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LncRNA KCNQ1OT1调控miR-10a-5p加重缺氧复氧H9c2细胞损伤的机制
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作者 程涛 赵沱 杨洁 《河北医药》 CAS 2023年第9期1307-1310,1315,共5页
目的探讨长非编码RNA KCNQ1重叠转录本1(KCNQ1OT1)调控缺氧复氧(H/R)心肌细胞(H9c2)增殖、凋亡的作用机制。方法成功建立H/R H9c2细胞模型;采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)、细胞计数试剂盒(CCK8)、膜联蛋白V-异硫氰酸... 目的探讨长非编码RNA KCNQ1重叠转录本1(KCNQ1OT1)调控缺氧复氧(H/R)心肌细胞(H9c2)增殖、凋亡的作用机制。方法成功建立H/R H9c2细胞模型;采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)、细胞计数试剂盒(CCK8)、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素和碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)凋亡检测试剂盒、蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中KCNQ1OT1、miR-10a-5p的表达、细胞活性、细胞凋亡率及P65、PHB、Bcl-2、Bax的蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光素酶活性。结果与H9c2组比较,H/R H9c2组细胞KCNQ1OT1表达显著升高,miR-10a-5p表达显著降低(P<0.05);过表达KCNQ1OT1或抑制miR-10a-5p具有相同的加重H/R对H9c2细胞的活性抑制、凋亡促进及P65、Bcl-2下调,PHB、Bax上调作用。miR-10a-5p明显抑制野生型KCNQ1OT1细胞的荧光活性,并负向调控KCNQ1OT1的表达。过表达miR-10a-5p部分逆转KCNQ1OT1对H/R H9c2细胞的活性抑制和凋亡促进作用。结论长链非编码RNA KCNQ1OT1抑制H/R H9c2细胞增殖,促进凋亡,其机制与靶向miR-10a-5p有关。 展开更多
关键词 长链非编码RNA KCNQ1重叠转录本1 miR-10a-5p 缺氧复氧h9c2细胞
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钾的配合物C_9H_(10)KNO_4S的合成、晶体结构及生物活性 被引量:11
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作者 张淑华 蒋毅民 +1 位作者 肖瑜 周忠远 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期517-520,共4页
The title complex was synthesized by the reaction of taurine 、salicylic and potassium hydrate in water ethanol solution. The crystal structure was determined by X ray diffraction method and the chemical formula weigh... The title complex was synthesized by the reaction of taurine 、salicylic and potassium hydrate in water ethanol solution. The crystal structure was determined by X ray diffraction method and the chemical formula weight of the complex is 267.34. and the crystal belongs to monoclinic system with space group P21/c and cell parameters: a=2.0292(8)nm, b=0.7283(4)nm, c=0.7540(4)nm; β=94.15(1)°, V=1.1115(9)nm3, Z=4, Dc=1.598 g·cm-3, μ=0.0663mm-1, F(000)=552. Thecomplex is a lamellar compound of infinite expansion. In addition, the complex has been tested for its antibacterial active. The average diameter of complex antibacterial activing cycle: colibacillus is 9mm, pseudomonas aeruginosa is 8mm. CCDC: 194630. 展开更多
关键词 配合物 C9h10KNO4S 合成 晶体结构 生物活性 牛磺酸缩水杨醛席夫碱 抗癌抗菌剂
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BMP_9对C_3H10T_(1/2)干细胞向心肌样细胞分化的影响 被引量:10
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作者 谭金童 陈沅 向平 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期672-676,共5页
目的:研究骨形态形成蛋白9(Bone morphogenetic proteins9,BMP9)在C3H10T1/2干细胞向心肌细胞分化过程中的影响。方法:以高滴度(2.67ml/L)pAdEasy-BMP9重组腺病毒质粒转染C3H10T1/2干细胞,1周后应用RT-PCR方法及激光共聚焦方法分别检测C... 目的:研究骨形态形成蛋白9(Bone morphogenetic proteins9,BMP9)在C3H10T1/2干细胞向心肌细胞分化过程中的影响。方法:以高滴度(2.67ml/L)pAdEasy-BMP9重组腺病毒质粒转染C3H10T1/2干细胞,1周后应用RT-PCR方法及激光共聚焦方法分别检测C3H10T1/2干细胞中心肌特异转录因子及特异性蛋白的表达变化。2周后应用电子显微镜观察细胞超微结构的改变。结果:C3H10T1/2干细胞经pAdEasy-BMP9重组腺病毒质粒诱导1周后,细胞体积明显变大,排布走向趋于一致,细胞间连接紧密,折光性增强;细胞中开始出现心肌特异性转录因子NKx2.5、GATA-4、MEF2C及心肌特异性表达蛋白连接蛋白43(Connex-in43,Cx43)和心肌特异性肌钙蛋白T(Cardiac isoform of TropninT,cTnT)的表达;出现心肌特异性超微结构肌丝和闰盘。结论:BMP9可影响体外培养的C3H10T1/2干细胞定向分化为心肌样细胞。 展开更多
关键词 BMP9 C3h10T1/2干细胞 分化 心肌细胞
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9-(4,5-二硫甲基-1,3-二硫杂环戊烯-2-甲叉基)蒽-10(9H)-酮的合成及量子化学计算 被引量:6
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作者 朱玉兰 阚玉和 +3 位作者 林元奎 潘万龙 苏忠民 崔亨波 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1916-1920,共5页
设计合成了一种新的具有D π A结构的有机分子 ,9 (4 ,5 二硫甲基 1,3 二硫杂环戊烯 2 甲叉基 )蒽 10 (9H) 酮(C19H14 OS4) .以1HNMR ,FTIR ,元素分析和UV vis进行了表征 .运用Gaussian 98量子化学程序包 ,采用B3LYP密度泛函(DFT... 设计合成了一种新的具有D π A结构的有机分子 ,9 (4 ,5 二硫甲基 1,3 二硫杂环戊烯 2 甲叉基 )蒽 10 (9H) 酮(C19H14 OS4) .以1HNMR ,FTIR ,元素分析和UV vis进行了表征 .运用Gaussian 98量子化学程序包 ,采用B3LYP密度泛函(DFT)的方法 ,在 6 3 1G(d)水平上对分子的几何构型进行了优化 ,在优化的基础上用TDDFT的方法计算了化合物的电子光谱 ,计算值与实验值基本吻合 .用TDHF的方法计算了它的二阶非线性光学系数 ,与蒽醌相比 ,其第一超极化率 β较大 ,为12 .0 3× 10 -3 0 esu . 展开更多
关键词 9-(4 5-二硫甲基-1 3-二硫杂环戊烯-2-甲叉基)蒽-10(9h)-酮 合成 量子化学 蒽醌衍生物 电子光谱 密度泛函理论
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OP-10/n-C_4H_9OH/c-C_6H_(12)/H_2O体系W/O微乳液稳定条件 被引量:2
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作者 王长龙 杨志宏 聂基兰 《南昌大学学报(理科版)》 CAS 北大核心 2005年第1期88-91,共4页
对OP-10 /n-C4H9OH/c-C6H12 /H2O体系W/O微乳液的相组成和性质进行研究,并分析了液晶相出现的原因。结果表明,当OP-10 /n-C4H9OH质量比为 32时,具有较宽范围的W/O微乳相区域,且该微乳液体系对整个pH变化不敏感,在 10℃-32℃范围内,温... 对OP-10 /n-C4H9OH/c-C6H12 /H2O体系W/O微乳液的相组成和性质进行研究,并分析了液晶相出现的原因。结果表明,当OP-10 /n-C4H9OH质量比为 32时,具有较宽范围的W/O微乳相区域,且该微乳液体系对整个pH变化不敏感,在 10℃-32℃范围内,温度变化对微乳液稳定区无太大的影响。 展开更多
关键词 W/O微乳液 相区域 OP—10 n—C4h9Oh c—C6h12
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Ge_(10)O_(28)单元构建的两个三维锗酸盐结构:(H_3O)_4Ge_7O_(16)·3H_2O和K_4Ge_9O_(20) 被引量:1
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作者 周亚明 刘志城 +2 位作者 陈珍霞 翁林红 赵东元 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期382-387,共6页
在半水溶剂热条件下 ,采用不同的合成条件合成了两个锗酸盐微孔分子筛 :(H3O) 4Ge7O16 ·3H2 O和K4 Ge9O2 0 .X射线单晶结构解析表明 ,两个晶体结构具有相同的“火箭状”二级结构单元 (SBU) ,SBU的不同的连接方式导致了完全不同的... 在半水溶剂热条件下 ,采用不同的合成条件合成了两个锗酸盐微孔分子筛 :(H3O) 4Ge7O16 ·3H2 O和K4 Ge9O2 0 .X射线单晶结构解析表明 ,两个晶体结构具有相同的“火箭状”二级结构单元 (SBU) ,SBU的不同的连接方式导致了完全不同的空间结构 .H4 Ge7O16 ·7H2 O的结晶学数据为Mr=894 2 7,P 43m ,a =0 7730 9( 18)nm ,V =0 462 0 5 ( 19)nm3,Z =1,MoKα ,λ =0 0 710 73nm ,R(F) =3 48% ,wR(F2 ) =8 39% .K4 Ge9O2 0 的结晶学数据为 :Mr=112 9 71,I4( 1) /a ,a =1 5 0 0 2 ( 3)nm ,c =0 7383( 2 )nm ,V =1 6618( 7)nm3,Z =4,MoKα ,R(F) =3 92 % ,wR(F2 ) =11 97% . 展开更多
关键词 Ge10O28 (h3O)4Ge7O16·3h2O K4Ge9O20 微孔材料 锗酸盐 晶体结构 溶剂热合成 分子筛
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孤儿核受体SHP敲减抑制BMP9诱导C3H10T1/2细胞的成骨分化 被引量:1
7
作者 董谦 李丽 +4 位作者 王玉凤 冯巧灵 吉彩霞 刘晓骅 罗进勇 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期161-167,共7页
孤儿核受体SHP(small heterodimer partner)是核受体超家族中的一员,具有LXXLL模体及配体结合域,但无经典的DNA结合域.它可与多种转录因子结合,调节细胞的增殖、分化和代谢等生物学过程.但目前关于SHP在BMP9诱导成骨分化中的确切作用却... 孤儿核受体SHP(small heterodimer partner)是核受体超家族中的一员,具有LXXLL模体及配体结合域,但无经典的DNA结合域.它可与多种转录因子结合,调节细胞的增殖、分化和代谢等生物学过程.但目前关于SHP在BMP9诱导成骨分化中的确切作用却尚不清楚.本研究证明,SHP参与BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化.RT-PCR结合Western印迹方法检测蛋白揭示,异位表达BMP9上调了SHP在C3H10T1/2细胞中的表达.小干扰RNA敲减SHP基因在C3H10T1/2细胞的表达下调了成骨相关基因Runx2、Id1、Id2及CTGF的表达,而过表达BMP9则可上调这些基因的表达.碱性磷酸酶(ALP)活性测定/染色及茜素红染色显示,敲减核受体SHP基因可抑制BMP9的成骨分化作用,而过表达BMP9可部分消除SHP敲减导致的成骨抑制作用.上述结果提示,核受体SHP为BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化所必需.究竟BMP9如何上调SHP基因表达,以及SHP究竟通过何种机制上调BMP9下游成骨分化相关基因的表达尚待进一步研究. 展开更多
关键词 孤儿核受体ShP 重组腺病毒 小干扰RNA 骨形态发生蛋白9 C3h10T1/2细胞
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丁烯-1在[(n-C_4H_9)_4N][γ-SiW_(10)O_(36)]催化剂上的环氧化 被引量:1
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作者 程时标 《石油学报(石油加工)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第3期80-84,共5页
研究了在带两缺陷的Keggin型结构的硅钨多氧阴离子盐[(n C4H9)4N][γ SiW10O36]催化剂上,丁烯 1环氧化的催化性能。结果表明,在丁烯 1的环氧化反应中,[(n C4H9)4N][γ SiW10O36]催化剂具有很好的催化性能,丁烯 1的转化率达到了80%,1,2 ... 研究了在带两缺陷的Keggin型结构的硅钨多氧阴离子盐[(n C4H9)4N][γ SiW10O36]催化剂上,丁烯 1环氧化的催化性能。结果表明,在丁烯 1的环氧化反应中,[(n C4H9)4N][γ SiW10O36]催化剂具有很好的催化性能,丁烯 1的转化率达到了80%,1,2 环氧丁烷的选择性大于98%。适宜的反应条件为:反应温度60℃,反应时间2h,H2O2与催化剂的摩尔比为100∶1。[(n C4H9)4N][γ SiW10O36]中的结晶水及其Keggin型结构对催化性能具有重要影响。 展开更多
关键词 丁烯-1 环氧化 [(n-C4h9)4N][γ-SiW10O36]
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夹心型杂多化合物Na_9[CeW_(10)O_(36)]·34H_2O的合成及晶体结构
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作者 薛岗林 刘斌 +2 位作者 王文亮 李谦定 李恒新 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第11期2022-2028,共7页
在pH≈ 6 5及NaAsO2 和Co(NO3 ) 3 ·6H2 O存在下 ,Na2 WO4·2H2 O与Ce(NO3 ) 3 ·6H2 O反应 ,得到了Na9[CeW10 O3 6]·34H2 O单晶 .用元素分析及X射线单晶衍射法确定了其组成与结构 ,晶体学数据为 :a =1 30 10 (5 )n... 在pH≈ 6 5及NaAsO2 和Co(NO3 ) 3 ·6H2 O存在下 ,Na2 WO4·2H2 O与Ce(NO3 ) 3 ·6H2 O反应 ,得到了Na9[CeW10 O3 6]·34H2 O单晶 .用元素分析及X射线单晶衍射法确定了其组成与结构 ,晶体学数据为 :a =1 30 10 (5 )nm ,b =1 30 72 (5 )nm ,c=1 996 2 (8)nm ,α=10 1 0 73(7)° ,β=10 4 4 11(5 )° ,γ =90 4 73(4)°,V =3 2 2 1(2 )nm3 ,空间群P1- ,V =3 2 11(2 )nm3 ,Z =4 ,最终R因子 [I>2σ(I) ]R1=0 0 4 2 4 ,wR2 =0 0 5 4 9,R因子 (全部数据 )R1=0 135 7,wR2=0 0 80 8.[CeW10 O3 6]9-具有D4d对称性 . 展开更多
关键词 夹心型杂多化合物 Na9[CeW10O36]·34h2O 合成 杂多钨酸盐 晶体结构
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2,2,7,7-四甲基-5,6-二氧代-9-(2-氯苯基)-10-(4-甲基苯基)-9,10-二氢-2H-吖啶的合成和晶体结构
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作者 王香善 史达清 +1 位作者 屠树江 姚昌盛 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第1期91-94,共4页
标题化合物2,2,7,7-四甲基-5,6-二氧代-9-(2-氯苯基)-10-(4-甲基苯基)-9,10-二氢-2H-吖啶(C30H32CINO2,Mr=474.02)是由邻氯苯甲醛和5,5-二甲基-1,3-环己二酮和对甲基苯胺以乙二醇作溶剂在微波辐射下而得到的。结构通过单晶X-... 标题化合物2,2,7,7-四甲基-5,6-二氧代-9-(2-氯苯基)-10-(4-甲基苯基)-9,10-二氢-2H-吖啶(C30H32CINO2,Mr=474.02)是由邻氯苯甲醛和5,5-二甲基-1,3-环己二酮和对甲基苯胺以乙二醇作溶剂在微波辐射下而得到的。结构通过单晶X-射线衍射分析确定,其晶体属于单斜晶系,空间群P21/c,a=12.048(3),b=11.044(2),C=19.989(5)(A°),β=101.42(2)°,Z=4,V=2607(1)(A°)^3,Dc=1.208g/cm^3,μ(MoKα)=0.173mm^-^3,F(000)=1008,R=0.0450,wR=0.0869。X-射线衍射分析表明:原子C(8),C(13),C(14),C(15),C(20)和N形成1个六员环,采用船式构象,六员环C(8)~C(13)和C(15)~C(20)采用半椅式构象。 展开更多
关键词 2 2 7 7-四甲基-5 6-二氧代-9-(2-氯苯基)-10-(4-甲基苯基)-9 10-二氢-2h吖啶 合成 晶体结构 邻氯苯甲醛 5 5-二甲基-1 3-环己二酮 对甲基苯胺 船式构象 半椅式构象
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P^(38)MAPK通路在BMP9诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用 被引量:3
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作者 张芬 陈沅 +3 位作者 孙文静 陈露 陈妙月 朱高慧 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期657-660,共4页
目的:研究P38丝裂原活化蛋白激酶(P38mitogen-activated protein kinases,P38MAPK)通路在骨形态发生蛋白9(Bonemorphogenetic protein 9,BMP9)诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用。方法:免疫印迹检测经pAdEasyBMP9诱导24 h的C... 目的:研究P38丝裂原活化蛋白激酶(P38mitogen-activated protein kinases,P38MAPK)通路在骨形态发生蛋白9(Bonemorphogenetic protein 9,BMP9)诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用。方法:免疫印迹检测经pAdEasyBMP9诱导24 h的C3H10T1/2干细胞磷酸化P38MAPK和P38MAPK表达水平,免疫荧光定位磷酸化P38MAPK;SB203580抑制C3H10T1/2干细胞磷酸化P38MAPK活性,pAdEasyBMP9诱导21 d时免疫印迹检测心肌特异性蛋白CX43、cTnT表达,免疫荧光检测心肌特异性蛋白cTnT、α-MHC表达,RT-qPCR检测心肌特异性基因GATA4、MEF2C表达。结果:pAdEasyBMP9促进磷酸化P38MAPK表达增高,却不影响P38MAPK表达水平;磷酸化P38MAPK有表达于胞浆和胞核、仅表达于胞核的不同状态。SB203580可显著性地抑制由pAdEasyBMP9诱导的C3H10T1/2干细胞CX43、cTnT、α-MHC、GATA4、MEF2C表达。结论:pAdEasyBMP9诱导C3H10T1/2干细胞能激活P38MAPK通路,并促进其向心肌样细胞分化。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白9 C3h10T1/2干细胞 心肌样细胞 P38丝裂原活化蛋白激酶
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Wnt3a联合BMP9诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化 被引量:2
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作者 刘书霞 耿雪静 +1 位作者 房松华 陈沅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期448-451,共4页
目的探讨Wnt3a单独以及联合骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化的作用。方法利用HEK293细胞扩增重组腺病毒AdGFP、AdBMP9、AdWnt3a;分别转染C3H10T1/2细胞3周后,倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态及绿色荧... 目的探讨Wnt3a单独以及联合骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化的作用。方法利用HEK293细胞扩增重组腺病毒AdGFP、AdBMP9、AdWnt3a;分别转染C3H10T1/2细胞3周后,倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态及绿色荧光蛋白表达;流式细胞术检测细胞转染效率;Westernblot法、免疫荧光技术及实时定量PCR(qRT-PCR)分别检测缝隙连接蛋白43(Cx43)、肌钙蛋白T(cTnT)、GATA结合蛋白4(GATA4)、心肌细胞增强因子2C(MEF2C)的表达。结果经HEK293细胞扩增可得到高滴度的重组腺病毒;转染C3H10T1/2细胞3周后,Wnt3a组Cx43、cTnT、GATA4、MEF2C的表达量与空白组比较无明显差异;Wnt3a联合BMP9组的Cx43、cTnT、GATA4、MEF2C基因的表达量显著高于空白组、GFP组和Wnt3a组,与单独BMP9组相比无显著性差异。结论Wnt3a不能单独诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化;Wnt3a联合BMP9可诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白9 WNT3A C3h10T1/2细胞 心肌细胞样细胞
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β联蛋白参与骨形成蛋白9诱导的C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化 被引量:1
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作者 房松华 刘书霞 陈沅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期750-754,759,共6页
目的探讨骨形成蛋白9(BMP9)诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化过程β联蛋白(β-catenin)的作用。方法利用重组腺病毒BMP9(Ad-BMP9)诱导C3H10T1/2细胞分化,通过Western blot法检测Ad-BMP9及不同剂量XAV-939处理后β-catenin的激活情... 目的探讨骨形成蛋白9(BMP9)诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化过程β联蛋白(β-catenin)的作用。方法利用重组腺病毒BMP9(Ad-BMP9)诱导C3H10T1/2细胞分化,通过Western blot法检测Ad-BMP9及不同剂量XAV-939处理后β-catenin的激活情况;在完全抑制β-catenin的情况下,Ad-BMP9诱导1周,通过实时定量PCR法检测心肌细胞增强因子2C(MEF2C)、心肌组织特异性转录因子GATA结合蛋白4(GATA4);Ad-BMP9处理3周后,通过Western blot法及免疫荧光技术检测心肌连接子蛋白43(Cx43)、心肌肌钙蛋白T(c Tn T)的表达。结果在感染效率约50%的情况下,BMP9可过度激活β-catenin,使其磷酸化水平增高;在XAV-939抑制β-catenin后,Ad-BMP9诱导的C3H10T1/2细胞表达的c Tn T、GATA4、Cx43和MEF2C均受到抑制。结论β-catenin能被BMP9激活并参与BMP9诱导的C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化。 展开更多
关键词 骨形成蛋白9 心肌细胞样细胞 C3h10T1/2细胞 Β-CATENIN
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H9和H10亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立 被引量:2
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作者 李丹 谢芝勋 +10 位作者 李孟 罗思思 谢丽基 张民秀 黄娇玲 范晴 王盛 谢志勤 邓显文 曾婷婷 张艳芳 《江西农业学报》 CAS 2020年第4期113-117,共5页
根据GenBank中H9和H10亚型禽流感病毒(AIV)的HA基因及所有亚型AIV M基因的保守序列,分别设计3对特异性引物,并优化退火温度和引物浓度及其配比等条件,建立了可同时鉴别检测H9和H10亚型AIV的三重RT-PCR检测方法。特异性实验结果表明,该... 根据GenBank中H9和H10亚型禽流感病毒(AIV)的HA基因及所有亚型AIV M基因的保守序列,分别设计3对特异性引物,并优化退火温度和引物浓度及其配比等条件,建立了可同时鉴别检测H9和H10亚型AIV的三重RT-PCR检测方法。特异性实验结果表明,该方法可以特异性地扩增出H9、H10亚型AIV及M基因对应大小的目的条带,而对其余亚型AIV仅M基因出现特异性条带,其它禽病病原体均未扩增出任何特异性条带。敏感性实验结果表明,该方法对H9、H10亚型HA基因及M基因质粒的扩增下限均为5×10^4拷贝/μL。此外,该方法对临床样品的检测结果与病毒分离及测序结果完全一致。 展开更多
关键词 禽流感病毒 h9亚型 h10亚型 M基因 三重RT-PCR 检测
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H9和H10亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立 被引量:2
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作者 李丹 谢芝勋 +10 位作者 李孟 罗思思 谢丽基 张民秀 黄娇玲 范晴 王盛 谢志勤 邓显文 曾婷婷 张艳芳 《安徽农业科学》 CAS 2020年第5期96-99,共4页
[目的]建立可同时鉴别检测H9和H10亚型禽流感病毒(AIV)的二重RT-PCR检测方法。[方法]根据GenBank中H9和H10亚型AIV的HA基因保守序列,分别设计2对特异性引物,优化引物之间的浓度与退火温度等条件,建立了可同时鉴别检测H9和H10亚型AIV的二... [目的]建立可同时鉴别检测H9和H10亚型禽流感病毒(AIV)的二重RT-PCR检测方法。[方法]根据GenBank中H9和H10亚型AIV的HA基因保守序列,分别设计2对特异性引物,优化引物之间的浓度与退火温度等条件,建立了可同时鉴别检测H9和H10亚型AIV的二重RT-PCR检测方法。[结果]特异性试验结果表明,该方法可以特异性扩增出H9和H10亚型AIV对应大小的目的条带,而对其余亚型禽流感病毒及其他禽病病原体均未扩增出特异性条带。同时,该检测方法对H9和H10亚型AIV的扩增下限均为5×10^4拷贝/μL。临床样品的检测结果表明其与病毒分离结果相一致(100%)。[结论]该研究建立的二重RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高,可在一管内同时鉴别检测H9与H10两种亚型AIV,为H9与H10亚型AIV的监测提供了技术支撑。 展开更多
关键词 禽流感病毒 h9亚型 h10亚型 二重RT-PCR
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过表达SHOX2对BMP9诱导的小鼠间充质干细胞系C3H10T1/2成骨分化的影响
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作者 张平 袁晓慧 +4 位作者 黄华坤 杨春梅 张露露 罗小辑 罗进勇 《基础医学与临床》 2021年第1期1-7,共7页
目的研究矮小身材同源框2(SHOX2)对骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的小鼠间充质干细胞系C3H10T1/2成骨分化的影响。方法构建SHOX2重组腺病毒(Ad-SHOX2),实验分为对照(NC)组、Ad-SHOX2组、BMP9组和BMP9+Ad-SHOX2组。碱性磷酸酶(ALP)评估早期... 目的研究矮小身材同源框2(SHOX2)对骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的小鼠间充质干细胞系C3H10T1/2成骨分化的影响。方法构建SHOX2重组腺病毒(Ad-SHOX2),实验分为对照(NC)组、Ad-SHOX2组、BMP9组和BMP9+Ad-SHOX2组。碱性磷酸酶(ALP)评估早期成骨;钙盐沉积检测晚期成骨;显微镜观察细胞增殖;Western blot检测成骨相关转录因子(RUNX2)、增殖细胞核抗原(PCNA)、ERK1/2磷酸化及总蛋白表达。结果成功构建Ad-SHOX2。Ad-SHOX2组与BMP9组较NC组ALP活性、钙盐结节及RUNX2蛋白表达明显上升(P<0.05)。相较于以上两组,BMP9+Ad-SHOX2组ALP活性增高(P<0.05),低感染率BMP9+Ad-SHOX2组钙盐结节减少。高感染率组则较BMP9组钙盐沉积增多,与Ad-SHOX2组无明显差异。同时,BMP9+Ad-SHOX2组RUNX2蛋白表达高于BMP9组,低于Ad-SHOX2组(P<0.05)。显微镜观察Ad-SHOX2组与BMP9组细胞密度均高于NC组,PCNA蛋白表达上调(P<0.05)。且BMP9+Ad-SHOX2组PCNA蛋白表达高于BMP9组(P<0.05)。此外,Ad-SHOX2组及BMP9+Ad-SHOX2组较NC组T-ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达增高(P<0.05)。结论无外源性成骨刺激因子诱导条件下,SHOX2可能通过调控MAPK/ERK信号通路促进C3H10T1/2细胞增殖及成骨分化,但其与BMP9对成骨分化的调控作用是否可能互为拮抗,有待进一步研究。 展开更多
关键词 矮小身材同源框2(ShOX2) 骨形态发生蛋白9(BMP9) 成骨分化 C3h10T1/2细胞
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浅谈Incoloy 800H与X10CrMoVNb9-1异种钢焊接工艺
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作者 费鼎 《江苏锅炉》 2018年第1期23-27,共5页
锅炉设备制造过程中,经常遇到异种钢焊接问题,本文分析了Incoloy 800H与X10CrMoVNb9—1钢的特性及焊接性,通过焊接工艺试验,制定了合理的焊接工艺,解决了上述材料之间焊接存在的焊缝化学成分、过渡层的形成及接头的应力状态问题。
关键词 Incoloy 800h X10CrMoVNb9-1 异种钢 焊接工艺
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Clonal spread of Escherichia coli O101:H9-ST10 and O101:H9-ST167 strains carrying fosA3 and blaCTX-M-14 among diarrheal calves in a Chinese farm,with Australian Chroicocephalus as the possible origin of E.coli O101:H9-ST10
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作者 Wan-Yun He Xing-Xing Zhang +7 位作者 Guo-Long Gao Ming-Yi Gao Fa-Gang Zhong Lu-Chao Lv Zhong-Peng Cai Xing-Feng Si Jun Yang Jian-Hua Liu 《Zoological Research》 SCIE CAS CSCD 2021年第4期461-468,共8页
During a 2018 antimicrobial resistance surveillance of Escherichia coli isolates from diarrheal calves in Xinjiang Province,China,an unexpectedly high prevalence(48.5%)of fosfomycin resistance was observed.This study ... During a 2018 antimicrobial resistance surveillance of Escherichia coli isolates from diarrheal calves in Xinjiang Province,China,an unexpectedly high prevalence(48.5%)of fosfomycin resistance was observed.This study aimed to reveal the determinants of fosfomycin resistance and the underlying transmission mechanism.Polymerase chain reaction(PCR)screening showed that all fosfomycin-resistant E.coli carried the fosA3 gene.Pulsed-field gel electrophoresis(PFGE)and southern blot hybridization revealed that the 16 fosA3-positive isolates belonged to four different PFGE patterns(i.e.,A,B,C,D).The fosA3 genes of 11 clonally related strains(pattern D)were located on the chromosome,while others were carried by plasmids.Whole-genome and long-read sequencing indicated that the pattern D strains were E.coli O101:H9-ST10,and the pattern C,B,and A strains were O101:H9-ST167,O8:H30-ST1431,and O101:H9 with unknown ST,respectively.Among the pattern C strains,the blaCTX-M-14 gene was co-localized with the fosA3 gene on the F18:A-:B1 plasmids.Interestingly,phylogenetic analysis based on core genome single nucleotide polymorphisms(cgSNPs)showed that the O101:H9-ST10 strains were closely related to a Australian-isolated Chroicocephalus-origin E.coli O101:H9-ST10 strain producing CTX-M-14 and FosA3,with a difference of only 11 SNPs.These results indicate possible international dissemination of the high-risk E.coli clone O101:H9-ST10 by migratory birds. 展开更多
关键词 Clonal spread Bovine fosA3 blaCTX-M-14 O101:h9-ST10 Chroicocephalus
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A Facile Synthesis of 9,10-Dimethoxybenzo[6,7]- ox-epino[3,4-<i>b</i>]quinolin-13(6<i>H</i>)-one and Its Derivatives
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作者 Dingqiao Yang Xiuli Liang +1 位作者 Xiongjun Zuo Yuhua Long 《International Journal of Organic Chemistry》 2013年第2期119-124,共6页
A concise and efficient method for the synthesis of novel 9,10-imethoxybenzo[6,7]oxepino[3,4-b]quinolin13(6H)-one and its derivatives 7a-p has been developed via the intramolecular Friedel-Crafts acylation reactions o... A concise and efficient method for the synthesis of novel 9,10-imethoxybenzo[6,7]oxepino[3,4-b]quinolin13(6H)-one and its derivatives 7a-p has been developed via the intramolecular Friedel-Crafts acylation reactions of 6,7-dimethoxy-2-(phenoxymethyl)quinoline-3-carboxylic acids 6a-p with polyphosphoric acid (PPA) as catalyst and solvent under mild conditions. The key intermediates 6a-p were prepared through the in situ formation of ethyl 6,7-dimethoxy-2-(phenoxymethyl)quinoline-3-carboxylates 5a-p followed by hydrolysis with aqueous ethanolic sodium hydroxide solution. The novel synthetic method has the advantages of good yields, easy work-up, and environmentally friendly character, which may provide a novel highly efficient process for making quinoline and related azaheterocycle libraries. 展开更多
关键词 The Intramolecular Friedel-Crafts Acylation Reaction: 9 10-Dimethoxybenzo [6 7]oxepino[3 4-b]quinolin-13(6h)-one and Its DERIVATIVES 6 7-Dimethoxy-2-(phenoxymethyl)quinoline-3-carboxylic Acid: Ethyl 7-dimethoxy-2-(phenoxymethyl)quinoline-3-carboxylate: PPA
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Investigation of [πh_(9/2)⊕i_(13/2)^(-1)]10^- Isomer in ^(206)At
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《近代物理研究所和兰州重离子加速器实验室年报:英文版》 1999年第1期24-24,共1页
关键词 同质异性态 At206[πh9/2+i13/2^-1]10^- 原子核 性质
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