymerase chain reaction reverse transcription-polymerase chain reaction. RESULTS: From the beginning to the 8th week, the growth rate of body weight in the Dangfei Liganning highdose group was slower than all other groups. There was no significant difference in ALB level in all groups(P > 0.05). Compared with the model group, the levels of ALT, AST, LDL-C, TG, CHO, TP, GLB, TBIL, DBIL, IL-6, TNF-α were significantly decreased and HDL-C were significantly increased in Dangfei Liganning high-dose group(P < 0.01, < 0.05). HE and oil red O staining showed that the fatty lesions in rat liver were alleviated, while the expressions of LXRα, SREBP-1, FAS m RNA and protein were significantly decreased(P < 0.01). CONCLUSIONS: Dangfei Liganning capsule can slow down the increase of body weight of MAFLD rats, reduce the levels of transaminase, Lipid and inflammatory factors in MAFLD rats, promote the synthesis of liver protein and bile metabolism, and improve the liver fatty lesion of MAFLD rats, among which the Dangfei Liganning highdose group is more effective. The mechanism of action may be through blocking LXR-SREBP-1-FAS signal pathway. 展开更多
关键词 metabolic associated fatty liver disease liver X receptors steroid regulatory element binding protein-1 fatty acid synthases signal transduction Dangfei Liganning capsule
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多不饱和脂肪酸对Δ15 Des转基因小鼠前列腺素E_(2)水平的影响
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作者 赵瑄 甘婷 +2 位作者 王雨虹 巨佳曦 朱贵明 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第11期1300-1306,共7页
目的探讨多不饱和脂肪酸(PUFAs)对Δ15脂肪酸去饱和酶(Δ15 Des)转基因小鼠前列腺素E_(2)(PGE_(2))水平的影响。方法取C57BL/6野生型(WT)雄性小鼠和Δ15 Des转基因雄性小鼠作为对照组(n=5,WT组)和实验组(n=5,TG组),6%花生四烯酸(ARA)饲... 目的探讨多不饱和脂肪酸(PUFAs)对Δ15脂肪酸去饱和酶(Δ15 Des)转基因小鼠前列腺素E_(2)(PGE_(2))水平的影响。方法取C57BL/6野生型(WT)雄性小鼠和Δ15 Des转基因雄性小鼠作为对照组(n=5,WT组)和实验组(n=5,TG组),6%花生四烯酸(ARA)饲养8周,每周记录小鼠体质量变化;8周后麻醉处死2组小鼠,冰上分离小鼠肝脏、睾丸及肌肉组织,采用气相色谱(GC)检测2组小鼠各组织中脂肪酸(FAs)的组成及水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定2组小鼠各组织中PGE_(2)的水平及前列腺素E合酶1(PTGES1)、前列腺素E合酶2(PTGES2)信使RNA(mRNA)的相对表达。结果第1~8周,2组小鼠体质量均在增长,2组间比较、差异无统计学意义(P>0.05);WT组小鼠各组织中PUFAs主要是欧米伽-6 PUFAs(n-6 PUFAs);与WT组相比,TG组小鼠各组织中ARA水平降低、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)水平升高(P<0.05或P<0.01),睾丸组织中亚油酸(LA)水平升高、二十二碳四烯酸(DTA)水平降低(P<0.05);TG组小鼠睾丸、肌肉组织中PGE_(2)水平低于WT组(P<0.05或P<0.01);TG组小鼠肝脏、睾丸组织中PTGES1、PTGES2 mRNA表达低于WT组(P<0.05或P<0.01)。结论PUFAs可减少Δ15 Des转基因小鼠ARA的合成,降低与PGE_(2)相关的合成酶表达,从而调节体内PGE_(2)的水平。 展开更多
关键词 花生四烯酸 脂肪酸类 不饱和 前列腺素E类 Δ15 Des转基因小鼠 多不饱和脂肪酸 前列腺素E_(2) 前列腺素E合酶1 前列腺素E合酶2
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茄子1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶基因的生物信息学及其响应逆境胁迫的表达分析 被引量:1
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作者 万发香 王连臻 高军 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期325-334,共10页
基于课题组前期得到的茄子低温转录组数据,筛选到1个1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid,ACC)合成酶基因SmACS。研究发现,SmACS编码的氨基酸序列与大豆ACS的同源性最高,并且含有ACC合成酶特有的7个保守结构域... 基于课题组前期得到的茄子低温转录组数据,筛选到1个1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid,ACC)合成酶基因SmACS。研究发现,SmACS编码的氨基酸序列与大豆ACS的同源性最高,并且含有ACC合成酶特有的7个保守结构域和11个不变的氨基酸残基。该SmACS基因位于第8号染色体上,全长3550 bp,编码序列长1437 bp,含3个内含子和4个外显子,属典型的ACS基因结构。其编码的蛋白质由478个氨基酸组成,分子质量为54.03 kDa,等电点为6.48,亲水系数为-0.206,是一种定位于细胞质的不稳定的非分泌型亲水蛋白;该蛋白的主要构成元件为α-螺旋和无规则卷曲,具有保守的Aminotran_1_2结构域,含有39个磷酸化位点,其中以丝氨酸和苏氨酸为主。SmACS蛋白主要与ACC氧化酶等发生相互作用。该基因启动子中含有脱落酸、乙烯、冷胁迫、水杨酸及伤口响应等有关的顺式作用元件。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)结果证实,SmACS基因受低温、高温、干旱和盐诱导而上调表达,其中尤以低温胁迫诱导效果最为显著。上述结果可为进一步研究茄子SmACS基因的功能奠定理论基础。 展开更多
关键词 茄子 1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶基因 生物信息学 表达分析
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