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铜绿假单胞菌催化阿糖2,6-二氨基嘌呤核苷合成阿糖鸟苷 被引量:2
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作者 刘国生 许航 +2 位作者 曹倩 邢善涛 黎梦 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期857-860,共4页
利用铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa TX16)细胞催化阿糖2,6-二氨基嘌呤核苷进行脱氨反应转化生成阿糖鸟苷。经优化得到的最适酶促反应条件为:在160 mmol/L磷酸盐缓冲液(p H 7.5)中加入13%铜绿假单胞菌TX16细胞和30 mmol/L阿糖2,6... 利用铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa TX16)细胞催化阿糖2,6-二氨基嘌呤核苷进行脱氨反应转化生成阿糖鸟苷。经优化得到的最适酶促反应条件为:在160 mmol/L磷酸盐缓冲液(p H 7.5)中加入13%铜绿假单胞菌TX16细胞和30 mmol/L阿糖2,6-二氨基嘌呤核苷,反应温度60℃,反应120 h。在上述条件下,嘌呤核苷的转化率可达90.0%。 展开更多
关键词 阿糖2 6-二氨基嘌呤核苷 阿糖鸟苷 铜绿假单胞菌 生物合成
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埃希菌催化合成阿糖鸟苷中间体阿糖2,6-二氨基嘌呤核苷 被引量:2
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作者 曹倩 杨灵 +2 位作者 刘国生 李金鑫 邢善涛 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期420-423,共4页
利用埃希菌(Escherichia sp.)AEM0812细胞催化阿糖尿苷和2,6-二氨基嘌呤合成阿糖鸟苷中间体阿糖2,6-二氨基嘌呤核苷。通过优化反应条件,得到最适酶促反应条件为:在60 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)中加入15%埃希菌AEM0812细胞及60 mmol/L... 利用埃希菌(Escherichia sp.)AEM0812细胞催化阿糖尿苷和2,6-二氨基嘌呤合成阿糖鸟苷中间体阿糖2,6-二氨基嘌呤核苷。通过优化反应条件,得到最适酶促反应条件为:在60 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)中加入15%埃希菌AEM0812细胞及60 mmol/L阿糖尿苷和60 mmol/L 2,6-二氨基嘌呤,60℃反应48 h。在上述条件下,阿糖尿苷的转化率可达95.2%。 展开更多
关键词 阿糖2 6-二氨基嘌呤核苷 阿糖鸟苷 阿糖尿苷 埃希菌 生物合成
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Two-step Enzymatic Synthesis of Guanine Arabinoside 被引量:5
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作者 魏晓琨 丁庆豹 +2 位作者 欧伶 张鹭 王昌禄 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2008年第6期934-937,共4页
The chemical synthesis of Guanine arabinoside (ara-G) is extremely complex, time-consuming, and seriously polluted. A two-step enzymatic synthesis process was developed to acquire ara-G easily. 2,6-Diaminopurine ara... The chemical synthesis of Guanine arabinoside (ara-G) is extremely complex, time-consuming, and seriously polluted. A two-step enzymatic synthesis process was developed to acquire ara-G easily. 2,6-Diaminopurine arabinoside (ara-DA) was first synthesized with purine nucleoside phosphorylase and pyrimidine nucleoside phosphorylase produced by Enterobacter aerogenes DGW-07. The conversion yield of ara-DA could reach above 90% when the reaction liquid contained 30 mmol·L^-1 uracil arabinoside as arabinose donor, 10 mmol·L^- 1 2,6-diaminopurine as arabinose acceptor in pH 7.0 20 mmol·L^-1 phosphate buffer, and reacted at 60℃ for 48h. Then, ara-DA was effectively transformed into ara-G with adenylate deaminase produced by Aspergillus oryzae DAW-01. The total process had no complex separation and purification. 展开更多
关键词 guanine arabinoside 2 6-diaminopurine arabinoside purine nucleoside phosphorylase pyrimidine nucleoside phosphorylase adenylate deaminase Enterobacter aerogenes Aspergillus oryzae
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用于阿糖鸟苷合成的腺苷脱氨酶在大肠埃希菌中的表达
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作者 黎梦 刘国生 +2 位作者 刘磊 常利草 邢善涛 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1604-1609,共6页
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa TX16)具有腺苷脱氨酶活性,可以催化2,6-二氨基嘌呤核苷脱氨合成阿糖鸟苷,但铜绿假单胞菌TX16是一种条件致病菌,直接用于工业生产存在一定风险。将铜绿假单胞菌TX16菌株来源的腺苷脱氨酶基因(add)... 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa TX16)具有腺苷脱氨酶活性,可以催化2,6-二氨基嘌呤核苷脱氨合成阿糖鸟苷,但铜绿假单胞菌TX16是一种条件致病菌,直接用于工业生产存在一定风险。将铜绿假单胞菌TX16菌株来源的腺苷脱氨酶基因(add)克隆至载体p ET-28a中,然后转化至大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE3),经过筛选获得工程菌E.coli(add)。经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测及酶活力测定,表明E.coli(add)能够表达大量腺苷脱氨酶,其产酶能力是含空载质粒的BL21(DE3)菌株E.coli(p ET-28a)的16.2倍。以E.coli(add)制备的粗酶液为催化剂,催化阿糖2,6-二氨基嘌呤核苷发生脱氨反应得到产物阿糖鸟苷,转化率可达96.8%。 展开更多
关键词 阿糖鸟苷 2 6-二氨基嘌呤核苷 铜绿假单胞菌 腺苷脱氨酶 基因表达
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