APPswe/PS1dE9双转基因阿尔茨海默病模型小鼠的行为学及病理学特征研究

目的:探讨不同月龄APPswe/PS1dE 9双转基因小鼠行为学及病理学的变化特征,为合理运用该模型研究阿尔茨海默病提供可靠依据。方法:采用旷场实验、新物体辨别实验、Y迷宫以及Morris水迷宫等行为学实验方法观察不同月龄的APP/PS1转基因小鼠的运动、新物体辨别以及学习记忆能力的变化;通过免疫组织化学方法检测不同月龄转基因小鼠脑内Aβ含量及星形胶质细胞数量等病理特征的变化。结果:APPswe/PS1dE 9双转基因小鼠的运动能力随月龄增加逐渐下降,9月龄时对新物体的识别、工作记忆及空间学习记忆能力均出现明显损害。同时,该转基因小鼠的海马在6月龄时开始出现Aβ沉积和星形胶质细胞数量增加,9月龄时各种病理变化更为明显。结论:APPswe/PS1dE 9双转基因小鼠在6月龄时开始出现脑内病理改变,9月龄时各种认知行为发生明显异常。提示该转基因小鼠脑内病理改变可能早于行为异常,因此可根据实验目的选取相应月龄的动物。

姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠Aβ生成和降解的影响

目的观察姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠β淀粉样蛋白(βamyloid,Aβ)生成酶早老素2(presenilin2,PS2)和Aβ降解酶胰岛素降解酶(insulin degrading enzyme,IDE)表达的影响,探讨姜黄素在AD防治中的机制。方法将3月龄的APPswe/PS1dE9双转基因小鼠随机分为模型组、阳性对照组[罗格列酮组,0.92mg/(kg·d)]、姜黄素大[400mg/(kg·d)]、中[200mg/(kg·d)]、小[100mg/(kg·d)]剂量组,每组10只;并以同月龄遗传背景相同的C57BL/6J小鼠作为正常对照组10只。每天灌胃给药1次,模型组和正常对照组用等体积0.5%羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose,CMC)灌胃。灌胃3个月后,应用Morris水迷宫、免疫组织化学等方法,检测动物的学习记忆能力、海马Aβ生成酶PS2和降解酶IDE表达变化。结果行为学检测,模型组小鼠的游泳轨迹多为边缘型,而正常对照组、阳性对照组、姜黄素各组小鼠的游泳轨迹多为趋向型和直线型。Aβ生成酶PS2和降解酶IDE的免疫组织化学染色结果,模型组小鼠海马CA1区PS2阳性细胞较正常对照组明显增加(P<0.01),与模型组相比,姜黄素各组小鼠海马CA1区PS2阳性细胞减少(P<0.01)。模型组小鼠海马CA1区PS2阳性细胞平均灰度值较正常对照组降低(P<0.05),姜黄素小剂量组阳性细胞平均灰度值同模型组相比明显增加(P<0.01)。模型组小鼠海马CA1区IDE阳性细胞较正常对照组明显减少(P<0.01),与模型组相比,姜黄素中剂量组小鼠海马CA1区IDE阳性细胞明显增加(P<0.05)。模型组小鼠海马CA1区IDE阳性细胞平均灰度值较正常对照组明显增加(P<0.01),姜黄素各组小鼠海马CA1区IDE阳性细胞平均灰度值同模型组相比均明显降低(P<0.01)。结论姜黄素能通过减少Aβ生成酶和增加Aβ降解酶的表达,降低Aβ蛋白的表达进而改善APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的学习记忆能力。

APPswe/PS1dE9双转基因鼠表型综述

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是常见的神经系统退行性疾病,其病因除了与衰老有关以外,还与淀粉样蛋白前体(β-Amyloid precursor protein,APP)基因、早老素(presenilin,PS)1和2基因、载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)基因和微管相关蛋白tau(microtubule-associated protein tau,MAPT)基因等的遗传缺陷密切相关。将上述突变基因转入动物体内建立AD转基因动物模型为AD发病机制和治疗的研究提供了新的平台。APPswe/PS1dE9双转基因鼠同时携带具有瑞典型突变位点(Swedish KM594/595NL)的人鼠嵌合型APP基因(Mo/Hu APP695)和具有第9个外显子(dE9)突变的人PS1基因,这两种突变基因共同作用,加速淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)的产生和沉积,在老年期出现认知功能障碍等行为学异常,较好地模拟了AD的病理特征和渐进性的病程,是常用的AD转基因动物模型。本文系统综述了APPswe/PS1dE9双转基因鼠在Aβ产生和沉积、行为学异常和神经元变性及缺失等方面的表型特点,为其更好地应用于实验室研究提供必要的信息。

阿尔茨海默病APPswe/PS1dE9双转基因小鼠对挥发性吸入麻醉药药物敏感性的变化

目的:研究阿尔茨海默病APPswe/PS1dE9双转基因小鼠对挥发性吸入麻醉药药物敏感性的变化。方法:C57BL/6J雌鼠与C3H/HeJ雄鼠交配得到F1代,再将F1代与3月龄的APPswe/PS1dE9双转基因小鼠交配得到F2代。F2代小鼠提取鼠尾DNA,PCR扩增目的基因并鉴定。选8月龄F2代同窝小鼠根据是否含APP和PS1基因分为转基因组和野生对照组,用夹尾法分别测定两组异氟醚、七氟醚和地氟醚3种挥发性吸入麻醉剂的最低肺泡有效浓度(MAC值)。结果:繁育F2代小鼠12只,其中转基因组7只,野生对照组5只。转基因组小鼠3种挥发性吸入麻醉剂MAC值分别为异氟醚1.129±0.160,七氟醚1.900±0.153,地氟醚5.614±0.363,均较野生对照组低,但是无统计学差异(P>0.05)。结论:APP/PS1双转基因对8月龄小鼠异氟醚、七氟醚、地氟醚3种挥发性吸入麻醉剂的MAC值无明显影响。

异氟醚对阿尔茨海默病APPswe/PS1dE9双转基因型小鼠学习记忆能力的影响

目的研究异氟醚对阿尔茨海默病APPswe/PS1dE9双转基因型小鼠学习记忆能力的影响。方法将转基因小鼠分为转基因异氟醚组(Tg-iso组)及转基因空白对照组(Tg-con组),野生型分为野生异氟醚组(Wt-iso组)及野生空白对照组(Wt-con组)。Tg-iso组及Wt-iso组于7个月龄行异氟醚麻醉,吸入1.1%异氟醚2 h,连续5d。同时Tg-con及Wt-con组吸入30%氧气与70%氮气的混合气体。麻醉后48h各组行水迷宫实验,麻醉后5个月各组行Y迷宫实验。结果 7个月龄时:与Wt-con组比较,Wt-iso组的潜伏期缩短(P=0.013);与Tg-con组比较,Tg-iso组的潜伏期缩短(P=0.043);各组间空间探索实验目标象限时间和路程百分比的差异无统计学意义(P=0.392和P=0.300)。12个月龄时:与Tg-con组比较,Wt-con组和Tg-iso组辨别错误次数明显减少(P=0.044和P=0.020)。结论短时间重复吸入低浓度的异氟醚不增加阿尔茨海默病APPswe/PS1dE9双转基因型小鼠及野生对照型小鼠近期及远期学习记忆能力障碍的风险,反而在一定程度上有减轻的作用。

姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力及大脑中Aβ_(42)表达的影响

目的观察姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力和大脑β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)42表达的影响,探讨姜黄素在阿尔采末病(Alzheimer’sdisease,AD)防治中的作用。方法将20只6月龄APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠随机分为对照组和姜黄素饲喂组,每组10只。姜黄素饲喂组每天饲喂姜黄素(500 mg·L-1),6个月后采用Morris水迷宫实验方法及恐惧实验方法检测小鼠的学习记忆能力,采用免疫组化法检测小鼠大脑Aβ42表达的变化。结果与对照组相比,姜黄素饲喂组小鼠空间学习和记忆能力有明显改善(P<0.01),大脑中Aβ42表达明显减少。结论姜黄素能降低APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠大脑中Aβ42的表达,进而改善小鼠的学习记忆能力。

MicroPET观察姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑葡萄糖代谢的影响

目的利用18氟-脱氧葡萄糖microPET(18F-FDG microPET)影像学技术观察正常对照组小鼠,模型组和姜黄素治疗组APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的脑葡萄糖代谢情况。方法随机挑选6月龄正常对照组C57BL/6J小鼠3只,模型组和姜黄素治疗组APPswe/PS1dE9双转基因小鼠各3只,通过2%异氟烷吸入麻醉后,从尾静脉弹丸式注射放射性示踪剂18F-FDG每例约14.8～16.5 MBq,摄取45 min后进行10 min microPET图像采集。计算并比较各组小鼠每克脑组织(除小脑)18F-FDG的摄取率。结果姜黄素治疗组小鼠每克脑组织18F-FDG的摄取率高于正常对照组和模型组。结论姜黄素能明显提高APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑18 F-FDG的摄取及每克脑组织的摄取率,并可能通过影响脑葡萄糖代谢而发挥神经保护作用。

姜黄素对9月龄APPswe/PS1dE9双转基因小鼠行为学的影响

目的应用Morris水迷宫,测试AD模型APPswe/PS1dE9双转基因小鼠定位航行及空间搜索等学习记忆和记忆保持能力,评价姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠认知功能的影响。方法将3月龄的APPswe/PS1dE9双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮组(10 mg/kg.d)、姜黄素高(400 mg/kg.d)、中(200 mg/kg.d)、低剂量组(100 mg/kg.d),每组6只;并以同月龄遗传背景相同的C57/BL6J小鼠作为对照组。每天灌胃给药1次,连续灌胃6个月。应用Morris水迷宫进行行为学检测。结果姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠空间学习记忆能力障碍有改善作用,尤以姜黄素大剂量和中剂量组效果比较明显。结论姜黄素能改善APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的认知功能。

脑苷肌肽对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑内β-淀粉样蛋白42和钙结合蛋白-D28K表达的影响

目的观察脑苷肌肽(cattle encephalon glycoside and ignotin injection,CEGI)对APPswe/PS1d E9双转基因痴呆模型小鼠脑内β-淀粉样蛋白42(amyloidβ-peptide,Aβ42)和钙结合蛋白-D28K(calbindin-D28K,CB)表达的影响,探讨CEGI对阿茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的防治作用。方法 APPswe/PS1d E9双转基因AD模型小鼠共48只,随机分为脑苷肌肽低剂量组[Tg+CEGI-L组,腹腔注射CEGI 6.6 ml/(kg·d)]、高剂量组[Tg+CEGI-H组,腹腔注射CEGI 13.2 ml/(kg·d)]、阳性药盐酸多奈哌齐组[Tg+Donepezil组,Donepezil灌胃2 mg/(kg·d)],模型组(Tg组,腹腔注射等体积0.9%氯化钠注射液),每组12只;同月龄同背景非转基因野生型C57BL/6J小鼠12只作为正常对照组(n Tg组,腹腔注射等体积0.9%氯化钠注射液)。小鼠自5月龄开始腹腔注射给药1个月,然后进行Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力,硫黄素S荧光染色和免疫组织化学染色检测皮质区Aβ42表达,免疫组织化学染色检测海马CA1区及CA3区CB表达的变化。结果行为学实验,与Tg组比较,Tg+CEGI-L组小鼠空间学习和记忆能力有明显改善(P<0.05);小鼠大脑皮质Aβ42的表达数目在Tg组显著高于Tg+CEGI-L组和Tg+CEGI-H组(43.00±10.03 vs 24.63±10.61/24.89±6.81,P<0.05);小鼠海马CA1区神经元保护性蛋白CB在Tg+CEGI-L组显著高于Tg组(0.056±0.023 vs 0.031±0.001,P<0.05)。结论 CEGI能抑制Aβ42在大脑中的聚集沉积、CB过表达来降低神经元损伤,进而改善APPswe/PS1d E9双转基因痴呆模型小鼠的学习记忆能力。

膳食锌缺乏对成年APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力的影响

目的研究膳食锌缺乏对成年APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力的影响。方法应用跳台试验观察膳食锌缺乏喂养50 d后,缺锌喂养组(zinc deficiency group,ZD)小鼠与阳性对照组(positive controlgroup,PG)和阴性对照组(negative control group,NC)小鼠学习记忆能力的差异。结果缺锌喂养50 d后,ZD组潜伏期由(126.30±106.43)s明显延长至(226.30±101.35)s,差异有显著性(P<0.05)。ZD组与NC组潜伏期分别为(226.30±101.35)s和(253.80±81.05)s,均明显较PC组(61.00±53.96)s长,差异有显著性意义(P<0.01)。ZD组与NC组5min错误次数分别为(1.4±1.9)次、(0.5±0.7)次,均低于PC组(3.8±2.9)次,差异有显著性(P<0.05)。结论缺锌喂养可能在一定程度上可以延缓成年APPswe/PSEN1dE9转基因小鼠学习记忆能力的下降。

针刺督脉腧穴对APPswe/PS1dE9转基因阿尔茨海默病小鼠的治疗机制研究

目的:借助同位素标记相对与绝对定量(i TRAQ)技术筛选针刺督脉治疗阿尔茨海默病(AD)蛋白靶点,以期为研究针刺治疗阿尔茨海默病的机制提供新思路。方法:将8只7月龄APPswe/PS1dE9转基因雄性幼鼠随机分为模型组和针刺组,每组4只。适应性饲养1周后,针刺督脉治疗组小鼠每只每天在清醒状态下针灸督脉百会、风府、神庭与水沟穴1次,行捻转手法,留针20 min,持续28 d后,采用Morris水迷宫和旷场实验检测各组小鼠学习、记忆和运动能力。行为学实验结束后,采用i TRAQ技术检测各组小鼠海马蛋白质组差异表达,并采用Western blot法对各组小鼠海马组织中FAM98A、SLC3A1及SLC17A7蛋白表达进行验证。结果:与模型组比较,针刺督脉治疗后小鼠第3、4天潜伏期缩短,穿越平台次数增多,中心运动距离和中心区域运动距离增加;且与模型组相比,针刺督脉治疗后小鼠的海马组织中FAM98A、SLC3A1及SLC17A7蛋白表达水平显著上升(P<0.05)。结论:针刺督脉治疗能够改善AD小鼠的学习认知能力,其治疗机制与FAM98A、SLC3A1及SLC17A7蛋白表达改变相关。

姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠海马神经元SR-BⅠ和ABCA1表达的影响

目的:观察姜黄素对β-淀粉样前体蛋白swe基因/早老蛋白1dE9基因(APPswe/PSEN1dE9)双转基因小鼠海马神经元B类Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor class B typeⅠ,SR-BⅠ)和三磷酸腺苷结合盒A1(ATP-binding cassette transporter,ABCA1)表达的影响,探讨姜黄素在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)防治中的机制。方法:将10只6月龄的APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠随机分为对照组和姜黄素饲喂组,每组5只。姜黄素饲喂组每天饲喂500 ppm姜黄素,6个月后采用免疫组化法检测小鼠海马神经元SR-BⅠ和ABCA1表达的变化。结果:与对照组相比,姜黄素饲喂组小鼠海马神经元ABCA1表达明显增加(t=-10.805,P=0.000),但2组小鼠海马神经元中均未见SR-BⅠ表达。结论:姜黄素能提高APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠海马神经元ABCA1的表达,而SR-BⅠ在神经元中未见表达。

梓醇-川芎嗪方干预APPswe/PS1dE9双转基因阿尔茨海默病模型小鼠的作用机制研究

目的:探究梓醇-川芎嗪方干预APPswe/PS1dE9双转基因阿尔茨海默病模型小鼠的作用机制。方法:将3月龄C57BL/6J野生型小鼠为对照组(control组),构建阿尔茨海默病模型后,将同月龄APPswe/PS1dE9双转基因小鼠随机分为模型组(model组)、梓醇-川芎嗪方低剂量组(CT-L组)、梓醇-川芎嗪方中剂量组(CT-M组)、梓醇-川芎嗪方高剂量(CT-H组)、安理申组,对照组及模型组均给予生理盐水灌胃,各用药组以相应药物灌胃,每日灌胃1次,连续8周。对各组小鼠进行行为学观察,检测各组小鼠海马组织乙酰胆碱酯酶(AChE)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)及血清中β淀粉样蛋白42(Aβ42)。结果:行为学观察:与model组比较,CT-M组、CT-H组、Arceipt组长时程学习和参考记忆能力、自主探究能力、情景识别记忆能力、短期工作记忆能力、条件恐惧记忆能力,缓解焦虑、抑郁状态等7项行为学指标均明显好转(P<0.01);与CT-L组比较,CT-M组、CT-H组、Arceipt组7项行为学指标均明显好转(P<0.05或P<0.01);与CT-M组比较,CT-H组7项行为学指标均明显好转(P<0.05);与Arceipt组比较,CT-H组7项行为学指标均明显好转(P<0.05)。生化检测方面:与model组比较,CT-M组、CT-H组、Arceipt组海马组织SOD、GSH-Px水平均升高,AChE活性、iNOS、IL-6、TNF-α、MDA水平及血清Aβ42水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与CT-L组比较,CT-M组、CT-H组、Arceipt组海马组织SOD、GSH-Px水平均升高,AChE活性、iNOS、IL-6、TNF-α、MDA水平及血清Aβ42水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与CT-M组比较,CT-H组海马组织SOD、GSH-Px水平均升高(P<0.05),AChE活性、iNOS、IL-6、TNF-α、MDA水平及血清Aβ42水平均降低(P<0.05);与Arceipt组比较,CT-H组海马组织SOD、GSH-Px水平均升高(P<0.05),AChE活性、iNOS、IL-6、TNF-α、MDA水平及血清Aβ42水平均降低(P<0.05)。结论:梓醇-川芎嗪方可以改善阿尔茨海默病模型小鼠的长时程学习和参考记忆能力、自主探究能力、情景识别记忆能力、短期工作记忆能力、条件恐惧记忆能力,缓解焦虑、抑郁状态,且其效应呈剂量依赖性,高剂量梓醇-川芎嗪方优于安理申。其作用机制可能与提高海马组织SOD、GSH-Px水平,降低AChE活性及iNOS、IL-6、TNF-α、MDA、Aβ42水平有关。

APPswe/PS1dE9双转基因小鼠中轴突异常与阿尔茨海默病的联系

目的探究阿尔茨海默病(AD)模型小鼠(APPswe/PS1dE9双转基因小鼠)中出现的神经元轴突异常及其可能的发生机制。方法RT-qPCR分别测定野生型及APPswe/PS1dE9双转基因小鼠体内神经突起导向因子(netrin)和结肠癌缺失基因(DCC)的表达量;用免疫细胞染色分别测量其海马区神经元轴突长度。结果与野生型相比,APPswe/PS1dE9双转基因小鼠海马区神经元轴突出现明显的缩短,且其脑内netrin-1(P<0.001)、DCC1和DCC2的表达量均有上升(P<0.01)。结论轴突的变化与AD的发生存在一定联系,这样的联系可能通过netrin-1与DCC的相互作用产生。

橙皮素早期干预对APPswe/PS1dE9小鼠学习记忆能力及TLR2、NF-κB表达水平的影响

目的研究橙皮素早期干预对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响与TLR2、NF-κB蛋白的表达。方法12只3月龄C57/B6小鼠为空白对照组,48只APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组和橙皮素低、中、高剂量组,每组12只。低、中、高剂量组分别灌胃给予橙皮素20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg,空白对照组及模型组灌胃等体积羧甲基纤维素钠(CMC),日1次,连续6个月。采用Morris水迷宫检测各组小鼠记忆能力,HE染色法观察小鼠海马CA1区神经元损伤情况,Western blot法检测小鼠脑组织TLR2和NF-κB蛋白含量。结果与空白对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05),跨越隐匿平台的次数明显减少(P<0.05),海马CA1区神经元损伤明显,TLR2和NF-κB蛋白含量升高(P<0.05);与模型组相比,橙皮素低、中、高剂量组小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),跨越隐匿平台的次数增加(P<0.05),海马CA1区神经元损伤较轻,TLR2和NF-κB蛋白含量降低(P<0.05)。结论橙皮素早期干预可明显改善APP/PS1dE9小鼠的学习记忆能力和海马神经元的损伤情况,其机制可能与下调TLR2和NF-κB蛋白表达水平有关。

云南汉族人群Tim-1外显子4上5509-5511delCAA基因多态性与类风湿关节炎关联性研究

目的探讨T细胞免疫球蛋白域黏蛋白域蛋白(Tim)-1外显子4上的5509-5511delCAA基因多态性与云南高原地区汉族人群类风湿关节炎(RA)的遗传易感性有无关联。方法采用PCR-DNA测序法对196例云南汉族RA患者和190例健康体检者Tim-1外显子4上的5509-5511delCAA基因多态性进行检测,同时采用ELISA法和间接免疫荧光法检测其类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽(CCP)、抗角蛋白抗体(AKA)3种自身抗体。结果 RA组和对照组Tim-1外显子4上多态性位点5509-5511delCAA的基因型及等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05);RA组Tim-1外显子4上5509-5511delCAA位点不同基因型中3种自身抗体,RF、CCP阳性率检测的差异无统计学意义(P>0.05),而AKA阳性率检测的差异有统计学意义(P<0.05)。结论云南汉族人群Tim-1外显子4上的5509-5511delCAA位点存在多态性变异,且其多态性变异与RA遗传易感性相关,其不同基因型不会影响RA相关自身抗体RF、CCP的表达,而对AKA的表达有影响。

APPswe／PS1dE9转基因小鼠繁殖性能及生长发育观察

目的为建立阿尔茨海默病APPswe／PS1dE9转基因小鼠生物学特性标准化资料提供实验依据。方法APPswe／PS1dE9转基因小鼠杂合子交配繁殖，建立基因型鉴定方法，选择160窝次的1158只小鼠分别统计4胎内不同胎次、不同基因型的繁殖性能及生长发育指标。结果①APP／Ps1片段大小为600bp；②第2胎和第3胎的仔鼠数量及阳性数量均大于第1胎（P〈0．05），阳性率则无明显差异（P〉0．05）；③第1、2胎之间的胎间隔天数较短（P〈0．05），第2、3胎的窝产仔数、离乳仔数及离乳率均高于其它两胎（P〈0．05）；④第3胎和第4胎的初生窝重、泌乳力和离乳个体重较为稳定；⑤雌雄APP／PS1小鼠的最高体重分别为24．45±0．92g和30．21士2．53g；⑥该转基因小鼠的基因型不影响其体重（P〉O．05）。结论建立了APP／PS1小鼠的基础生物学特性资料；

阿尔茨海默病APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的行为学研究

目的:研究APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的感觉运动活性/移动探索活性、情感和物体识别能力。方法:采用旷场实验和新颖物体辨别实验分别对6月龄(雌、雄)和12月龄(雄)的APPswe/PS1dE9转基因小鼠进行行为学研究,以同窝同龄同性别野生型小鼠为对照。结果:在旷场实验中,与野生型小鼠相比,双转基因小鼠在12月龄时出现探索活性降低且可能更具有焦虑倾向(P<0.05);而在物体识别任务中,各研究组间差异无统计学意义。结论:APPswe/PS1dE9双转基因小鼠能较好地模拟AD患者的部分精神行为症状,为AD的发病机制和治疗研究提供了有价值的工具。

Cdk5/p25在APPswe/PS1dE9双转基因AD模型小鼠海马内表达与认知功能障碍的关系

目的观察APPswe/PS1dE9双转基因阿尔茨海默病模型小鼠认知功能的变化,探讨其与海马细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5及其激动因子细胞周期蛋白(Cdk5/p25)表达的关系。方法通过Morris水迷宫观察3、6、9月龄APPswe/PS1dE9双转基因小鼠和同种野生型小鼠学习记忆能力的变化;采用western blotting法及免疫组织化学染色法检测其海马内Cdk5/p25的表达水平。结果通过Morris水迷宫训练发现,3月龄APPswe/PS1dE9双转基因小鼠学习记忆能力与同月龄野生型小鼠比较,差异无统计学意义(P>0.05);而6、9月龄APPswe/PS1dE9双转基因小鼠较同月龄野生型小鼠定位航行实验潜伏期逐渐延长,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果显示,6、9月龄APPswe/PS1dE9双转基因小鼠海马内Cdk5/p25的表达水平较同月龄野生型小鼠增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,6、9月龄APPswe/PS1dE9双转基因小鼠海马内Cdk5阳性细胞的表达与同月龄野生型小鼠比较,差异有统计学意义(P<0.05);且随着年龄的增长,APPswe/PS1dE9双转基因小鼠海马内Cdk5阳性细胞表达逐渐增多,差异有统计学意义(P <0.05)。结论APPswe/PS1dE9双转基因小鼠学习记忆能力的下降与Cdk5/p25活性异常表达有关。

APPswe/PS1dE9转基因小鼠小脑内突触素及BDNF/Trk-B蛋白表达的变化

目的:观察APP/PS1转基因小鼠小脑突触素及BDNF/Trk-B蛋白表达变化。方法:选用9月龄APP/PS1雄鼠(n1)和同窝对照野生型WT雄鼠(n2)。采用Western blot(n1=6;n2=6)、免疫组化(n1=4;n2=4)两种方式定量、定位测定小脑组织功能活性依赖蛋白突触素、脑源性神经营养因子(BDNF)和其高亲和力受体(Trk-B)的蛋白表达。用透射电镜观察小脑皮质突触超微结构变化(n1=2;n2=2)。结果:与WT组相比,APP/PS1组小脑皮质内突触素、BDNF/Trk-B表达明显减少;突触间隙增宽,突触后致密区变薄,密度降低。结论:APP/PS1小鼠小脑皮质中突触素、BDNF/Trk-B蛋白含量均明显降低,突触超微结构也发生明显改变,提示AD小脑突触数量及形态变化可能与BDNF合成及释放减少有关。