穿心莲内酯对肿瘤坏死因子-α和白介素-12表达的抑制作用

目的研究穿心莲内酯对细胞因子肿瘤坏死因子-α和白介素-12水平的影响。方法用巯基乙酸腹腔注射小鼠,取小鼠的腹腔巨噬细胞进行体外培养,以穿心莲内酯预先作用于巨噬细胞,随后添加脂多糖刺激巨噬细胞,以RT-PCR检测巨噬细胞肿瘤坏死因子-α、白介素-12a和白介素-12b mRNA水平,以ELISA检测巨噬细胞培养上清的肿瘤坏死因子-α和白介素-12蛋白水平。结果穿心莲内酯能抑制活化小鼠腹腔巨噬细胞的肿瘤坏死因子-αmRNA和蛋白水平,并能抑制白介素-12a mRNA、白介素-12b mRNA和白介素-12蛋白水平,且抑制作用随穿心莲内酯浓度增加而增强。12μg/ml穿心莲内酯能抑制肿瘤坏死因子-αmRNA(P<0.05),25μg/ml抑制肿瘤坏死因子-αmRNA水平(P<0.01),1μg/ml穿心莲内酯能抑制肿瘤坏死因子-α蛋白(P<0.05),12μg/ml抑制肿瘤坏死因子-α蛋白水平(P<0.01)。1μg/ml穿心莲内酯抑制白介素-12b mRNA水平(P<0.01),12μg/ml穿心莲内酯抑制白介素-12a mRNA水平(P<0.01),1μg/ml穿心莲内酯抑制白介素-12蛋白水平(P<0.01)。结论穿心莲内酯能抑制活化巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α和白介素-12。

14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯对1型糖尿病大鼠急性心肌缺血的保护作用

目的观察14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯对1型糖尿病急性心肌缺血大鼠心肌组织的保护作用。方法选取50只SD大鼠分为正常组和实验组,正常组10只大鼠,实验组40只大鼠均一次性腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)55 mg/kg,制造1型糖尿病动物模型,后选取造模成功的30只大鼠随机分为模型组、药物低剂量组、药物高剂量组,每组10只。药物低、高剂量组分别给予14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯100 mg·kg^(-1)·d^(-1)、200 mg·kg^(-1)·d^(-1),正常组和模型组分别腹腔注射等体积的0.9%氯化钠注射液,连续给药14 d。给药结束后24h,除正常组外,各组大鼠均皮下注射异丙肾上腺素(ISO)5 mg/kg,记录注射异丙肾上腺素后大鼠的Ⅱ导心电图,根据ST段(J点)的偏移判断心肌缺血的程度。断尾取血,测空腹血糖;腹主动脉取血,检测生化指标,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织的形态变化,蛋白质印迹法检测心肌核因子(NF)-_κBp65的表达,免疫组织化学检测肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达量。结果 14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯100 mg·kg^(-1)·d^(-1)、200 mg·kg^(-1)·d^(-1)组均能降低1型糖尿病大鼠急性心肌缺血时的空腹血糖,可降低肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH1)(P<0.05),200 mg·kg^(-1)·d^(-1)组能显著改善糖尿病急性心肌缺血大鼠心电图ST段的偏移程度(P<0.01),100 mg·kg^(-1)·d^(-1)组对ST段的偏移改善不明显(P>0.05)。100 mg·kg^(-1)·d^(-1)组、200 mg·kg^(-1)·d^(-1)组均能改善大鼠的心肌组织病理改变,显著减少TNF-α的表达(P<0.05)和NF-_κBp65的表达(P<0.05)。结论 14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯能降低糖尿病急性心肌缺血大鼠心肌组织中NF-_κBp65、TNF-α的表达,改善心肌组织的损伤。

玄参的化学成分研究

利用正、反相硅胶以及各种色谱技术进行分离,经理化性质和光谱分析鉴定中药玄参(Scrophularia ningpoensis)有效成分。从玄参(S.ningpoensis)根的乙醇提取物中分离了8个化合物,分别鉴定为14-去氧-12(R)-磺酸基穿心莲内酯(14-deoxy-12(R)-sulfo and rographolide,Ⅷ)、肉桂酸(cinnamic acid,Ⅰ)、对羟基肉桂酸(p-hydroxycinnamic acid,Ⅱ)、丁二酸(succinic acid,Ⅲ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅳ)、胡萝卜甙(daucosteol,Ⅴ)、葡萄糖(gluose,Ⅵ)、熊果酸(ursolic acid,Ⅶ)。Ⅷ为在玄参中首次发现的天然化合物。

引种不同来源穿心莲叶中穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯积累分析

目的观察不同来源穿心莲叶中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的积累,以期为品种选育提供依据。方法收集同一引种地各生长阶段的不同来源地穿心莲叶,以HPLC测定叶中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。结果经数据分析,穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯与生长期呈现明显的相关性。穿心莲内酯含量无论大叶型还是小叶型与始花期均成正相关,即开花期越晚,生长期越长,含量越高,大叶型相关系数的平均值为0.951,小叶型为0.899;脱水穿心莲内酯含量与始花期均成负相关,即开花期越晚,脱水穿心莲内酯含量越低,大叶型相关系数均值为-0.930,小叶型为-0.979。结论建议穿心莲品种应从大叶型中选育始花期晚的品种。

薄层扫描法测定穿心莲中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量

采用薄层扫描法测定了 15批穿心莲商品药材中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量 ,并进行了比较。结果脱水穿心莲内酯高于穿心莲内酯的占 2 6 .7% ,穿心莲内酯高于脱水穿心莲内酯的占 5 3.3% ,两者含量差异在±10 %以内的占 2 0 .0 %。

痔舒息洗剂质量标准研究

目的：制定痔舒息洗荆的质量标准。方法：用TLC法检测痔舒息洗剂中两面针和大黄药材。用高效液相色谱法测定制荆中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。结果：两面针和大黄在石油醚（30～60℃）一甲酸乙酯一甲酸（15：5：1）上层溶液中获得良好的分离；穿心莲内酯在7．52．-188μg范围内呈现良好的线性关系（r=0．99995），平均回收率为102．9％，RSD为1．68％（n=5）。脱水穿心莲内酯在在1．6～40μg范围内呈现良好的线性关系（r=0．99994），RSD为1．68％（n=5）。结论：所建立的质量标准为有效控制新制刺的质量提供指标和方法。

穿心莲中一种新内酯的立体结构研究

利用柱色谱及高效液相色谱等方法对穿心莲地上部分的乙酸乙酯提取物进行分离，得到１０个已知化合物和１个新化合物。

薄层扫描法测定清火栀麦片中脱水穿心莲内酯的含量

目的:建立清火栀麦片中脱水穿心莲内酯的含量测定方法。方法:双波长薄层扫描法。结果:脱水穿心莲内醋在1.025～5.125μg有良好线性关系,平均回收率101.5％,RSD=2.04％。结论:方法简便,快速,准确,重现性好。

穿心莲流膏中穿心莲内酯类成分在烘干过程中的变化

目的 :探讨在穿心莲流膏干燥过程中穿心莲内酯类成分变化规律。方法 :以HPLC法测定了烘干过程中不同处理条件下样品的穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。结果 :在烘干过程中 ,穿心莲内酯一直呈下降趋势 ,脱水穿心莲内酯在前 12h呈上升趋势 ,以后缓慢下降。结论

妇科千金分散片质量标准研究

目的妇科千金分散片的质量标准研究。方法采用薄层色谱法鉴别当归、穿心莲、党参,用高效液相色谱法测定穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。SHIMADZU VP-ODS(150×4.6mm,5μm)柱,以甲醇∶水=52∶48为流动相,穿心莲内酯检测波长为225nm,脱水穿心莲内酯检测波长为254nm。结果能准确对当归、穿心莲、党参进行定性鉴别;穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯分别在0.2004～2.0400μg与0.1172～0.7024μg呈良好线性关系。结论本法简便、快速、准确,灵敏,可作为该制剂质量控制的有效方法。

穿心莲内酯磺化物对支气管哮喘小鼠肺泡灌洗液炎性细胞、白细胞介素-12及白细胞介素-13表达的影响

目的探讨穿心莲内酯磺化物对哮喘小鼠肺泡灌洗液(BALF)内炎性细胞、IL-12及IL-13表达的影响。方法 BALB/c小鼠随机分为哮喘组、穿心莲内酯磺化物干预组和对照组。以卵清蛋白(OVA)致敏激发建立哮喘小鼠模型。计数BALF炎性细胞总数及分类,双抗体夹心ELISA法测定BALF中IL-12、IL-13水平,实时荧光定量PCR检测肺组织中IL-12 mRNA、IL-13 mRNA相对表达量。结果哮喘组、穿心莲内酯磺化物干预组、对照组BALF中白细胞总数分别为(203.09±43.60)×104L-1、(123.90±35.10)×104 L-1、(20.69±3.68)×104 L-1;嗜酸性粒细胞(EOS)数分别为(160.78±31.62)×104 L-1、(67.44±20.00)×104 L-1、(1.72±0.68)×104 L-1;巨噬细胞数分别为(33.85±2.29)×104 L-1、(14.12±2.10)×104 L-1、(17.24±1.97)×104 L-1;BALF中IL-12水平分别为(60.45±7.91)ng.L-1、(92.27±18.67)ng.L-1、(278.48±36.78)ng.L-1;BALF中IL-13水平分别为(570.20±62.98)ng.L-1、(299.71±31.64)ng.L-1、(230.22±27.83)ng.L-1;肺组织IL-12 p40 mRNA相对表达量分别为0.43±0.24、0.93±0.28、1.04±0.28;IL-13 mRNA相对表达量分别为44.80±9.51、11.27±5.47、1.07±0.47。上述指标,三组间比较差异均有统计学意义(Pa<0.01)。结论穿心莲内酯磺化物可抑制哮喘小鼠炎性细胞浸润和IL-13表达,促进IL-12表达拮抗哮喘呼吸道炎症。