我国^(14)C标记人体物质平衡临床研究方案的统计分析

目的:了解我国^(14)C标记人体物质平衡临床研究方案,评价研究方案与《放射性标记人体物质平衡研究技术指导原则》(以下简称“指导原则”)要求的相符性,为后续该类型研究的开展提供参考。方法:检索国家药品监督管理局药品审评中心药物临床试验登记与信息公示平台登记的^(14)C标记放射性物质平衡临床研究,检索时限为建库至2023年12月31日,收集研究方案的基本情况、受试者特征、纳入与排除标准、研究药物特征、样本收集时长、入组例数和研究开展时机等研究方法相关的特征性数据,并比较其与指导原则的相符性。结果:共纳入137项研究,其中化学药136项,中药单体1项;口服药物130项,注射药物7项;适应证中,实体瘤、非小细胞肺癌、血液系统恶性肿瘤和2型糖尿病等占比较大,研究设计较规范。结论:绝大多数^(14)C标记人体物质平衡临床研究方案的方法学特征性数据与指导原则要求相符,但是在研究开展时机方面与指导原则建议有较大不同,后续研究仍需加以关注。

基于^(13)C同位素标记法探究连作对丹参生长及光合碳分配的影响

以1年龄盆栽丹参为研究对象,设置^(13)C脉冲标记处理与^(12)C正常处理,应用^(13)C脉冲标记法研究连作与非连作丹参光合碳分配规律,比较植株标记40 d后的形态学与理化指标差异,分析丹参地上部、根部以及根际土壤碳的^(13)C丰度、碳同位素比率、^(13)C原子百分比以及单位干重样品的^(13)C总量,以明确连作对丹参生长与光合作用的影响机理。结果表明,连作条件下,丹参各部分生物量与叶绿素含量明显下降,抗氧化酶活性升高;有效成分中的丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_(A)、二氢丹参酮Ⅰ以及迷迭香酸含量均降低;连作显著影响^(13)C-光合碳分配比例,非连作丹参地上部、根部以及根际土壤中^(13)C-光合碳比率分别为27.14%、72.80%和0.06%,连作丹参为59.38%、40.59%和0.03%。综上,连作后,丹参生长发育与次生代谢受到明显影响;光合产物向地下部的转移能力降低,导致连作丹参根部生长发育受到明显抑制;丹参光合作用的强弱是反映丹参生长状况的重要指标。

喹烯酮在猪、鸡体内的药代动力学研究

猪6头,鸡10只,单剂量0 4065mg·kg-1(比活度24 6μci mg-1)静注给药,一个月后,单剂量31 15mg·kg-1(比活度5 187μci·mg-1)口服给药,进行代谢动力学研究。依据本实验建立的方法,以液体闪烁谱仪计数法进行含量测定。喹烯酮以原药的形式代谢排泄,静注给药符合二室开放模型:猪,T1/2α=0 1899h,T1/2β=4 5528h,Kel=0 8654h-1,AUC=0 00925mg·h-1·L-1;鸡,T1/2α=0 1637h,T1/2β=3 8189h,Kel=1 6834h-1,AUC=0 005046mg·h-1·L-1。口服给药符合一级吸收一室开放模型:猪,T1/2Ka=0 4678h,T1/2β=3 7445h,Tp=1 3367h,Cmax=0 000713μg·ml-1,AUC=0 00303mg·L-1·h-1;鸡,T1/2Ka=0 5142h,T1/2β=4 6637h,Tp=1 8459h,Cmax=0 000897μg·m-1,AUC=0 00773mg·L-1·h-1,说明喹烯酮口服给药后,其吸收较快,消除相对也较快,生物利用度低。

猪血液中^(14)C标记喹烯酮的测定及药代动力学研究

用喹烯酮 14 C标记法测定猪血液中喹烯酮的浓度并对喹烯酮静脉单次给药后在猪体内的药代动力学进行了分析。猪 6头 ,单剂量0 .4 0 6 5 mg·kg-1(比活度 2 4 .6 μci· mg-1)静注给药 ,于不同的时间采集血样。消化液(HCl O4:H2 O2 =1:1.2 5 )消化完全一定量血样后 ,以液体闪烁谱仪计数法进行含量测定。喹烯酮线性范围为 0 .0 10～ 3.170 μg· g-1(r=0 .9980 ) ,最低检测量为 1.1ng,最低检测浓度为 0 .0 11μg· g-1,平均方法回收率 (10 2 .75±5 .2 6 ) % ,精密度考察喹烯酮日内、日间相对标准偏差小于 6 %。喹烯酮以原药的形式代谢排泄 ,静注给药符合二室开放模型 :t1/ 2α=0 .1899h,t1/ 2β=4 .5 5 2 8h,Kel=0 .86 5 4h-1,AUC=0 .0 0 92 5 mg· h-1· L-1。结果表明 :喹烯酮静注给药后 ,其在体内分布快而广 ,消除相对也较快。本方法专一性强 ,快速 ,准确。

土壤微生物生物量碳的表观周转时间测定方法

土壤微生物生物量碳周转对土壤有机质和养分循环起着决定作用。本研究建立了土壤微生物生物量碳周转时间的测定方法。培养条件下 (2 5℃、10 0 %湿度 ) ,加入14 C标记葡萄糖标记土壤微生物生物量碳 ,在 10 0d培养期内 ,每隔 2 0d测定一次14 C标记微生物生物量碳 (14 C BC) ,采用一级热力学方程拟合测定期内 (2 0～ 10 0d) 14 C BC 的周转速率常数 (k) ,由此计算土壤微生物生物量碳的表观周转时间。测定的 5个土壤在培养条件下微生物生物量碳的周转时间为 93～ 4 0 0d ,根据培养温度和实际田间年平均温度推算得到田间条件下土壤微生物生物量碳的周转时间为 1 0～ 4 1a。其主要影响因子为土壤质地 ,土壤利用方式的影响较小。土壤微生物生物量碳的周转时间能较好地反映土壤微生物生物量的周转状况及其与土壤有机质的周转和积累的关系。

^(14)C标记秸秆碳素在淹水土壤中的转化与平衡

应用密闭培养法，于３０℃恒温箱中对１４Ｃ标记水稻秸秆、玉米秸秆在淹水红壤及变性土中１４Ｃ与１２Ｃ间的转化与平衡进行了示踪研究。培养期为１１２天。结果表明：秸秆碳和土壤原有碳的分解以前期为快（尤其是淹水后３～７天），以后逐渐减慢，至１１２天时，秸秆碳在土壤中的分解达５４．２０％～５５．４０％，分解速率常数为６．６９×１０－３ｄ－１～７．０６×１０－３ｄ－１，半衰期为９８～１０４天。不同秸秆碳在不同土壤中的分解差异不大，显示土壤类型和秸秆种类对秸秆的分解状况影响不明显。土壤原有碳矿化特征表明变性土中１２ＣＯ２释放量始终大于红壤，虽然加秸秆处理土壤中存在着微弱的正激发和负激发（激发率小于５％），但这些处理都出现了秸秆碳的净积累。至１１２天时，土壤原有碳仅分解６．７６％～８．３３％，分解速率常数为（５．８８～７．３７）×１０－４ｄ－１，半衰期为２．５８～３．２３年。

旱地和水田有机碳分解速率的探讨与质疑

14C标记的羊粪、杂交狼尾草（象草）及其根部分别施于淋溶土中，在30℃培养365天。土壤保持旱地（70％WHC）和淹水两种状态，进行有机碳在土壤中分解的对比试验。另一组试验采用14C标记的水稻秸和玉米秸，分别施于老成土和变性土中，在上述相同的水分条件下于30℃培养112天进行对比。所有加入的不同有机物料。不论是在何种土壤，其在淹水土壤中的有机碳分解速率均快于旱地土壤，而前者的残留率却明显低于后者。淹水处理中各种不同有机物料的分解半衰期约为旱地相应处理的1．4—2．0倍。这和有关有机质在旱地和水田土壤中分解速率的传统概念相反。作者认为如果旱地和水田的土壤条件均适宜于微生物的代谢作用，水田土壤中不论是有机碳的分解速率还是分解量实质上均大于旱地土壤。

水分胁迫后复水对苹果结果树体内^(14)C-光合产物分配的影响

利用14 C示踪方法研究胁迫后复水对14 C 光合产物从苹果结果树叶片的输出及其在体内的分配影响。结果表明 ,胁迫期间14 C 光合产物合成和输出量均减少 ,同化物向枝、干的分配率增加 ,向新梢 (幼叶 )和果实的分配率下降 ;胁迫后复水 ,同化物的合成和输出均较胁迫条件下改善 ,但仍未完全恢复到充分供水的水平 ,同化物优先运往新梢 (幼叶 ) ,果实未获得较多的同化物。

1,2,4-三氯苯矿化菌的鉴定与功能分析

采用同位素示踪法从氯苯污染土壤中筛选到能高效降解1,2,4-三氯苯(1,2,4-TCB)为CO2的细菌E3和F2,根据其表型特征1、6S rDNA序列和荧光原位杂交(FISH)分析,鉴定E3和F2为博德特氏菌(Bordetellasp.).E3和F2的16S rDNA序列相似性为100%;它们与菌株Bordetellasp.QJ2-5同源性最高,与Bordetella petrii(GDH030510)最接近,同源性分别为100%和99.4%.E3和F2能在含1,2,4-TCB的无机盐培养基中彻底降解1,2,4-TCB生成CO2,30 d降解率达到90%以上,其中58%和46%矿化为CO2,同时形成一定量的微生物生物量.

^(14)C-标记氧化乐果的合成

杀虫剂氧化乐果(O,O-二甲基-S-(N-甲氨基甲酰甲基)硫赶磷酸酯)的14C标记合成经4步完成。其放化收率为27.81%(以14C-碳酸钡计),放化纯度经薄板检测大于95%。

^(14)C-菲在营养液-火山石-小麦有控系统中的迁移和转化

利用放射性同位素示踪技术研究了１４Ｃ标记菲在有控系统中的迁移转化．结果表明，１４Ｃ菲在有控系统中降解较快，施入药品２４ｄ后仅有０．３２％的１４Ｃ－菲存留在植物、营养液和火山石中．植物吸收的１４Ｃ放射性大部分被结合到植物组织中，其它１４Ｃ主要以菲的极性代谢物形态存在．

杀菌剂氟吗啉的^(14)C标记合成

氟吗啉是新型内吸性杀真菌剂。它的14C标记合成经3步完成,其放化收率为35.9%(以14C-碳酸钡计),放化纯度经薄板检测达97.8%。

除草剂虎威的标记合成

5-( 2-氯-4-三氧甲基 )苯氧基 )- N-(甲基磺酰基 ) - 2-硝基苯甲酰胺 (虎威 )的14 C标记合成经 6步完成。其放化收率为 1 8 1 5 % (以14 C 以苯甲酸计 ) ,放化纯度经薄板检测大于 99%。

HP的液体闪烁测量法

用液体闪烁测方法 ,通过测量患者呼气中 1 4 C标记的尿素水解物的含量来诊断患者是否感染幽门螺杆菌。

N-甲基-^(14)C苄基胺及其亚硝胺的合成

报道了Ｎ－甲基－１４Ｃ苄基胺和Ｎ－甲基－１４Ｃ苄基亚硝胺的合成，比活度约为９．２×１０１１Ｂｑ／ｍｏｌ。由高压液相色谱仪测得的化学纯度和放化纯度均大于９５％。

^(14)C-苄嘧磺隆的合成

用Ｂａ１４ＣＯ３为原料，合成１４Ｃ氰化钠、硝酸胍和苄基磺酰胺等中间体，最终得到１４Ｃ苄嘧磺隆产品。放化收率为１４６％，放化纯度大于９５％，放射性比活度为０７８１μＣｉ／ｍｇ（２８８９７ｋＢｑ／ｍｇ）。

海洋菌对对硫磷的积累与降解

本文研究了3株海洋菌对对硫磷的积累与降解,结果发现,对硫磷在三株菌中标记率由高到低分别是菌株4307、菌株4320、菌株5621。菌株4307的标记率普遍在70%以上,菌株4320则表现了明显的时间变化,随着时间的增长标记率不断减少,由0.5小时到24小时的标记率分别为:68.63%、56.47%、53.06%、31.96%、17.17%、8.98%。菌株5621的标记率远远低于上述两株菌,平均值在8小时内才30%左右;对硫磷在菌株中的结合态比率比较低,在菌株4307中平均值只有4%左右,在菌株4320中表现出时间变化,随时间的增长,结合态不断增加,由0.5小时到24小时的结合态比率分别为:6.19%、6.90%、12.25%、14.15%、26.94%、28.27%,菌株5621也表现出时间变化,但是增幅没有菌株4320明显;在降解方面,在菌株4307中,随着时间的推移,其母体对硫磷由开始时的100%,逐渐降到24小时的82.6%,降解物对氧磷,也由开始的0增长到后来的11.8%。在菌株4320中,可以明显的看出对硫磷的降解情况,在4个小时内,60%的母体就已经发生了降解,到了24小时,母体只剩下3.9%。菌株5621对对硫磷的降解情况也比较明显,24小时内母体就只剩下56.5%%,原点未知物增加到32.8%。同时在实验中我们发现降解率、标记率这两个指标进行着同步变化。标记率越大,降解程度就越完全,并推测在这些海洋菌含有能降解对硫磷的胞内酶。

[^(14)C]乙双吗啉在小鼠体内的整体自显影分布

用宏观放射自显影术研究[^(14)C]乙双吗啉在小鼠体内的分布。药物经尾静脉注射后很快分布到各组织,以肺、肾、肝及胃肠道聚积的放射性为最高。其次为肿瘤及皮肤等组织,而大脑内未见有放射性分布。

[1-^(14)C]-己酰乙醛亚硫酸氢钠药代动力学研究

用[1-^(14)C]-己酰乙醛亚硫酸氢钠静注给药在小鼠体内作了药代动力学研究。结果表明:血药浓度改变符合开放式二房室模型;体内放射性分布广泛,给药4h后大部分组织的放射性已降至较低水平,瘤组织的放射性分布较低;血清、尿和肝、肾组织匀浆TLC显示大部分血清的放射性来自原形药物,而尿的放射性来自代谢物:肝、肾组织内放射性以代谢物为主,给药3h从呼吸道以^(14)CO_2形式和24h从尿排出的放射性分别占注入放射性总剂量的26.76％和14.60％。

双标记碱性洗脱法研究电离辐射引起的细胞DNA单链断裂与修复

本文应用双标记碱性洗脱法对X射线照射引起的正常人纤母细胞、毛细血管扩张性共济失调症(AT)纤母细胞、AT肿瘤突变细胞DNA单链断裂及重接修复进行了研究。结果提示10GyX射线照射对三种不同类型纤母细胞DNA的单链断裂与各自的不照射对照组比较有显著差别。而三种不同细胞株之间比较则无明显差别。细胞接受10GyX射线照射后在37℃孵箱中孵育15、30和60min可见三种细胞株DNA单链断裂都能立即进行重接修复,60min内大部分已重接,细胞在10Gy照射后加5×10^(-4)mol/L aphidicolin/皿抑制聚合酶α,经37℃孵育60min也有一定程度的修复。