仿生电刺激联合人工周期对卵巢储备功能减退患者子宫容受性及血清生长分化因子-9、抑制素B、骨形态发生蛋白-10水平的影响

目的探讨仿生电刺激联合人工周期对卵巢储备功能减退(DOR)患者子宫容受性及血清生长分化因子-9(GDF-9)、抑制素B(INHB)、骨形态发生蛋白-10(BMP-10)水平的影响。方法选取2019年1月至2022年3月广西壮族自治区妇幼保健院收治的87例DOR患者作为研究对象。采用随机数字表法分为A组、B组、C组,每组29例。A组采用仿生电刺激治疗,B组采用人工周期治疗,C组采用仿生电刺激联合人工周期治疗。比较三组治疗前后子宫容受性,血清GDF-9、INHB、BMP-10水平,子宫内膜血流参数及卵巢体积;随访1年,比较三组的妊娠情况;比较三组治疗期间不良反应发生情况。结果与治疗前比较,治疗后A组、B组、C组初级卵泡数、优势卵泡数、排卵数及血清GDF-9、INHB、BMP-10水平均升高,卵巢体积均增大,且A组、B组、C组呈增高趋势(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后A组、B组、C组子宫内膜血流搏动指数(PI)、子宫内膜血流阻力指数(RI)均减小,且A组、B组、C组呈下降趋势(P<0.05)。随访1年,C组妊娠率高于A组、B组(P<0.05)。治疗期间,三组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论仿生电刺激联合人工周期可提高DOR患者子宫容受性,改善子宫内膜血流参数及卵巢体积,也可改善血清GDF-9、INHB、BMP-10水平,提高自然妊娠率,且安全性好。

东盛煤业9+10号煤层水文地质条件分析

借助山西潞安集团东盛煤业已有地质和水文地质资料,综合分析了该矿9+10号煤层的水文地质条件,采用理论公式法计算确定了9+10号煤层导水裂缝带最大发育高度为70.22 m,认为9+10号煤层的主要充水水源和水害类型为老空水、顶板水、大气降水,最主要的水害类型为老空水,并针对3种主要水害类型分别提出了水害防治建议。

编辑ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7基因的串联DsRed荧光表达盒的CRISPR/Cas9系统的构建及验证

CCT家族基因影响植物开花,在玉米中,ZmCCT10、ZmCCT9基因是光周期敏感基因,ZmGhd7基因是与开花期相关的基因。利用CRISPR/Cas9技术靶向编辑ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7基因为研究基因的功能和快速改良玉米的开花期提供了可能。本研究以玉米ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7基因为编辑对象,以KN5585为稳定转化受体、以CML312SR、LCL-1、LCL-2为预改良的晚熟材料受体,首先通过Sanger测序验证了3个基因靶标区域在4份玉米材料中的保守性,其次根据sgRNA设计原则选择了1个sgRNA复合编辑3个基因,并利用同源重组方法构建了将由胚特异性启动子Zm3896驱动的DsRed表达盒和由ZmU6-2启动子驱动的sgRNA表达盒串联的CRISPR/Cas9基因编辑敲除载体CCT-CPD,然后采用酶切法和Sanger测序法分析T0代KN5585中3个基因的突变率和突变类型,验证了该系统的基因编辑效果,最后通过对稳定遗传转化植株所结籽粒在籽粒水平、组织水平进行DsRed荧光标记表型鉴定,验证了该系统中DsRed荧光筛选标记的有效性。在此基础上,通过杂交育种法以晚熟材料为母本、以T1代KN5585阳性株为父本获得F1并经过DsRed荧光筛选获得含有有效编辑转基因元件的晚熟材料。本研究构建的编辑ZmCCT10/ZmCCT9/ZmGhd7基因的串联DsRed荧光表达盒的CRISPR/Cas9系统为创制单基因突变体,双基因突变体,三基因突变体奠定了基础,该系统中DsRed荧光筛选标记的应用可以快速筛选区分有无转基因成分的玉米籽粒,成本低,鉴定效率高,具有大规模籽粒筛选的潜力,本研究为鉴定ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7三个基因的功能和创制玉米光周期钝感材料奠定了材料基础和高效的技术基础。

系统性红斑狼疮患者血清IL-6、IL-8、IL-9、IL-10水平变化及其与早期肾损伤的相关性研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-9(IL-9)、白细胞介素-10(IL-10)水平变化及其与早期肾损伤的相关性。方法选择2022年3月至2023年3月陕西省人民医院收治的120例早期肾损伤的SLE患者作为观察组,选择同期于我院体检的120例健康者作为对照组。比较两组受检者血清IL-6、IL-8、IL-9、IL-10水平和尿素氮、血肌酐、血尿酸水平,并采用Pearson相关分析法分析血清IL-6、IL-8、IL-9、IL-10水平与尿素氮、血肌酐、血尿酸的相关性。结果观察组患者的血清IL-6、IL-8、IL-9、IL-10、尿素氮、血肌酐、血尿酸水平分别为(13.38±2.45)pg/mL、(68.01±10.47)pg/mL、(10.49±2.06)pg/mL、(9.42±2.50)pg/mL、(15.12±3.04)mmol/L、(159.90±28.51)μmol/L、(476.22±48.18)μmol/L,明显高于对照组的(4.46±0.39)pg/mL、(30.25±5.55)pg/mL、(5.51±1.10)pg/mL、(4.70±1.08)pg/mL、(5.20±1.38)mmol/L、(86.57±10.80)μmol/L、(204.51±30.60)μmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析结果显示,血清IL-6、IL-8、IL-9、IL-10水平与尿素氮、血肌酐、血尿酸均呈正相关(P<0.05)。结论SLE患者的血清IL-6、IL-8、IL-9、IL-10水平均明显升高,且与早期肾损伤密切相关,有助于评估病情的进展。

北京黑猪AQP9和RPS10基因多态性及其与背膘厚的关联分析

旨在研究水通道蛋白9(aquaporins9,AQP9)及核糖体蛋白10(ribosomal protein S10,RPS10)基因多态性及其与北京黑猪背膘厚的相关性,以期能够获得北京黑猪背膘厚的有效标记。本研究以413头北京黑猪为研究对象,测定不同部位(肩部、6-7肋间、胸腰结合、腰荐结合)的背膘厚度。PCR扩增AQP9和RPS10基因的启动子区和外显子区序列筛选SNP位点,并将SNPs与各部位背膘厚进行关联分析。运用荧光定量PCR检测基因的差异表达。结果发现,AQP9基因启动子区有4个突变位点,其中1个SNP:rs332699245 A>C与胸腰结合处背膘厚关联显著(P<0.05),且该位点突变预测到了结合转录因子的改变;RPS10基因在3′UTR、CDS区共有8个突变位点,其中5个与背膘厚显著关联:rs80795904 C>G、rs80932213 T>C与6~7肋间背膘厚关联显著(P<0.05),rs3469834461 C>T与肩部背膘厚、四点平均背膘厚关联显著(P<0.05),rs80862457 C>T与胸腰结合处背膘厚、腰荐结合处背膘厚关联显著(P<0.05),rs336938272 A>C与6~7肋间背膘厚、腰荐结合处背膘厚、四点平均背膘厚均关联显著(P<0.05);且在3′UTR区检测到1个SNP(rs80862457 C>T),位于小RNA(microRNA,miRNA)结合靶点。基因表达差异分析表明,rs332699245 A>C中AA型个体的AQP9基因mRNA水平显著高于AC型个体(P<0.05),rs80862457 C>T中TT型个体的RPS10基因mRNA水平显著高于CC型个体(P<0.05)。综上所述,AQP9和RPS10基因与北京黑猪背膘厚显著关联,rs332699245 A>C和rs80862457 C>T位点可作为北京黑猪背膘厚选育的潜在分子标记,为北京黑猪的选育提供理论支撑。

10Cr9Si1Mo1VNb钢在450℃静态铅铋中的腐蚀行为

液态铅铋腐蚀问题是制约铅冷快堆发展的主要问题,商用9%~12%Cr铁素体/马氏体钢被认为是铅冷快堆首选结构材料。本文研究了10Cr9Si1Mo1VNb钢在450℃静态饱和氧铅铋共晶(LBE)中的腐蚀行为。结果表明:10Cr9Si1Mo1VNb钢暴露在LBE后,表面氧化膜主要由外氧化层Fe3O4、次外层(Fe,Cr)3O4和SiO2、内氧化区组成;Si与Cr在氧化过程中表现出协同作用,促进次外层形成,阻碍元素扩散,提高了基体抗氧化性;腐蚀1500 h后基体表面形成连续致密的氧化层,表现出良好的耐铅铋腐蚀性能。本文提出了10Cr9Si1Mo1VNb钢在450℃静态饱和氧LBE环境下的氧化扩散过程模型,为9%Cr耐热钢在铅冷快堆系统的应用提供了一定的理论依据。

10Cr9Mo1VNbN钢管焊接及热处理工艺研究

10Cr9Mo1VNbN钢是制造锅炉炉管的优质原材料,存在焊接性较差,对热处理温度很敏感,有较大冷裂倾向,焊后易检出焊缝区及热影响区冲击韧性、硬度等力学性能指标不合格等问题。研究了10Cr9Mo1VNbN钢管的焊接工艺,通过焊接试验和焊接工艺评定优化了焊接工艺以及热处理工艺参数,提升了10Cr9Mo1VNbN钢管的焊接质量,可为类似材质产品的焊接提供焊接工艺参考。

五加生化胶囊和妇炎舒胶囊对人流术后子宫复旧不全患者血清MMP-9、IL-10水平的影响

目的:探讨五加生化胶囊和妇炎舒胶囊对人流术后子宫复旧不全患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白细胞介素-10(IL-10)水平的影响。方法:选取2020年1月—2022年9月本院收治的60例人流术后子宫复旧不全患者为观察对象,采用奇偶数分组法分为对照组和研究组,各30例。对照组予以妇炎舒胶囊治疗,研究组予以五加生化胶囊治疗。比较两组临床疗效、临床症状以及治疗前后子宫内膜厚度、子宫三径之和、子宫内膜血流动力学参数[阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、子宫动脉收缩期血流峰值速度(PSV)]、血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白细胞介素-10(IL-10)水平。随访3个月经周期,比较两组远期并发症发生率。结果:研究组总有效率为93.33%,高于对照组的73.33%(P<0.05);研究组临床症状改善程度优于对照组(P<0.05);治疗后研究组子宫内膜厚度高于对照组,子宫三径之和、RI、PI、PSV低于对照组(P<0.05);治疗后研究组血清MMP-9水平低于对照组,IL-10水平高于对照组(P<0.05);两组远期并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:五加生化胶囊治疗人流术后子宫复旧不全在提高治疗效果、改善临床症状、改善子宫内膜血流动力学水平方面优于妇炎舒胶囊,并可调节血清MMP-9、IL-10水平,且具有一定安全性。

10Cr9Mo1VNb与12Cr1MoVG异种钢焊接及热处理工艺探讨

锅炉及蒸汽管道检修改造过程中经常遇到厚壁管异种钢的焊接,为了保证焊接质量,根据标准规范选用合适的焊接材料、采用合适的焊接及热处理工艺,获得了优良的焊接接头,保证管线的安全可靠运行,希望能为以后类似管道焊接及热处理工艺的确定提供一些参考。

2023年2月9—10日石嘴山市大雾天气过程分析

利用地面观测资料、Micaps常规资料、探空资料和EC模式物理量场资料,对2023年2月9—10日发生在石嘴山市的大雾天气过程进行了详细分析。结果表明:本次大雾过程是在较为稳定的大尺度环流背景下产生的,中低层暖温度脊控制,地面均压场维持,大气层结稳定,有利于低层逆温层的生成;探空资料显示,大雾发生过程中,低层出现多层逆温且较为深厚,对大雾的形成和维持起了重要作用;热力结构表明,温度日较差大表示地面辐射冷却为水汽的凝结起到了重要作用,具有辐射雾的特征;温度平流表明,在大雾发展和维持阶段,低层有暖平流输入,具有平流雾的特征;水汽条件表明,前期的降雪天气、地面积雪融化以及沙湖地区靠近水域,都为本次大雾天气提供了较为充沛的水汽;动力条件表明,在大雾发展维持期间高层存在稳定的下沉运动,在中低层,大雾发生前期存在弱的辐合上升运动,大雾消散期间存在下沉运动。

血清MMP9、ADAM10联合对类风湿关节炎患者颈动脉粥样硬化的诊断价值

目的 探究血清基质金属蛋白酶9(MMP9)、解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)联合检测对类风湿关节炎(RA)患者颈动脉粥样硬化(CAS)的诊断价值。方法 纳入2021年2月至2022年7月在我院就诊治疗的89例RA患者为研究对象,将RA患者分为合并CAS组(RA-CAS组)和非CAS组(RA-nonCAS组),同期选择50例在我院进行体检健康者为对照组。使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清MMP9、ADAM10水平;Pearson相关性分析患者血清MMP9、ADAM10水平与颈动脉内膜中层厚度(IMT)之间的关系;受试者工作特征曲线(ROC)评估MMP9、ADAM10对RA患者并发CAS的诊断价值;Logistic回归分析RA患者发生CAS的影响因素。结果 3组研究对象在性别、年龄、吸烟史、BMI、TC、TG、HDL、LDL上差异无统计学意义(P>0.05);RA-CAS组和RA-nonCAS组在病程上差异有统计学意义,RA-CAS组患者病程显著长于RA-nonCAS组(P<0.05);与对照组相比,RA-CAS组和RA-nonCAS组IMT值、血清MMP9、ADAM10水平均显著升高(P<0.05),且RA-CAS组显著高于RA-nonCAS组(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,RA患者并发CAS血清MMP9、ADAM10水平与IMT值均呈显著正相关(r1=0.568,r2=0.571,P<0.05);ROC曲线显示,MMP9、ADAM10单独诊断RA患者并发CAS的AUC分别为0.879、0.865,灵敏度分别为83.3%、77.1%,特异性分别为66.8%、63.9%,两者联合诊断RA患者并发CAS的AUC为0.963,灵敏度、特异性分别为95.8%、87.0%;多因素Logistic回归分析表明,MMP9、ADAM10是影响RA患者并发CAS的危险因素(P<0.05)。结论 RA并发CAS患者血清MMP9、ADAM10水平显著升高,血清MMP9、ADAM10水平与IMT呈正相关,并且血清MMP9、ADAM10可作为诊断RA患者并发CAS的血清标志物。

血清ADA、IL-10及TLR9与EBV相关传染性单核细胞增多症患儿EBV-DNA载量的相关性

目的分析血清腺苷脱氨酶(ADA)、白细胞介素-10(IL-10)及Toll样受体9(TLR9)与EB病毒(EBV)相关传染性单核细胞增多症(IM)患儿EBV-DNA载量的相关性。方法前瞻性选择2021年2月至2022年12月就诊于该院的98例EBV相关IM患儿作为IM组,另选同期于该院体检的50例健康儿童作为对照组。比较对照组、IM组血清ADA、IL-10及TLR9水平,线性回归分析ADA、IL-10、TLR9水平与IM发生的关系,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ADA、IL-10、TLR9水平单独及联合预测IM发生的价值。根据EBV-DNA载量不同将IM组患儿分为低载量组(18例)、低-中载量组(25例)、中-高载量组(49例)、高载量组(6例)4个亚组,比较各组血清ADA、IL-10及TLR9水平,Spearman等级相关分析血清ADA、IL-10、TLR9水平与IM患儿EBV-DNA载量的关系。结果与对照组比较,IM组血清ADA、IL-10、TLR9水平升高(P<0.05);线性回归分析结果显示,ADA、IL-10、TLR9水平均与EBV相关IM的发生有关(P<0.05);ROC曲线结果发现血清ADA、IL-10、TLR9水平单独及联合预测EBV相关IM发生的曲线下面积分别为0.850(95%CI 0.791~0.910)、0.867(95%CI 0.811~0.924)、0.891(95%CI 0.840~0.943)、0.912(95%CI 0.843~0.956);血清ADA、IL-10、TLR9水平及EBV-DNA载量从高到低为高载量组、中-高载量组、低-中载量组、低载量组(P<0.05);Spearman等级相关结果显示,血清ADA(r=0.526,P<0.001)、IL-10(r=0.610,P<0.001)及TLR9(r=0.715,P<0.001)水平与EBV相关IM患儿EBV-DNA载量呈正相关。结论EBV相关IM患儿血清ADA、IL-10及TLR9水平异常升高,上述指标水平与EBV-DNA载量密切相关,且三者联合可有效预测EBV相关IM的发生。

美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4与BtCry9Ea10结合特性分析

为明确苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis Cry9Ea10毒素蛋白对美国白蛾(Hyphantria cunea)的作用,本研究测定了其对美国白蛾四龄幼虫的活性,采用邻接法构建了美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4系统发育树;Ligand blot和ELISA试验研究了Bt Cry9Ea10毒蛋白与HcABCC4受体蛋白间的结合能力;利用HcABCC4基因dsRNA,采用注射法比较了基因沉默前后Cry9Ea10毒素对美国白蛾的毒力变化。结果表明,Bt Cry9Ea10蛋白对美国白蛾幼虫有杀虫活性,毒力回归方程为y=-4.61+2.28x,LC_(50)和LC_(70)值分别为115.60和177.58μg/mL。美国白蛾HcABCC4氨基酸序列(GenBank登录号:MW727508.1)与夜蛾科棉铃虫Helicoverpa armigera(XM 049842273.1)、美洲棉铃虫H.zea(XM 047179823.1)、草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(XM 035574947.2)、斜纹夜蛾S.litura(KP335688.1)的ABCC4氨基酸序列聚为一支、相似性一致;Bt Cry9Ea10、Bt Cry1Ac毒素与HcABCC4 TMD结构域重组蛋白能特异结合,解离常数Kd值分别为(276.80±0.056)、(131.30±0.087)nmol/L,最大亲和力Bmax值分别为(0.23±0.06)、(0.86±0.086)。与对照组相比,美国白蛾注射HcABCC4 dsRNA后基因表达量下降58.04%,Cry9Ea10蛋白平均校正死亡率下降58.97%(P<0.05)。据此推断美国白蛾中肠HcABCC4蛋白是Bt Cry9Ea10的特异受体,为进一步揭示Bt Cry9Ea10蛋白的杀虫机制提供了资料。

血清Galectin-9、CXCL10对老年结肠癌伴冠心病患者化疗相关心脏毒性的预测效能

目的探讨血清半乳糖凝集素-9(Galectin-9)、CXC趋化因子配体10(CXCL10)对老年结肠癌伴冠心病患者化疗相关心脏毒性的预测效能。方法选取2020年1月—2023年1月收治104例伴有冠心病的老年结肠癌为研究对象,根据是否发生化疗相关心脏毒性事件分为无心脏毒性组76例与有心脏毒性组28例。比较2组血清Galectin-9、CXCL10水平,采用受试者工作特征曲线评估血清Galectin-9、CXCL10对老年结肠癌伴冠心病患者化疗相关心脏毒性的预测价值,采用多因素Logistic回归分析探讨老年结肠癌伴冠心病患者化疗相关心脏毒性的影响因素。结果有心脏毒性组血清Galectin-9、CXCL10水平高于无心脏毒性组(P<0.01)。血清Galectin-9、CXCL10预测老年结肠癌伴冠心病患者化疗相关心脏毒性的曲线下面积(AUC)分别为0.805、0.739,特异度分别为64.76%、56.87%,敏感度均为91.45%。二者联合预测的AUC为0.906,特异度为86.97%,敏感度为87.47%。左心室射血分数≤51.74%、血清Galectin-9≥10.81μg/L、血清CXCL10≥127.24 pg/mL是老年结肠癌伴冠心病患者化疗相关心脏毒性的独立危险因素(P<0.01)。结论血清Galectin-9、CXCL10水平升高与老年结肠癌伴冠心病患者化疗相关心脏毒性密切相关,可作为评估患者化疗相关心脏毒性的生物学指标,且二者联合预测的效能更高。

血清Galectin⁃9、CXCL10对急性心肌梗死患者急诊PCI术后慢血流现象的预测效能

目的探讨血清半乳糖凝集素⁃9(galectin⁃9)、血清CXC趋化因子配体10(CXCL10)对急性心肌梗死(AMI)患者急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后冠状动脉慢血流(CSF)现象的评估价值。方法选取2019年12月至2022年12月合肥京东方医院收治的102例行急诊PCI术的AMI患者为研究组,另外选取同期来本院体检的100名健康体检者作为健康组。根据PCI术后连续校正TIMI帧数(CTFC)计数法将AMI患者分为CSF组(CTFC≥27帧)37例、血流正常组(CTFC<27帧)65例。采用酶联免疫吸附法检测血清Galectin⁃9、CXCL10水平,采用受试者工作特性(ROC)曲线评估血清Galectin⁃9、CXCL10对AMI患者急诊PCI术后CSF的预测价值,采用多因素Logistic回归分析探讨AMI患者急诊PCI术后CSF的影响因素。结果研究组血清Galectin⁃9、CXCL10水平均高于健康组(t=21.002,10.869,P<0.05)。CSF组血清Galectin⁃9、CXCL10水平高于血流正常组(t=10.929,11.133,P<0.05)。血清Galectin⁃9、CXCL10两者联合预测的AUC为0.901(0.864~0.938),优于单一检测(P<0.05)。CSF组高脂血症史比例、术中低血压比例、收缩压、舒张压、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL⁃C)、N末端脑钠肽前体(NTproBNP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK⁃MB)、中性粒/淋巴细胞比率(NLR)、空腹血糖(FPG)及美国纽约心脏病协会(NYHA)分级Ⅲ~Ⅳ级占比高于血流正常组,LVEF低于血流正常组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,术中出现低血压、Galectin⁃9≥9.00μg/L、CXCL10≥9.82 ng/mL是AMI患者急诊PCI术后CSF的影响因素(P<0.05)。结论血清Galectin⁃9、CXCL10水平升高与AMI患者急诊PCI术后慢血流现象密切相关,可作为评估AMI患者急诊PCI术后慢血流现象的生物学指标,且两者联合预测的效能更高。

10Cr9MoVNbN无缝钢管热弯裂纹分析

10Cr9MoVNbN无缝钢管在弯制的过程中,表面出现裂纹。对此钢管产生裂纹的原因进行分析,利用Zeiss金相显微镜分析热弯萌生裂纹的无缝钢管的组织,利用Supra55扫描电子显微镜对裂纹进行断口分析,发现无缝钢管热弯时存在超温现象。因此得出实际操作中的超温导致的晶粒粗化和晶界过烧是钢管开裂的主要原因,而与弯制工艺参数选择无关。研究结果可为10Cr9MoVNbN无缝钢管的弯制工艺参数的选择提供参考,同时也可为热加工缺陷的预防提供经验。

10Cr9Mo1VNbN钢冷却过程中的组织转变

采用热膨胀仪测量10Cr9Mo1VNbN钢在不同冷却速度下的连续转变行为。利用硬度计测试不同冷却速度下的维氏硬度,利用金相显微镜和扫描电子显微镜观察不同冷却速度下的显微组织,分析组织的演变规律。结果表明,10Cr9Mo1VNbN钢的硬度值随着冷却速度的增加而增加;当冷却速度较小时,10Cr9Mo1VNbN钢显微组织以铁素体为主,有少量马氏体析出,随着冷却速度增加,先共析铁素体的含量降低,直至组织全部转变为马氏体。

OsOPR10正调控水稻对稻瘟病和白叶枯病的抗性

【目的】茉莉酸(Jasmonic acid,JA)在植物生长发育和应对(非)生物胁迫中发挥重要功能,12-氧-植物二烯酸还原酶(12-oxo-phytodienoic acid reductase,OPR)是JA生物合成途径中的关键酶。创制OsOPR10转基因水稻,进行稻瘟病和白叶枯病抗性分析,揭示OsOPR10调控水稻抗病的分子机制,有望为水稻抗病育种提供种质资源。【方法】构建OsOPR10的CRISPR/Cas9敲除载体和过表达载体,并分别利用农杆菌介导转化野生型水稻日本晴(Nipponbare,NPB),获得OsOPR10敲除和过表达转基因水稻。对转基因后代进行抗病性、活性氧(ROS)爆发、水杨酸(salicylic acid,SA)与茉莉酸(JA)途径基因表达模式分析。利用激光共聚焦显微镜观察OsOPR10的亚细胞定位,酵母双杂交实验和荧光素酶互补实验获取OsOPR10的互作蛋白。【结果】获得OsOPR10纯合的敲除和过表达植株。接菌试验结果表明,OsOPR10过表达植株对稻瘟病和白叶枯病抗性更强。在几丁质(chitin)和细菌鞭毛蛋白(flg22)诱导后,OsOPR10过表达植株的ROS积累量明显高于野生型。qRT-PCR结果显示,在接种稻瘟菌12h后,OsOPR10过表达植株中JA通路基因(OsAOS2、OsAOC)和SA通路基因(OsPR1a、OsPAL1)较NPB表达上调。亚细胞定位结果显示,OsOPR10蛋白定位于叶绿体。通过酵母双杂交试验获取OsOPR10的互作蛋白OsCYP28。【结论】OsOPR10受稻瘟病菌和白叶枯菌以及外源茉莉酸甲酯与SA诱导。OsOPR10参与了病原菌分子模式触发的免疫途径(PTI),并且正调控水稻对稻瘟病和白叶枯病的抗性。此外,OsOPR10可能通过JA和SA途径介导水稻抗病反应。OsOPR10蛋白定位于叶绿体,与OsCYP28蛋白存在互作。

CD10、CA9、CD133表达与索拉非尼或舒尼替尼一线治疗转移性肾透明细胞癌患者预后的相关性

目的分析CD10、CA9、CD133表达与索拉非尼或舒尼替尼一线治疗转移性肾透明细胞癌(mccRCC)患者预后的相关性。方法回顾性纳入80例接受索拉非尼或舒尼替尼一线治疗的mccRCC患者,对肿瘤组织标本中CD10、CA9、CD133进行免疫组织化学(IHC)染色,分析各标志物表达与临床病理变量的相关性,采用单因素和多因素Cox比例风险模型分析PFS和OS的预后因素,并对CA9表达与治疗亚组患者的PFS和OS进行Kaplan-Meier生存分析。结果37例(46.25%)患者出现无进展生存期(PFS)的随访结局,中位PFS(mPFS)为24.9个月(95%CI:16.5~33.2)。55例(68.75%)患者死亡,中位总生存期(mOS)为44.2个月(95%CI:14.6~73.7)。CD10低表达与Fuhrman高分级相关(χ^(2)=6.241,P=0.012),CA9低表达与淋巴结转移(χ^(2)=5.952,P=0.015)和转移器官个数≥2个(χ2=8.205,P=0.004)相关。单因素分析显示Fuhrman分级、转移器官数以及淋巴结转移是PFS的预后因素(P<0.05),转移器官数、淋巴结转移及CA9表达是OS的预后因素(P<0.05);多因素分析显示Fuhrman分级是PFS的独立预后因素(HR=2.457,95%CI:1.126~5.365,P=0.024),转移器官数是OS的独立预后因素(HR=1.857,95%CI:1.048~3.290,P=0.034)。治疗亚组患者生存分析,索拉非尼组中CA9高表达与患者更长的OS相关(HR=0.401,95%CI:0.204~0.787,P=0.008)。结论CA9低表达是OS的非独立危险因素,而CD10、CD133不能作为mccRCC的预后因素。CA9低表达的mccRCC患者从索拉非尼和舒尼替尼治疗中生存获益较少,可根据指南选择靶向免疫联合或双免联合治疗以改善预后。

血清可溶性galectin-9在慢性肾脏病患者中的变化及临床意义

目的探讨慢性肾脏病(CKD)患者血清可溶性半乳糖凝集素-9(galectin-9)的变化及临床意义,同时检测血清白细胞介素-17(interleukin 17,IL-17)、白细胞介素-10(interleukin 10,IL-10)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)在不同分期CKD中的变化,探讨其与galectin-9水平的相关性。方法收集96例CKD患者及30例健康对照者,依据CKD分期标准将患者分为CKD1~2期(n=32)、CKD3~4期(n=33)和CKD5期(n=31)。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清galectin-9、IL-17、IL-10及MMP-9浓度。Spearman分析galectin-9与MMP-9、IL-17、IL-10及eGFR间的相关性。结果与健康对照组相比较,CKD患者血清galectin-9浓度显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),且CKD5期和CKD3~4期患者高于CKD1~2期,差异有统计学意义(P<0.05),但CKD5期和CKD3~4期患者之间差异无统计学意义(P>0.05);此外,IL-17和MMP-9在CKD5期患者中显著高于CKD3~4期以及CKD1~2期,且CKD3~4期患者高于CKD1~2期,差异均有统计学意义(P<0.05);而IL-10在CKD患者中则显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),虽CKD5期和CKD3~4期患者IL-10浓度均显著低于CKD1~2期患者(P<0.05),但CKD5期和CKD3~4期患者之间差异无统计学意义(P>0.05)。CKD患者中血清galectin-9与IL-17呈显著正相关关系(r=0.3427,P=0.0017),与IL-10和eGFR呈负相关性(r=-0.3272,-0.4145,P=0.0029),但与MMP-9间无显著相关性(r=0.1630,P=0.1460)。结论CKD患者血清galectin-9异常上调,并与疾病严重程度相关,并与IL-17/IL-10存在关联,可能参与CKD发生发展过程。