改良微柱法检测17-OH，17-KS和VMA及其临床应用

目的完善并改良微柱分光光度检测技术，探讨其在肾上腺肿瘤、心血管等疾病中的应用价值。方法选取2010年4月～2013年3月济南军区总医院住院肾上腺肿瘤患者181例，高血压和冠心病患者168例作为实验组，同时以30例健康人作为对照组。所有研究对象均采用微柱分光光度比色法，进行24h尿液17羟皮质类固醇（17Hydroxycorticosteroids，17-OH）、17酮皮质类固醇（17-Ketosteroids，17KS）和香草扁桃酸（VanilmandelicAcid，VMA）的水平检测。在常规检测方法基础上，17—0H采用活性高岭土作为吸附剂，过柱后采用70ml／dl的无水乙醇作为洗脱液收集待测成分；17=KS检测在加热水解后，以3000r／min离心5min后再行过柱，Zimmermann显色过程稳定在4℃，60min；VMA检测则将样本PH值调至6．5～7．0时再行过柱，比色时在做样品测定的同时做试剂空白、样品空白。以蒸馏水调零测标准及其空白、样本及其空白，最后计算时将各自空白扣除，并进行回收率、精密度等方法学评价。结果①应用此方法检测17—0H，17-KS及VMA的平均回收率分别为76％，98．8％和90．8％；平均批内变异系数为9．5％，5．9％和3．8％；平均批间变异系数为10．0％，5．6％和8．4％。②17—0H在肾上腺良性肿瘤组、肾上腺恶性肿瘤组、嗜铬细胞瘤组、腹膜后肿瘤组、其他恶性肿瘤组、高血压组、冠心病组和对照组中的水平（μmol／24h）分别为30．49±18．61，34．51±18．59，32．08±10．89，30．74±25．53，67．25±27．06，44．83±32．63，39．59q-24．93和18．90±3．98，差异均有统计学意义（t=3．08，P〈0．05；t=3．19，P〈0．05；t=3．11，P〈0．05；t=2．93，P〈0．05，t=10．248，P〈0．01；t=5．19，P〈0．01；t=4．01，P〈0．01）；17=KS在肾上腺良性肿瘤组、嗜铬细胞瘤组、肾上腺恶性肿瘤组、其他恶性肿瘤组、高血压组、冠心病组和对照组中的水平（μmol／24h）分别为50．66±17．28，57．62±31．51，60．78±24．78，89．20±33．29，79．21±32．45，68．57±36．22和39．46±3．74，差异均有统计学意义（t=2．37，P〈0．05；t=3．43，P〈0．05；t=8．19，P〈0．01；t=9．99，P〈0．01，t=9．78，P〈0．01；t=7．47，P〈0．01）；VMA在肾上腺恶性肿瘤组、其他恶性肿瘤组、嗜铬细胞瘤组和对照组中的水平（μmol／24h）分别为49．34±42．29，48．97±28．92，114．63±82．94和30．85±6．09，差异均有统计学意义（t=3．01，P〈0．05；t=2．5，P〈0．05；t=7．2，P〈0．01）。③以大于17—0H，17-KS和VMA正常高值为阳性，17-OH，17-KS和VMA在肾上腺良性肿瘤组、肾上腺恶性肿瘤组、嗜铬细胞瘤组、腹膜后肿瘤组、其他恶性肿瘤组、高血压组和冠心病组的阳性栓出率分别为25％（22／89），33％（29／89）和12％（11／89）；25％（4／16），31％（5／16）和19％（3／16）；21％（7／34），44％（15／34）和79％（27／34）；20％（1／5），20oA（1／5）和20％（1／5）；63％（10／16），50％（8／16）和38％（6／16）；32％（53／168），45％（75／168）和15％（25／168）；43％（9／21），48％（10／21）和14％（3／21）。结论微柱法17—OH，17-KS及VMA的检测方法经改良后其稳定性、重复性和精密度较好，对临床肾上腺肿瘤、心血管等疾病具有=定的诊断和鉴别诊断价值。

兔血中5β-H-17-OH雄甾烷的气相色谱-质谱测定

建立了一种气相色谱 -质谱 (GC/MS)技术测定兔血中甲睾 (MT)的主要代谢物 5 β-H-1 7-OH雄甾烷(5β-MT)质量浓度的方法 ,为药物动力学等研究提供技术方法和数据。 6只兔口服 2 0 mg MT后按设定时间点取血 ,用甲醇提取血浆 1 m L,提取液用 β-葡萄糖醛酸苷酶于 5 5℃水解 3 h。去氢甲睾 (DHMT)为内标物进行定量计算。结果显示 :给药后每个血样中均含有 5 β-MT,计算每个时间点 6只兔的 5 β-MT平均质量浓度 ρ,发现在 3 h时达到峰值 2 .2mg/L 。

尿17-KS,17-OH在女性不孕症诊断中的应用

目的 探讨尿17-酮类固醇（17-KS）、尿17-羟类固醇（17-OH）与不孕的关系.方法 采用色谱-分光光度法测定130例不孕患者24 h尿中17-KS和17-OH的含量,同时测定健康对照组.结果 24 h尿17-KS和17-OH平均水平,不孕组明显高于正常对照组（P均＜0.001）.结论 不孕组尿17-KS和17-OH水平明显高于正常对照组,说明尿17-KS和17-OH排泄量增加与育龄妇女不孕间存在一定的相关性,可为临床提供有价值的参考数据,对临床诊断、治疗具有辅助意义.

17-OH、17-KS、VMA、ALD和COR在心血管疾病中的诊断价值

目的:探讨尿17羟皮质类固醇(17-OH)、17酮皮质类固醇(17-KS)、香草扁桃酸(VMA)、血浆醛固酮(ALD)和血清皮质醇(COR)在心血管疾病中的水平变化及应用价值。方法:应用微柱比色法和电化学发光法对116例原发性高血压(PH)患者、52例继发性高血压(SH)患者和21例冠心病(CHD)患者进行24h尿液17-OH、17-KS、VMA和血浆ALD、血清COR的检测,以30例健康人作为正常对照组。结果:与正常对照组比较,SH组17-OH、17-KS、VMA、ALD和COR水平均较对照组和PH组增高,具统计学意义(P<0.01,P<0.001);CHD组尿17-OH、17-OH和血浆ALD、血清COR水平较正常对照组明显增高,具统计学意义(P<0.01,P<0.05);相关实验显示,ALD与17-OH、17-KS之间呈正相关(r=0.502、0.796,P<0.01);COR与17-OH、17-KS之间亦呈正相关(r=0.648、0.584,P<0.01);ALD、COR与VMA之间无相关性(P>0.05)。结论:尿17-OH、17-KS、VMA、血浆ALD、血清COR水平联检在PH和SH的鉴别诊断、针对性治疗和CHD的预后判断等方面具有重要临床价值。

1,25(OH)_2D_3干预IL-17通路抑制大鼠肝纤维化作用机制研究

目的通过检测1,25(OH)_2D_3对大鼠肝组织中IL-17及其相关蛋白表达的影响,探讨1,25(OH)_2D_3抑制肝纤维化形成的作用机制。方法将60只大鼠随机分为四组:对照组、模型组(DMN盐溶液)、药物溶剂组(DMN盐溶液+花生油灌胃)、治疗组(DMN盐溶液+1,25(OH)_2D_3油溶液灌胃),8周后对各组大鼠肝脏行Masson染色,观察其病理学变化,并行纤维化程度分级;免疫组化法(IHC)观察各肝组织中IL-17的蛋白表达;Western blotting法定量检测各组肝脏中IL-17、RORγt及MIP3α蛋白表达;Real time-PCR法分析各组肝脏中IL-17、RORγt和MIP3αmRNA表达量。结果模型组及药物溶剂组大鼠肝脏呈显著纤维化改变,1,25(OH)_2D_3治疗组肝脏纤维化程度较溶剂组明显减轻;模型组和药物溶剂组肝组织中IL-17、RORγt、MIP3α蛋白及mRNA表达量较对照组明显升高,而治疗组中三者蛋白及mRNA表达量较溶剂组显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论1,25(OH)_2D_3抑制肝纤维化发生、发展;1,25(OH)_2D_3可抑制肝组织中IL-17、RORγt及MIP3α蛋白和mRNA表达,从而减轻肝纤维化,提示1,25(OH)_2D_3可能通过干预肝脏IL-17信号通路抑制纤维化进程。

系统性红斑狼疮患者血清维生素D和白介素-17水平变化及其临床意义

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中25-羟基维生素D(25-OH-D)和白介素-17(IL-17)水平的变化及其临床意义。方法选取40例SLE患者作为研究对象,20例健康体检人员为健康对照组。运用电化学发光法检测25-OH-D水平,酶联免疫吸附法检测IL-17水平。结果 SLE患者25-OH-D水平明显低于健康对照组(P<0.01),活动期SLE患者25-OH-D水平明显低于缓解期患者(P<0.01)。SLE患者IL-17水平明显升高(P<0.01)。低25-OH-D水平与肾损害(P<0.01)相关,与疾病活动度评分(SLEDAI评分)(r=-0.844,P<0.01)及IL-17水平(r=-0.596,P<0.01)负相关。结论 SLE患者25-OH-D水平降低,低25-OH-D水平与肾损害、病情活动及高IL-17水平相关,25-OH-D可能参与了SLE的炎症进程。

非酒精性脂肪性肝病儿童血清25-(OH)D3和IL-17水平变化初步研究

目的调查非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)肥胖儿童血清25羟维生素D3[血清25-(OH)D3]和白介素-17(IL-17)水平变化。方法2014年1月~2017年12月我院诊治的肥胖儿童62例,参照非酒精性脂肪性肝病诊疗指南标准诊断单纯性非酒精性脂肪肝(NAFL)36例,非酒精性脂肪性肝炎(NASH)26例,另选健康儿童30例,采用ELISA法检测血清25-(OH)D和IL-17水平。结果NAFL儿童血清25-(OH)D3水平为(15.2±2.1)ng/mL,NASH儿童为(9.6±1.3)ng/ml,均显著低于健康儿童的(26.3±2.3)ng/mL,而血清IL-17水平分别为(17.1±7.8)μg/L和(36.2±12.6)μg/L,均显著高于健康儿童的(1.4±0.5)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);中度脂肪变儿童血清ALT和AST水平分别为(54.1±15.4)U/L和(46.5±12.6)U/L,重度组儿童分别为(117.1±37.1)U/L和(78.5±31.0)U/L,均显著高于轻度组的(33.4±4.6)U/L和(30.5±2.9)U/L(P<0.05);中度脂肪变儿童血清25-(OH)D3水平为(10.2±1.4)ng/ml,重度组儿童为(8.4±1.1)ng/ml,显著低于轻度组的(15.8±2.0)ng/mL(P<0.05),而血清IL-7水平分别为(22.2±6.3)μg/L和(39.6±9.2)μg/L,显著高于轻度脂肪变儿童的(13.5±3.5)μg/L,组间差异均有显著性统计学意义(P<0.05)。结论NAFLD儿童血清25-(OH)D3水平降低,而血清IL-17水平升高,它们的变化可能与肝内脂肪变程度有关,动态监测这些变化,可能对了解病情和防治效果判断起指导作用。

1,25(OH)2D3通过STAT5抑制Th17细胞分化的调控作用研究

目的研究1.25二羟基维生素D3[1,25(OH)_2D_3]抑制辅助性T细胞17(Th17)的分化与STAT5调控的关系。方法通过分选出的CD4+T细胞,在1,25(OH)_2D_3和/或STAT5抑制剂的作用下,采用ELISA法检测抑制剂处理后细胞培养上清液Th17细胞因子(IL-17A、IL-22)水平的变化;采用细胞免疫荧光技术检测STAT5的磷酸化水平,采用Western blot技术检测STAT5蛋白表达水平。结果 1,25(OH)_2D_3组细胞培养上清IL-17A和IL-22水平(12.5±0.5 ng/ml,48.5±0.9 pg/ml)明显低于对照组(22.7±0.5 ng/ml,73.8±1.9 pg/ml),而STAT5抑制剂组IL-17A和IL-22水平明显升高(33.5±0.7 ng/ml,89.1±1.4 pg/ml),1,25(OH)_2D_3与STAT5抑制剂联合作用细胞IL-17A和IL-22水平(18.5±0.7 ng/ml,54.1±1.6 pg/ml)显著高于1,25(OH)_2D_3组,但低于STAT5抑制剂组,差异有统计学意义(P<0.01);1,25(OH)_2D_3组细胞p-STAT5表达显著强于对照组,1,25(OH)_2D_3联合STAT5抑制剂组p-STAT5表达量低于对照组,而STAT5抑制剂组细胞p-STAT5表达量最低;1,25(OH)_2D_3组STAT5蛋白表达明显升高,而1,25(OH)_2D_3联合STAT5抑制剂组或STAT5抑制剂组STAT5蛋白表达明显降低,以STAT5抑制剂组细胞表达最弱,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 1,25(OH)_2D_3通过STAT5信号通路能抑制Th17细胞分化。

支气管哮喘儿童血清25羟维生素D3和白细胞介素17的关系

背景：研究发现，白细胞介素17和25羟维生素D3在支气管哮喘发病中扮演着重要的角色。目的：探索儿童支气管哮喘中自细胞介素17和25羟维生素D3是否存在关系。方法：收集80例支气管哮喘儿童和20名正常对照儿童的血清样本，使用放免法和酶联免疫吸附方法测量血清中白细胞介素17和25羟维生素D3并分析两者的相关性。结果与结论：与对照组相比，哮喘组儿童血清中白细胞介素17表达水平显著升高（P〈0．01），而25羟维生素D3表达水平明显降低（P〈0．01），同时发现哮喘组儿童血清中自细胞介素17表达水平和25羟维生素D3表达水平呈负相关（P〈0．01）。说明白细胞介素17和25羟维生素D3在儿童支气管哮喘的发病中重要作用。

支气管哮喘儿童血清25-(OH)D_3、IgE、IL-17、TGF-β1水平变化及意义

目的探讨支气管哮喘儿童血清25羟基维生素D_3[25(OH)D_3]、免疫球蛋白E(IgE)、白介素-17(IL-17)及转化生长因子-β1(TGF-β1)水平变化及临床意义。方法选取河北省邯郸市妇幼保健院儿科2016年1月至2016年8月收治的喘息性哮喘患儿60例(哮喘组),依据哮喘发作病情分为轻度和中重度哮喘发作患儿各30例,设立同期河北省邯郸市妇幼保健院健康体检儿童20例为对照组;采集各组儿童静脉血2mL,分离血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定各组血清25(OH)D_3、IgE、IL-17及TGF-β1水平,并对比不同病情患儿25(OH)D_3、IgE、IL-17及TGF-β1水平变化。结果哮喘组患儿血清25(OH)D_3水平低于对照组(P<0.05),血清IgE、IL-17及TGF-β1水平高于对照组(P<0.05);轻度哮喘组患儿血清25(OH)D_3水平高于中重度哮喘组(P<0.05),血清IgE、IL-17及TGF-β1水平低于中重度哮喘患儿组(P<0.05);相关性分析结果表明,对照组25(OH)D_3水平与IgE、IL-17、TGF-β1无相关性(P>0.05);哮喘组患儿25(OH)D_3水平与IgE呈负相关(r=-0.738,P<0.05),血清IL-17与TGF-β1呈正相关(r=0.877,P<0.05)。结论 25(OH)D_3、IgE、IL-17和TGF-β1在哮喘患儿发作中起重要作用,哮喘患儿血清25(OH)D_3水平下降,IgE、IL-17、TGF-β1水平上升,多提示病情加重,临床应注意防治。

血浆Th17细胞相关因子与25-羟基维生素D检测对宫颈癌的临床价值

目的探讨宫颈癌患者Th17细胞相关因子与25-羟基维生素D检测的临床价值。方法收集宫颈癌患者68例,其中腺癌28例、鳞状细胞癌40例,选取年龄与其相匹配的50例健康体检者作为对照组。分析25羟维生素D与白介素17(IL-17)、白介素6(IL-6)在各组间的差异及其相关性。结果宫颈癌患者血浆25-羟基维生素D浓度为(24.50±6.80)ng/ml,低于健康对照组(35.10±8.70)ng/ml,宫颈癌患者血浆IL-17浓度为550(350,705)ng/L,IL-6浓度为480(390,620)ng/L,均低于健康对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);腺癌患者血浆25-羟基维生素D、IL-17、IL-6浓度与鳞状细胞癌患者比较,差异无统计学意义(P>0.05);宫颈癌患者血浆IL-6、IL-17与25-羟基维生素D存在相关性(r分别=0.37、0.40,P均<0.05)。结论宫颈癌患者血浆25-羟基维生素D与Th17细胞相关因子浓度检测对治疗和预后监测具有一定临床价值。

血清1,25-(OH)_2D_3、IL-17、IL-35及MMP-9水平与哮喘急性发作期患儿病情严重程度的相关性研究

目的探讨血清1,25-二羟基维生素D_3[1,25-(OH)_2D_3]、白介素(interleukin,IL)-17、IL-35及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)水平与哮喘急性发作期患儿病情严重程度的相关性。方法选取2016年1月至2018年1月本院收治的285例哮喘急性发作期患儿为研究对象,根据病情严重程度将其分为轻度组(77例)、中度组(119例)和重度组(89例),并选取同期于本院体检的80例健康儿童纳入对照组。比较各组儿童血清1,25-(OH)_2D_3、IL-17、IL-35与MMP-9水平。结果四组儿童的血清1,25-(OH)_2D_3、IL-17、IL-35及MMP-9水平比较差异均有显著性(P_均<0.05),且两两比较均有显著差异(P_均<0.05);血清1,25-(OH)_2D_3和IL-35水平:对照组>轻度组>中度组>重度组;血清MMP-9和IL-17水平:对照组<轻度组<中度组<重度组。结论哮喘急性发作期患儿的血清1,25-(OH)_2D_3和IL-35水平显著降低,MMP-9和IL-17水平显著升高,与疾病严重程度有关,具有潜在的临床价值。

血清25(OH)D_3、hsa-miR-17-5p与HCV-RNA联合检测在丙肝疾病诊断中的意义

目的:研究血清25(OH)D_3、hsa-miR-17-5p与HCV-RNA联合检测在丙肝疾病诊断中的意义。方法:选取我院收治的丙肝患者100例为观察组,另选我院同期体检正常者100例为对照组,观察两组研究对象血清25(OH)D_3、hsa-miR-17-5p与HCV-RNA水平、不同HCV-RNA组别患者的血清25(OH)D_3、hsa-miR-17-5p水平、HCV-RNA与血清25(OH)D_3、hsa-miR-17-5p相关性以及联合检测与单独检测对丙肝诊断效能之间的差异。结果:观察组的hsa-miR-17-5p表达量明显高于对照组,25(OH)D_3表达水平低于对照组,HCV-RNA阳性组的hsa-miR-17-5p高于HCV-RNA阴性组,25(OH)D_3低于HCV-RNA阴性组,观察组的HCV-RNA与血清25(OH)D_3、hsa-miR-17-5p分别呈现正、负相关,通过对联合检测和单独检测对丙肝患者诊断效能评估,发现血清25(OH)D_3、hsa-miR-17-5p以及HCV-RNA的临界值分别为24.23μg/L,1.89相对表达量,1.22×10~3 IU/mL。hsa-miR-17-5p+25(OH)D_3+HCV-RNA联合检测的AUC面积大于单独检测。结论:血清25(OH)D_3、hsa-miR-17-5p与HCV-RNA联合检测对于丙型肝炎诊断效能较高,灵敏度较好,建议在临床应用。

糖尿病周围神经病变的维生素D水平及与IL-13、IL-17的相关性研究

目的糖尿病周围神经病变(diabeticperipheralneuropathy,DPN)的维生素D水平及与白细胞介素13(interleukin-13,IL-13)、白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)的相关性。方法选取2017年1月-2018年11月在河北省秦皇岛军工医院诊疗的82例2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者(T2DM组)。与其同时纳入30名体检健康志愿者(健康对照组)。根据有无DPN将82例T2DM患者分为DPN组(n=53)与无DPN组(NDPN组,n=29)。比较T2DM组患者与健康对照组25-(OH)D水平,进一步比较DPN组与NDPN组患者的25-(OH)D水平。采用Pearson’s检验分析25-(OH)D与IL-13、IL-17相关性。采用多因素Logistics回归分析探讨T2DM患者发生DPN的危险因素。结果 T2DM组患者25(OH)D水平低于健康对照组(P<0.05);DPN组年龄、病程、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、IL-17均高于NDPN组(P<0.05);正中神经运动神经传导速度(median motor nerve conduction velocity,MNCV)、正中神经振幅(median nerve amplitude,MNA)、腓总神经运动神经传导速度(peroneal motor nerve conduction velocity,PMCV)、腓运动神经振幅(peroneal motor nerve amplitude,PMNA)、正中神经感觉神经传导速度(median nerve sensory nerve conductionvelocity,MSCV)、正中运动神经振幅(medianmotornerveamplitude,MMNA)、25(OH)D、IL-13均低于NDPN(P<0.05)。疼痛型DPN患者的25(OH)D水平低于无痛型DPN患者且差异具有统计学意义(P=0.003);NDS评分中重度患者25(OH)D水平高于轻度、低于中度患者(P<0.05);DPN组患者25(OH)D与IL-13呈正相关(r=0.559,P=0.000);与IL-17呈负相关(r=-0.363,P=0.008);年龄、病程、HbAlc、IL-17是T2DM患者发生DPN的危险因素(P<0.05);25(OH)D、IL-13是T2DM患者发生DPN的保护因素(P<0.05)。结论维生素D缺乏可以下调IL-13水平,上调IL-17水平来促进DPN的发生,且与DPN类型及神经病变的严重程度相关,但是这一结论需要进一步的研究来证实。

Graves病血清TC及F水平变化临床观察

为观察Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）血脂和肾上腺皮质功能的动态变化，对２４例ＧＤ患者使用抗甲状腺药物（ＡＴＤ）治疗前后分别测定血清胆固醇总量（ＴＣ）、皮质醇（Ｆ）及２４小时尿１７－羟皮质类固醇（１７－ＯＨ），结果：治疗前ＴＣ为３．９３±０．７９ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｆ为１２．４６±５．０８μｇ／ｄＬ，１７－ＯＨ为１０．５３±６．２２ｍｇ／２４小时尿。治疗后ＴＣ为５．３２±０．９６ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｆ为１７．８９±６．１４μｇ／ｄＬ，１７－ＯＨ为１３．５６±５．６６ｍｇ／２４小时尿。治疗后ＴＣ及Ｆ明显升高（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．０１），且二者呈明显正相关（ｒ＝０．３５０）。１７－ＯＨ亦升高（但Ｐ＞０．０５）。

先天性肾上腺皮质增生症早期治疗回顾分析

目的探讨先天性肾上腺皮质增生症（CAH，21-羟化酶缺乏）早期治疗的疗效。方法回顾性分析1997年至2011年出生，在6月龄内诊断并开始治疗的69例CAH患儿病史资料，了解早期治疗对患儿生长发育的影响，探讨治疗随访的评估指标。结果69例患儿于生后4～180d开始接受治疗，平均中位年龄47d；平均生长速率为（7．4±1．1）cm，年；末次随访中位年龄3．4岁（0．67～9．92岁），身高均位于正常儿童生长水平的第25-50百分位；76％患儿的骨龄接近实际年龄；预测男女患儿终身高分别为（168．9±8．5）cm和（155．4±8．0）cm，71％位于遗传靶身高范围内，优于以往报道的诊断和治疗年龄〉1岁患儿的终身高[（151．0±7．0）cm]；真性性早熟发生率为5．79％（4／69），低于以往报道≤3岁及〉3岁治疗者性早熟发生率（分别为14％及50％）；治疗期间电解质、促肾上腺皮质激素（ACTH），睾酮水平控制正常比例占86％-93％，17-羟孕酮波动较大；促肾上腺皮质激素、17-羟孕酮、睾酮呈正相关。结论早期治疗能改善CAH患儿的生长，降低性早熟发生率，提高终身高。

生化与影像学检查对Cushing综合征的诊断价值

目的探讨各项生化与影像学检查对Ｃｕｓｈｉｎｇ综合征的诊断价值。方法对经手术和病理证实的３２例Ｃｕｓｈｉｎｇ综合征（Ｃｕｓｈｉｎｇ病所致的肾上腺皮质增生２２例，肾上腺腺瘤８例，肾上腺癌１例，异源性ＡＣＴＨ综合征１例）进行回顾性分析。结果①血皮质醇（Ｆ）单次升高者占８４．４％，昼夜节律失常率为１００％；②２４ｈ尿１７－羟皮质类固醇（１７－ＯＨ）：增生组９０．９％升高，腺瘤组８７．５％升高；③２４ｈ尿游离皮质醇（ＵＦＣ）：测定的８例患者（增生者６例，腺瘤者２例）ＵＦＣ均明显升高（１００％）；④血浆ＡＣＴＨ：测定的８例中，增生者５例升高（５／８，６２．５％），而腺瘤者２例均在正常水平以下，１例异源性ＡＣＴＨ综合征升高；⑤小剂量地塞米松抑制试验（ＤＳＴ）：增生组阳性率均为９５．５％，腺瘤组１００％；⑥大剂量ＤＳＴ：增生组阳性率分别为８１．８％和７２．７％；而腺瘤组均不被抑制（抑制率均＜５０％）；⑦Ｂ超：增生组６８．２％、腺瘤组８７．５％有阳性发现；⑧肾上腺ＣＴ：增生组９０．９％、腺瘤组１００％有阳性发现；颅脑ＣＴ：增生组中的２０例行ＣＴ检查，仅２例（１０％）垂体有阳性发现。结论血Ｆ昼夜节律失常、ＵＦＣ测定与小剂量ＤＳ?

维生素D在子宫内膜异位症免疫发病机制中的作用研究

目的观察子宫内膜异位症(EMT)患者外周血中25(OH)D_(3)、Th17和Treg细胞及其分泌的相关细胞因子的表达水平并分析其相关性,从而探讨子宫内膜异位症的免疫发病机制。方法采用病例对照研究法,分别收集观察组(40例)和对照组(40例)患者外周静脉血,采用酶联免疫吸附试验测定法检测两组患者血清中25(OH)D_(3)、Th17、Treg、IL-17、IL-6、IL-10、TGF-β的表达水平。结果与对照组比较,观察组25(OH)D_(3)、Treg、IL-10、TGF-β表达水平明显降低,而Th17、IL-17、IL-6表达水平明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),外周血中呈现Treg向Th17细胞飘移现象;观察组25(OH)D_(3)与Th17、IL-17、IL-6的表达水平均呈负相关(r=-0.362、-0.514、-0.571,均P<0.05),而与Treg、IL-10、TGF-β的表达水平均呈正相关(r=0.683、0.433、0.314,均P<0.05);对照组25(OH)D_(3)与Th17、Treg及其分泌的细胞因子表达水平无相关性,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论维生素D可能通过调节EMT患者体内Th17/Treg免疫平衡系统参与EMT的发病,且维生素D与Th17/Treg细胞失衡二者间存在负相关。

1,25-(OH)_2D_3抑制脂多糖诱导的脐血CD4^+T细胞IL-13和IL-17的表达

目的本研究旨在探讨生命早期脂多糖(LPS)对脐血CD4+T细胞白介素-13(IL-13)和白介素-17(IL-17)表达的影响及1,25-(OH)2D3对其表达的干预作用,为维生素D的临床合理应用及其对哮喘等变态反应性疾病的防治提供理论依据。方法选取顺产的足月新生儿12例,断脐后立即取胎盘端脐静脉血50 mL,采用密度梯度离心法分离脐血单个核细胞(CBMCs),磁珠分选CD4+T细胞后依据不同的处理方法分为空白刺激组、LPS(10μg/mL)单独刺激组和LPS(10μg/mL)+1,25-(OH)2D3(10-8mmol/L)共刺激组。培养72 h后采用双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)和Real-Time PCR分别检测培养上清液中IL-13和IL-17水平及CD4+T细胞中IL-13和IL-17 mRNA表达。结果与空白刺激组相比,LPS单独刺激组培养上清液中IL-13和IL-17水平及CD4+T细胞中IL-13和IL-17 mRNA表达水平明显升高(均P<0.01),而1,25-(OH)2D3处理可降低其表达水平(均P<0.05),但仍高于空白刺激组(均P<0.01)。结论 LPS可促进脐血CD4+T细胞IL-13和IL-17的表达;1,25-(OH)2D3对于LPS诱导的脐血CD4+T细胞IL-13和IL-17表达具有抑制作用,提示1,25-(OH)2D3可能在变应原致敏的早期发挥一定保护作用。

不同剂量1,25-(OH)_2D_3对哮喘小鼠肺内高迁移率族蛋白B1及IL-17表达的影响

目的观察不同剂量1,25-二羟基维生素D3[1,25-(OH)2D3]对哮喘小鼠肺内高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及IL-17表达的影响。方法将50只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只。卵清蛋白混合液致敏并雾化吸入建立哮喘小鼠模型,低、中、高剂量组在每次激发前分别按1、4、10μg/kg给予腹腔注射1,25-(OH)2D3混合液,对照组和哮喘组以生理盐水替代。采用苏木精-伊红染色观察小鼠气道结构变化;免疫组化染色观察HMGB1、IL-17蛋白表达的变化,RT-PCR检测HMGB1及IL-17m RNA水平的表达变化。结果哮喘组气道壁厚度、HMGB1和IL-17的m RNA及蛋白表达水平均明显高于对照组(P<0.05);低、中剂量组气道壁厚度、HMGB1和IL-17的m RNA及蛋白表达水平均明显低于哮喘组,且上述指标在中剂量组均明显低于低剂量组(P<0.05);但高剂量组中气道壁厚度、HMGB1和IL-17的m RNA及蛋白表达水平均高于哮喘组(P<0.05)。结论 HMGB1及IL-17可能参与哮喘气道重塑过程;适量1,25-(OH)2D3能改善哮喘小鼠气道重塑,大剂量1,25-(OH)2D3可加重气道重塑。