糖尿病足感染患者外周血miR-155及miR-132表达水平及其与下肢血管病变程度的关系分析

目的:探究糖尿病足(DF)感染患者外周血miR-155及miR-132表达水平及其与下肢血管病变程度的关系。方法:选取2020年6月至2023年6月于我院就诊的62例单纯2型糖尿病(T2DM)患者,纳入T2DM组,选取同期于我院就诊的93例T2DM合并DF感染患者,纳入DF感染组。比较两组患者外周血miR-155、miR-132水平,分析DF感染患者外周血miR-155、miR-132水平与临床特征之间的关系。根据泛大西洋学会联盟(TASC)分级标准将DF感染患者A级、B级、C级、D级,比较不同下肢血管病变程度DF感染患者外周血miR-155、miR-132水平,采用Spearman法分析外周血miR-155、miR-132与下肢血管病变程度的相关性。结果:DF感染组miR-155水平高于T2DM组,miR-132水平低于T2DM组(P均<0.05);miR-155高表达组DF溃疡病程、创面面积、Wagner分级IV级占比大于低表达组,而miR-132高表达组DF病程、创面面积、Wagner分级IV级占比小于低表达组,8周后DF溃疡愈合率大于低表达组(P均<0.05);A级至D级DF感染患者miR-155水平依次升高,而miR-132水平依次降低(P均<0.05);Spearman分析显示,miR-155表达水平与下肢血管病变程度呈正相关,而miR-132表达水平与下肢血管病变程度呈负相关(P均<0.05)。结论:DF感染患者外周血miR-155高表达,与下肢血管病变程度呈正相关,miR-132低表达,与下肢血管病变程度呈负相关。

CDR132L改善高血压合并高脂血症小鼠血管重构和功能

[目的]观察CDR132L(miR-132反义核苷酸)对高血压合并高脂血症小鼠血管重构和功能的影响,并探究其可能的作用机制。[方法]随机选择30只8周龄雄性C57BL/6小鼠,分为三组:对照组、模型组和CDR132L组,每组10只。对照组接受标准饲料喂养,模型组和CDR132L组给予N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)和高脂食物联合喂养来诱导高血压和高脂血症。CDR132L组给予20 mg/kg CDR132L腹腔注射,1次/周,连续6周,对照组和模型组腹腔注射相同剂量的生理盐水溶液。尾套法测量小鼠尾动脉收缩压和舒张压,血脂、血糖检测由全自动生化分析仪完成,HE染色观察胸主动脉结构,血管环试验观察小鼠胸主动脉内皮依赖性舒张反应,定量基因扩增检测胸主动脉miR-132表达水平,Western blot检测胸主动脉Gab1和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达水平。[结果]与对照组相比,模型组小鼠收缩压、舒张压、血清甘油三酯、血清总胆固醇和体质量均明显升高(P<0.05),胸主动脉内膜凹凸不平,血管壁厚度不均,中膜平滑肌细胞的排列呈现不规则状态,血管壁上存在大量脂肪积聚,胸主动脉内皮依赖性舒张反应减低(P<0.05),胸主动脉miR-132表达水平明显增加(P<0.05),Gab1和eNOS蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组相比,CDR132L组小鼠收缩压、舒张压、血清甘油三酯、血清总胆固醇和体质量均无统计学差异(P>0.05),胸主动脉管腔内膜较完整光滑,血管壁厚度较均一,中膜平滑肌细胞的排列较为有序,血管壁仅存在少量脂肪积聚,胸主动脉内皮依赖性舒张反应增强(P<0.05),胸主动脉miR-132表达水平明显降低(P<0.05),Gab1和eNOS蛋白表达水平明显增加(P<0.05)。[结论]CDR132L能改善高血压合并高脂血症小鼠血管重构及内皮依赖性舒张功能,这一作用可能与其降低胸主动脉miR-132表达水平,进而上调胸主动脉Gab1和eNOS蛋白表达水平有关。

miR-132-3p/CAMTA1对I-125粒子处理的面神经损伤大鼠施万细胞的调控作用

目的探讨miR-132-3p通过钙调素结合转录因子1(CAMTA1)对I-125粒子处理的面神经损伤大鼠(FNI)中施万细胞的调控作用。方法用I-125粒子辐射大鼠施万细胞,并在细胞中转染miR-132-3p mimic、miR-132-3p inhibitor以及sh-CAMTA1。免疫荧光检测S100B和β-TubulinⅢ荧光强度。RT-qPCR检测miR-132-3p的表达,Western blot检测CAMTA1蛋白表达。EdU染色评估细胞增殖,Transwell检测细胞迁移。同时,构建FNI大鼠模型并在大鼠面部植入I-125粒子,HE、LFB染色以及IF染色评估大鼠面神经组织的病理损伤。StarBase v2.0数据库和双荧光素酶报告实验验证miR-132-3p和CAMTA1的靶向关系。结果S100B和β-TubulinⅢ在大鼠施万细胞中显著表达。I-125粒子辐射组中miR-132-3p表达降低(P<0.001),抑制细胞的增殖(P<0.001)和迁移(P<0.001)。过表达miR-132-3p或敲降CAMTA1显著促进施万细胞的增殖(P<0.001)和迁移(P<0.05),敲降miR-132-3p则具有相反的作用。机制研究显示,miR-132-3p靶向负调控CAMTA1。体内实验结果显示,过表达miR-132-3p通过抑制CAMTA1的蛋白表达,减弱I-125粒子对FNI大鼠面神经损伤的促进作用。结论过表达miR-132-3p抑制CAMTA1的表达,促进施万细胞的增殖和迁移,抑制I-125对FNI大鼠面神经损伤的促进作用。

Ki-67及IDH1-R132H在神经胶质瘤中的表达水平及临床意义

目的检测Ki-67及异柠檬酸脱氢酶-R132H(IDH1-R132H)在中枢神经系统胶质瘤细胞中的表达情况,进一步探讨其临床价值。方法收集手术切除并经病理确诊的脑胶质瘤患者41例为研究对象,取同期因颅脑外伤及自发性颅内出血行血肿清除开颅手术而获取的正常脑组织13例作空白对照。免疫组化法检测并比较Ki-67及IDH1-R132H在神经胶质瘤及对照组中蛋白表达情况。结果Ki-67在Ⅲ~Ⅳ级中的阳性率(93.7%)明显高于Ⅰ~Ⅱ级肿瘤组织(45.4%),两组差异有统计学意义(χ^(2)=11.748,P<0.05),在正常脑组织中表达为阴性;IDH1-R132H在Ⅱ和Ⅲ级中的阳性率(83.3%)明显高于Ⅰ和Ⅳ级肿瘤组织(47.0%),两组差异有统计学意义(χ^(2)=6.047,P<0.05),在正常脑组织中表达为阴性;IDH1-R132H阴性表达和阳性表达组中,Ki-67蛋白阳性表达率,两组差异有统计学意义(χ^(2)=4.055,P<0.05),进一步行相关性分析,差异有统计学意义(r=-0.314,P<0.05)。结论Ki-67和IDH1-R132H蛋白表达水平可指导脑胶质瘤患者临床实践,提供一定的参考依据。

阿尔茨海默病患者血清miR-132-3p、SMAD2水平及其临床意义

目的探讨微小RNA-132-3p(miR-132-3p)、SMAD2在阿尔茨海默病(AD)患者预后中的价值。方法收集2020年1月—2022年12月佳木斯市中心医院神经内科治疗的AD患者82例作为研究对象,根据6个月后预后情况分为预后良好组39例和预后不良组43例,记录患者基线资料。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-132-3p水平,采用酶联免疫吸附法检测血清SMAD2水平;采用Pearson及Spearman相关性分析检验预后不良AD患者miR-132-3p、SMAD2水平与基线资料的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-132-3p、SMAD2水平对AD患者预后不良的预测价值;采用Logistic多因素回归分析AD患者预后不良的影响因素。结果预后不良组血清SMAD2水平及AD分期中/晚期比例、CRP、Hcy高于预后良好组,血清miR-132-3p水平、HDL-C低于预后良好组(t/χ^(2)/P=7.362/<0.001、5.598/0.018、14.021/<0.001、12.593/<0.001、7.145/<0.001、6.655/<0.001)。预后不良AD患者血清miR-132-3p与AD分期、CRP、Hcy呈负相关,与HDL-C呈正相关(r=-0.513、-0.492、-0.507、0.485,P<0.001);预后不良AD患者血清SMAD2与AD分期、CRP、Hcy呈正相关,与HDL-C呈负相关(r=0.504、0.527、0.510、-0.496,P<0.001)。血清miR-132-3p、SMAD2单独及二者联合预测AD患者预后不良的AUC分别为0.828、0.835、0.910,二者联合预测价值大于二者单独检测(Z=2.148、1.964,P=0.032、0.046)。AD分期中/晚期、SMAD2高是影响AD患者预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=2.978(1.609~5.511)、2.826(1.776~4.497)],miR-132-3p高是影响AD患者预后不良的保护因素[OR(95%CI)=0.828(0.722~0.950)]。结论预后不良AD患者血清miR-132-3p表达降低,SMAD2表达升高,二者可能成为AD患者预后不良的血清标志物。

胃癌患者血清miR-216b和miR-132水平表达与临床预后的关系研究

目的 探讨胃癌患者血清miR-216b和miR-132水平表达与临床预后的关系。方法 选取2018年1月~2020年2月在佳木斯市中心医院就诊的87例胃癌患者作为胃癌组,选择同期87例健康体检者作为对照组。实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测血清中miR-216b和miR-132表达水平,分析胃癌患者血清miR-216b和miR-132表达水平与临床病理特征的关系。根据胃癌患者随访期间的生存或死亡情况,将胃癌患者分为预后良好组(生存,n=51)和预后不良组(死亡,n=36),用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清miR-216b和miR-132表达水平对胃癌患者预后的预测价值;COX回归分析影响胃癌患者预后的因素。结果 与对照组比较,胃癌组血清中miR-216b (0.69±0.20 vs 1.02±0.24)和miR-132 (0.73±0.19 vs 1.01±0.22)表达水平降低,差异具有统计学意义(t=9.853,8.984,均P<0.001)。分化程度为低分化、TNM分期为Ⅲ±Ⅳ期、有淋巴结转移、有远处转移的胃癌患者血清miR-216b,miR-132表达水平低于分化程度为中、高分化、TNM分期为Ⅰ±Ⅱ期、无淋巴结转移、无远处转移的胃癌患者,差异具有统计学意义(t=6.266,3.412,2.890,2.723;4.999,3.734,4.180,5.502,均P<0.05)。与预后良好组比较,预后不良组胃癌患者血清中miR-216b(0.56±0.16vs 0.78±0.23)和miR-132(0.60±0.11 vs 0.82±0.25)表达水平降低,差异具有统计学意义(t=4.952,4.946,均P<0.001)。血清miR-216b,miR-132及二者联合预测胃癌患者预后的曲线下面积(area under the cure,AUC)分别为0.797 (95%CI:0.706~0.889),0.832(95%CI:0.745~0.918)和0.900 (95%CI:0.836~0.964);敏感度和特异度分别为83.3%,68.6%;97.2%,62.7%和79.4%,72.5%;当血清miR-216b,miR-132预测胃癌患者预后不良的截断值分别为0.66,0.76时,预测的敏感度较高。COX回归分析显示,miR-216b低表达、miR-132低表达、分化程度为低分化、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、有淋巴结转移、有远处转移是胃癌患者预后不良的危险因素(均P<0.05)。结论miR-216b和miR-132在胃癌患者血清中呈低表达,二者可作为预测胃癌患者预后的有效生物标志物。

lncRNA KCNQ1OT1靶向调控miR-132-5p对帕金森病细胞损伤的保护机制

目的探究长链非编码RNA KCNQ1OT1(lncRNA KCNQ1OT1)靶向调控微小RNA-132-5p(miR-132-5p)对帕金森病细胞损伤的保护机制。方法SH-SY5Y细胞通过1-甲基-4-苯基吡啶阳离子(MMP+)诱导建立帕金森病细胞模型,检测SH-SY5Y细胞中lncRNA KCNQ1OT1、miR-132-5p表达、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平、凋亡率及Bcl-2、Bax蛋白表达,验证lncRNA KCNQ1OT1、miR-132-5p的调控关系。结果与Con组相比,MMP+组lncRNA KCNQ1OT1、miR-132-5p表达量较高(P<0.05)。低表达lncRNA KCNQ1OT1、干扰miR-132-5p表达均可减轻MMP+诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激及炎性损伤,抑制细胞死亡,lncRNA KCNQ1OT1靶向正调控miR-132-5p表达,miR-132-5p过表达逆转了lncRNA KCNQ1OT1低表达对MMP+诱导SK-N-SH细胞氧化应激、炎症损伤及凋亡。结论lncRNA KCNQ1OT1通过靶向抑制miR-132-5p表达减轻了MMP+诱导SK-N-SH细胞氧化应激、炎症损伤,抑制了细胞凋亡。

血清miR-181a-5p、miR-132-5p水平对慢性肾小球肾炎患者预后的预测价值

目的探讨血清微小RNA(miR)-181a-5p、miR-132-5p水平与慢性肾小球肾炎患者3年内预后的关系。方法选取2018年1月—2020年4月中国人民解放军联勤保障部队第九〇一医院肾内科收治的慢性肾小球肾炎患者128例作为慢性肾小球肾炎组(肾炎组)和体检健康者130例作为健康对照组(对照组)。检测2组肾功能指标、血清miR-181a-5p、miR-132-5p水平;分析血清miR-181a-5p、miR-132-5p与肾功能指标的相关性,影响慢性肾小球肾炎患者3年内预后不良的因素,血清miR-181a-5p、miR-132-5p及二者联合预测慢性肾小球肾炎患者3年内预后不良的价值。结果与对照组比较,肾炎组血清miR-181a-5p、miR-132-5p水平显著降低(t/P=47.860/<0.001、75.095/<0.001),血清尿酸(UA)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、胱抑素C(CysC)水平显著升高,肾小球滤过率(eGFR)水平显著降低(t=27.103、16.387、37.145、47.506、28.550,P均<0.001);血清miR-181a-5p与miR-132-5p水平呈正相关,血清miR-181a-5p和miR-132-5p均与UA、BUN、Scr、CysC水平呈负相关,与eGFR水平呈正相关(r=0.572、-0.506、-0.514、-0.493、-0.627、0.605、-0.498、-0.546、-0.481、-0.609、0.612,P均<0.001);与预后良好亚组比较,预后不良亚组血清UA、BUN、SCr、CysC水平显著升高,eGFR、血清miR-181a-5p、miR-132-5p水平显著降低(t=6.730、3.596、10.629、7.760、12.657、8.881、13.932,P均<0.001);高水平UA、高水平BUN、高水平SCr、高水平CysC、低水平eGFR、低水平miR-181a-5p、低水平miR-132-5p是影响慢性肾小球肾炎患者3年内预后不良的危险因素[OR(95%CI)=2.239(1.256~3.992)、2.768(1.237~6.194)、2.173(1.195~3.950)、1.806(1.204~2.709)、3.022(1.620~5.637)、2.565(1.349~4.879)、3.350(1.226~9.157)];血清miR-181a-5p、miR-132-5p及二者联合预测慢性肾小球肾炎患者3年内预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.832、0.801、0.904,其中二者联合预测的AUC显著高于各自单独预测AUC(Z/P=1.714/0.043、2.050/0.020)。结论慢性肾小球肾炎患者血清miR-181a-5p、miR-132-5p水平较低,二者与肾功能关系密切,二者联合有助于评估患者3年内预后情况。

急性缺血性脑卒中患者血清miR-132、sFasL及IL-1β水平与血管性痴呆的相关性

目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清微小RNA-132(miR-132)、可溶性细胞凋亡因子配体(sFasL)及白细胞介素-1β(IL-1β)水平与血管性痴呆(VD)的关系。方法选取2021年1月至2022年12月佳木斯市中心医院东院区神经内科收治的103例AIS患者,根据是否发生VD分为VD组(36例)和非VD组(67例)。统计两组患者基础资料,对比两组血清miR-132、sFasL、IL-1β水平。分析血清miR-132、sFasL及IL-1β对AIS患者发生VD的预测价值。结果VD组年龄≥60岁、多发性梗死、基底核梗死患者比例高于非VD组,脑梗死面积>非VD组(P<0.05)。VD组患者血清miR-132水平低于非VD组,而血清sFasL、IL-1β水平高于非VD组(P<0.05)。VD患者血清miR-132水平与MoCA评分呈正相关,血清sFasL、IL-1β水平与MoCA评分呈显著负相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,脑梗死面积、年龄、基底核区梗死、血清miR-132、sFasL及IL-1β水平是AIS患者发生VD的独立影响因素(P<0.05)。血清miR-132、sFasL、IL-1β及联合检测预测AIS患者发生VD的曲线下面积(AUC)为0.840、0.797、0.824、0.926,联合预测的AUC及敏感性显著高于单项检测(P<0.05)。结论血清miR-132、sFasL、IL-1β水平与AIS患者VD的发生有关,miR-132、sFasL联合IL-1β检测有助于早期预测VD发生风险。

miR-132-3p靶向调控PTEN/Akt信号通路对缺氧/复氧诱导海马神经元HT22细胞损伤的影响

目的研究miR-132-3p靶向调控第10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对缺氧/复氧(H/R)诱导海马神经元HT22细胞损伤的影响。方法体外培养HT22细胞并随机分为对照组、H/R组、阴性对照(miR-132-3p mimics阴性对照+空载质粒)组、miR-132-3p mimics组(miR-132-3p mimics)、PTEN敲低组(PTEN siRNA质粒)、miR-132-3p mimics+PTEN过表达组(miR-132-3p mimics+PTEN过表达质粒),除对照组外,其余各组进行H/R处理,同时进行分组转染,然后采用qRT-PCR实验、免疫印迹法检测各组细胞miR-132-3p与PTEN/Akt通路相关蛋白表达;采用MTT法、TUNEL染色分别检测各组细胞增殖与凋亡情况;采用试剂盒测量各组细胞活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、白细胞介素(IL)-6、IL-18水平;采用免疫印迹法检测各组细胞凋亡相关蛋白(Cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2)表达;采用双荧光素酶报告实验验证miR-132-3p对HT22细胞PTEN的靶向调控。结果与对照组相比,H/R组细胞miR-132-3p表达、p-Akt/Akt、GSH-Px与SOD水平、Bcl-2蛋白表达、细胞活力降低(P<0.05),细胞凋亡率、PTEN mRNA与蛋白表达、ROS相对水平、LDH产生水平、IL-6与IL-18水平、Bax与Cleaved Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。与H/R组相比,miR-132-3p mimics组、PTEN敲低组p-Akt/Akt、GSH-Px与SOD水平、Bcl-2蛋白表达、细胞活力升高(P<0.05),细胞凋亡率、PTEN mRNA与蛋白表达、ROS相对水平、LDH产生水平、IL-6与IL-18水平、Bax与Cleaved Caspase-3蛋白表达降低(P<0.05);阴性对照组细胞各指标无明显变化(P>0.05)。与miR-132-3p mimics相比,miR-132-3p mimics+PTEN过表达组p-Akt/Akt、GSH-Px与SOD水平、Bcl-2蛋白表达、细胞活力降低(P<0.05),细胞凋亡率、PTEN mRNA与蛋白表达、ROS相对水平、LDH产生水平、IL-6与IL-18水平、Bax与Cleaved Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。miR-132-3p可靶向下调HT22细胞PTEN表达。结论miR-132-3p可通过靶向下调PTEN表达而激活Akt信号,进而抑制H/R诱导的HT22细胞炎症与凋亡,缓解其细胞损伤。

异柠檬酸脱氢酶1 R132H突变型胶质细胞瘤及其维持端粒的代偿机制

异柠檬酸脱氢酶1 (isocitrate dehydrogenase 1,IDH1) R132H是Ⅱ-Ⅲ级胶质瘤和少突胶质细胞瘤中最常见的突变基因。绝大多数IDH1R132H突变型胶质细胞瘤并没有通过端粒酶的激活(在端粒酶逆转录酶TERT的介导下以RNA为模板延伸端粒长度)作为其端粒维持机制,而是通过一种依赖于同源重组(homologous recombination,HR)的代偿机制来维持端粒长度,该机制被称为端粒延长替代(alterative lengthening of telomere,ALT),目前关于ALT形成的机制尚不完全清楚。最近的研究表明,端粒Shelterin复合物组分RAP1和非同源DNA末端连接(non-homologous end joining,NHEJ)修复因子XRCC1的表达在IDH1R132H突变的胶质细胞瘤中均一致下调,导致端粒功能障碍并促进HR。同时,IDH1R132H突变通过下调去甲基化酶KDM4B的活性水平,与α地中海贫血伴智力低下综合征X连锁(alpha thalassemia/mental retardation syndrome X-linked,ATRX)基因缺失协同作用促进ALT途径。基于这些研究,本文就突变IDH1R132H的表达如何引发端粒功能障碍并改变端粒处的DNA修复途径偏好,进而与ATRX丢失协同作用促进ALT发生的机制进行综述。为临床靶向治疗IDH1R132H突变型胶质细胞瘤提供参考。

循环血微小RNA-132和微小RNA-195在慢性阻塞性肺疾病相关肺动脉高压患者中的表达及意义

目的探讨循环血微小RNA(miRNA,miR)-132和miR-195在慢性阻塞性肺疾病(COPD)相关肺动脉高压(PH)患者中的表达及意义。方法纳入COPD相关PH患者108例作为观察组,同期于我院就诊的COPD但无COPD相关PH患者97例作为对照组。比较两组患者循环血miRNA-132和miR-195相对表达水平、第1秒用力呼气容积(FEV_(1))占预计值的百分比(FEV_(1)%)、FEV_(1)/用力呼气容积(FVC)及肺动脉收缩压(sPAP)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析循环血miRNA-132和miRNA-195对COPD相关PH的预测价值;采用Pearson相关分析评估循环血miR-132和miR-195与FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC及sPAP的相关性;采用多元logistic回归分析评估COPD相关PH发生的影响因素。结果观察组患者循环血miR-132相对表达水平及sPAP均高于对照组,循环血miRNA-195相对表达水平及FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC均低于对照组(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,循环血miRNA-132、miRNA-195预测COPD相关PHmiR的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.894(95%CI 0.863~0.947)、0.912(95%CI 0.882~0.955)。Pearson相关分析结果显示,COPD相关PH患者循环血miR-132与FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC均呈负相关,与sPAP呈正相关;COPD相关PH患者循环血miR-195与FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC均呈正相关,与sPAP呈负相关(P<0.001)。多元logistic回归分析结果显示,循环血miR-132和miR-195均为COPD相关PH发生的独立危险因素(P<0.05)。结论COPD相关PH患者循环血miR-132呈高表达,而miR-195呈低表达,且二者对COPD相关PH的预测价值良好,为其独立危险因素。

基于生物信息学分析跨膜蛋白132A在肝癌中的表达及其临床意义

目的:基于公共数据库探究跨膜蛋白132A(TMEM132A)在肝癌中的表达模式及临床意义。方法:利用肿瘤基因组图谱并基于基因表达数据库优选其中的GSE14520、GSE60502数据集分析TMEM132A在肝癌与癌旁组织中的m RNA表达水平,及与临床因素的相关性。通过HPA数据库获取TMEM132A在组织中的免疫组织化学结果。利用Kaplan-Meier法探讨TMEM132A与患者预后的相关性。运用受试者操作特征曲线探究TMEM132A是否可以作为诊断指标。通过癌症药物敏感基因组学预测TMEM132A对化疗药物的药物敏感性。通过单样本GSEA、TIMER、STORMAL SCORE和免疫检查点热图,对TEME132A进行免疫分析。linkedomics网站用于对TMEM132A差异基因进行基因集富集分析。利用STRING数据库预测TMEM132A的互作蛋白。结果:TMEM132A在肝癌组织表达显著高于癌旁组织(P<0.05),定位于胞浆、胞膜。TMEM132A高表达与肿瘤分期、分级、甲胎蛋白水平和体重显著正相关。TMEM132A高表达提示患者预后不良,可作为准确的诊断指标。TMEM132A对多种化疗药物敏感,且被多种免疫细胞浸润,可以作为药物治疗及免疫治疗的研究靶点。癌组织中TMEM132的启动子甲基化水平显著降低。TMEM132A影响细胞黏附,脂肪酸代谢等信号通路。结论:TMEM132A在肝癌中高表达,与患者预后不良正相关。

肺超声特征及血清miR-132、miR-432水平与耐药肺结核抗结核疗效的关系

目的探讨肺超声特征及血清微小RNA-132(miR-132)、微小RNA-432(miR-432)与耐药肺结核(DR-PTB)抗结核疗效的关系。方法选取2020年1月至2023年4月黑龙江省传染病防治院收治的85例DR-PTB患者作为研究对象。所有患者入院后均进行规范化抗结核治疗,治疗前进行肺超声检查,分析肺超声特征,比较不同肺超声特征患者血清miR-132、miR-432水平。统计治疗6个月后抗结核疗效,根据结核分枝杆菌培养结果,将患者分为疗效良好组和疗效不良组,比较疗效良好组和疗效不良组临床资料。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-132、miR-432对DR-PTB患者抗结核疗效不良的预测价值。结果85例DR-PTB患者中,胸膜下实变:单个29例(34.12%),多个56例(65.88%);胸膜下结节64例(75.29%);胸膜增厚68例(80.00%);空洞38例(44.71%);胸腔积液20例(23.53%);肺尖实变46例(54.12%)。多个胸膜下实变、有胸膜下结节、有胸膜增厚、有空洞、有胸腔积液、有肺尖实变患者患者血清miR-132、miR-432水平高于单个胸膜下实变、无胸膜下结节、无胸膜增厚、无空洞、无胸腔积液、无肺尖实变患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结核菌培养结果显示,疗效不良组有37例患者,疗效良好组有48例患者。疗效不良组复治、耐多药、有空洞患者比例及血清miR-132、miR-432水平高于疗效良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-132、miR-432单独预测DR-PTB患者抗结核疗效不良的曲线下面积(AUC)分别为0.768、0.744;血清miR-132、miR-432联合预测DR-PTB患者抗结核疗效不良的AUC为0.921;联合预测的AUC大于血清miR-132、miR-432单独预测的AUC(Z_(联合-miR-132)=2.368,P=0.018;Z_(联合-miR-432)=2.723,P=0.007)。结论血清miR-132联合miR-432对DR-PTB患者抗结核疗效不良的预测价值较高,且高于单项指标的预测价值。

微小RNA-132在胰腺癌患者外周血中的表达及其临床意义

目的研究微小RNA-132在胰腺癌患者外周血中的表达和临床意义。方法选择83例胰腺癌患者作为观察组,另外选择接受治疗的50例胰腺炎患者和50例健康体检者作为对照组Ⅰ组和对照Ⅱ组。所有研究对象均采用Trizol法提取细胞当中的微小RNA-132,并通过反转录试剂盒反转录成cDNA,根据实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)试剂盒说明书配制反应体系进行扩增,计算miR-132的相对表达水平。对比三组微小RNA-132相对表达水平,分析微小RNA-132相对表达对胰腺癌的诊断价值。结果①三组微小RNA-132相对表达水平对比,差异有统计学意义(P<0.05);观察组外周血中的微小RNA-132相对表达水平(2.87±0.60)明显高于对照组Ⅰ组的(2.50±0.52)和对照Ⅱ组的(2.02±0.42),对照Ⅰ组高于对照组Ⅱ组,差异有统计学意义(P<0.05)。②受试者工作特征曲线(ROC)分析可得,微小RNA-132诊断胰腺癌的最佳临界点为2.79,外周血的微小RNA-132相对表达水平达到2.79,其诊断胰腺癌的曲线下面积(AUC)为0.907,95%CI=(0.864,0.949),敏感度为79.50%,特异度为90.00%,P<0.05。结论胰腺癌患者外周血中的微小RNA-132有明显上调趋势,可将微小RNA-132当做是对胰腺癌患者进行潜在诊断的主要标记物。

血浆miR-132、miR-134联合miR-124对抑郁症患者的预测价值及疗效评估

目的探讨血浆微小核糖核酸(miR)-132、miR-134联合miR-124对抑郁症患者的预测价值及疗效评估。方法选取2021年6月至2023年7月在该院精神病科确诊抑郁症患者75例作为研究组,另选取同期于该院体检的健康者75例作为对照组。检测两组血浆miR-132、miR-134及miR-124相对表达水平,并对两组治疗8周前后miR-132、miR-124、miR-134、脑源性神经营养因子(BDNF)、炎症因子[白细胞介素(IL)-6、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平进行比较。采用多元线性回归分析构建联合预测模型。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血浆miR-132、miR-134、miR-124及联合预测在诊断抑郁症患者中的应用价值。结果研究组血浆miR-132、miR-124相对表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组血浆miR-134相对表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血浆miR-132、miR-134、miR-124及联合预测诊断抑郁症的曲线下面积分别为0.8588、0.8519、0.7631、0.9714。与治疗8周前比较,治疗8周后血浆miR-132、miR-124、IL-6、IL-18、TNF-α水平明显下调,miR-134、BDNF水平明显上调。结论miR-132、miR-134及miR-124与抑郁症的发生密切相关,三者联合可用于预测、早期诊断抑郁症患者及评估抑郁症患者的药物疗效。

PF-127水凝胶联合骨髓间充质干细胞外泌体来源miR-132诱导成骨分化修复牙槽骨缺损

目的:探究PF-127水凝胶联合骨髓间充质干细胞外泌体来源miR-132诱导成骨分化对牙槽骨缺损的修复作用。方法:培养骨髓间充质干细胞,(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),并转染anti-miR-132、anti-miR-NC质粒。制备BMSCs来源外泌体(bone mesenchymal stem cells-exosomes,BMSCs-exo),蛋白质印迹法鉴定表达标志物。制备PF-127水凝胶和BMSCs-Exo复合物,PKH67标记法检测BMSCs的摄取;茜素红染色检测BMSCs的成骨能力;逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测细胞中miR-132表达和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)mRNA表达。建立牙槽骨缺损大鼠模型,将大鼠随机分为PF-127水凝胶组、PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-NC组和PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-132组。微型计算机断层扫描(Micro-computed tomography,micro-CT)评估牙槽骨缺损情况;蛋白质印迹法检测牙槽骨组织中ALP、OCN、Runx2蛋白表达。结果:anti-miR-132组BMSCs中miR-132表达明显低于anti-miR-NC组(P<0.05),提示anti-miR-132成功转染至BMSCs中。BMSCs-exo-anti-miR-NC组和BMSCs-exo-anti-miR-132组中外泌体标志物CD9和CD63显著表达。和BMSCs-exo-anti-miR-NC组相比,BMSCs-exo-anti-miR-132组中miR-132表达明显降低(P<0.05)。和PF127水凝胶组相比,BMSC-exo-anti-miR-NC组、PF127水凝胶+BMSC-exo-anti-miR-NC组、PF127水凝胶+BMSC-exo-anti-miR-132组中miR-132表达均明显降低,茜素红染色相对活性、细胞中Runx2、ALP和OCN mRNA表达均明显增加,且PF127水凝胶+BMSC-exo-anti-miR-132组变化最显著(P<0.05)。和Control组相比,PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-NC组和PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-132组BV/TV比值、BMD、Tb.N和Tb.Th及细胞中Runx2、ALP、OCN蛋白表达均明显升高,Tb.Sp明显降低(P<0.05),且PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-132组变化最显著。结论:PF-127水凝胶联合骨髓间充质干细胞来源外泌体来源干扰miR-132表达可促进骨髓间充质干细胞的成骨分化,从而促进牙槽骨缺损大鼠的修复。

探讨血清外泌体miRNA-132及SIRT1在2型糖尿病伴轻度认知障碍中的诊断价值

目的本研究旨在探索血清外泌体miRNA-132及沉默信息调节因子1(SIRT1)在2型糖尿病(T2DM)伴轻度认知障碍(MCI)患者中的表达水平,以及作为诊断T2DM伴MCI的诊断价值。方法本实验选取泰州市人民医院内分泌科60例2型糖尿病患者,其中认知正常组(T2DM+NCI)30例,轻度认知障碍组(T2DM+MCI)30例,检测血清外泌体miRNA-132及SIRT1的表达水平。结果与T2DM+NCI组相比,T2DM+MCI组患者中性别、年龄、受教育程度、LPA有差异性,具有统计学意义(P<0.05);且血清外泌体miRNA-132、血清SIRT1表达水平降低,亦具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示血清外泌体miRNA-132在单独检测时,其灵敏度为0.933,特异度为0.5,曲线下面积(AUC)为0.727。血清SIRT1在单独检测时,灵敏度为0.433,特异度为1,曲线下面积(AUC)为0.673。两者联合检测时,灵敏度为0.867,特异度为0.6,曲线下面积(AUC)为0.752。结论与T2DM+NCI组相比,T2DM+MCI组患者中miRNA-132、SIRT1表达水平同向降低。血清外泌体miRNA-132及血清SIRT1对诊断T2DM伴轻度认知障碍具有一定的意义,二者联合检测时诊断价值更高。

Circ-SMG6调节miR-132-3p/BTG2轴对缺氧/复氧诱导心肌细胞损伤的影响

目的探讨Circ-SMG6对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响及对miR-132-3p/BTG2轴的调节作用。方法心肌H9c2细胞分为:NC组(不做任何处理)、缺氧/复氧组、缺氧/复氧+si-NC组、缺氧/复氧+si-CircSMG6组、缺氧/复氧+si-Circ-SMG6+anti-NC组、缺氧/复氧+si-Circ-SMG6+anti-miR-132-3p组。RT-qPCR检测miR-132-3p、Circ-SMG6表达;Western blot检测BTG2、Bcl-2、Bax、cleaved-Caspase-3蛋白水平;ELISA法检测SOD、MDA以及IL-1β、IL-6、TNF-α水平CCK8法测定心肌细胞增殖;流式细胞术检测心肌细胞凋亡;双荧光素酶验证Circ-SMG6与miR-132-3p,miR-132-3p与BTG2靶向关系。结果与NC组相比,缺氧/复氧组、缺氧/复氧+si-NC组BTG2 mRNA及蛋白、Circ-SMG6水平、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α含量、凋亡率及Bax、cleavedCaspase-3蛋白水平显著增加(P<0.01),miR-132-3p水平、SOD含量、72 h的细胞活力、Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.01)。与缺氧/复氧组相比,缺氧/复氧+si-Circ-SMG6组BTG2蛋白、Circ-SMG6水平、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α含量、凋亡率及Bax、cleaved-Caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.01),miR-132-3p水平、SOD含量、72 h的细胞活力、Bcl-2蛋白水平显著增加(P<0.01)。与缺氧/复氧+si-Circ-SMG6组相比,缺氧/复氧+si-Circ-SMG6+antimiR-132-3p组BTG2蛋白、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α含量、凋亡率及Bax、cleaved-Caspase-3蛋白水平显著增加(P<0.01),miR-132-3p水平、SOD含量、72 h的细胞活力、Bcl-2蛋白水平显著下降(P<0.01)。结论敲低CircSMG6可能通过调节miR-132-3p/BTG2轴减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤。

荜茇酰胺通过miR-132-3p调控FOXO1改善脓毒症肾损伤机制研究

目的探究荜茇酰胺(PPL)对脓毒症肾损伤的作用及其可能机制。方法24只雄性C57BL/6小鼠随机数字表法分为四组:Sham组、盲肠结扎穿刺(CLP)组、CLP+PPL-L组和CLP+PPL-H组,每组6只。使用CLP法构建脓毒症小鼠模型,CLP+PPL-L组和CLP+PPL-H组小鼠分别按5、10 mg/kg剂量灌胃PPL溶液,CLP组和Sham组小鼠灌胃等量生理盐水。随后使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠外周血肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)表达情况以评估模型构建,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肾组织形态。使用脂多糖(LPS)刺激人近端肾小管上皮细胞(HK-2)构建体外脓毒症细胞模型,随后使用CCK-8和流式细胞术分别检测细胞活性和凋亡水平,qRT-PCR检测miR-132-3p表达量,蛋白免疫印迹法检测叉头框蛋白O1(FOXO1)蛋白的表达情况。使用双荧光素酶实验检测miR-132-3p与FOXO1靶向结合关系。结果小鼠体内实验中,与Sham组比较,CLP组小鼠TNF-α[(13.26±2.15)ng/mL比(2.61±0.33)ng/mL,P<0.01]、IL-6[(6.56±0.84)ng/mL比(1.20±0.13)ng/mL,P<0.01]、MCP-1[(55.35±5.13)ng/mL比(20.85±2.09)ng/mL,P<0.01]表达上升,病理显示肾损伤显著,miR-132-3p表达显著上升[(2.84±0.24)比(1.00±0.03),P<0.01],FOXO1蛋白表达下降;与CLP组比较,CLP+PPL-L组和CLP+PPL-H组小鼠TNF-α[(9.55±0.57)ng/mL、(6.69±1.13)ng/mL比(13.26±2.15)ng/mL,P<0.01]、IL-6[(4.79±0.35)ng/mL、(3.24±0.35)ng/mL比(6.56±0.84)ng/mL,P<0.01]、MCP-1[(44.68±3.80)ng/mL、(29.79±4.10)ng/mL比(55.35±5.13)ng/mL,P<0.01]表达下降,病理显示肾损伤有所缓解,miR-132-3p表达显著下降[(2.36±0.28)、(1.44±0.18)比(2.84±0.24),P<0.05或P<0.01],FOXO1蛋白表达上升。在体外细胞模型中,PPL能显著提高LPS刺激下肾小管细胞活性[(67.11±3.48)%、(88.53±4.42)%比(50.23±4.44)%,P<0.05或P<0.01],抑制凋亡水平,并且过表达miR-132-3p会抑制PPL对LPS刺激下细胞的影响。同时,在体外细胞中证实了miR-132-3p对FOXO1的靶向调控作用。结论PPL可能通过miR-132-3p调控FOXO1的表达从而缓解脓毒症肾损伤。