口腔扁平苔藓患者外周血中ASH1L及其相关调控因子表达与免疫功能的相关性

目的探究口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血中存在缺失的同源异形1(ASH1L)及其相关调控因子表达与免疫功能的相关性。方法回顾性选取2018年1月至2021年12月间就诊于三亚中心医院的103例OLP患者临床资料,将其作为观察组;同时选取同期100名健康体检者作为对照组,测定两组受试者外周血ASH1L及其相关调控因子A20、IL-6的表达水平,并对比两组受试者的细胞免疫指标及体液免疫指标水平,分析ASH1L及其相关调控因子表达与免疫功能指标的相关性。结果观察组患者ASH1L相对表达量及其相关调控因子A20表达量为(0.412±0.116)×10^(-2)、(0.173±0.025)×10^(-2),明显低于对照组[(0.637±0.217)×10^(-2)、(0.335±0.134)×10^(-2)],IL-6相对表达量为(0.018±0.009)×10^(-2),明显高于对照组[(0.004±0.002)×10^(-2)],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)以及总T^(+)B^(+)NK细胞水平为(62.26±7.84)%、(37.22±3.32)%、(1.33±0.57)、(95.75±0.45)%,均低于对照组[(73.15±5.32)%、(45.82±3.57)%、(1.97±0.58)、(105.68±0.48)%],CD8^(+)、CD19^(+)水平为(28.64±3.21)%、(12.65±2.57)%,高于对照组[(23.46±3.43)%、(8.43±1.26)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者IgM水平为(1.63±0.21)g/L,明显高于对照组[(1.16±0.17)g/L],而补体C3、补体C4水平为(957.98±75.36)、(210.58±65.36)mg/L,低于对照组[(1157.30±94.27)、(276.39±49.54)mg/L],差异均有统计学意义(P<0.05);两组受试者IgG、IgA水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,OLP患者外周血ASH1L相对表达量与IgG呈正相关(P<0.05),A20相对表达量与IgA呈正相关(P<0.05),与CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关(P<0.05);IL-6相对表达量与各项免疫功能指标均不具相关性(P>0.05)。结论OLP患者外周血中ASH1L及其相关调控因子A20、IL-6表达量明显异常,且其表达水平与患者免疫功能密切相关。

过表达组蛋白甲基转移酶ASH1L对牛卵丘细胞增殖和凋亡的影响

旨在探究缺失的、小的、同源异形1(absent,small,or homeotic 1-like,ASH1L)过表达对牛卵丘细胞(cumulus cells,CCs)增殖和凋亡的影响。本研究将牛ASH1L SET结构域的cDNA序列克隆到pcDNA3.1上,构建牛ASH1L过表达载体;以导入pcDNA3.1+ASH1L载体的牛CCs为过表达组(ASH1L-OE),野生型牛CCs为对照组(Control),采用免疫荧光染色检测两组细胞中ASH1L表达水平和H3K36me1/2/3甲基化水平;通过流式细胞术分析ASH1L过表达细胞的凋亡和增殖情况;采用荧光定量PCR检测两组细胞中凋亡、增殖相关基因的mRNA表达水平。以牛CCs cDNA为模板,PCR扩增获得长2487 bp的牛ASH1L SET结构域DNA片段,与pcDNA3.1载体连接;经Nhe I/Not I双酶切和测序鉴定,成功构建过表达载体pcDNA3.1+ASH1L。过表达载体转染牛CCs后,细胞中ASH 1L mRNA及其蛋白表达水平、H3K36me1/2甲基化水平均显著升高(P<0.05)。另外,ASH 1L过表达显著提高了活细胞率(91.85±1.25)%vs.(87.39±1.71)%,降低了细胞凋亡率(8.08±1.21)%vs.(12.51±1.72)%,并显著下调了凋亡基因BAX和CASPASE-3 mRNA表达水平(P<0.05),上调抗凋亡基因BCL-2 mRNA表达水平(P<0.01)。ASH 1L过表达24、36 h时,细胞增殖率、增殖相关基因PCNA、CCND 2表达水平显著升高(P<0.05)。可见,ASH 1L过表达抑制了牛CCs凋亡,诱导了细胞增殖及H3K36me1/2甲基化水平的升高,为进一步研究ASH1L对CCs生长和卵泡发育的调控提供技术和理论基础。

淮北1/3焦煤与不同地域同类炼焦煤的差异性研究

选取4种淮北典型1/3焦煤和4种不同地域同类1/3焦煤为研究对象,对比分析了不同煤样官能团结构、化学性质和工艺性质的差异。结果表明,4种淮北1/3焦煤煤样总体挥发分和硫分相对较低,灰分偏高,而灰成分中矿物质催化指数MCI相对较低,碱金属含量低;其中,许疃、杨柳和孙疃1/3焦煤的活惰比、b值和Y值相对较高,且煤样软化温度低,软固区间温度宽,最大流动度高于其它煤样,表明煤样胶质体的流动性和热稳定性较好,可以替代部分优质肥煤使用。与印尼1/3焦煤相比,国内7种1/3焦煤整体的芳香缩合度较高,变质程度高,煤中SiO_(2)含量较高,其中淮北煤样中的杨柳、孙疃1/3焦煤的羟基含量高,而芦岭、许疃1/3焦煤的SiO_(2)含量相对较高。

组蛋白甲基转移酶ASH1L的研究进展

组蛋白甲基化修饰作为表观遗传中的机制之一,在基因的表达及沉默、异染色质形成、细胞分化和基因印迹等方面发挥着重要作用。缺失的、小的、同源异形1(ASH1,也称为ASH1L)是组蛋白赖氨酸甲基转移酶,因其在果蝇中基因突变导致的同源异形的表现与三胸腔结构蛋白的突变体相似而被归类于三胸腔结构蛋白质组;在哺乳动物中ASH1L可特异性甲基化H3K4和H3K36,激活基因转录。本文综述了组蛋白甲基化修饰、三胸腔结构蛋白组成及功能、组蛋白甲基转移酶ASH1L的调控作用等方面的研究进展,为探索ASH1L蛋白酶在疾病的发病、防治和调控中的作用机制,及其在大家畜繁育中的应用研究提供参考。

ASH1L甲基转移酶在牛卵丘细胞中的表达与功能研究

旨在探究缺失、小的、同源异形1(absent,small,or homeotic 1-like,ASH1L)甲基转移酶在牛卵丘细胞中的表达与功能。本研究通过免疫荧光染色在健康母牛卵丘细胞中对ASH1L甲基转移酶进行定位,并分析细胞的组蛋白H3第36位赖氨酸(histone H3 lysine36,H3K36)甲基化修饰模式;合成靶向Ash 1L基因的siRNA,对siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3及对照组进行荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹,筛选有效siRNA;采用荧光定量PCR分析干扰Ash 1L表达对处理组及对照组中凋亡相关基因及多梳抑制复合体(polycomb repressive complex 2,PRC2)组成基因的表达水平的影响。结果显示,ASH1L甲基转移酶位于牛卵丘细胞的细胞核中,呈点状分布。成功筛选到能有效干扰牛Ash 1L基因的siRNA-2,其干扰效率为60%~70%。将siRNA-2转染卵丘细胞后,该干扰组细胞中H3K36的单甲基化、二甲基化及三甲基化3种甲基化水平均显著低于对照组(P<0.05);干扰Ash 1L导致凋亡相关基因Bax、Bcl-2及caspase-3表达水平显著上调,凋亡基因Bax和caspase-3表达量高于抗凋亡相关基因Bcl-2(1.311和1.179 vs 1.146);同时,干扰Ash 1L基因表达也引起PRC2蛋白亚基EZH 2和Suz 12基因的mRNA表达量显著升高(P<0.05)。综上所述,本研究探讨了ASH1L甲基转移酶在牛卵丘细胞中的表达和功能,ASH1L在牛卵丘细胞中呈点状分布,且Ash 1L基因的抑制导致H3K36me1/2/3水平均显著下降及凋亡基因和PRC2蛋白相关亚基EZH 2和Suz 12基因表达的升高,为进一步研究其对家畜胚胎的调控作用提供技术和理论基础。

敲低组蛋白甲基转移酶ASH1L基因对牛卵丘细胞表达谱的影响

旨在研究干扰类缺失的、小的、同源异形1(absent,small,or homeotic 1-like,ASH1L)甲基转移酶基因表达对牛卵丘细胞表达谱的影响。本研究采用经过筛选的siRNA干扰牛卵丘细胞中ASH1L基因的表达,分别收集干扰组和对照组细胞(野生型)进行RNA测序及基因差异表达、基因功能、信号通路、可变剪切和单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)等生物信息学分析;采用实时定量PCR方法验证测序结果;每个试验3个重复。结果显示,干扰组与对照组细胞共筛选出2046个差异表达基因,其中上调基因1078个,下调基因968个;差异表达基因主要富集到2802个GO条目,如细胞分裂、细胞连接和组蛋白甲基转移酶活性;涉及到白细胞跨内皮迁移、PI3K-Akt、细胞黏附分子等53条KEGG通路。全部表达基因的基因集富集分析结果显示,ASH1L基因参与发育诱导、H3K4特异性组蛋白甲基转移酶活性、组蛋白去甲基化等生物学过程。另外,测序结果鉴出12种可变剪切方式,共117994个可变剪切事件;同时检测到522205个SNPs位点,其中碱基转换的发生频率显著高于颠换。综上所述,ASH1L基因干扰的卵丘细胞和野生型卵丘细胞的表达谱存在差异,推测该基因可能通过细胞黏附分子和白细胞跨内皮迁移等通路调节细胞生长,也可通过可变剪切和SNP影响基因表达,本试验为深入研究ASH1L对卵丘细胞增殖和胚胎发育的调控功能提供理论基础。

天然无序区域在Ash1/Ash1L组蛋白甲基转移酶活化过程中的调控作用

组蛋白甲基化修饰与基因的转录调控密切相关,其中果蝇的Ash1以及哺乳动物的同源蛋白Ash1L是催化组蛋白H3上36位赖氨酸进行单甲基化和双甲基化的甲基转移酶.由于存在一个自抑制环区阻挡了底物的结合位点,Ash1/Ash1L本身的组蛋白甲基转移酶活性是很低的.但与Mrg15结合后,Ash1/Ash1L从原来的自抑制态转变为活化态.最近,Ash1L与Mrg15结合后复合物的晶体结构被成功解析出来,使之可以揭示Ash1L与Mrg15之间的特异相互作用以及Mrg15激活Ash1L的机理.我们通过比较Ash1L/Mrg15复合物的两个晶体结构来讨论Ash1L分子中的天然无序区域在其活化过程中所起的重要调控作用.

Ash2l-1调控小鼠卵黄囊早期造血

作为甲基转移酶MLL/SET1复合体的核心成分之一,ASH2L能够促进组蛋白H3K4me3修饰的形成,并在小鼠早期胚胎发育过程中行使重要功能.在小鼠中,由于启动子的选择性使用,Ash2l会转录成两种不同长度的转录本并形成两种蛋白质亚型:ASH2L-1和ASH2L-2.目前有关该基因在小鼠胚胎发育中的作用机制及不同亚型的功能还不清楚.本文利用CRISPR/Cas9技术特异敲除Ash2l-1并研究该亚型的生理学功能.研究结果发现,当Ash2l-1缺失时,小鼠胚胎在E9.5~E10.5时发生致死.特别是Ash2l-1-/-E9.5胚胎的卵黄囊血管和早期造血发育存在明显缺陷.转录组测序结果显示,Ash2l-1的缺失影响红细胞发育和成熟、血管发生和形成相关基因的表达.H3K4me3的CUT&RUN结果显示,在一些表达下调关键基因的启动子区,H3K4me3修饰水平出现下降.以上结果表明,Ash2l-1在小鼠卵黄囊的早期造血和血管形成过程中是必不可少的,它可能是通过调控关键基因启动子区的H3K4me3修饰水平而控制这些基因的表达,从而在相关过程中行使功能.

口腔扁平苔藓患者外周血中ASH1L及其相关调控因子表达与免疫功能相关性

目的分析口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血中ASH1L及其相关调控因子表达与免疫功能的相关性,探讨其在OLP发病机制中的作用及意义。方法收集2018年8月至2019年8月贵州医科大学附属口腔医院40例OLP患者(OLP组)和20名同期体检健康者(对照组)的外周血。采用流式细胞术及散射比浊法检测两组细胞免疫及体液免疫相关指标水平,实时荧光定量PCR检测两组外周血单个核细胞中ASH1L、泛素编辑酶A20、白细胞介素-6(IL-6)mRNA相对表达量及其与OLP免疫指标的相关性。结果OLP组中CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、总T^(+)B^(+)NK细胞、IgM水平均低于对照组,CD19^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、补体C3及C4水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。OLP组ASH1L及A20 mRNA相对表达量低于对照组,IL-6 mRNA高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。OLP组ASH1L mRNA相对表达量与IgG水平呈正相关(r>0,P<0.05)。A20 mRNA相对表达量与CD8^(+)、IgA水平呈正相关(r>0,P<0.05),与CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关(r<0,P<0.05)。结论ASH1L及其相关调控因子在OLP患者外周血中表达异常且与免疫指标水平相关,在OLP免疫相关发病机制中发挥了一定作用。

基于新陈代谢算法优化的GM(1,N)动态网络灰分拟合

煤炭是我国能源资源安全的压舱石,“双碳”背景下实现煤炭清洁加工与高效利用意义重大,而灰分检测对煤炭清洁化和智能化发展尤为重要。针对现有灰分检测存在的检测精度有待提高的突出问题,以两淮矿区典型煤样为研究对象,通过慢灰和X射线荧光(X ray fluorescence,XRF)测试系统地探究了煤样的灰分和元素组成分布规律,并结合机器学习理论构建了灰分-元素特征数据集;结合灰色系统理论和新陈代谢算法,构建了自适应的GM(1,N)动态网络灰分拟合优化模型,并详细设计了动态网络算法流程;提出了GM(1,N)动态模型的关键超参数,并通过与常规拟合方法对比,全面地评价了模型拟合性能。结果表明:两淮矿区煤可视为由可燃元素和成灰元素共同构成,且成灰元素中质量分数占比最高为Si和Al,次之为S、Fe和Ca等,最少为P和Cl等,并且煤中成灰元素总含量与灰分呈正相关,而可燃元素与之相反;以灰分为标签值、以组成元素为特征值,形成了煤的灰分-元素特征数据集;以样本数据划分→动态网络灰分拟合→模型评价机制→动态拟合模型自适应优化→鲁棒性提升→多轮迭代优化为主线设计了GM(1,N)动态网络灰分拟合模型及其算法流程,有效提升了数据集稳定性和新鲜度,并且迭代收敛速度快,灰分误差阈值5%时其准确率达100%;对比经典GM(1,N)模型和常规多元线性回归模型,证明了新模型的灰分拟合性能得到显著提升,其相对误差为0.16%~4.96%、误差均值仅2.29%。

F1ash课件在课堂教学中的应用研究

随着教育信息化手段的不断推进及新课程的实施,以发展为目标,以学生为主体的教育理念逐步深入人心。Flash课件应如何将新课程的理念落实到课堂教学之中,改变课程过于注重知识传授的倾向,强调形成积极主动的学习态度,是每一个教育工作者面临的重要课题。

轻松解决F1ash课件下载难题

目前因特网上基于flash平台的课件越来越多，如果想下载网页中这些精美动感的Flash动画，直接利用IE浏览器本身的功能，是很难实现的。下面介绍两种下载Flash动画常用的方法。

开发Flash模拟仿真试验的关键技术分析

本文分析了模拟仿真试验的技术特点,在此基础上介绍了利用 Flash 设计与开发模拟仿真实验的若干关键技术,以期对今后的相关设计开发给予帮助。

循环灰条件下1-甲基萘催化裂解的实验研究

热解气化过程中 ,促进焦油的裂解使之转化为高热值煤气 ,对高挥发分劣质煤和生物质燃料的清洁高效利用具有重要的意义 .在固定床反应器上 ,以石英砂和两种烟煤在循环流化床锅炉上燃烧形成的循环灰为床料 ,实验研究了焦油中含量较高的 1 -甲基萘的裂解反应 ,测定了反应动力学参数 .结果表明 ,与石英砂条件下相比 ,循环灰促进了 1 -甲基萘的裂解 ,反应活化能降低 。

Flash动画在汽轮机调节系统多媒体教学中的应用

运用Flash动画技术,并结合AutoCAD计算机辅助设计技术,建立了汽轮机调节系统动作过程的动态演示,并嵌入PowerPoint教学演示文稿。应用动画课件可以直观地全面了解调节系统各部件的工作原理及工作过程,达到寓教于乐的效果。

TJ-1模拟月壤的研制

以吉林省靖宇县境内的红色火山灰为原材料,将其烘干、粉碎、筛分后通过调整级配,力学试验成功研制出了Tongji-1(简称TJ-1)模拟月壤。测试了TJ-1模拟月壤的矿物成分、颗粒形态、比重、内摩擦角、黏聚力、压缩指数、动剪模量、阻尼比及吸湿性能等,并将TJ-1模拟月壤与月壤以及国际上已有模拟月壤的物理力学特性进行了对比分析。结果表明:TJ-1模拟月壤的物理力学特性在月壤的范围之内,可模拟月壤的基本力学特性;且与其他模拟月壤相比,具有级配稳定,较大孔隙比时抗剪强度高的特点。

Flash技术在人体解剖学虚拟实验室的应用

虚拟现实技术已逐渐进入到教学的各个领域,有着广阔的前景。文章介绍了利用Flash技术构建局部解剖学虚拟实验室的方法,探讨了其对解剖学实验教学和实验环境改善所产生的深远影响。