类风湿关节炎患者检测血清14-3-3η蛋白和自身抗体的临床意义

目的:探讨血清14-3-3η蛋白与自身抗体检测对类风湿关节炎(RA)诊断的临床价值。方法:收集134例RA患者、90例非RA关节病变患者及同期40例健康体检者血清样本,采用ELISA和速率比浊法分别检测14-3-3η蛋白、抗CCP抗体(anti-CCP)、抗RA33抗体(anti-RA33)、抗Sa抗体(anti-Sa)和类风湿因子(RF)含量,并分析其对RA的诊断价值。结果:(1)血清14-3-3η蛋白、anti-CCP、anti-RA33、anti-Sa、RF水平在RA组均显著高于非RA组和对照组,组间差异都具有统计学意义;(2)绘制各指标ROC曲线,14-3-3η蛋白、anti-CCP、anti-RA33、anti-Sa、RF曲线下面积(AUC)分别0.831、0.852、0.615、0.706和0.739,均P<0.01;其中14-3-3η蛋白和anti-CCP达到中等以上诊断价值,对应cutoff值分别为2.59 ng/ml和24.10 U/ml;(3)所有指标中anti-Sa特异度最强为97.69%,RF灵敏度最高为83.58%;14-3-3η诊断RA的特异度为91.54%仅稍次于anti-Sa和anti-RA33抗体,但其敏感度较anti-Sa和anti-RA33均高。结论:14-3-3η蛋白、anti-CCP、anti-RA33、anti-Sa和RF在RA中均显著升高,对RA的诊断都有一定的价值。同时,14-3-3η诊断RA的敏感度和特异度相比自身抗体更有一定优势,可以作为辅助诊断RA的指标。

14-3-3η对类风湿关节炎的诊断价值及其与骨代谢的相关性分析

目的探讨14-3-3η检测对类风湿关节炎(RA)的诊断价值,并分析其与RA患者骨代谢水平的相关性。方法纳入2016年9月-2017年12月南昌大学第二附属医院收治的113例RA患者为RA组,40例骨性关节炎(OA)和37例强直性脊柱炎(AS)患者为non-RA组,以及该院同期健康体检者77例为健康对照组。ELISA法检测14-3-3η水平,绘制受试者工作曲线(ROC),通过曲线下面积(AUC)评价14-3-3η对RA的诊断价值并确定截断值。根据血清14-3-3η蛋白水平将RA患者分为3组,对比不同14-3-3η水平患者Ⅰ型胶原氨基端前肽(PINP)、β-胶原降解产物(β-CTx)及骨钙素(OC)等骨代谢指标水平。对RA患者14-3-3η、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸多肽抗体(anti-CCP)及骨代谢相关指标进行相关性分析。结果 14-3-3η诊断RA的AUC为0.845,与RF及anti-CCP联合诊断RA的AUC为0.907;PINP和β-CTx水平在高14-3-3η组明显升高,二者与14-3-3η的相关系数(r)分别为0.817和0.808。结论 14-3-3η检测有助于RA诊断,联合RF和anti-CCP可提高RA诊断水平,并能反映RA患者的骨代谢水平。

血清RF、anti-CCP及14-3-3η蛋白联合检测对类风湿关节炎的诊断价值

目的评价血清抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)、类风湿因子(RF)及14-3-3η蛋白联合检测对类风湿关节炎(RA)的诊断价值。方法选取RA患者94例作为RA组,年龄、性别相匹配的疾病对照组和健康对照组各40例。采用酶联免疫吸附试验检测所有受试者的血清14-3-3η和anti-CCP,散射免疫比浊法检测RF水平。将以上3个指标分别进行串联和并联试验,采用敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度及约登指数(YI)分析各试验方案对RA的诊断效能。结果在anti-CCP、RF及14-3-3η蛋白3个指标中,anti-CCP的准确度(87.4%)、YI(0.753)最高,同时敏感度(84.0%)也最高,是最好的RA诊断指标;双项目检测方案中,anti-CCP与RF并联的准确度(87.4%)和YI(0.742)最高,同时敏感度(90.4%)也较高,是较为理想的组合;三项目检测方案中,[(14-3-3η+anti-CCP)/RF]、[(14-3-3η+RF)/anti-CCP]、[(14-3-3η/RF)+anti-CCP]和[(14-3-3η+anti-CCP)/(14-3-3η+RF)/(anti-CCP+RF)]的准确度(87.4%、87.9%、87.4%、87.9%)及YI(0.745、0.756、0.757、0.760)在联合检测方案中较高,而[(14-3-3η+antiCCP)/RF]、[(14-3-3η+RF)/anti-CCP]和[(14-3-3η+anti-CCP)/(14-3-3η+RF)/(anti-CCP+RF)]的敏感度(88.3%、89.4%、87.2%)较[(14-3-3η/RF)+anti-CCP]的敏感度(81.9%)高,是较为理想的组合。结论在anti-CCP、RF及14-3-3η蛋白3个指标中,anti-CCP准确度、YI和敏感度最高。联合检测方案[(14-3-3η+anti-CCP)/RF]、[(14-3-3η+RF)/anti-CCP]、[(14-3-3η+anti-CCP)/(14-3-3η+RF)/(anti-CCP+RF)]的准确度和YI较高,兼有较高的敏感度。

血清14-3-3η蛋白水平在类风湿关节炎和脊柱关节病诊断中的临床意义

目的对于类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)与脊柱关节病(spondyloarthropathy,Sp A)的诊断标准中,实验室指标的敏感度及特异度均有限,易造成误诊。文中探讨血清14-3-3η蛋白水平在RA和Sp A中的临床意义。方法回顾性分析2012年11月至2014年8月期间安徽医科大学第一附属医院风湿科住院的84例RA患者(RA组)、93例Sp A患者(Sp A组)和体检中心按年龄、性别、身高、体重相匹配的80例正常人群(对照组)。采用ELISA法分别测定上述研究对象血清14-3-3η蛋白浓度。同时对67例RA患者均采用DEXA法测定其股骨和腰椎部位骨密度;53例Sp A患者行骶髂关节MRI扫描并进行SPARCC评分。结果 1血清14-3-3η蛋白在RA组[3.91(1.69,6.51)]和Sp A组[0.52(0.32,0.92)]中水平均明显高于正常对照组[0.20(0.14,0.29)],差异有统计学意义(P<0.01),且RA组中水平亦明显高于Sp A组(P<0.01)。2RA组中血清14-3-3η蛋白浓度阳性率高达91.7%,其次为Sp A组(33.3%),对照组血清14-3-3η蛋白阳性率最低(5%),3组阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.01)。3相关性分析结果显示,RA组血清14-3-3η蛋白与患者疼痛积分(visual analogue scale,VAS)评分、健康评价问卷(health assessment questionnaire,HAQ)评分、血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、CRP均呈正相关(P<0.05),与腰椎及股骨区各骨密度值均呈负相关(P<0.05)。Sp A组患者血清14-3-3η蛋白仅与ESR呈正相关(P<0.05)。结论血清14-3-3η蛋白可作为RA及Sp A诊断及鉴别诊断的参考指标,且可能在RA中的临床意义更大;14-3-3η蛋白与RA患者临床症状、疾病活动性及骨质疏松的发生相关。

血清14-3-3η蛋白水平在类风湿关节炎及其合并骨质疏松中的临床意义

目的:探讨血清14-3-3η蛋白水平在类风湿关节(RA)及其合并骨质疏松(OP)中的临床意义。方法:收集259例RA患者和80例正常对照组;采用ELISA法测定血清14-3-3η蛋白浓度,同时采用DEXA法测定RA患者骨密度(BMD)。结果:(1)血清14-3-3η蛋白在RA组中水平及阳性率明显高于正常对照组(P<0.000 1);(2)ROC曲线显示:当血清14-3-3η蛋白截断点值为0.879 ng/m L时,其对早期RA诊断的敏感性为91.7%,特异性为99.6%(AUC=0.917,P<0.000 1);(3)线性相关:血清14-3-3η蛋白水平在早期RA患者骨量正常组、骨量减少组、骨质疏松组间差异有统计学意义(χ2=7.974,P=0.019)。结论:血清14-3-3η蛋白在RA(尤其是早期RA)患者中明显升高,且与早期RA患者病情及OP密切相关。

血清14-3-3η、DD、anti-CCP及CRP检测对鉴别诊断RA的临床意义

目的探讨14-3-3η蛋白、D-二聚体(DD)、抗环瓜氨酸多肽抗体(anti-CCP)及C反应蛋白(CRP)联合检测对类风湿关节炎(RA)鉴别诊断的临床意义。方法采用ELISA法检测3组患者的14-3-3η蛋白、anti-CCP,胶乳免疫比浊法检测DD,速率散射比浊法检测CRP,比较分析各检测指标对RA鉴别诊断的价值。结果 RA组血清各指标和指标阳性率均显著高于其他风湿性疾病组和对照组(P<0.05);14-3-3η蛋白、DD和anti-CCP的ROC曲线下面积分别为0.971、0.779及0.863(P<0.05),对诊断RA准确性较高;DD和anti-CCP并联时敏感性最高,为97.68%,DD和anti-CCP串联时特异性最高,为99.42%。结论 14-3-3η蛋白、DD水平在RA患者中显著升高,是诊断RA的理想指标,DD和antiCCP联合检测对鉴别诊断RA有较大价值。

Anti-MCV、14-3-3η蛋白和anti-RA33等在类风湿关节炎检测中的意义

目的:探究抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(anti-MCV)、14-3-3η蛋白、抗RA33抗体(anti-RA33)和类风湿因子(RF)在类风湿关节炎(RA)检测中的意义。方法:选取南昌大学第二附属医院161例RA患者、151例非RA患者及40例健康体检者,采用ELISA法检测anti-MCV、14-3-3η蛋白和anti-RA33,采用速率散射比浊法检测RF,并进行统计分析和临床评价。结果:RA组血清各指标水平经非参数Kruskal-Wallis检验统计分析,显著高于非RA组(P<0.01)和健康对照组(P<0.01);anti-MCV对RA检测结果灵敏度最高为86.34%,anti-RA33灵敏度最低为37.62%;anti-MCV、14-3-3η蛋白、anti-RA33和RF的ROC曲线下面积分别为0.873、0.852、0.664和0.762(P<0.05),其中anti-MCV对RA的诊断效能最大。结论:anti-MCV、血清14-3-3η蛋白、anti-RA33和RF对RA具有较高的诊断价值,anti-MCV诊断价值最高。

14-3-3η抑制TRIF和IKKε激活的IRF3的转录活性

为了研究14-3-3蛋白是否参与了IRF3信号通路,以及14-3-3蛋白质对IRF3转录活性的影响,在真核细胞293T中表达14-3-3蛋白质的三种亚型,并且通过双荧光报告系统研究14-3-3蛋白对TRIF和IKKε激活的IRF3转录活性的影响。结果显示14-3-3蛋白质能够在真核细胞293T中正确表达,过表达14-3-3η能够抑制TRIF和IKKε激活的IRF3转录活性,而且能够直接抑制IRF3转录活性。

检测血清14-3-3η蛋白对RA与SpA患者的临床意义

目的研究血清14-3-3η蛋白运用于检测类风湿关节炎(RA)和脊柱关节病(SpA)的临床意义。方法选取本院2015年4月至2018年7月收治的60例类风湿关节炎患者(RA组)和75例脊柱关节病患者(SpA组)作为研究对象,另选择同期健康体检者80名作为对照组,分别进行血清14-3-3η蛋白检测,分析检测结果。结果RA组阳性率为96.67%,明显高于SpA组(60.00%)和对照组(7.50%),差异有统计学意义(P<0.05)。RA组早期患者血清14-3-3η蛋白水平与非早期比较差异无统计学意义,但SpA组早期血清14-3-3η蛋白水平与非早期比较差异有统计学意义(P<0.05),且RA组早期、非早期血清14-3-3η蛋白水平均高于SpA组(P<0.05)。结论血清14-3-3η蛋白运用于RA、SpA中具有较高的诊断价值,可判断疾病类型,值得临床推广运用。

14-3-3η蛋白联合抗MCV抗体检测在RA诊断中的应用

目的:探讨14-3-3η蛋白和抗突变型瓜氨酸波形蛋白(Mutated citrullinated vimentin,MCV)抗体在类风湿关节炎患者(Rheumatoid arthritis,RA)血清中的表达情况,评价两者联合检测对RA诊断的临床意义。方法:在同一时间段内收集50例类风湿性关节炎(RA)患者,45例骨关节炎(OA)患者,40例健康对照者(HC),应用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清中抗MCV抗体和14-3-3η蛋白的含量,同时与临床常用指标抗环瓜氨酸多肽抗体(anti-cyclic peptide containing citrulline,anti-CCP)进行比较,利用SPSS22.0软件对实验数据进行统计分析。结果:RA组中的14-3-3η蛋白和抗MCV抗体阳性率分别为68.00%、74.00%,均高于OA组和HC组,单独检测14-3-3η蛋白和抗MCV抗体对RA诊断的灵敏度均远低于抗CCP抗体,但14-3-3η蛋白和抗MCV抗体联合检测,灵敏度和特异性都得到了显著性提高,其敏感性为91.68%,特异性高达99.17%。结论:14-3-3η蛋白和抗MCV抗体联合检测,并结合抗CCP抗体的表达水平,能帮助提高类风湿关节炎的诊断准确率。

托法替布联合甲氨蝶呤治疗类风湿性关节炎的效果及对血清14-3-3η蛋白、RF的影响

目的:分析托法替布联合甲氨蝶呤治疗类风湿性关节炎(RA)的效果及对血清14-3-3η蛋白、类风湿因子(RF)的影响。方法:选取邢台市人民医院2019年10月-2021年1月收治的RA患者168例,应用随机数字表法分成两组,对照组(n=84)应用甲氨蝶呤治疗,观察组(n=84)采用托法替布联合甲氨蝶呤治疗。治疗前、疗程结束后抽取患者空腹静脉血,采用酶联免疫吸附法检测血清14-3-3η蛋白水平,采用散射免疫比浊法检测类风湿因子(RF)水平。比较两组血清14-3-3η蛋白、RF水平,疗效[采用美国风湿病学会(ACR)疗效评价标准进行评价]及不良反应发生情况。结果:两组疗效比较,观察组ACR20率为90.48%,ACR50率为60.71%,ACR70率为41.67%,而对照组分别为70.24%、33.33%、21.43%,观察组治疗后ACR20率、AVR50率、ACR70率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后血清14-3-3η蛋白、RF水平均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后血清14-3-3η蛋白、RF分别为(0.23±0.07)mg/L、(86.47±10.39)IU/ml,对照组治疗后血清14-3-3η蛋白、RF分别为(0.36±0.09)mg/L、(125.73±14.53)IU/ml,观察组血清14-3-3η蛋白、RF水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗期间均无明显不良反应病例。结论:托法替布联合甲氨蝶呤可降低RA患者血清14-3-3η蛋白、RF水平,提高疗效,而且不增加不良反应,具有较高的安全性。

14-3-3η通过抑制内质网应激反应对H9c2心肌细胞的保护作用

目的探讨14-3-3η通过抑制内质网应激对异丙肾上腺素(ISO)诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用。方法构建p FLAG-14-3-3η重组表达载体转染H9c2心肌细胞,使用ISO建立心肌细胞损伤模型。将培养的H9c2心肌细胞随机分为4组:正常对照组、ISO组、ISO+p FLAG组、ISO+14-3-3η组。流式细胞仪检测H9c2心肌细胞凋亡;Western blot检测H9c2心肌细胞中半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-12、葡萄糖调节蛋白78(GPR78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达情况;采用试剂盒检测各组细胞丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果 ISO刺激H9c2心肌细胞后,与正常对照组比较,ISO组细胞凋亡率显著增高(P<0.05),caspase-3与caspase-12的表达升高(P<0.05),MDA含量增高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),内质网应激反应标志蛋白GPR78与CHOP的表达显著增高(P<0.05)。转染p FLAG-14-3-3η后再进行ISO处理,与ISO组比较,ISO+14-3-3η组心肌细胞的凋亡率显著降低(P<0.05),caspase-3与caspase-12的表达明显减少(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),SOD活性增大(P<0.05),GPR78与CHOP的表达显著降低(P<0.05)。结论 14-3-3η可以通过抑制内质网应激反应减轻ISO诱导的H9c2心肌细胞损伤。

血清14-3-3η蛋白和胶原三螺旋重复蛋白-1及类风湿因子在类风湿关节炎诊断中的价值

目的血清14-3-3η蛋白和胶原三螺旋重复蛋白-1(CTHRC1)参与类风湿关节炎(RA)的发展过程,类风湿因子(RF)是首个应用于诊断RA的血清学指标,对评估RA病情的活动性和监测预后有重要参考价值。文中旨在分析血清14-3-3η蛋白、CTHRC1和RF在RA患者诊断中的临床应用价值。方法选取2020年2月至2021年2月于南昌大学第二附属医院风湿免疫科确诊的RA患者为RA组(n=153);选取同期本院诊治的非RA患者作为non-RA组(n=116),其中多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)患者41例、骨关节炎(OA)患者43例和强直性脊柱炎(AS)患者32例;选取本院同期健康体检者作为健康对照组(n=64)。采用ELISA法检测血清14-3-3η蛋白和CTHRC1水平,采用速率散射比浊法检测血清RF和CRP水平,分析比较3组研究对象各指标水平并绘制受试者工作曲线(ROC),评估各指标单独或两两联合检测在RA诊断中的价值。结果RA组血清14-3-3η蛋白、CTHRC1和RF水平显著高于non-RA组和健康对照组(P<0.01),且non-RA组中PM/DM、OA和AS患者的14-3-3η蛋白水平高于健康对照组(P<0.01)。当14-3-3η蛋白和CTHRC1的截断值分别为2.54(ng/mL)和244.45(ng/mL)时,其ROC曲线下面积分别为0.844和0.836,对RA有较高的诊断价值。诊断RA灵敏度最高的是CTHRC1(82.35%),特异度最高的是14-3-3η蛋白(89.44%)。阳性预测值、阳性似然比和约登指数也表明14-3-3η蛋白诊断RA的价值较高。串联检测时14-3-3η蛋白与CTHRC1特异度最高(97.36%),并联检测时CTHRC1与RF灵敏度最高(96.66%)。其中14-3-3η蛋白与CTHRC1的约登指数在并联时最高(0.61)。结论14-3-3η蛋白是诊断RA的高特异度指标,CTHRC1及RF可作为RA诊断的灵敏度指标,联合检测可明显提高RA的诊断效能。

强直性脊柱炎患者14-3-3η DKK-1及TGF-β1水平与BASDAI BASFI的相关性分析

目的分析强直性脊柱炎(AS)患者血清14-3-3η、dickkopf相关蛋白1(DKK-1)及转化生长因子β1(TGF-β1)水平与Bath强直性脊柱炎病情活动指数(BASDAI)、Bath强直性脊柱炎功能指数(BASFI)的相关性。方法选取2012年2月至2016年1月河南驻马店市中心医院收治的60例AS患者为研究对象,设为AS组,另按1∶1比例选取同期在本院接受体检的健康体检者60例设为对照组。比较两组研究对象入院时血清14-3-3η、DKK-1及TGF-β1水平,采用Pearson相关性分析血清14-3-3η、DKK-1及TGF-β1水平与BASDAI、BASFI的相关性。结果 AS组血清14-3-3η、TGF-β1高于对照组,DKK-1低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);AS组平均BASDAI评分(40.12±2.63)分,BASFI评分(42.67±5.22)分;经Pearson相关性分析显示,AS患者血清14-3-3η、TGF-β1与BASDAI评分(r=0.556、0.533,P均<0.05)、BASFI评分呈正相关(r=0.459、0.433,P均<0.05);DKK-1则与BASDAI评分(r=-0.285,P<0.05)、BASFI评分(r=-0.464,P<0.001)呈负相关。结论 AS患者血清14-3-3η、TGF-β1、DKK-1与BASDAI评分、BASFI评分存在相关性,值得临床重视。

类风湿关节炎患者血清14-3-3η蛋白及其mRNA表达水平与关节损伤的关系

目的:探究类风湿关节炎(RA)患者血清14-3-3η蛋白及其mRNA表达水平与关节损伤的关系。方法:选择2017年1月至2018年12月收治的RA患者158例,其中早期RA 80例,非早期RA 78例,另招募同期体检健康者50例为对照组;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清14-3-3η蛋白,C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸抗体(抗CCP抗体)等浓度,实时荧光定量-聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测血清14-3-3ηmRNA浓度,应用RAMRIS系统评分、28个关节肿胀关节个数、28个关节压痛关节个数及28个关节疾病活动度评分评价关节损伤表现,分析血清14-3-3η蛋白及其mRNA表达水平与关节损伤的关系。结果:RA患者血清14-3-3η蛋白及mRNA、ESR、CRP、RF和抗CCP抗体水平均显著高于正常对照组(均P<0.05);当14-3-3η蛋白浓度≥1.37 ng/ml时,ROC曲线下面积(AUC)为0.824,灵敏度为84.00%,特异度为81.00%,诊断价值最高;非早期RA组14-3-3η蛋白及mRNA表达水平显著高于早期RA组(均P<0.05);RA患者DAS28评分为(7.58±1.58)分,28个关节肿胀关节(13.49±3.42)个,28个关节压痛关节(12.73±3.16)个,RA患者滑膜炎评分为(1.75±0.86)分,骨髓水肿评分为(1.48±0.51)分,骨侵蚀评分为(3.26±1.43)分;RA患者血清14-3-3η蛋白与CRP水平、滑膜炎评分、骨髓水肿评分、DAS28评分、28个关节肿胀关节个数及压痛关节个数呈正相关(r/P=0.462/0.039,0.427/0.045,0.384/0.017,0.528/0.032,0.451/0.008,0.419/0.027)。结论:血清14-3-3η蛋白及其mRNA表达水平在内风湿关节炎患者中明显升高,且与关节损伤密切相关。

类风湿关节炎患者血清14-3-3η蛋白、免疫球蛋白的变化及其意义

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者血清免疫球蛋白、14-3-3η蛋白的变化及其意义。方法选取我院2015年2月—2017年12月收治的RA患者110例(RA组)和年龄、性别相匹配的健康对象40例(对照组),检测两组的血清IgA、IgG、IgM、补体C3、C4、14-3-3η蛋白水平,并根据RA患者是否处于疾病活动期和放射学分级进行分层分析。结果 RA组的血清IgG、14-3-3η蛋白水平显著高于对照组(P<0.05),血清IgA、IgM、补体C3、C4蛋白水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);活动期RA患者血清IgG、14-3-3η蛋白水平显著高于非活动期的RA患者(P<0.05),血清IgA、IgM、补体C3、C4水平与非活动期的RA患者比较差异无统计学意义(P>0.05);放射学分级3级、4级RA患者血清IgG、补体C3、14-3-3η蛋白水平显著高于非活动期组的2级患者(P<0.05),血清IgA、IgM、补体C4水平与放射学分级2级RA患者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RA患者血清IgG、补体C3 14-3-3η蛋白水平较高,血清14-3-3η蛋白、免疫球蛋白水平变化与RA患者病情、活动情况具有一定的相关性。

血清14-3-3η蛋白联合抗环瓜氨酸肽抗体对类风湿关节炎的诊断价值

目的探讨血清14-3-3η蛋白联合抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体对类风湿关节炎（RA）的诊断价值。方法纳入185例因关节症状就诊的患者，其中RA患者89例（RA组）和其他风湿病患者96例（其他风湿病组），选取同期健康体检者100例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测3组患者血清14-3-3η蛋白和抗CCP抗体水平，比较两者在诊断RA中的敏感度和特异度。结果RA组、其他风湿病组及对照组血清14-3—3η蛋白、抗CCP抗体、RF水平及阳性率比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。RA组血清14-3—3η蛋白水平及阳性率均高于其他风湿病组和对照组，其他风湿病组血清14-3-3η蛋白水平及阳性率均高于对照组（P〈0．05）。血清14-3-3η蛋白联合抗CCP抗体诊断RA的特异度明显提高，但敏感度降低。抗CCP抗体阴性和阳性的RA患者中血清14-3-3η蛋白的阳性率分别为70．6％（24／34）、81．8％（45／55）。结论血清14—3-3η蛋白联抗CCP抗体能提高RA的诊断率。

14-3-3η表达水平对依那西普治疗的类风湿关节炎患者临床应答的预测价值

目的:探索14-3-3η表达水平与类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)患病风险、疾病活动度的关联性,及其在依那西普治疗RA患者临床应答的预测作用。方法:纳入88例准备接受依那西普治疗的类风湿关节炎(RA)患者与80例健康对照者,并在治疗前采集血液样本。使用ELISA检测RA患者与健康对照者血清14-3-3η表达水平。于治疗24周后评估所有RA患者临床应答(定义为相比治疗前,治疗后DAS28(ESR)评分下降≥1.2分)。结果:14-3-3η在RA中高表达,且受试者工作特征曲线(ROC)显示其可以很好地区分RA患者与健康对照者〔AUC:0.868(95%CI:0.815~0.921)〕。14-3-3η表达量还与RA病程、C反应性蛋白水平(CRP)、DAS28(ESR)评分以及抗环瓜氨酸肽抗体(ACCP)阳性呈正相关。在接受依那西普治疗的RA患者中,14-3-3η基线期表达量在应答患者较无应答患者中更高,且ROC曲线表明其可以预测依那西普治疗RA患者更高的临床应答〔AUC:0.665(95%CI:0.547~0.784)〕。结论:血清14-3-3η水平与RA高患病风险和疾病活动度相关,并在一定程度上预测依那西普治疗RA有更好的临床应答。

类风湿关节炎患者血清14-3-3η蛋白水平及临床检测价值的初步研究

目的:定量测定类风湿关节炎(RA)患者血清14-3-3η蛋白表达水平并探讨其临床检测价值。方法:收集2020年5月—2020年12月在天津中医药大学第一附属医院就诊的136例RA患者(RA组)、65例非RA关节病变患者(疾病对照组)及同期36名健康体检者(健康对照组)作为研究对象,采用光激化学发光法检测所有研究对象的血清14-3-3η水平,酶联免疫法检测抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)水平,免疫比浊法检测D-二聚体(D-Dimer)水平,散射比浊法检测类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)水平,分析以上指标在不同组间的表达差异以及指标间的相关性。结果:根据14-3-3η水平将RA组分为14-3-3η阳性组与14-3-3η阴性组,阳性组66例,阴性组70例。RA组血清14-3-3η水平显著高于疾病对照组、健康对照组(U=40.5、0.0,均P<0.0001);14-3-3η阳性组14-3-3η蛋白与DAS28-CRP评分(DAS28-CRP)、RF呈正相关(r=0.2598,P<0.05;r=0.2480,P<0.05);与红细胞沉降率(ESR)、D-Dimer呈负相关(r=-0.2354,P<0.05;r=-0.2536,P<0.05.);14-3-3η阳性组RF与anti-CCP的表达均显著高于14-3-3η阴性组(U=758,P=0.000;U=528,P=0.006)。结论:血清14-3-3η蛋白在部分RA患者血清中呈高浓度,且与RF水平以及临床疾病活动度密切相关。

14-3-3η蛋白的生物信息学分析及原核表达

目的分析巨噬细胞不同极化状态下14-3-3η mRNA表达及其生物信息,并构建14-3-3η蛋白原核表达载体,为研究其在巨噬细胞活化中的作用提供实验基础。方法提取C57BL/6小鼠骨髓原代巨噬细胞mRNA,反转录后用实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测14-3-3η mRNA水平的改变。运用Prot Param tool、SOPMA等在线软件对14-3-3η氨基酸序列进行分析。以小鼠巨噬细胞cDNA为模板,采用PCR的方法扩增14-3-3η基因,插入pGEX-4T-3载体中,双酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化入大肠杆菌BL21菌株,用异丙基硫代半乳糖苷诱导其原核表达并纯化,SDS-PAGE法和Western blotting法对融合蛋白进行鉴定。采用Graphpad prism 5软件进行统计分析。样本比较均采用配对t检验。结果 M1型巨噬细胞14-3-3η表达降低,M2型趋势相反。生物信息学表明14-3-3η蛋白其二级结构中主要为α-螺旋(占62.60%)且疏水性较差(疏水系数为-0.607)。酶切和测序结果提示重组质粒pGEX-4T-3-14-3-3η构建成功。SDS-PAGE和Western blotting结果表明融合蛋白谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-14-3-3η成功表达和纯化。结论本实验对14-3-3η进行了初步的生物信息学分析,成功表达并纯化融合蛋白GST-14-3-3η,为14-3-3η在巨噬细胞极化上的功能研究奠定了实验基础。