HA/H_(2)O_(2)体系对磺胺噻唑降解的机理与效能

以盐酸羟胺/过氧化氢(HA/H_(2)O_(2))作为研究体系,考察其对于磺胺噻唑(STZ)的降解效能。文章考察了HA初始浓度、H_(2)O_(2)初始浓度、STZ初始浓度、pH、天然有机物(NOM)、阴离子(SO_(4)^(2-)、Cl-和NO_(3)^(-))对STZ降解的影响。结果表明:在pH值=3.0的条件下,HA/H_(2)O_(2)体系对STZ具有高效的降解效果,当HA的物质的量浓度由2 mmol/L增加到10 mmol/L时,对STZ的去除率从56.06%增加到85.26%;当H_(2)O_(2)的物质的量浓度从2 mmol/L增加到10 mmol/L时,对STZ的去除率从58.96%增加到85.26%,当STZ的物质的量浓度从2μmol/L增加到10μmol/L时,对STZ的去除率从98.72%降低到71.86%。随着pH的增大,STZ的去除率逐渐降低,在pH值>7的条件下对STZ的去除率可以忽略不计。向反应体系中分别投加5 mmol/L的SO_(4)^(2-)和5 mmol/L的NO_(3)^(-)都可以有效促进STZ的降解,而5 mmol/L的Cl^(-)则会抑制STZ的降解。当向体系中投加小于5 mg/L的NOM则对STZ的降解的影响可以忽略不计。测定了体系中共有17种降解产物,并推测STZ通过取代反应、羟基化反应等方式逐步被降解。通过明亮发光杆菌发光值变化分析降解过程中溶液毒性的变化,测定发现STZ降解过程中急性毒性不高。实际水体试验结果表明,HA/H_(2)O_(2)系统对二级出水中的荧光类物质具有较好的降解效果。

HA-Al_(2)O_(3)复相陶瓷浆料的调制及其高精度光固化性能

利用高强度氧化铝(Al_(2)O_(3))作为增强相,可以改善生物活性材料羟基磷灰石(HA)的强度,但传统水热法制备的HA-Al_(2)O_(3)陶瓷无法实现孔隙大小和孔隙率的精确控制,而光固化增材制造技术可以利用高性能光固化浆料实现HA-Al_(2)O_(3)陶瓷的高精度成型。通过加入分散剂、光引发剂及光吸收剂,调节HA-Al_(2)O_(3)浆料状态,缓解HA粉末、Al_(2)O_(3)粉末和光敏树脂之间折射率不匹配而产生的严重散射效应。本研究探索了光引发剂和分散剂的种类和含量对浆料的影响,流变性和固化性能随着两者含量增加先改善后削弱,光引发剂和分散剂最佳用量分别为0.5%和4%(质量分数)。比较了石墨和甲基黄两种光吸收剂对提高打印精度的影响,虽然石墨对浆料的打印精度和流变性均有改善,但是降低了打印质量,因此确定甲基黄的用量为5.0×10^(-5),最终获得了适用于高精度打印的HA-Al_(2)O_(3)光固化浆料。

射频磁控溅射TiO_2/HA复合生物膜的制备与表征

将水热合成的羟基磷灰石(HA)粉与20wt%Ti粉混合,冷压烧结成靶材。采用射频磁控溅射方法,在工业纯钛基体上沉积TiO2/HA生物薄膜,通过扫描电镜(SEM)及其能谱(EDS)、X射线衍射(XRD)和差热分析仪(TDA)对膜层进行了表征,探讨了溅射膜的晶化工艺。结果表明:由于选择溅射和OH-损失,溅射膜由TiO2晶体颗粒和非晶钙磷化合物组成,且其Ca/P比降低。经700℃,0.5h水蒸气处理,非晶钙磷化合物结晶度大大提高,并部分转化为HA晶体,且处理后的溅射膜与基体间无裂纹。

HA复合rhBMP-2转染的BMSCs对羊胫骨延长骨愈合的影响

目的评价HA复合rhBMP-2的腺病毒(adenovirus mediated rhBMP-2,Adv-rhBMP-2)转染的羊BMSCs对骨痂延长骨愈合的影响。方法成年山羊19只,雌雄不限,体重15～20kg。于每只羊髂嵴上穿刺抽取骨髓10mL,常规传代培养BMSCs。取第3代BMSCs,以感染复数200转染腺病毒。取0.25%胰蛋白酶消化转染后3d的细胞1×108个,与HA充分混匀制备Adv-rhBMP-2/BMSCs/HA。建立山羊右侧胫骨延长模型,术后立即于截骨部位注射自体细胞复合物。按术后注入物质不同随机分成4组:A组为Adv-rhBMP-2/BMSCs/HA组(n=6),B组为Adv-rhBMP-2/BMSCs组(n=5),C组为Adv-β-gal/BMSCs/HA组(n=4),D组为空白组(n=4)。术后第7天开始行胫骨延长,速度1mm/d,共延长4周。术后5、8、12周摄X线片观察骨痂生长情况,12周处死动物,取标本分别行骨密度检测、生物力学测定、组织学观察和骨形态计量学分析。结果X线片检查示,术后5、8周A、B组骨痂生成量明显多于C、D组,X线片定量评分A、B组明显高于C、D组,差异均有统计学意义(P<0.05);12周各组均在骨延长部位形成连续骨痂。骨密度测定:术后12周A、B、C、D组延长部位骨矿物质含量分别为(4.175±1.921)、(2.600±0.638)、(2.425±0.826)和(1.175±0.574)?g,骨矿物质密度分别为(0.612±0.196)、(0.630±0.159)、(0.450±0.166)和(0.266±0.113)g/cm2,A、B组显著高于C、D组(P<0.05)。生物力学测定:A、B、C、D组最大载荷分别为(490.20±155.08)、(350.59±80.48)、(221.95±68.79)和(150.65±92.29)N,弹性模量为(178.24±105.80)、(105.88±27.09)、(81.18±48.67)和(50.35±47.64)MPa,各指标A组显著高于C、D组(P<0.05)。组织学观察见A组骨延长处大量新生骨组织,骨小梁多为纵行网状排列。骨形态计量分析示A、B、C、D组新骨体积分别为72.35%±5.68%、67.58%±7.42%、49.63%±4.87%和38.87%±2.35%,A组新生骨生成量明显比D组多(P<0.05)。结论HA复合rhBMP-2修饰的BMSCs制备的组织工程骨可促进羊胫骨延长骨愈合。

HAS-2在乳腺癌中的表达及临床意义

【目的】探讨透明质烷合酶2(HAS-2)在乳腺癌及癌旁组织中的表达差异及与其他临床病理指标的相关性,并分析其阳性表达与生存数据的关系。【方法】收集中山大学附属第三医院2000年6月至2003年6月间行乳腺癌手术的存档蜡块120例,病理证实为浸润性导管癌,设为实验组,对照组收集癌旁组织标本53例(距肿瘤>2 cm)。采用免疫组化法检测120例乳腺癌组织(实验组)及53例癌旁组织(对照组)中HAS-2的表达情况,比较两组HAS-2表达率的差异,以及实验组HAS-2的表达与其他临床病理指标的相关性。统计学分析采用SPSS20.0软件进行,计数资料比较采用卡方检验,生存分析采用Kaplan-Meier法,生存率比较采用Log-rank检验,同时采用COX比例风险回归模型进行多因素分析。【结果】乳腺癌组HAS-2的阳性表达率显著高于癌旁组织组(45.83%vs.20.75%,P=0.002)。实验组HAS-2表达水平与淋巴结转移(P<0.001)及Ki-67表达(P<0.001)呈密切相关性,与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、组织学分级、ER、PR、Her-2表达等的差异无统计学意义。Kaplan-Meier法生存分析显示,HAS-2蛋白表达水平高的乳腺癌患者预后较低表达水平的患者差,差异有统计学意义(P=0.023)。Cox回归分析结果表明,淋巴结转移、TNM分期、Ki-67表达是判断乳腺癌患者预后的独立因素,而其他参数包括HAS-2并未达到统计学差异。【结论】HAS-2在乳腺癌组织中的表达水平较癌旁组织中明显升高,HAS-2在乳腺癌组织中的表达与淋巴结转移呈正相关,且与肿瘤增殖指标Ki-67呈正相关,HAS-2高表达的患者预后较差,表明其可能促进乳腺癌的发生发展,并预示着乳腺癌细胞增殖速度较快,预后欠佳。

H9N2禽流感病毒HA2基因重组杆状病毒的表达

从pMD18-T-HA阳性质粒扩增了H9N2亚型禽流感病毒的HA2基因,将扩增到的 HA2基因克隆至昆虫杆状病毒转移载体pBlueBacHis2A中。将其与杆状病毒共转染于Sf9昆虫细胞,经蚀斑筛选纯化重组杆状病毒,用其感染Sf9昆虫细胞,并优化表达条件。SDS-PAGE和 Western-blotting分析表明,表达产物的分子质量约为27 ku。Dot-ELISA分析表明,表达的HA2 融合蛋白可与鸡抗H9N2亚型血清发生特异性反应,而与H5和H7亚型抗血清间无交叉反应。

镁合金表面MgF_2/HA复合涂层的体外降解性能

为改善镁合金的耐蚀性和生物相容性,利用化学处理和电化学沉积法在镁合金AZ31表面制备MgF_2/HA复合涂层。采用Hank’s仿生溶液中浸泡和电化学阻抗(EIS)的方法,结合浸泡过程中涂层EIS谱和表面形貌成分的变化,研究MgF_2/HA涂层的体外降解行为。结果表明:在Hank’s仿生溶液浸泡过程中,涂层电化学阻抗谱的高频容抗弧明显减小,涂层电阻随浸泡时间而降低。浸泡至5 d时,出现感抗弧,涂层表面区域产生腐蚀孔核。浸泡至8 d时,镁合金基体发生点蚀,点蚀产生的腐蚀产物在孔中堆积形成胞状突起。浸泡至12 d时,Cl-渗透至镁合金基体,涂层表面形成MgCl_2结晶。浸泡过程中,表面涂层未发生脱落和明显的溶解,降解以溶液渗透至基体,然后发生局部点蚀为主。

PDLLA／HA接骨系统固定兔下颌骨骨折愈合过程中外源性rhBMP-2的作用

探讨rhBMP-2在PDLLA/HA接骨系统固定兔下颌骨骨折愈合过程中的作用。对36只新西兰白兔实施骨折模型,采用PDLLA/HA接骨系统、PDLLA/HA接骨系统+胶原膜、PDLLA/HA接骨系统+含rhBMP-2的胶原膜3种不同方法,进行兔下颌骨骨折处的固定。在术后2周、4周、8周、12周,进行大体观察、X线观察和组织病理学的分析,对3组结果进行比较,并考察rhBMP-2膜在PDLLA/HA接骨系统固定兔下颌骨骨折愈合过程中的作用。各组动物伤口均Ⅰ期愈合,骨折无移位,咬合正常;X线显示,术后2～12周,骨折线逐渐由清晰变为模糊最后消失。但加入rhBMP-2组比另两组在同一时间段骨折线密度更高,在第2周、4周、8周显示,rhBMP-2组愈合加快,HE染色显示,在早期(2～4周)rhBMP-2组即有大量成骨细胞和成软骨细胞及新生骨样组织,12周rhBMP-2组骨折线不可见,骨小梁走向趋于规则。不含rhBMP-2的两组骨小梁呈网状,不如rhBMP-2组规则,骨折线模糊。PDLLA/HA接骨系统具有良好的固定骨折和使骨折愈合的效果,而rhBMP-2膜与PDLLA/HA接骨系统联合使用来固定兔下颌骨骨折可提高愈合速度,具有很好的促骨愈合效果,为临床上解决固定期过长的问题提供了一种新的途径。

脉冲电沉积制备HA/ZrO2纳米复合涂层的稳定性及生物相容性评价

采用脉冲电化学沉积法成功地在生物医用钛金属表面制备出均匀的纳米HA/ZrO2复合涂层.通过热处理提高涂层的致密性,同时保留涂层的微纳结构.考察了热处理后复合涂层的成分、形貌、生物相容性及生理稳定性.X射线衍射分析表明,复合涂层成分为HA和ZrO2.扫描电镜观察发现,热处理后复合涂层的致密性有所提高.研究发现,ZrO2的加入大大降低了HA/ZrO2复合涂层中钙离子的释放速度,提高了HA/ZrO2复合涂层的生理稳定性.纳米划痕实验结果表明,HA/ZrO2复合涂层具有较好的结合强度.通过培养成骨细胞考察了复合涂层的生物相容性.A lam ar B lue检测表明,HA/ZrO2复合涂层表面细胞黏附及增殖能力较好.ALP检测发现,热处理后HA/ZrO2复合涂层表面的细胞分化能力较强.综合细胞培养结果显示,HA/ZrO2复合涂层有较好的生物相容性.

应用流式细胞技术分析Ca(OH)_2及HA对牙髓细胞周期的影响

目的 采用流式细胞技术分析盖髓剂氢氧化钙 [Ca(OH2 ) ]及羟基磷灰石 (HA)对牙髓细胞周期的影响。方法 将香猪恒牙牙髓机械暴露后 ,行氢氧化钙和羟基磷灰石盖髓术 ,分别于术后 2 ,4,8,12周拔牙 ,采取牙髓 ,胶原酶消化后流式细胞仪检测。将组方图存入磁盘进行计算机分析处理 ,得到G0 /G1,G2 ,S及M期细胞百分比。结果 氢氧化钙和羟基磷灰石均能使牙髓细胞的G0 /G1期细胞减少 ,S期细胞积累。结论 提示氢氧化钙及羟基磷灰石可能有促进G0 /G1期细胞进入S期 ,增加DNA合成的作用。

H_9N_2亚型AIV HA基因的原核表达及间接ELISA方法的建立

根据GenBank公开发表的禽流感病毒(AvianInfluenzaVirus,AIV)H9N2亚型血凝素基因(HA)序列设计引物,用PCR方法从重组质粒pUCHA中扩增H9N2亚型禽流感病毒去除信号肽的血凝素基因,将该片段定向插入到原核表达载体pET32a(+)中,构建原核表达载体pETHA。阳性质粒转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导,HA基因获得表达,经定位分析,目的蛋白以包涵体的形式存在于大肠杆菌中。通过改变IPTG的浓度和诱导时间,确定了表达HA基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为0.7mmol/L,诱导时间为3h。Westernblot分析表明,重组蛋白能与H9N2亚型AIV阳性血清发生特异性反应。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测H9亚型AIV抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原的最佳包被浓度为25μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶80,阳性标准初步定为:OD待检血清>0.5且OD标准阳性血清>1.0;OD标准阴性血清<0.1。

具有多孔结构的HA/TiO_2生物材料的制备工艺研究

以聚氨酯为造孔支架模板,采用有机泡沫法与高温烧结法,制备了多孔HA/TiO2陶瓷支架材料。讨论了烧结保温时间、PVB含量、TiO2含量等对材料结构与性能的影响。研究表明:较佳的烧结工艺为1 200℃烧结3 h,烧结后样品主要是HA、TiO2相。多孔HA/TiO2陶瓷拥有大孔径300～1 000μm,也有50～300μm的小孔径,具有较好的孔连通性与孔结构,有利于细胞和组织的生长以及营养输送。TiO2具有增强效应,其含量增加,材料压缩强度提高,但TiO2含量过高会增加其脆性,最佳含量为5%,此时材料力学性能接近于人体松质骨。

调控miR-495、P4HA2的表达对肝纤维化和肝细胞癌发生机制研究

目的:探究调控miR-495、脯氨酰4-羟化酶亚基α-1(P4HA2)的表达对肝纤维化、肝细胞癌的发生机制。方法:体外构建P4HA2的3’UTR报告基因质粒,使用荧光素酶报告基因检测miR-495与P4HA2的调控关系。使用miR-495及其反义链处理HepG2肝细胞癌细胞检测P4HA2的表达。低氧条件下检测HepG2肝细胞癌细胞中miR-495和P4HA2的表达,以及细胞增殖反应。在28例肝细胞癌患者中检测miR-495和P4HA2的表达,分析其相关性。结果:萤光素酶报告基因检测显示miR-495显著抑制了HepG2细胞中pGL3-P4HA2-wt的荧光素酶活性,但不能抑制pGL3-P4HA2-mut的荧光素酶活性。miR-495的过表达能够在HepG2细胞中以剂量依赖性方式抑制P4HA2的mRNA和蛋白表达。低氧组HepG2细胞中miR-495的表达显著低于正常组,而P4HA2的表达显著高于正常组。增殖检测表明低氧组HepG2细胞中EdU阳性细胞数显著增加,而在低氧组细胞中过表达miR-495可以明显逆转HepG2细胞的增殖。肝细胞癌中miR-495与P4HA2的mRNA的水平呈负相关(r=-0.683,P<0.05)。结论:miR-495能够通过靶向P4HA2 mRNA的3’UTR来抑制肝细胞癌细胞的增殖,而低氧可以通过下调miR-495来促进P4HA2的表达,进而参与肝纤维化和肝细胞癌的发生发展。

牙龈卟啉单胞菌HA2基因与牙周病关系的研究

目的利用PCR及RT-PCR检测慢性牙周炎患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P·g)HA2的DNA和RNA水平,探讨其分布规律及与牙周病的关系。方法12例慢性牙周炎患者共采集36个龈下菌斑标本,记录临床指标(探诊深度、临床附着水平、牙龈指数、菌斑指数、龈沟出血指数),PCR及RT-PCR扩增龈下菌斑标本中的P·g HA2基因,扩增产物经琼脂糖电泳、拍照,应用计算机软件GeneTools扫描并计量其中的相对核酸含量。结果P·g HA2在DNA水平上的检出率为92%,在RNA水平上的检出率为86%。P·g HA2的DNA水平与探诊深度及牙龈指数之间存在正相关关系(P<0·01);P·g HA2的RNA水平与牙龈指数之间存在正相关关系(P<0·05)。结论P·g HA2基因广泛存在于慢性牙周炎患者的龈下菌斑中,且P·g HA2在DNA和RNA水平上与牙周状态关系密切,提示P·g HA2可能是P·g致病因子之一。

射频磁控溅射制备HA(+ZrO_2+Y_2O_3)／Ti6Al4V复合生物活性涂层

采用射频磁控溅射法制备了HA(+ZrO2+Y2O3)／Ti6A14V生物复合涂层．借助于XRD、SEM、FTIR和AFM等对溅射涂层的相组成、微观形貌和界面结合进行了研究,并以模拟体液试验探讨了涂层的生物活性．实验结果表明:磁控溅射的复合涂层呈非晶态,经过退火处理,可以使其转化为晶态;复合涂层的微观表面凹凸不平,并呈现网状结构和较多的孔隙,其孔隙直径约为0．5-2．0μm,孔隙面积占涂层表面积的30％-40％;HA(+ZrO2+Y2O3)／Ti6Al4V复合涂层的界面结合强度随(ZrO2+Y2O3)复合颗粒含量的增大和溅射功率的提高而增强,最高可达59．6MPa．复合涂层在模拟体液中浸泡一段时间后,表面覆盖一层新生物质-含有CO32-的类骨磷灰石,其晶粒非常小,它与自然骨中无机相的结构成分相似,表明复合涂层具有良好的生物活性．

硅基HA/Al_2O_3复合生物涂层的制备与表征

通过磁控溅射沉积、阳极氧化与溶胶-凝胶结合的多步技术在Si(100)表面制备了HA/Al_2O_3复合生物涂层材料。采用TG-DSC测定了复合涂层中HA外层的烧成温度,采用XRD、FT-IR以及EDS分析了Si(100)基HA/Al_2O_3复合生物涂层的组成,并借助SEM研究了复合涂层的表面与截面的微观形貌。研究表明,凝胶完全转变为HA外层的最低温度约为550℃,凝胶经600℃处理30min后可在Si(100)- Al_2O_3基上形成具有一定数量纳米细孔且含有少量CO_3的HA外层;HA外层嵌入Si(100)基阳极氧化Al_2O_3多孔层的孔洞中构成HA/Al_2O_3复合生物涂层。

HA(+ZrO_2+Y_2O_3)/Ti_6Al_4V复合涂层的微结构与生物活性

采用射频磁控溅射法成功制备了HA(+ZrO2+Y2O3)/Ti6Al4V生物复合涂层。借助于XRD、SEM、FTIR及AFM等对溅射涂层的相组成、微观形貌和界面结合进行了研究,并以模拟体液试验探讨了涂层的生物活性。实验结果表明:磁控溅射的复合涂层呈非晶态,经过退火处理,可以使其完全转化为晶态;复合涂层的微观表面凹凸不平,并呈现网状结构和较多的孔隙,其孔隙直径约为0.5μm^2μm;涂层的生长模式为层状加岛状生长;复合涂层在模拟体液中浸泡一段时间后,表面覆盖一层新生物质——含有CO32-的类骨磷灰石,其晶粒非常小,它与自然骨中无机相的结构成份相似,因此复合涂层具有良好生物相容性和生物活性。

溶胶-凝胶/微弧氧化复合制备种植体表面HA/TiO_2复合涂层的研究

目的:探讨微弧氧化和溶胶-凝胶复合方法对钛种植体进行表面改性研究,在提高耐磨性、耐腐蚀性的同时,改善材料的生物活性。方法:利用微弧氧化和溶胶-凝胶复合方法在钛种植体表面制备羟基磷灰石(hydroxyapatite)HA/TiO2复合涂层,用扫描电镜(SEM)观察陶瓷膜层的表面形貌,用χ射线衍射(XRD)仪和X射线能谱(EDX)分析膜层的成分和元素分布。并对材料表面粗糙度的变化和涂层结合力进行检测。结果:形成的复合涂层由内层表面多孔的TiO2层和外层的HA层构成。HA/TiO2复合涂层与基体的结合强度约为(30±2.5)N,同时复合涂层提高了材料的表面粗糙度。结论:采用微弧氧化和溶胶-凝胶复合的方法可在钛种植体表面制备HA/TiO2复合涂层,初步研究表明该涂层具有较好的结构和生物活性。

HAl77-2铝黄铜管三辊行星轧制工艺模拟

通过理论分析,基于DEFORM3D软件,采用刚粘塑性有限元理论,建立HAl77-2铝黄铜管三辊行星轧制过程有限元模型,模拟轧制过程。由于HA l77-2黄铜存在"中温脆性区",导致管坯在轧制过程中开裂。为实现HAl77-2铝黄铜管的行星轧制,控制轧制过程中管坯温度是解决问题的关键。

CF表面Al_2O_3涂层及CF/Al_2O_3/HA复合材料的研究

为缓解在制备碳纤维(CF)增强羟基磷灰石(HA)复合材料过程中CF的氧化损坏,采用溶胶-凝胶法配置的浓度为0.4 mol/L的溶胶能在CF表面制备厚度适中、形貌均匀的Al_2O_3抗氧化保护涂层.该涂层将在复合材料烧结过程中对CF起到保护作用,防止CF的氧化损伤,且当复合材料中Al_2O_3-CF的添加量为0.5wt%时其抗弯强度达到最佳7.31±0.05MPa,一定程度上改善了CF/HA复合材料的力学性能.