多囊卵巢综合征患者血清DHEA-S、SHBG、17α-OHP检测的临床意义

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)、性激素结合球蛋白(SHBG)和17α-羟孕酮(17α-OHP)检测的临床意义。方法选取2020年1月1日—2023年3月8日上海市奉贤区奉城医院PCOS患者110例(PCOS组)、同期体检健康女性550名(正常对照组)。检测所有研究对象血清DHEA-S、SHBG和17α-OHP水平。采用多因素Logistic回归分析评估PCOS发生的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价DHEA-S、SHBG、17α-OHP诊断PCOS的效能。结果PCOS组血清DHEA-S和17α-OHP水平均显著高于正常对照组(P<0.01),SHBG水平显著低于正常对照组(P<0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,DHEA-S、SHBG和17α-OHP均是PCOS发生的危险因素[比值比(OR)值分别为3.546、0.931、5.742,95%可信区间(CI)分别为1.504~8.448、0.882~0.982、1.869~17.648,P<0.01]。DHEA-S、SHBG、17α-OHP单项检测和联合检测诊断PCOS的曲线下面积(AUC)分别为0.823、0.868、0.869、0.968。结论PCOS患者血清DHEA-S和17α-OHP水平显著升高,SHBG水平显著降低,三者联合检测在PCOS的辅助诊断中有较高的临床价值。

酶联免疫吸附法与放射免疫法检测17羟孕酮的结果比较

目的分析酶联免疫吸附法与放射免疫法检测17羟孕酮的结果,探讨其灵敏度和特异度的差异,为临床医生正确使用、解读报告单提供有利的诊断依据。方法用酶联免疫吸附法与放射免疫法分别检测40例先天性肾上腺皮质综合征患者和50例健康对照者血清中的17羟孕酮,观察其灵敏度和特异度;用统计学方法分析两种方法的差异性。结果酶联免疫吸附法在先天性肾上腺皮质患者中测定17羟孕酮的灵敏度为90%,特异度为100%,放射免疫分析法在先天性肾上腺皮质患者中测定17羟孕酮的灵敏度为95%,特异度为100%。结论酶联免疫吸附法和放射免疫法检测17羟孕酮,二种方法结果之间的灵敏度和特异度差异均无统计学意义。二者结果之间的一致性非常高,对于一些临床上开展不了放免法的医院,开展酶联免疫吸附法也能够满足临床质量要求,同时酶联免疫吸附法较放射法操作简便,对人体无害,更具有可操作性。另外,临床医生在看不同医院结果的时候,还需了解方法学之间的差异性,综合临床诊断与其他检测项目并进行综合分析,才能对患者做出更好的诊断与治疗。

贵阳市新生儿筛查中心新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查分析

目的探讨贵阳市新生儿遗传代谢病筛查中心新生儿先天性肾上腺皮质增生症(CAH)的筛查数据,了解本地新生儿CAH的发病情况,总结筛查经验,讨论整改措施。方法对来自贵阳市65家助产机构出生于2019—2020年的118670例新生儿干血斑标本,应用时间分辨免疫荧光法分析干血滤纸片上的17-羟孕酮(17-hydroxyprogesterone,17-OHP)水平。结果在中心检测的118670名新生儿中,有6名被诊断患有CAH(男性3名,女性3名),CAH在本市的发生率为1∶19778。不同性别、出生体重、早产和足月儿组间17-OHP指标浓度值差异有统计学意义(P<0.05)。结论新生儿肾上腺皮质增生症筛查有利于对新生儿进行早期诊断及治疗。本病在贵阳地区的发病率为1∶19778。

不同出生孕周新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查中17-羟孕酮切值初探

目的探讨建立适合本中心的关于足月儿(孕周≥37周)及早产儿(孕周<37周)先天性肾上腺皮质增生症(CAH)筛查中17-羟孕酮(17-OHP)的切值。方法采用荧光酶免疫分析方法检测新生儿滤纸干血斑中17-OHP的浓度,去除确诊病例的17-OHP浓度数据,采用百分位数法确定切值。结果 4700例早产儿中,17-OHP浓度分布水平为(15.96±10.34)ng/ml;65496例足月儿中,17-OHP浓度分布水平为(10.21±4.96)ng/ml。早产儿17-OHP浓度的95%百分位数和99%百分位数分别为35.65、51.92 ng/ml,足月儿17-OHP浓度的95%百分位数和99%百分位数分别为19.23、26.87 ng/ml,两组新生儿17-OHP浓度差异有统计学意义(P<0.01)。结论结合本中心的实际情况,采用统一17-OHP切值进行新生儿CAH筛查不合理,建议早产儿17-OHP切值采用50.0 ng/ml,足月儿17-OHP切值采用25.0 ng/ml,以减少假阳性率和需召回率。

新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查中17羟孕酮切值的建立

目的回顾性分析2010年1月-2010年9月，我院新生儿先天性肾上腺皮质增生症（CAH）的筛查数据，初步探讨不同性别、出生孕周及体重的新生儿17-羟孕酮（17-OHP）分布情况，并结合临床确诊病例，设定合理的筛查切值。方法采用时间分辨荧光免疫分析方法检测新生儿末稍血17-OHP浓度，采用百分位数法确定切值。结果新生儿筛查的17-OHP检测水平呈偏态分布；不同性别、体重及孕周的17-OHP亦有显著性差异；根据稳健回归统计发现孕周与170HP的相关性最好，所以在设定切值时分设早产儿和足月儿即可。早产新生儿（〈37周117-OHP的99％百分位数值为66．1nmol／L；正常孕周（≥37周）新生儿17-OHP的99％百分位数值为26．6nmol／L，与早产新生儿组差异有显著性（P〈0．01）。本文跟踪统计了从2010年1月到2011年8月间筛查的88061例活产新生儿，一共确诊了17例CAH，其中失盐型2例，发病率为1／44030；单纯男化型1例，发病率为1／88061；非典型14例，发病率为1／6290。结论中山地区的CAH发病率明显低于全国水平。用统一的17-OHP切值30nmol／L对新生儿CAH筛查结果有一定影响，建议早产儿筛查切值为60nmol／L，以减少假阳性率和召回率。

391714例新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查与基因检测

目的了解广西地区先天性肾上腺皮质增生症(CAH)的发病率与基因检测结果。方法选择2015-2021年期间在广西新筛中心管辖范围内的168家助产医院出生的391714例新生儿为研究对象,采用时间分辨荧光法检测17羟孕酮(17-OHP),对可疑阳性患儿召回复查,对二次召回阳性患儿结合相关临床辅助检测,采用Sanger测序联合MLPA技术对患儿21-羟化酶基因CYP21A2基因进行检测,确定基因型。结果391714例新生儿中,CAH初筛阳性1769例,确诊21例,确诊年龄为2~27 d,发病率为1/18653;确诊患儿均能发现相关基因变异,且CYP21A2基因变异多样化,c.293-13A/C>G是本地区的热点变异,发生率为33%。结论对21-羟化酶基因的检测,可检测出CYP21A2基因点突变和大片段缺失;结合17-OHP升高、临床表现从而有效诊断CAH患儿,可防止威胁生命的肾上腺皮质危象的发生。

羊水17羟孕酮的酶免疫法测定

本文报道的17羟孕酮(17-Hydroxyprogesterone,17-OHP)酶免疫荧光法。采用混合酐醛法制备17-OHP与辣根过氧化酶(HRP)结合物。利用羊抗兔IgG抗血清吸附的聚甲醛固相珠分离游离与结合的17-OHP-HRP。双氧水和对羟苯丙酸作为酶反应基质。通过荧光法测定酶的活性。该法的灵敏度为0.25～0.5pg/20μ1,组内、组间变异系数分别为5.00～7.95%,1.91～4.81%。在建立本法的同时,测定58例15～24孕周正常孕妇羊水,平均值45.71±26.56(5.22～120.42)pg/20μl,并且对一位高危先天性肾上腺皮质增生症(Congenital Adrenal Hyperplasia,CAH)产妇进行了孕中期羊水17-OHP测定,浓度为32pg/20μl,足月分娩一男婴,体检正常,出生72小时血清17-OHP正常,诊断为正常新生儿,与产前诊断符合。

AutoLumo A2000检测系统检测17-α-羟孕酮的性能验证及评价

目的对AutoLumo A2000检测系统检测17-α-羟孕酮(17-α-OHP)的分析性能进行评价。方法参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)系列文件,制订方法学评价方案,对AutoLumo A2000检测系统的精密度、灵敏度、线性范围、干扰试验和参考区间进行评价和验证。结果分析室内质控品QC1批内精密度为2.85%,批间精密度为1.25%,室内质控品QC2批内精密度为3.25%,批间精密度为2.65%;分析灵敏度为0.005 ng/mL;线性相关系数R 2为0.9998,在试剂参考范围内线性良好;高胆红素和高三酰甘油水平对检测结果无显著干扰,高血红蛋白水平对结果影响明显;参考区间偏倚为-4.34%。结论AutoLumo A2000检测系统检测17-α-OHP的分析性能良好,能够满足临床检测的需求。

新生儿血清中17-羟孕酮水平的影响因素研究

目的探讨新生儿血清17-羟孕酮(17-OHP)浓度的影响因素。方法选取2014年1月-2015年12月在西南医科大学附属医院分娩的1 585例新生儿作为研究对象,所有新生儿均排除先天性肾上腺皮质增生症者。采用时间分辨荧光免疫分析法检测17-OHP浓度,比较不同性别、胎龄、出生体重、分娩方法、胎儿数量、采血日龄、血糖水平、血p H值、有无出现感染、窒息、溶血性黄疸等特征的新生儿血清17-OHP浓度,采用多元线性回归来分析各临床特征与血清17-OHP浓度的关系。结果全部新生儿的血清17-OHP浓度为0~136.8 nmol/L,平均(16.68±6.83)nmol/L。胎龄为≤28周、29~32周、33~36周、37~41周、≥42周的新生儿血17-OHP的浓度分别为(24.23±2.18)、(22.34±3.23)、(18.56±4.54)、(16.10±5.72)及(14.18±2.56)nmol/L,极低出生体重儿、低出生体重儿、正常出生体重儿、巨大儿的新生儿血17-OHP的浓度分别为(23.87±2.25)、(21.84±3.36)、(16.17±6.08)及(14.43±3.18)nmol/L,各组比较差异有统计学意义(P<0.05)。多元线性回归结果表明,17-OHP浓度与多个因素有关,按作用从大到小依次为胎龄、出生体重、血p H值、血糖、窒息、感染、采血日龄、溶血性黄疸、分娩方法、胎儿数量。结论新生儿血清17-OHP的浓度受到胎龄、出生体重、酸碱平衡、血糖水平等多个因素的影响,故临床上要全面关注这些因素来综合判断血17-OHP的水平。

早产新生儿体重对CAH筛查中17-羟孕酮结果的影响分析

目的 探讨不同出生体重早产新生儿17-羟孕酮（17—OHP）分布状况，以及对筛查先天性肾上腺皮质增生症（CAH）结果的影响。方法 采用时间分辨荧光免疫分析方法检测新生儿末稍血17-OHP浓度。结果 体重〈1500g的早产新生儿17-OHP均数±SD为（63．3±16．3）nmol／L，体重1500～1999g的早产新生儿17-OHP均数±SD为（38．1±22．6）nmol／L，体重2000～2499g的早产新生儿17-OHP均数±SD为（28．1±12．7）nmol／L，体重≥2500g的早产新生儿17-OHP均数±SD为（20．8±10．2）nmol／L。正常体重组（≥2500g）的早产新生儿17-OHP值与其余三个低体重早产新生儿组比较，有显著性差异（P〈0．05）。结论 用统一17-OHP切割值〈30nmol／L对新生儿CAH筛查结果有一定的影响，建议低体重早产新生儿（〈2500g）的17-OHP切割值定为〈7Onmol／L较好，以减少假阳性率和召回率。

提高非经典21羟化酶缺乏症临床诊治水平:局限与展望

非经典21羟化酶缺乏症(NC-21OHD)是最常见的常染色体隐性遗传病之一,但其临床表现多种多样,缺乏特异性,常与多囊卵巢综合征(PCOS)混淆,极易漏诊误诊。同时,NC-21OHD患者的循证诊断和治疗、随访管理策略仍然面临许多困难,有不少具争议性的科学问题,本文着重从其临床特征、诊断与治疗等方面进行系统地阐述,以期提高临床对该病的认识。

月经稀发-多毛-不孕:浅谈非经典型21-羟化酶缺乏症临诊应对

患者女性,38岁,16岁时出现月经稀发、多毛,29岁时发现血清睾酮水平升高并诊断为多囊卵巢综合征,给予炔雌醇环丙孕酮片治疗,治疗期间月经恢复正常,血清睾酮水平无明显变化。38岁因婚后5年未孕,进一步检查发现血清17-羟孕酮、硫酸脱氢表雄酮水平升高,通过促肾上腺皮质激素刺激试验和基因分析最终确诊为非经典型21-羟化酶缺乏症。本病例提示患者出现月经稀发、多毛、高雄激素血症并不孕时,应警惕不典型先天性肾上腺皮质增生症。

新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查的初步报告

目的开展新生儿先天性肾上腺皮质增生症(CAH)筛查,降低残疾儿童的发生率,提高人口素质。方法采用时间分辨荧光免疫分析法检测新生儿滤纸干血片上的17-羟孕酮(17-OHP)浓度。结果筛查93 971例新生儿,确诊5例,CAH发生率为1/18 795;98.7%的新生儿17-OHP<40 nmol/L。结论开展新生儿CAH筛查可以早期诊断和治疗CAH,值得在我国推广。17-OHP的阳性临界值取40 nmol/L是可行的。

我国2015年新生儿遗传代谢病筛查指标切值的调查

目的调查我国新生儿遗传代谢病筛查检验指标的切值情况，为新生儿遗传代谢病筛查工作提供建议。方法调取国家卫生计生委临床检验中心2015年全国新生儿遗传代谢病筛查指标苯丙氨酸（Phe）、促甲状腺激素（TSH）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）和17-羟孕酮（17-OHP）室间质量评价回报结果中切值相关信息，包括实验室编码、单位名称、所在地区、指标切值、切值来源、方法学原理、仪器、试剂和校准品。分析不同地区、方法学原理和切值来源对4个指标切值大小的影响。结果220家实验室中，切值来源中所占比例最高的3项依次为：试剂厂家说明书（48．2％-69．8％）、实验室自行确定（27．7％～35．2％）和新生儿疾病筛查技术规范（0．0％-20．0％）。参加研究的机构数量最多的3个省份分别为广东（25家）、山东（17家）和江苏（16家）。对切值情况调查显示：Phe切值分布在1．60～5．00mg／dL；TSH切值分布在4．82-18．00mlU／L；G6PD切值在2．00～10．00U／gHb；17-0HP切值在23．20～60．00nmol／L范围内。对于Phe指标，各来源组和方法组切值差异均有统计学意义（P均〈0．05）；对于TSH指标，各来源组间切值差异有统计学意义（P〈0．05），但方法组间差异无统计学意义（P〉0．05）；对于G6PD和17-OHP指标，不同来源和方法组的切值差异均无统计学意义（P均〉0．05）。结论各个检验指标切值较为一致，有个别实验室切值差异较大，建议各实验室对现有不同方法的切值进行评审。

四川省新生儿筛查中心新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查分析

目的分析四川省新生儿筛查中心新生儿先天性肾上腺皮质增生症(CAH)的筛查数据,了解其筛查情况。方法回顾性分析2015年1月至2018年12月四川省新生儿筛查中心筛查片区各接生单位送检新生儿样本共271283例,采用荧光酶免疫分析方法检测新生儿滤纸干血斑中17羟-孕酮(17-OHP)的浓度,正常体重足月儿同一标本两次结果均≥30nmol/L,早产儿和低体重儿初次结果≥30nmol/L者召回复查,召回复查结果仍≥30nmol/L者进一步检查确诊。结果271283例新生儿中,确诊CAH患儿16例。早产儿、低体重儿和足月儿17-OHP浓度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论了解新生儿CAH的筛查情况,可以为新生儿CAH的早期筛查、确诊和治疗提供依据。

先天性肾上腺皮质增生症的诊治进展

先天性肾上腺皮质增生症是一组因类固醇激素生物合成过程中某种酶先天性缺乏引起的常染色体隐性遗传病，临床上可表现为失盐、脱水、外生殖器性别不清、生长过速和典型的激素异常，易漏诊或误诊。常见多种酶缺陷，其中以21-羟化酶缺失症最常见，占该病的90％～95％。不同类型的鉴别依赖于激素水平测定及基因型分析。目前对先天性肾上腺皮质增生症的诊断已上升到了分子水平，可直接进行基因缺陷的诊断，产前诊断和新生儿筛查方兴未艾。治疗方法除了外科手术，糖皮质激素疗法是先天性肾上腺皮质增生症的经典治疗方法，使用剂量得当与否至关重要。

液相色谱串联质谱技术在新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查的运用

目的采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术,对传统新生儿先天性肾上腺皮质增生症(CAH)筛查方法进行改进。方法对73例时间分辨荧光法(TRFIA)初筛异常的疑似CAH患儿,先用基因分析技术为诊断标准分为CYP21A2基因突变患者、携带者和非CAH21新生儿,再用LC-MS/MS测定17-羟孕酮(17-OHP)和21-脱氧皮质醇(21-DF)浓度,最后比较LC-MS/MS技术与TRFIA法的差异。结果73例研究对象中,CAH21患者6例,携带者9例,非CAH21新生儿58例。LC-MS/MS法的17-OHP浓度1.65~218.63ng/mL,21-DF浓度0.112~23.300ng/mL;其中,CAH21患儿的17-OHP浓度显著高于携带者或非CAH21新生儿(均P<0.001);21-DF浓度:CAH21患儿>携带者>非CAH21新生儿(分别P<0.001和P<0.05)。Deming回归和Bland-Altman偏差分析:LC-MS/MS技术与TRFIA法检测结果的关联性良好,但后者明显高于前者。根据LC-MS/MS技术检测正常人群上述两指标的参考范围,前者假阳性27例,为TRFIA法40.30%;后者假阳性13例,为TRFIA法19.40%。结论LC-MS/MS技术应用对初筛阳性的疑似CAH患儿进行原干血片测定17-OHP和21-DF浓度,可降低TRFIA过高的假阳性率。

针刺对孕期高雄大鼠雄性子代的影响

目的:探讨针刺对大鼠孕期高雄激素血症环境子代雄性大鼠的影响。方法:通过母体高雄环境建立子代雄性大鼠高雄激素血症模型。孕鼠皮下注射丙酸睾丸酮或油剂,以雄性子代为实验对象,即模型组和油剂组,将模型组分为针刺组和对照组。治疗后检测脂肪代谢、糖代谢、肾上腺相关指标。结果:模型组和油剂组比较,睾酮水平无显著性差异,17-羟孕酮水平升高。治疗前后针刺组和对照组比较,OGTT无显著性差异。治疗前针刺组DHEAS差值与对照组比较无显著性差异,治疗后显著降低(P<0.01)。治疗后针刺组较对照组比较体重下降明显(P<0.05);针刺组脂肪湿重较对照组显著减轻(P<0.05)。结论:孕鼠注射丙酸睾丸酮可诱导子代雄性大鼠发生高雄激素血症。针刺丰隆、天枢、足三里、三阴交对DHEAS水平有调节作用,对类多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠亲代的肥胖有治疗作用。

液相色谱串联质谱法分析血清中多囊卵巢综合征相关甾体激素的性能评价

目的建立液相色谱串联质谱法定量检测血清中17-α-羟孕酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸酯的方法,并对其进行性能分析评价。方法采用液相色谱串联质谱法定量检测血清中17-α-羟孕酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸酯的含量。根据《中国药典》(2015年版)通则中9012“生物样品定量分析方法验证指导原则”和《液相色谱串联质谱临床检测方法的开发与验证》对所建方法的线性范围、检出限、精密度、样本稳定性、回收率和携带污染率等基本性能进行确认。结果液相色谱串联质谱法定量检测血清中17-α-羟孕酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸酯的线性范围分别为0.16~40 ng/mL、0.16~40 ng/mL、32~8000 pg/mL、0.16~40 ng/mL、2~500μg/dL,检出限分别为0.008 ng/mL、0.008 ng/mL、0.0032 ng/mL、0.008 ng/mL、1 ng/mL,定量下限分别为0.032 ng/mL、0.016 ng/mL、0.0064 ng/mL、0.016 ng/mL、4 ng/mL,批内变异系数(CV)和批间CV均小于15%,回收率分别为89.79%~101.23%、87.23%~98.33%、91.39%~101.10%、86.99%~94.30%、86.35%~108.35%。同时,血清中各激素在-20℃保存条件下7 d内是稳定的。结论建立的液相色谱串联质谱法基本性能符合评价标准,能够灵敏且准确地检测血清中17-α-羟孕酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮和脱氢表雄酮硫酸酯的含量。

多囊卵巢综合征相关雄性激素的液相色谱-串联质谱检测

建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测血清中硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)、雄烯二酮(A4)、睾酮(T)、17-羟基孕酮(17-OHP)、双氢睾酮(DHT)5种激素的分析方法。血清样本经蛋白沉淀后,采用固相萃取,经Agela Venusil MP C18色谱柱(3.0 mm×50 mm,3μm)分离,以含0.1%甲酸的甲醇和含0.02%甲酸的水为流动相进行梯度洗脱。使用正-负离子多反应监测模式进行数据采集。结果表明,5种激素在各自质量浓度范围内线性关系良好(r2>0.995),回收率为96.0%~105%,各激素的批内精密度和批间精密度均小于10%,DHEAS、A4、T、17-OHP、DHT的定量下限(LOQ)分别为5.00、0.05、0.05、0.025、0.025 ng/mL。该方法快速、准确、灵敏,适用于临床对多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清雄性激素水平的检测。