2,4-二硝基苯肼显色法测定环己酮含量

为简化定向进化筛选环己酮还原能力提高的突变型糖多孢红霉菌聚酮合成酶酮还原酶域的繁琐工作,建立了利用环己酮和2,4-二硝基苯肼的显色反应来检测环己酮含量的方法。环己酮浓度在0～5mg·mL-1范围内与吸光度线性关系良好,线性相关系数为0.9973。在10mL转化液的实验条件下,方法的检测限为188μg.L-1,相对标准差为1.52%。该方法操作简便、灵敏度较高、结果可靠,能满足筛选突变体的要求。

2,4-二硝基苯肼法测定白酒中甲醇的研究

提出了一种以2,4 二硝基苯肼作为显色剂的测定白酒中甲醇的检测方法.白酒中的甲醇经高锰酸钾氧化为甲醛,甲醛与2,4 二硝基苯肼发生反应生成稳定的酒红色腙类物质,其最大吸收波长390nm,ε=1 64×103L·mol-1·cm-1,线性范围0～0 053mg/mL,线性方程y=0 00758+0 3257x 测定酒样回收率94 3%～104 8%,相对标准偏差0 3%～0 6%(n=6) 该方法简便快速,结果满意.

珍珠岩表面改性及对2，4-二硝基苯肼的吸附研究

以珍珠岩尾砂为基体,用硅烷偶联剂对其表面进行改性。X-衍射结果表明:改性后珍珠岩表面与偶联剂发生了化学键合,从而实现了其表面的改性。用改性后的珍珠岩对2,4-二硝基苯肼进行吸附实验,结果表明:改性后珍珠岩对2,4-二硝基苯肼的吸附明显优于珍珠岩尾砂,去除率可达80%以上。

用改良的2,4-二硝基苯肼比色法评价抗氧化保健食品

对测定蛋白质羰基含量的方法2,4-二硝基苯肼比色法进行改良,使这一方法更适用于保健食品的功能检测。用液氮低温法代替经典的蛋白酶抑制剂,用两种方法分别测定同龄小鼠与不同龄小鼠脑组织蛋白质羰基含量进行对比,并用两种抗氧化保健食品功能材料对改良方法的实用性进行检验。结果显示改良方法与经典方法测定的结果之间无显著性差异(p>0.05),改良方法同样能够将抗氧化保健食品对蛋白质羰基含量的影响显示出来。

2,4-二硝基苯肼法对三种蔬菜维生素C含量的测定

采用2,4-二硝基苯肼法,测定了西红柿、甘蓝、青椒三种蔬菜中维生素C的含量.在波长500nm处,蔬菜维生素C提取液吸光度达到最大值的条件是:水浴时间3 h、活性炭用量1.0 g和温度37℃,为最佳测定条件.西红柿、甘蓝、青椒提取液维生素C质量浓度与吸光度的线性回归方程分别为y=0.0215x+0.0785,y=0.0206x+0.0703,y=0.0201x+0.0716;相关系数分别为r2=0.9959,r2=0.9993,r2=0.9977.西红柿、甘蓝、青椒中维生素C含量的测定结果分别为为4.07g/kg、3.94 g/kg、7.18 g/kg.

2,4-二硝基苯肼法测定两种饮料中Vc的含量

以2,4-二硝基苯肼为显色剂,利用分光光度法对市售两种品牌饮料中Vc的含量进行了测定。固定吸收波长为500nm,当活性炭用量为1g、水浴时间为3h、温度为37.2℃时,测定条件最佳。Vc标准溶液的线性回归方程为y=0.0234x+0.0679,R2=0.9967。结果表明,该方法简便易行、准确,能满足饮料中Vc含量的测定。

分子改造羰基还原酶CpCR提高其催化合成2-苯乙醇能力

该研究对近平滑假丝酵母ATCC 7330羰基还原酶CpCR进行分子改造,以提高其催化合成2-苯乙醇的能力。通过易错PCR构建突变文库,利用2,4-二硝基苯肼高通量筛选阳性突变株,测序确定氨基酸突变位点。再通过蛋白质半理性设计进行虚拟饱和突变,采用定点突变技术进行构建和评价。筛选获得突变体T171F具有更强的催化能力和热稳定性。进一步考察了催化时间、温度、pH值和底物浓度对wtCpCR和T171F催化合成2-苯乙醇的影响。研究表明,酶最适催化合成2-苯乙醇的温度为30℃;T171F最适催化合成2-苯乙醇的pH为6.5;苯乙醛的质量浓度为1000 mg/L时T171F产率可达91.24%,是wtCpCR的2.8倍。此外,突变体T171F相比wtCpCR催化时间由10 h降低到4 h,催化效率得到很大的提高。该研究为羰基还原酶催化合成2-苯乙醇提供科学基础,同时具有一定的应用价值。

2,4-二硝基苯肼柱前衍生-高效液相色谱法测定水中的微量乙醛

目的探讨2,4-二硝基苯肼(2,4-dinitrophenylhydrazine,DNPH)柱前衍生高效液相色谱法测定水中微量乙醛的方法。方法将样品在60℃水浴中用DNPH衍生化20min,由正己烷萃取,以乙腈:水(52:48,V:V)为流动相,于365 nm波长下迚行测定。结果乙醛在0.015~1.00 mg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数r为0.9999,加标回收率为80.2%~99.8%,相对标准偏差为4.6%~7.4%,方法最低检出浓度为0.003 mg/L。结论该方法样品前处理简单快捷、检出限低、灵敏度高,能够满足生活饮用水卫生规范的要求,并且能够同时测定大批量样品,为解决国家标准中检测方法最低检出限与其乙醛的限值相矛盾的问题提供参考。

2,4二硝基苯肼衍生化甲醛条件探讨

甲醛的排放污染环境且对人体具有毒性,所以在生产和使用过程中对甲醛的检测非常重要。采用2,4-二硝基苯肼衍生化甲醛并通过高效液相色谱法检测甲醛的浓度,研究了温度、时间及醋酸盐缓冲溶液对2,4-二硝基苯肼衍生化甲醛反应及标准曲线的影响。研究发现当pH值=5,60℃水浴加热15min时线性关系较好,线性相关系数达0.998。

2,4-二硝基苯肼比色法快速测定餐饮企业油烟中醛酮类化合物含量的研究

基于醛酮类化合物中的羰基与2,4-二硝基苯肼在加热及酸的催化条件下生成黄色的苯腙类化合物,该化合物在强碱性条件下进一步生成红色或酒红色的显色物质,该文建立了一种2,4-二硝基苯肼比色法快速测定醛酮类化合物的方法,并将其应用于实际餐饮体系。最佳实验条件为:反应温度60℃,反应时间30 min,浓盐酸45μL,醛肼比为1∶50,60 g/L KOH 2.0 mL。该方法操作简单,样品通量大,线性范围宽(2.5~15μmol/L),用于实际餐饮油烟样品的分析,加标回收率为80.0%~84.0%,相对标准偏差(RSD)均小于5%。该方法为快速、高效测量餐饮油烟中高浓度的醛酮类化合物提供了参考。

2,4-二硝基苯肼衍生化共振散射光谱法测定丙二醛

在pH3.8醋酸-醋酸钠缓冲溶液中,丙二醛(MDA)与2,4-二硝基苯肼(DNPH)发生反应生成疏水性的苯腙,导致体系产生共振散射效应,体系在451 nm、493 nm处产生共振散射峰,据此建立一种用共振散射光谱测定MDA含量的方法。探讨缓冲溶液pH值及其用量、2,4-二硝基苯肼稀乙醇溶液用量和反应时间、反应温度对体系的影响,优化实验条件。在最佳实验条件下,方法的线性范围为0.075~2.5μg/m L,相关系数(R2)为0.9929,检出限(3S/K)为0.025μg/m L。

上海市大气PM_(2.5)中羰基化合物的研究

利用2,4-二硝基苯肼(DNPH)作为衍生化试剂,高效液相色谱/紫外检测法(HPLC/UV)定量检测上海市大气PM2.5中单羰基和二羰基化合物,共检测出5种单羰基化合物和2种二羰基化合物(乙二醛和甲基乙二醛).单羰基化合物中浓度最高的是甲醛和乙醛,其年平均浓度分别为(1579.47 672.81)ng/m3和(572.02 470.58)ng/m3;二羰基化合物乙二醛和甲基乙二醛的年平均浓度分别为(63.74 54.27)ng/m3和(97.28 39.62)ng/m3.研究发现上海市大气PM2.5中一些羰基化合物具有明显的日变化和季节变化规律:日变化表现为早晚高峰,而季节性变化单羰基化合物是冬天>夏天,二羰基化合物则是夏季>冬季.此外,PM2.5中羰基化合物的浓度还与温度、湿度、质量浓度具有一定的关系.

2,4-二硝基苯肼法测定果蔬VC含量条件探索

对2, 4-二硝基苯肼法测定果蔬VC含量的条件进行探索。结果表明,活性炭最佳用量1.8～2.2 g;显色剂2, 4-二硝基苯肼最佳用量2.0 mL,显色时间3～3.5 h;测定波长523 nm,且在2 h内吸光度无显著变化;抗坏血酸质量浓度在0～80μg/m L范围内遵守朗伯-比尔定律,表观摩尔吸光系数ε=2.455×10~3 L/(mol·cm),桑德尔灵敏度S=0.071 74。利用所得出的试验条件测定西红柿、辣椒、草莓和樱桃中VC含量,与碘量法和2, 6-二氯酚靛酚法相比,试验结果令人满意。

2,4-二硝基苯肼与牛血清白蛋白的相互作用

用荧光光谱研究了2,4-二硝基苯肼(DNPH)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。实验结果表明,2,4-二硝基苯肼能导致BSA的内源荧光猝灭,猝灭机制为静态猝灭;根据热力学参数ΔH<0、ΔS<0,得出2,4-二硝基苯肼与BSA之间的主要作用力为氢键和范德华力;同步荧光的结果表明2,4-二硝基苯肼使BSA分子构象发生了改变,其分子内的色氨酸和酪氨酸残基疏水作用增强。

高效液相色谱法测定环境空气醛酮类化合物的研究及应用

利用涂渍2,4-二硝基苯肼(DNPH)硅胶填充管采集环境空气中醛酮类化合物,建立了高效液相色谱法测定环境空气中醛酮类的方法。结果表明:该测试方法呈现良好的线性关系,线性系数的范围在0.9998~1.0000之间;方法检出限范围为0.65~2.46μg·m^(-3),测定下限为2.61~9.85μg·m^(-3);低、中、高浓度相对标准偏差范围分别为0.9%~8.5%、0.5%~3.6%、0.6%~2.8%;实际样品加标回收率范围为94.6%~113%。该方法稳定性好,操作简单,灵敏度高,满足于环境空气中醛酮类测定。

高效液相色谱法测定聚乳酸吸管中甲醛迁移量

目的:建立用于准确检测聚乳酸吸管中甲醛在水和酸性食品模拟液中迁移量的检测方法。方法:优选的色谱条件为:流动相水—乙腈(V_(水)∶V_(乙腈)为55∶45),柱温35℃,检测波长355 nm。优化的柱前衍生条件:酸性2,4-二硝基苯肼溶液中冰乙酸体积分数为1.5 mL/100 mL(pH 3.07),2,4-二硝基苯肼用量为甲醛物质的量的4倍,反应温度为45℃,反应时间为40 min。结果:衍生化产物甲醛-2,4-二硝基苯腙标准溶液在1.008~70.560μg/mL的范围内线性方程为y=55.2470x-3.8494,相关系数为0.9995;对应的甲醛检出限为0.066 mg/kg,定量限为0.22 mg/kg,且衍生化产物甲醛-2,4-二硝基苯腙在13.5 h内稳定;甲醛三水平加标试验的平均回收率在92.6%~104.1%,标准偏差(n=6)在0.4%~3.3%。在迁移温度为5,40,100℃,迁移时间为3 h的试验条件下,甲醛从一次性聚乳酸吸管到3种食品模拟液(水、3%冰乙酸水溶液、4%冰乙酸水溶液)的最大迁移量为1.839 mg/kg,小于中国及欧盟规定的15 mg/kg的特定迁移量要求。结论:该方法准确、高效,适用于聚乳酸吸管中甲醛迁移量的检测。

高效液相色谱法分析车用料挥发性醛酮类化合物

使用2,4-二硝基苯肼(DNPH)采样管,建立了一种高效液相色谱(HPLC)法分析车用料挥发性醛酮类化合物的方法。结果表明:经优化得到分离度最佳的HPLC分析条件为:选用Analytical C 18型色谱柱为分离柱,以乙腈和水为流动相,V(乙腈)/V(水)为70/30,柱温为45℃,流速为1.0 mL/min,进样量为25μL;一次进样能够使13种挥发性醛酮类物质有效分离,完成1个试样的检测时长约为25 min;对于中国石油兰州石化公司的车用料SP 179,在所得最佳HPLC分析条件下,13种醛酮类化合物的质量浓度在0.045~3.000 mg/L内各组分标准曲线的相关系数均等于1,具有良好的线性关系,且各组分的分离度均大于1.1;而且,当在DNPH管添加3个不同质量浓度为0.03,0.06,0.09 mg/L的13种醛酮的混合标准溶液标样后,车用料SP 179中的DNPH采样加标回收率为96.67%~104.44%,3次重复加标回收测定结果的相对标准偏差为0.92%~6.90%。该方法快捷、准确可靠,可适用于车用料中挥发性醛酮类化合物的检测分析。

蔬菜中维生素C含量测定方法的研究

维生素C能够抑制体内自由基的生成,提高人体抵抗力,从而延缓机体衰老。本研究分别采用2,6-二氯靛酚滴定法、碘量法和2,4-二硝基苯肼比色法,对蔬菜中维生素C的含量进行了测定。结果表明,2,4-二硝基苯肼比色法测定结果重复性较其他方法更好,维生素C测定结果高于其他2种方法。

3-脱氧葡萄糖醛酮代谢产物——3-脱氧果糖的HPLC检测方法初步建立

建立了3-脱氧果糖(3-DF)初步检测的高效液相色谱(HPLC)方法。先使用气相色谱―质谱联用(GC-MS)对合成的3-DF标样进行鉴定。再采用C18反相色谱柱,流动相为乙腈-水(10%∶90%~90%∶10%)梯度洗脱60min,紫外检测波长352nm,应用2,4-二硝基苯肼柱前衍生法,以薄层色谱―高效液相色谱联用(TLC-HPLC)对3-DF衍生物峰进行定位,并完善衍生条件,进行方法学考察。结果表明:合成样品为3-DF;衍生条件以衍生液中1∶3添加乙酸乙酯效果最佳;3-DF衍生物峰出峰时间为15.972 min,呈尖峰,分离度良好,线性范围为0.5~8 mg/mL,方法精密度RSD为2.4%,重复性RSD为4.4%,稳定性RSD为2.4%。本检测方法稳定、可靠,可初步用于3-DF定性及相对定量。

沙棘果中维生素C含量的测定与探究

沙棘号称“维C之王”,果实中VC含量居果蔬之首,但相关定性和定量的研究较少,导致其相关深产品研发滞后。本研究利用2,4-二硝基苯肼作为显色剂,分光光度法测定其最大吸收波长下的吸光度,通过四个单因素实验及正交实验等多次测定,得出活性炭1.2g,温度38℃,水浴时间3h,氧化液5mL的最优显色组合及y=0.0114x+0.0764,r2=0.9984为标准溶液的线性回归方程。该方法简便、精确,可推动高附加值沙棘产品研发水平,提升沙棘在绿色生态产业中的主导地位。