Lupalbigenin通过EGFR信号通路抑制非小细胞肺癌NCI-H1975细胞增殖

目的:探究Lupalbigenin是否通过表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)信号通路诱导非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)系中NCI-H1975细胞增殖。方法:主要采用了MTT法检测细胞毒性;用细胞形态学观察、细胞迁移实验、细胞克隆形成实验观察及检测细胞增殖能力;通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测Lupalbigenin对EGFR和其下游MAPK信号通路蛋白ERK及其磷酸化水平及其凋亡相关Cleaved PARP、P21、CDK4、CDK6、CyclinD1和CyclinA2以及抗凋亡蛋Bcl-2的影响。结果:结果显示Lupalbigenin在NCI-H1975细胞系上IC_(50)值为3.246μmol/L,并且呈浓度依赖性抑制细胞增殖;细胞形态学观察结果显示与空白组比较,10μmol/L Lupalbigenin实验组处理细胞24 h导致细胞核固缩、细胞质凝聚及细胞凋亡显著增加;迁移实验和集落形成实验结果显示,5μmol/L LG能够显著抑制细胞迁移和菌落形成能力;Western Blot检测结果表明,Lupalbigenin在较短时间内对EGFR/ERK蛋白磷酸化表达有显著的抑制作用。同时,Lupalbigenin处理后,Cleaved PARP和P21蛋白的表达水平显著上调,CDK4、CDK6、CyclinD1和CyclinA2以及Bcl-2蛋白的表达水平显著下降。结论:综上,Lupalbigenin可以调控EGFR及其下游相关蛋白的表达,从而抑制NCI-H1975细胞的增殖。

柠檬醛通过EGFR信号通路抑制NCI-H1975细胞增殖

该文探究柠檬醛是否通过表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)信号通路诱导非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)系中NCI-H1975细胞增殖。主要采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞毒性、流式细胞术检测细胞凋亡率、分子对接探究柠檬醛与EGFR蛋白结合位点,通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测柠檬醛对EGFR及其下游细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)蛋白表达的影响。研究结果显示柠檬醛在NCI-H1975细胞系上IC50值为114.5μmol/L,且100μmol/L的柠檬醛已对NCIH1975细胞的增殖产生显著抑制作用(P<0.05),呈浓度依赖性抑制细胞增殖;流式结果显示柠檬醛可增大细胞凋亡率,促进细胞凋亡;Western Blot检测结果表明,柠檬醛在100μmol/L时对EGFR/ERK蛋白磷酸化表达有显著抑制作用(P<0.05)。综上,柠檬醛可抑制NCI-H1975细胞增殖并能促进凋亡,通过抑制EGFR信号通路传导进而发挥作用。

金复康口服液对吉非替尼耐药肺腺癌H1975细胞有氧糖酵解的影响

目的 探讨金复康口服液联合吉非替尼对肺腺癌H1975细胞有氧糖酵解的影响。方法 首先采用CCK-8法检测不同浓度金复康口服液和吉非替尼对H1975细胞增殖的影响;然后实验分为空白组、吉非替尼组、金复康口服液组和联合用药组,采用2-NBDG荧光探针和乳酸测试盒分别检测各组细胞葡萄糖摄取能力及乳酸生成量,酶活性试剂盒检测细胞中糖酵解关键限速酶[己糖激酶(HK)、磷酸果糖激酶(PFK)、丙酮酸激酶(PK)]的活性,Western blot法检测细胞中己糖激酶2(HK2)、P型磷酸果糖激酶(PFKP)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)蛋白表达情况,JC-1、DCFH-DA荧光探针分别检测细胞线粒体膜电位和活性氧(ROS)水平。结果 金复康口服液对H1975细胞的生长抑制作用呈时间和剂量依赖性增强,差异均有统计学意义(P均<0.05);与不同浓度吉非替尼单独作用48 h比较,相应浓度吉非替尼联合金复康口服液作用后的H1975细胞增殖抑制率均更高(P均<0.05)。各给药组细胞葡萄糖相对摄取量与空白组比较差异均无统计学意义(P均>0.05);各给药组细胞乳酸生成量均明显低于空白组(P均<0.05),且联合用药组明显低于吉非替尼组和金复康口服液组(P均<0.05);吉非替尼组PFK、PK活性,金复康口服液组HK、PFK活性,联合用药组HK、PFK、PK活性均明显低于空白组(P均<0.05),且金复康口服液组与联合用药组HK、PFK活性均明显低于吉非替尼组(P均<0.05)。金复康口服液组和联合用药组HK2、PFKP、PKM2蛋白相对表达量及吉非替尼组PFKP蛋白相对表达量均明显低于空白组(P均<0.05),且金复康口服液组和联合用药组HK2、PFKP、PKM2蛋白相对表达量均明显低于吉非替尼组(P均<0.05)。与空白组比较,各给药组细胞线粒体膜电位明显下降,ROS明显增加,且联合用药组细胞线粒体膜电位下降和ROS增加更明显。结论 金复康口服液能通过抑制有氧糖酵解途径,降低细胞线粒体膜电位,促进ROS产生,增加H1975细胞对吉非替尼的敏感性。

Hierarchical Management to be Implemented on Ratification Risk of Certification Institution

Recently, the China National Accreditation Service for Conformity Assessment (CNAS) has promulgated Measures for Hierarchical Management of Ratification Risk of Certification Institution (hereinafter referred to as Measures), which was put into execution.……

钟敬文致谷兴云书札二十通(1975、1976年)辑注

谷兴云先生在20世纪70年代中后期的几年里,因为研究鲁迅和编印有关资料,曾与他的大学老师、著名的民间文学研究专家钟敬文教授频繁通信。钟敬文先生致谷兴云信札二十通,由谷兴云先生提供并整理。这些信札写作时间均在1975、1976年间,具有重要的文献价值和学术意义。谷兴云先生对信札所涉及的相关文史细节,作了必要的简注,可帮助学者理解其中的信札内容。

Singapore Convention on Mediation and Its Ratification in China

China has signed the United Nations Convention on International Settlement Agreements Resultingfrom Mediation 9 namely the Singapore Convention on Mediation,on August 7,2019,making it possible for China's domestic courts to resolve international commercial disputes by implementing settlement agreements resulting from international commercial mediation.Relying on the Belt and Road Initiative(BRI),numerous commercial mediation organizations have successively established and integrated mediation into the international commercial dispute resolution mechanism in making effort for the internationalization of China's commercial mediation system under the background of improving diversified dispute resolution mechanisms.Based on the status quo of commercial mediation in China,this article focuses on the connection and convergence between China's practice and the principle of the Convention,as well as discusses the rationality for its ratification.

除痰解毒方联合吉非替尼对肺腺癌H1975荷瘤小鼠Twist、Fibronectin表达的影响

本文研究除痰解毒方(Chutan Jiedu Decoction,CJD)联合吉非替尼对肺腺癌H1975荷瘤小鼠移植瘤twist、fibronectin表达的影响,从上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)角度探讨其抗肿瘤作用机制。建立人肺腺癌H1975耐药细胞荷瘤裸鼠模型,随机分为模型组,吉非替尼组,除痰解毒方低、中、高剂量组,除痰解毒方中剂量联合吉非替尼组,每组10只,各组予以相应的药物灌胃2周。检测瘤体积和瘤质量,计算抑瘤率,采用免疫组织化学法、Western blot法、荧光定量PCR法检测各组肿瘤组织twist、fibronectin蛋白及基因的表达。结果显示,联合用药组抑瘤率为61.92%,明显高于模型组、吉非替尼组,除痰解毒方低、中、高剂量组(P<0.01)。免疫组织化学法、Western blot法及荧光定量PCR法结果均显示除痰解毒方中剂量、高剂量及联合用药组均能下调twist和fibronectin的表达,且联合用药组下调作用高于单独用药组(P<0.01)。研究结果表明除痰解毒方联合吉非替尼对肺腺癌H1975荷瘤小鼠移植瘤生长及twist、fibronectin表达的抑制作用优于除痰解毒方单药及吉非替尼组,其协同增效作用可能与逆转EMT增强吉非替尼的敏感性有关。

五年来对邓小平1975年整顿研究述评

笔者从当前理论界对邓小平1975年整顿研究的整体概况出发,比较了各学派研究的初步成果,着重从指导思想、整顿的具体内容、整顿取得的成绩、整顿中断的原因以及整顿的历史地位等方面进行了分析和研究,对不同理论观点进行分析和分类汇总,系统概括了1975年整顿研究的阶段性成果并指出1975年整顿的研究的缺陷和不足。

1975年海城地震和1976年和林格尔强震与1976年唐山大震的关系讨论

从北纬40°纬向地震带活动的关系探讨了华北3次强震发生的同时性的原因,这条EW向地震带首先发生的地震传递的能量促使唐山积累了发震能量,而另一条由邢台、河间NE走向的下地壳蠕滑断层的能量传至唐山断层后,解锁了该孕震断层,从而发生了唐山大震。地震波的触发作用也是同步的另一个原因,除了震动的断层面的直接触发之外,对组合模式中单地震波的积累与调整也会产生触发作用而改变其性质。另外还从中国8级大地震发生的25年周期讨论了同步性。

雷公藤甲素与吉非替尼序贯应用对人肺腺癌细胞H1975存活及凋亡通路的影响

背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)被用于治疗进展性晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),然而最初接受TKIs治疗有反应的患者,大都会在10个月左右出现获得性耐药。报告称EGFR基因T790M的突变是产生获得性耐药的主要原因,比例约占50%。本研究旨在探索雷公藤甲素(triptolide,TP)和吉非替尼序贯应用对肺腺癌细胞H1975细胞增殖和凋亡通路的作用。方法 MTT法检测细胞的增殖。等效线图法和联合指数(combination index,CI)法评估雷公藤甲素和吉非替尼序贯作用的效价。流式细胞术检测细胞凋亡和周期分布,Hoechest 33258染色法检测凋亡形态。化学比色发光法检测Caspases的活性。结果等效线图法和联合指数法均显示雷公藤甲素序贯吉非替尼组较其他序贯作用组明显抑制了细胞增殖,增加了细胞的凋亡。细胞周期分布实验结果显示与吉非替尼序贯雷公藤甲素组主要把细胞抑制在G0/G1期相比较,雷公藤甲素序贯吉非替尼组主要把细胞抑制在G2/M期。在肺腺癌H1975中,所有序贯模型组都主要通过活化Caspase-9/Caspase-3来诱导激活细胞凋亡通路。结论先用雷公藤甲素再用吉非替尼治疗模式可能是克服T790M突变耐药的一个新选择。

多西他赛与吉非替尼序贯应用对人肺腺癌细胞H1975存活及凋亡通路的研究

背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosinekinase inhibitors,TKIs)被用于治疗进展性晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),然而最初接受EGFR-TKIs治疗有反应的患者,大部分会在10个月左右出现获得性耐药。绝大多数报告称T790M的突变是产生获得性耐药的主要原因,约占获得性耐药的50%。本研究旨在探索多西他赛和吉非替尼序贯应用对肺腺癌细胞H1975增殖和凋亡通路的作用。方法 M法检测细胞的增殖。等效线图法和联合指数(combination index,CI)法评估多西他赛和吉非替尼序贯作用的效价。流式细胞术检测细胞凋亡和周期分布,Hoechest 33258染色法检测凋亡形态。化学比色发光法检测Caspases的活性。结果等效线图法和联合指数法均显示多西他赛序贯吉非替尼组较其它序贯作用组明显抑制了细胞增殖,增加了细胞的凋亡。细胞周期分布实验结果显示与吉非替尼序贯多西他赛组主要把细胞抑制在G0/G1期相比较,多西他赛序贯吉非替尼组主要把细胞抑制在G2/M期。在肺腺癌H1975中,所有序贯模型组都主要通过活化Caspase-8/Caspase-3来诱导激活细胞凋亡通路。结论先用多西他赛再用吉非替尼治疗模式可能是TKIs耐药后T790M突变肺癌的一个新选择。

吉非替尼对肺癌细胞株A549和H1975放射敏感度的影响及其机制

目的本研究旨在探讨小分子表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼是否能增加肺癌细胞株A549和H1975的放疗敏感度及其机制。方法选取两种非小细胞肺癌细胞株A549和H1975,分为单纯X线组和X线+吉非替尼组。单纯X线组采用单纯X线照射,X线+吉非替尼组经10μmol/L吉非替尼作用24 h后行X线照射。两株细胞不同分组细胞,采用克隆形成实验检测放射敏感度,免疫荧光激光共聚焦显微镜观察X线照射后不同时间点细胞核中磷酸化H2AX(γ-H2AX)亮点在细胞中的定位情况,Western blot法检测放疗后胞质胞核蛋白中EGFR的表达。结果克隆形成实验中,A549细胞X线+吉非替尼组在各放疗剂量点的SF2值(0.3475)低于单纯X线组(0.4833);H1975细胞X线+吉非替尼组与单纯X线组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.3094和0.3207,无明显差异。免疫荧光结果显示,照射4 Gy后各时间点X线+吉非替尼组A549细胞核中γ-H2AX亮点相比单纯X线多;单纯X线组和X线+吉非替尼组H1975细胞γ-H2AX亮点在各时间点无明显差异;Western blot结果显示,A549细胞经4Gy照射后EGFR有入核现象,而预先经吉非替尼处理再接受4Gy照射,EGFR蛋白绝大部分位于细胞质内;H1975细胞,单纯X线组和X线+吉非替尼组EGFR蛋白均在细胞质中表达,胞核中几乎没有,且两组无明显差异。结论吉非替尼能增加肺癌细胞株A549的放射敏感度,可能与阻止放疗后EGFR入核进行双链断裂(double strand break,DSB)修复有关;对H1975细胞无影响,与其放疗后EGFR不入核相关。

1975年纽约市财政危机

1975年纽约市危机直接表现为一场财政危机,但在更深层次上,是涉及纽约市政治、经济和社会的全面危机,是城市的危机,而不仅仅是城市中的危机。这其中,既有纽约市产业结构转换以及社会经济环境相应变化的影响,又有地方政府体制上的问题,还有管理上的疏漏。这场危机,在一定程度上暴露了全国大城市普遍存在的问题:中心城市经济地位下降,中产阶级居民外迁,税基弱化;另一方面,贫困人口滞留中心城市,加剧了政府的福利支出,形成了"两面夹攻"的局面。危机来袭,市政府已无计可施,惟有州政府或联邦政府出面,这无形中在美国地方政府体系上出现了一定程度的制度性突破。这场危机加速了州政府对地方政府的参与,而且是深度的制度化参与,应该说,正面的积极作用更大,这些举措为后来类似问题的解决提供了先例。当然,联邦政府的参与,仅限于经济援助,还未深入到制度层面。这场危机说明,联邦政府、州政府与地方政府间的关系还需不断调适。这一点,在现今大都市区发展所导致的新问题上越来越清楚了,90年代的第二次城市危机和目前方兴未艾的大都市区治理运动和"精明增长"运动都是很有说服力的案例。

1975年经济整顿在党的经济工作史上的历史地位

1975年邓小平领导的经济整顿在中国共产党经济工作史上具有特殊重要的地位。它是推进党的工作重心转移的一次尝试 ,是对什么是社会主义和怎样建设社会主义的一次探索 ,是中国改革开放的最初试验 ,是中国的改革开放、社会主义现代化建设以及探索中国特色社会主义的历史“先声”。

芹菜素对人肺癌H1975细胞增殖、凋亡、转移及IGF-1R/Akt信号通路的影响

目的:探讨芹菜素对人肺癌H1975细胞增殖、凋亡和转移及胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法:设H1975细胞组、氟尿嘧啶组(100μg·ml-1)、芹菜素低(100μg·ml-1)、高(200μg·ml-1)剂量组,以上各组每孔设6个平行样,培养72h。MTT法、结晶紫染色测定细胞增殖、克隆形成数目,Transwell细胞培养室评估细胞迁移,流式细胞仪测定凋亡水平,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹(WEST-BLOT)法检测IGF-1R、Akt基因和蛋白表达水平。结果:与H1975细胞组比较,氟尿嘧啶组、芹菜素低、高剂量组的光密度(OD)值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、IGF-1R、Akt mRNA和蛋白降低,凋亡率升高(P<0.05)。与氟尿嘧啶组比较,芹菜素低剂量组的光密度(OD)值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、IGF-1R、Akt mRNA和蛋白升高,凋亡率降低(P<0.05);芹菜素高剂量组OD值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、IGF-1R、Akt mRNA和蛋白降低,凋亡率升高(P<0.05)。与芹菜素低剂量组比较,芹菜素高剂量组的OD值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、IGF-1R、Akt mRNA和蛋白降低,凋亡率升高(P<0.05)。结论:芹菜素能明显抑制人肺癌H1975细胞增殖、凋亡和转移;其机制与芹菜素抑制IGF-1R、Akt mRNA和蛋白的表达,进而抑制了IGF-1R/Akt信号通路的激活有关。

论1975年文化工作的初步拨乱反正

1975年邓小平全面主持中央党政日常工作后,淡化以至否定"以阶级斗争为纲"的指导思想,对各行各业进行全面整顿。文化工作的拨乱反正,是这种整顿的一个有机组成部分。其内容包括:在文艺工作方面,重新提出要贯彻执行"双百方针",配合毛泽东的有关批示,开禁一批文艺作品;科技工作方面,提出科学技术也是生产力,提高科技工作人员的地位,鼓励他们钻研业务;教育方面,提出要正确看待"文革"前的教育制度,否定"文革"时期在招生制度和教育制度方面的一些所谓改革措施。这三个方面的拨乱反正,初步纠正了"文革"时期由于"左"倾思想的影响而造成的文艺、科技、教育等领域的认识上和实际工作中的偏差,为"文革"结束后文化工作的全面拨乱反正提供了思想基础。

施燕平《〈人民文学〉复刊和编辑日记》劄记(一)——解放军文艺社学习毛主席关于《创业》批示的情况纪要(1975年)

1975年下半年，随着毛泽东有关《创业》的批示㈢的传达及其影响力的扩大，权力政治和意识形态的博弈又起了一个波澜。相似的情形在文革期间算是常态，但这一次的态势已经可以见出文革政治的颓势实在到了无可挽回的地步。

邓小平与1975年的整顿

1975年初 ,邓小平受命主持中央日常工作。面对着“文化大革命”以来造成的严重混乱局面 ,他从反对资产阶级派性 ,增强无产阶级党性入手进行整顿 ,开始实现安定团结。进而他开展了全面整顿 ,力图消除“文化大革命”的破坏和影响 ,把国民经济搞上去。这个整顿实际上是改革的试验。他在整顿过程中发表的讲话及文件 ,提出了许多新的思想和观点 ,也直接酝酿着邓小平理论。

1975年整顿是邓小平理论的起点吗?

1975年邓小平主持的全面整顿不是明显的历史转折的标志,当时整顿的指导思想从总体上看与邓小平理论的主导思想并不一致,实事求是的思想路线并未在全党牢固确立起来,不能影响和支配全局,因而不能构成其理论起点。党的十一届三中全会是改革开放历史新时期的开端,自然也是反映和指导这个历史过程的邓小平理论的起点。

海南岛昌江县1937～1975年土地覆被/土地利用的变化——以昌化大角为例

以昌江县生态环境脆弱风沙危害最为严重的昌化大角为典型研究区,依靠对1937年、1959年和1975年大比例尺地形图土地利用类型的解译数据,并参照其他文献,研究了1937～1975年之间海南岛昌江县LUCC的总趋势和过程.结果表明:昌江县的LUCC较为显著,并存在明显的时空差异,总的趋势是1959年以前变化和缓,以后剧烈.持续增加的是水田、建筑用地、有林沙地;旱地、林地在50年代减少,以后增加;裸沙地和荒草地在50年代增加而以后减少.工业化、城镇化、商业化及国家政策等因素是土地利用变化的驱动力.