大肠杆菌Nissle 1917鞭毛蛋白FliC的结构特性及刺激Caco-2细胞作用的研究

试验旨在分析大肠杆菌Nissle 1917鞭毛蛋白FliC(FliC_(EcN))的结构特征及其对Caco-2细胞的刺激作用。试验通过大肠杆菌BL21(DE3)表达FliCEcN蛋白、经NTA柱纯化FliC_(EcN)蛋白并通过SDS-PAGE和Westernblot验证,利用SOPMA和Alphofold2预测FliC_(EcN)蛋白的结构模型、表面增强拉曼光谱和圆二色谱解析FliC_(EcN)蛋白的结构,使用FliC_(EcN)蛋白刺激Caco-2细胞后,检测免疫相关因子的分泌水平。结果显示,FliC_(EcN)蛋白的大小为64kDa,能够被抗His单克隆抗体特异识别;FliC_(EcN)蛋白的氨基和羧基末端主要由α-螺旋组成,中间结构域主要由β-折叠组成。FliC_(EcN)蛋白酰胺Ⅰ区最大吸收峰均位于1656 cm^(-1)处,主要二级结构为α-螺旋和β-折叠;FliC_(EcN)的α-螺旋占比44.4%,β-折叠占比23.4%,β-转角占比13.5%,无规则卷曲占比19.0%;FliC_(EcN)蛋白能够有效刺激Caco-2细胞分泌白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10);随着刺激时间延长,IL-6的分泌水平呈下降趋势,IL-10和TNF-α的分泌水平呈增加趋势。研究表明,α-螺旋和β-折叠是构成FliC_(EcN)的主要结构,可促进其构象的正确折叠和维持其三维结构稳定,FliC_(EcN)蛋白刺激Caco-2细胞分泌IL-6、IL-10、TNF-α的水平存在差异。

论电影《1917》“一镜到底”断点处影像意义

2020年上映的反战影片《1917》导演萨姆•门德斯,运用“一镜到底”的技术手段,完成了将近两小时的战争叙事。他用三次黑场过渡的方式在连续不断的画面中形成断点,从而以断点来带动叙事节奏,推动情节发展,并在黑场过渡所形成的间离效果中完成他者意义表达。萨姆•门德斯没有把“一镜到底”的影像意义局限于时间真实性与空间客观性,其在影片的断点处完成了时间凝缩与空间转换,以巧妙的影像表现手法完成了情节意义的表达,实现了技术手段与艺术技巧的高度融合。

战争电影中多模态隐喻的认知建构——以《1917》为例

隐喻不仅存在于语言本身,还可以通过声音、图像等其他模态表达,从而形成了多模态隐喻。在电影中,多模态隐喻能够调动观众更多的感官体验,从而推动电影主题的表达。本研究在认知语言学的概念隐喻的基础上,对战争电影《1917》进行案例分析,着重探讨多模态隐喻在战争电影中的认知建构过程,分析各种模态的映射过程,揭露战争电影如何通过多模态隐喻来强化电影主题的表达,从而能够帮助观众更好地理解电影情节及主题,同时也进一步说明了多模态隐喻在战争电影中的广泛运用。

俄国1917年革命和内战期间各种势力在乌克兰的角逐及结果

乌克兰历史文化复杂,乌克兰三次争取独立的历史都与国际地缘政治的变化相关联。第一次世界大战、1917年俄国革命及俄国内战导致的地缘政治变化为乌克兰提供了在帝国废墟上建立自己国家的客观条件。但由于乌克兰地区各种势力的不同要求,各种力量在乌克兰地区激烈博弈,最后布尔什维克取胜。一战前乌克兰地区分属于俄罗斯帝国和奥匈帝国两国,一战后,则分属于四个国家:苏维埃俄国获得了乌克兰的大部分,波兰获得了加利西亚和从前曾属于俄国的沃伦部分地区,捷克斯洛伐克获得了喀尔巴阡罗斯,罗马尼亚获得了比萨拉比亚和布科维纳。当时与俄罗斯及乌克兰问题利益相关的各国出于各自的利益考虑,也对乌克兰采取了不同的态度。研究俄国革命及内战期间乌克兰地区各种力量的争夺,对理解和认识当今俄乌冲突具有现实借鉴意义。

大肠杆菌Nissle 1917对炎症性肠病治疗作用的研究进展

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一组特定的肠道疾病的统称,主要体现为慢性及复发性的肠道炎症。其全球发病率正在迅速上升,严重影响人们生活质量与生命健康,已成为当前的全球性健康问题。在过去的几十年里,大量研究表明IBD的发病率与肠道菌群失调有关。因此,以肠道益生菌为主的治疗策略成为一大热点,其中大肠杆菌Nissle 1917(Escherichia coli Nissle 1917,EcN)备受关注。本文聚焦肠道益生菌EcN在治疗IBD中的应用与机制,系统地综述了EcN的益生菌特性,概述EcN在临床实践中对IBD的治疗应用,同时从上皮屏障完整性调节、免疫调节、黏液屏障保护和肠道菌群稳态等方面阐述EcN治疗IBD的具体作用机制。此外,结合当前的研究现状,讨论了未来基于工程化EcN新疗法的发展前景,强调EcN在IBD治疗和预防中的适用性和可行性策略,并对该领域未来的研究方向进行了展望,为进一步深入研究EcN治疗IBD提供思路和参考。

利用CRISPR/Cas9双质粒系统构建Nissle 1917ΔcheZ基因缺失株

为研究趋化性基因cheZ对大肠杆菌益生菌Nissle1917的影响,研究以敲除大肠杆菌Nissle1917的cheZ基因为目的.首先,利用诺唯赞ClonExpress®MultiS一步克隆试剂盒构建pTargetTΔcheZ重组质粒,随后将pTargetTΔcheZ重组质粒电转入含pCas质粒的Nissle1917感受态中,以实现对大肠杆菌益生菌Nissle1917染色体中cheZ基因进行靶向敲除,经PCR鉴定和基因测序双重证实,Nissle1917基因组中的cheZ基因已敲除.最后,经IPTG诱导和高温培养,消除缺失株中的pTargetTΔcheZ和pCas2个质粒,最终获得趋化性基因cheZ缺失株Nissle1917ΔcheZ.本试验为验证cheZ基因在益生菌Nissle1917中的生物活性及其扮演的基因功能的后续相关研究打下了前期基础.

生存与艺术之间——论尤金·奥尼尔1917—1923年的戏剧创作

在美国商业戏剧大行其道的十九世纪末,奥尼尔投身于小剧场运动创作的一系列独幕剧赢得了一些声誉。小剧场微薄的票房收入很难支撑实验戏剧的制作和巡演,实验探索之路极为艰难。因此,奥尼尔1917—1923年创作的几部叫好又叫座的作品显现出百老汇商业剧的诸多特征,在题材选择、剧本结构、情节设置、戏剧语言上都带有对观众心理和社会热点考量的明显痕迹。在资本与艺术理想的博弈下,奥尼尔致力于使剧场成为表达现代思想的平台。凭借几部高票房收入和普利策奖作品,1923年成了奥尼尔创作生涯中重要的分野,他终于不再捉襟见肘,走出了生存与艺术之间的夹缝,获得了完全的创作自由。

口服益生菌Escherichia coli Nissle 1917调控断奶仔猪空肠黏膜屏障功能的机理研究

旨在探讨口服益生菌Escherichia coli(E.coli)Nissle 1917调控病原菌E.coli Abbottstown攻毒或未攻毒21d断奶仔猪肠道屏障功能的机理。将20头21d断奶仔猪((6.35±0.38)kg)随机分为4组:(1)饲喂基础日粮的对照组(CON);(2)正试期口服E.coli Nissle 1917组(EcN);(3)预试期E.coli Abbottstown攻毒组(EcA);(4)预试期E.coli Abbottstown攻毒和正试期口服E.coli Nissle 1917组(EcN+EcA)。每个处理5个重复,每个重复1头仔猪。试验分为3d预试期和21d正试期。预试期EcA和EcN+EcA组的断奶仔猪接种5×10~9E.coli Abbottstown。正试期EcN和EcN+EcA组仔猪每天每头口服1×10~10E.coli Nissle 1917。试验结果表明,未攻毒的断奶仔猪中,与CON相比,口服1×10~10E.coli Nissle 1917能显著改善生长性能(P<0.05),降低腹泻率,提高oCcludin蛋白水平(P<0.05),显著降低空肠黏膜calprotectin蛋白水平(P<0.05),显著下调空肠黏膜蛋白激酶R(Protein kinase R,PKR)、toll样受体-2(Toll-like receptor-2,TLR-2)和真核起始因子-5A(eukaryotic initiation factor-5A,eIF-5A)mRNA的相对表达丰度(P<0.05),上调空肠黏膜内皮生长因子(Endothelial growth factor,EGF)、肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)、胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factor,IGF-I)、三叶肽因子-3(trefoil peptide factor-3,TFF-3)mRNA的相对表达丰度(P<0.05);在E.coli Abbottstown攻毒的断奶仔猪中,与EcA组相比,口服1×10~10E.coli Nissle 1917能显著改善生长性能(P<0.05),降低腹泻率,降低血清二胺氧化酶(DAO)活性(P<0.05)和一氧化氮(NO)含量(P<0.05),下调空肠黏膜PKR、eIF-5A和TLR-2 mRNA相对表达丰度(P<0.05),显著降低空肠黏膜calprotectin蛋白水平和淋巴细胞数量(P<0.05),显著提高空肠黏膜oCcludin蛋白水平(P<0.05),上调空肠黏膜IGF-I、HGF、TFF-3和EGF mRNA相对表达丰度(P<0.05)。本试验结果提示,口服1×10~10E.coli Nissle 1917能降低病原大肠杆菌攻毒或未攻毒21日龄断奶仔猪空肠黏膜屏障功能的损伤。

1917年海河流域洪涝灾害过程重建

洪涝灾害历来是影响中国的主要自然灾害之一。根据历史文献记载及观测资料,从天气过程、水文过程、受灾情况等方面对1917年海河流域洪涝灾害的自然过程作了详细梳理。得出以下结论:(1)1917年洪涝灾害呈现由台风袭扰→集中降水→山洪暴发/河流决口→积水/淹没→受灾的成灾过程。(2)7月份2次台风带来大范围暴雨,集中性降水出现于7月20—28日,沿燕山、太行山分布,而9月份2次台风带来的暴雨则使灾情更加严重。(3)1917年海河流域各河于7月中旬开始涨溢、决口,9月中旬上游降雨结束后,中下游水位趋于稳定并下降,10月份以后洪水才迟缓退去,而洪水泛滥引发的涝灾影响一直延续到1918年。(4)1917年洪涝灾害在海河南系和北系都有发生,南系尤为严重,共造成156个县受灾。受灾田亩级数在5级以上的区域主要集中于海河干流沿线、南运河沿线以及河北省文安县等低洼地区。

1917年海河流域洪涝灾害的社会响应过程

1917年是海河流域在20世纪中最为严重的几个洪涝灾害年之一,该文从4个方面归纳了灾害的社会影响的传递过程。(1)1917年海河流域在夏秋连遭台风影响,降雨时间长、强度大,导致河水涨溢、泛滥成灾。海河流域多地受灾,河堤被毁、耕地被淹、房屋倒塌、交通中断、城市内涝、人口死亡,出现大量灾民。(2)灾民向外逃难,部分进入城市。政府、社会和教会均参与了救灾工作,紧急发放急赈,并投入救灾物资,以及安置灾民。救灾组织帮助灾民自救,恢复生产。(3)政府组织成立专门的水利治理机构顺直水利委员会,兴修水利工程设施,并测绘地形图、设置观测站。(4)洪涝灾害的长期效应是成立顺直水利委员会,有效减少海河流域洪涝灾害,并奠定了我国现代水利管理制度体系的基础;城市的人口增长、经济发展也得益于于灾民。

益生菌大肠杆菌Nissle 1917抗逆性能、猪肠上皮细胞黏附率及抑菌效果研究

本试验旨在研究益生菌大肠杆菌Nissle 1917(Ec N)抗逆性能、猪肠上皮细胞黏附率及抑菌效果。采用体外法对Ec N进行生长曲线绘制和耐酸、耐胆盐、耐热性能的测定;以猪肠上皮细胞IPEC-J2细胞为体外细胞模型,考察了Ec N对该细胞的黏附率以及对致病菌大肠杆菌K88的黏附抑制率;同时通过蛋白质印迹法检测了Ec N对IPEC-J2细胞β-防御素-2和Toll样受体4的水平的影响。结果表明:1)Ec N对高酸、高胆盐和高温环境具有一定耐受能力。2)Ec N对IPEC-J2细胞的黏附作用以对数期最佳,黏附率达33.96%,显著高于迟缓期、稳定期和衰亡期(P<0.05)。3)Ec N对致病菌大肠杆菌K88具有良好的抑制效果,黏附抑制率达87.84%。4)Ec N还能上调IPEC-J2细胞β-防御素-2和Toll样受体4水平。结果提示,益生菌Ec N具有较好的抗逆性能,能够良好地黏附猪肠上皮细胞,对致病菌大肠杆菌K88具有良好的抑制作用。

大肠杆菌Nissle 1917株鞭毛展示6His标签的构建及相关生物学特性分析

为探索大肠杆菌Nissle 1917株(EcN)鞭毛展示的应用,本研究以重组质粒p UC18-fli C为模板,反向PCR产物经DpnⅠ、Exnase^(TM)Ⅱ重组环化,将6His标签基因分别插入无质粒大肠杆菌Nissle 1917(EcNcured of its two cryptic plasmids p MUT1和p MUT2;EcNc)fli C高变区774 bp^775 bp和792 bp^811 bp之间,构建嵌合鞭毛基因片段fliC01和fliC02。分别将其克隆于自杀性载体pRE112中,构建重组质粒pRE112-fliC01和pRE112-fliC02,并分别转化至EcNc中。通过一次重组和二次重组将嵌合鞭毛基因整合于EcNc基因组中,构建无抗性筛选的重组菌株EcNc fliC01和EcNc fliC02。对重组菌株进行生长状况、鞭毛形成以及体外细胞黏附试验和小鼠体内定植试验检测,结果表明EcNc fliC01和EcNc fliC02的生长未受影响,表达的嵌合鞭毛能够被H1多抗或His-Tag单克隆抗体识别并组装形成鞭毛丝;重组菌对IPEC-J2细胞的黏附能力及小鼠肠道定植能力与亲本株EcNc相比无显著性差异。本实验结果为进一步研究EcNc鞭毛展示技术应用于活疫苗研制奠定了基础。

大肠杆菌属Nissle 1917研究进展

大肠杆菌属Nissle 1917(EcN)是目前广泛应用的一种益生菌。研究发现EcN对常见胃肠道疾病有良好疗效,被广泛用于预防传染性腹泻、溃疡性结肠炎等炎性肠疾病,防止新生儿消化道内病原菌定殖等。近年研究发现EcN还具有免疫调节作用。本文对EcN的应用作一综述。

基于SN8P1917微控制器的输液无线自动呼叫系统

介绍了一种基于SN8P1917单片机的输液无线自动呼叫系统。该系统包括发送终端和接收终端;文中详细地介绍了发送终端的电路原理,同时也简要介绍了接收终端的原理;采用了高精度称重传感器来计量输液的重量,保证了系统的安全可靠;系统数据采用无线传输,安装简单便捷,接收终端具有声光报警,同时通过上位机可以实时查阅相关数据,系统设计优化,运行稳定可靠。

论1917年京畿直隶大水灾

河北省及其近京地区,在历史上出现过多次自然灾害,曾严重危及当地国民经济的运行和发展。尤其是民国六年(1917年)发生的特大水灾,其破坏力相当之大,百姓罹难极其深重。面对这次惨烈的灾情,北洋政府和民间积极行动起来,想方设法地予以应对,并及时开展和进行了种种减灾救灾的相关活动,一些国际友人也参与其间,取得了相应的效果。为后世积累了一定的经验和教训,很值得研究和探讨。

天灾与人祸:1917年京直大水灾及其成因探析

1917年,海河流域发生数十年、百年一遇的特大水灾,京直地区雨情、水情、灾情均十分严重。此次水灾,直接导源于气候、地理等自然因素,又与各种人为因素密不可分。其中,段祺瑞执政期间,军阀混战、政治动荡,大大限制了对水灾的预防和救治。此当为造成这次水灾异常严重的症结所在。此外,由于滥砍滥伐森林,造成严重的水土流失,加剧了河道淤塞,也是不容忽视的重要人为因素。1917年京直特大水灾,正是天灾与人祸分合交错的产物。

miRNA1917在番茄微重力反应过程中的作用

为确定miRNA1917在植物微重力反应中的作用,对番茄培养环境中乙烯含量、与乙烯相关的表型变化以及miRNA1917及其靶基因Le CTR4相对表达量进行了测定。结果表明：模拟微重力处理条件下,番茄出现下胚轴向地性弯曲和形成螺旋等乙烯三重反应表型,丙二醛和超氧阴离子含量受模拟微重力处理影响明显,植物培养环境中乙烯含量在培养前期（10~20d）差异显著,20d以后差异不显著,miRNA1917相对表达量随处理时间持续增加,其靶基因相对表达量相应降低。由此可见,番茄下胚轴弯曲和形成螺旋等表型与模拟微重力处理初期乙烯含量有关,但在处理后期（20d以后）,MDA和O2-积累等则与miRNA1917的相对表达量变化有关,miRNA1917相对表达量增加,导致其负调控乙烯反应的靶基因相对表达量减少,从而使植物对乙烯的反应灵敏度增加,即miRNA1917通过降低其靶基因表达量而增加了植物对乙烯的反应灵敏性,从而在微重力反应过程中发挥一定作用。该研究为确立miRNA介导的植物微重力反应过程奠定了基础。

1917年京直水灾救济中的“义赈”及其作用

1917年京直水灾救济采用委托慈善组织办理赈济的办法,使义赈组织成为此次救灾的主体,并有效促进了民间义赈事业的发展。为加强各义赈组织之间的合作,专门成立京畿水灾赈济联合会,开创了义赈组织联合办赈的先例。义赈组织不仅为此次水灾筹集了大量资金,而且受委托办理"急赈"和"官赈",并在"散赈""灾民收养"和"灾后恢复"等方面发挥了重要作用。然而,由于赈灾款物筹集困难、义赈组织间的协调性不强等原因,导致"义赈"多集中于某些重灾区,且赈灾款物分配不均,在一定程度上影响了"义赈"在此次水灾救济中的效果和作用。

官义合作,委托救灾——1917年京直水灾救济方式探析

1917年夏秋之际,直隶京兆一带发生特大水灾,受灾103县,灾民五六百万人。灾情发生后,北京政府成立了督办京畿一带水灾河工善后事宜处,任命熊希龄为督办,主持赈务和河工事宜。为联合中外各慈善团体,又成立了京畿水灾赈济联合会。这次水灾救济的急赈主要由各慈善团体担任,冬赈春赈则委托各义赈机构办理。在官绅两方的合作下,这次水灾救济取得了明显的成效,其官义合作、委托救灾的救灾方式显示出民初灾荒救济的新面貌,在中国近代救荒史上应占有一席之地。

知识分子与中国现代文学经典的建构——由《中国新文学大系》(1917～1927)引发的思考

本文在《中国新文学大系》(1 91 7-1 92 7)的基础上探讨中国现代文学经典的建构与知识分子主体的互动关系 ,认为知识分子编选作家全集、文集应该坚守人文精神阵地 ,保持理性批评眼光 ,才能建构和确立文学经典。