HPLC法检测HDBRS-1菌株发酵液中2-羟基联苯含量

采用高效液相色谱法测定脱硫菌发酵液中2-羟基联苯(2-HBP)的含量。以Delta-PakTMC18(300A,3.9mm×150mm,5μm)为色谱柱,甲醇:水(7:3,V/V)为流动相,流速1ml/min,用紫外检测器在260nm处检测2-HBP。结果显示2-HBP标准品的保留时间为2.6min,线性范围为0～80mg/L,利用该方法测得HDBRS-1菌株发酵液中,2-HBP的生成量为6.11mg/L。。

利用两种微生物的协同作用进行柴油的深度脱硫

红串红球菌通过4S途径降解二苯并噻吩(DBT)产生SO42-和2-羟基联苯(2-HBP).SO24-和2-HBP的存在对红串红球菌的进一步脱硫有抑制作用,加入脱SO42-和2-HBP的菌株可以解除SO42-和2-HBP对红串红球菌脱硫反应的抑制,使该反应继续向生成产物的方向移动,从而提高其脱硫率.在脱硫菌和专一性降解SO42-的水解好氧菌(代号:PYS)的协同作用下可以使高浓度的DBT从1.142mmol/L降到0.0468mmol/L,降解率达到95.9%,比没有加PYS时提高32%的脱除率.在油水比为1∶9的条件下,可以将柴油中的硫从554mg/mL降到306mg/mL,降解率达到44.8%.

增溶剂强化模拟柴油生物脱硫研究

生物脱硫速率受控于生物脱硫菌的活性以及含硫有机物在水相中溶解度。由于柴油中含硫有机化合物在水中的溶解度较低,大大限制了微生物脱硫速率。为有效解决上述问题,本文以二苯并噻吩(DBT)作为模型化合物,选用分支杆菌ZD-19作为脱硫菌,考察不同种类增溶剂,例如天然表面活性剂大豆卵磷脂(SL)、非离子型表面活性剂Tween-80和超分子受体β-环糊精(β-CD)对生物脱硫的影响。研究结果表明:三种增溶剂都能有效提高DBT的溶解度,并且它们对脱硫菌ZD-19没有毒性。SL和β-CD的添加大大强化了微生物脱硫速率,而Tween-80的添加对微生物脱硫并没有明显促进作用。此外,产物抑制实验结果表明:β-CD的添加可有效缓解DBT脱硫产物2-HBP对生物脱硫造成的抑制作用。在低浓度2-HBP(0.5 mmol×L^(-1))存在下,6.0 g×L^(-1)β-CD的加入几乎完全消除了2-HBP对脱硫菌的抑制作用。

HNHHJ-1脱硫菌株对DBT的脱硫条件优化

将一株从大庆油田含油土壤中分离筛选得到的专一性脱硫力最高的菌株HNHHJ-1作为培养菌株,通过对DBT转化为2-HBP的脱硫效率来了解初始p H值、氮源、碳源、培养温度和摇瓶转速条件对脱硫力的影响,并优化培养条件。确定的最佳培养条件为:在30℃温度下培养,每250m L三角瓶装100mL培养基,接种量为1%(V/V),转速为180r·min^(-1)。在上述培养条件下培养,2-HBP生成量为22.806mg·L^(-1)。

重油生物脱硫菌的筛选

本实验由菌种采集开始,经过富集培养、平板分离、选样、摇瓶培养等步骤,筛选出了具有较好脱硫能力的菌株,并通过紫外分光光度计和气相色谱仪初步检测了它们的脱硫能力。

UPLC法检测HNHHJ-1菌株发酵液中2-羟基联苯含量

采用超高效液相色谱法(UPLC)测定脱硫菌发酵液中2-羟基联苯(2-HBP)的含量。色谱柱为ACQVITY DPLC@BEH C18(2.1×50mm,1.7μm,Waters),流动相为甲醇∶水(90∶10,V/V),柱温30℃,流速0.2m L/min,进样量2μL,PDA检测器检测2-HBP,检测器检出限范围为0~200mg/L。结果显示2-HBP的保留时间为0.74min。利用该检测方法得到HNHHJ-1菌株培养后的发酵液中2-HBP的含量为5.35mg/L。